辣椒组织培养再生体系的影响因素研究

以早熟辣椒、红线辣椒、茄门大辣椒(绿辣椒)3个品种为材料,研究了辣椒组织培养再生体系的影响因素。结果表明:红线辣椒为最佳基因型,辣椒离体再生最适外植体为茎段、子叶。诱导茎段愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA;子叶愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L6-BA+4.0 mg/L NAA;高效不定芽分化培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA;高效不定根分化培养基为MS+0.5 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA。     

辣椒子叶离体培养及植株再生体系建立

以10个辣椒品种的子叶为试材,探讨了影响辣椒子叶离体培养及再生的各种因素(子叶外植体的生理年龄、外植体的部位、基本培养基、激素、硝酸银及光照强度等),筛选出辣椒子叶高效芽分化培养基为MS 6-BA 5.0 mg/L IAA 1.0 mg/L AgNO3 4.0 mg/L,平均芽分化率达到90.5%;高效芽伸长培养基为MS 6-BA3.0 mg/L IAA 1.0 mg/L GA32.0 mg/L AgNO34.0 mg/L;生根培养基为1/2 MS IAA 0.2mg/L NAA 0.1 mg/L,建立了辣椒高效再生体系.     

CMS甜椒子叶离体培养再生植株的研究

以两个性状稳定的CMS甜椒不育系为材料，探讨了不同叶龄、激素组合及其它因子对子叶离体培养再生植株的影响，筛选出了高效分化培养基为MS IAA1.0mg/L 6-BA4.0mg/L分化率达90%;高效生根诱导培养基为1/2MS 1AA0.5mg/L 庶糖30g/L 琼脂8g/L生根率达90,并设计了高效可行的液相培养生根法,建立了一种有效的CMS甜椒子叶离体培养再生植株洲的培养方法和程序.     

辣椒胞质雄性不育相关基因的克隆及表达

为分离辣椒细胞质雄性不育基因,并阐明其不育机理,本研究以辣椒细胞质雄性不育系21A及保持系21B的线粒体DNA为材料进行SRAP分析。结果显示,在21A中获得3条多态性条带。对多态性条带回收、克隆和测序分析后发现,这3个片断(分别命名为CMS721、CMS394、CMS285)在GenBank中都与能量代谢途径有关。针对序列特征设计SCAR引物,对21A和21B的基因组DNA进行扩增验证,3对引物只在21A中扩增出目的条带,表明已成功地将SRAP标记转化为SCAR标记。利用荧光定量PCR技术对CMS721、CMS394和CMS285基因在21A不同组织(根、茎、叶和花)中的表达情况进行了分析。结果表明:3个基因只在不育系中表达,且在不同的组织中均有表达,但表达量差异很大,其中基因CMS721表达量在中花蕾中迅速下降,推测该基因控制辣椒花药中与能量代谢相关的蛋白质的表达,从而引起小孢子发育障碍,最终导致雄性不育。     

辣椒CMS系及其保持系叶绿体超微结构观察比较

从辣椒胞质雄性不育系8A、保持系8B为材料,利用透射电镜观察两者叶片叶绿体超微结构,探讨CMS与叶绿体结构的关系,并比较其特性与差异,揭示CMS机理。结果表明,辣椒CMS系8A叶绿体结构发生变化,表现为基粒片层之间界限模糊、消失,发育滞后,与基粒连接的类囊体不发达,整个片层排列紊乱,叶绿体数目减少;保持系8B叶绿体形状为椭圆形,基粒片层、类囊体均发育正常。辣椒胞质雄性不育系叶绿体数目较保持系减少,结构、形状与保持系有所不同。     

彩色辣椒愈伤组织的诱导与植株再生

分别以彩色辣椒茎尖、子叶、上胚轴、下胚轴为外植体进行离体培养,结果发现,子叶较易诱导愈伤组织。在MS附加不同浓度配比的6-BA和NAA培养基上,对子叶进行分化及生根诱导研究的结果表明,彩色辣椒子叶芽的分化受6-BA和NAA浓度的影响,最适合芽分化的培养基为MS 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2MS NAA 1.0 mg/L。     

大果型辣椒雄性不育系4556A的选育

利用引进的辣椒CMS不育材料,通过杂交、连续回交等方法,成功选育出大果型优质辣椒CMS系4556A及保持系4556B,不育株率和不育度均达100％,不育性稳定,有较好的应用前景。     

辣椒子叶离体培养及植株再生

对5个辣椒品种进行了子叶离体培养试验，筛选出两种较适粗的培养基为：MS IAA0.2mg/L 6-BA2mg/L 30g蔗糖和MS ZT5mg/L 16g蔗糖。子叶于25℃下光照培养，21d后可陆续分化出芽，芽伸长形成茎芽约2-3cm高时移入生根培养基MS NAA0.5mg/L中，可发育为植株。     

黄灯笼辣椒子叶离体培养与植株再生

以黄灯笼辣椒无菌苗子叶为外植体,研究激素对不定芽分化及植株再生的影响。结果表明:6-BA对子叶不定芽的诱导效果最好;IAA与6-BA配合能明显提高子叶不定芽的分化率;在分化培养基中添加4mg/LGA3,有利于不定芽的伸长。不定芽分化的最适培养基为MS 6-BA5mg/L IAA1mg/L AgNO36mg/L,平均诱导率达75%;不定芽伸长的最适培养基为MS 6-BA3mg/L IAA1mg/L AgNO36mg/L GA34mg/L,平均伸长率可达90%;最佳生根培养基为MS IAA0.5mg/L,生根率达95%;建立了辣椒子叶植株再生体系。     

辣椒CHS基因表达的定量分析及与雄性不育的相关性

为了揭示辣椒胞质雄性不育(CMS)机制，以辣椒胞质雄性不育系9704A和其相应保持系9704B为材料，对其花蕾转录组进行了Solexa测序，经过生物信息学分析鉴别出1个花药特异性表达的查尔酮合酶基因(CHS)，该基因在保持系9704B中的表达水平为其对应不育系9704A的16倍；克隆后的序列比对分析表明，该基因属于CHS基因家族，与菸草花药特异表达的同源基因CHSLK的同源性达90%；用实时荧光定量RT–PCR对9704A和9704B的根、茎、叶中CHS基因的表达进行了定量分析，结果表明该基因在2种材料的茎中几乎不表达，在9704B的根和叶中表达量也极低，证实了在正常情况下该基因只在辣椒花药中有较高水平的表达；对不育系的定量PCR结果表明，CHS基因在9704A的根和叶中有异常的较高水平表达，结合其在花药中的低表达，推测辣椒不育系中CHS的异常表达可能与其CMS性状相关。     

辣椒胞质雄性不育系(CMS)子叶培养植株再生(英文)

An in vitro shoot regeneration procedure was developed in pepper (Capsicum annuum L.) cytoplasmic male sterility (CMS) lines 9704A and 8214A using cotyledon as explant. The callus and bud cluster derived from cotyledon tissue explants were proliferated on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with different combinations of 6-benzladenine (6-BA), indole-3-acetic acid (IAA), gibberellic acid (GA3) and silver nitrate (AgNO3). From the formula of MS appended with 5.0 mg/L 6-BA, 1.0 mg/L IAA and 5.0 mg/L AgNO3, for the explants callus and bud cluster, the maximum differentiation rates (respectively 100.0% and 58.3%) and average number of adventitious bud from each explant (respectively 18.8 and 13.2) were obtained. The optimum medium combination for the elongation of adventitious bud was determined to be: MS+ 3.0 mg/L 6-BA + 1.0 mg/L IAA+ 5.0 mg/L AgNO3+ 2.0 mg/L GA3, from which the elongation rates of buds from callus and bud cluster were both 100%, and the average number of per explant adventitious bud number reached 6.3 and 5.8, respectively. And all the elongated shoots were successfully rooted on half-strength MS medium supplemented with 0.3-0.5 mg/L IAA.     

辣椒子叶和下胚轴的离体培养及高效再生体系的建立

采用 9 个辣椒品种(Capsicum annuum L.)的子叶和下胚轴,分别离体培养在附加不同激素及化合物的MB5培养基上,对苗龄、基因型、不同外植体、激素组合和 AgNO3等对外植体不定芽诱导分化和芽伸长的影响进行研究。结果表明,苗龄对外植体不定芽分化的方式有直接影响;AgNO3的加入可使芽分化率平均提高 20 %～30 %,并缩短外植体再生时间;子叶的不定芽分化率高于下胚轴;B5维生素有利于芽的生长和芽伸长率的提高。通过结果比较,筛选出了辣椒子叶和下胚轴离体再生的较好芽分化培养基为 MB5+5 mg/L、6-BA+0.5 mg/L、IAA+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;芽伸长培养基为 MB5+3 mg/L、6-BA+1 mg/L、IAA+2 mg/L、GA3+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;生根培养基为 1/2 MS+0.2 mg/L、IAA+0.1 mg/L NAA。     

南瓜离体培养及植株再生的研究

研究了不同外植体、消毒方法、激素水平等对南瓜离体培养及植株再生的影响。结果表明:以子叶作为外植体可以通过愈伤组织途径之后形成再生植株;而以子叶节作为外植体可以直接诱导不定芽形成再生植株。诱导不定芽的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA;诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D;诱导南瓜不定根的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LIAA。     

辣椒子叶不定芽的诱导及发生发育的组织学观察

以辣椒子叶切块为外植体,在添加5 mg/L6-BA和0.5 mg/LIAA的MS不定芽诱导培养基上诱导出愈伤组织后分化为不定芽,然后将丛生芽转移至添加2.0 mg/LGA3和2.0 mg/LZT的不定芽伸长培养基上,不定芽显著伸长。组织切片观察结果表明,辣椒子叶不定芽发生于愈伤组织表层。     

不同基因型黄瓜离体再生及其影响因素的研究

以6个黄瓜(Cucumissativus L.)自交系为试验材料,研究不同的基因型、外植体类型和激素组合等因素对黄瓜离体植株再生的影响。结果表明,不同基因型黄瓜材料的再生能力差别较大;带柄子叶比下胚轴和不带柄子叶的再生率高,是比较理想的外植体材料;较低的6-BA/IAA配比促进黄瓜不定芽的分化;6-BA/IAA配比较高则适合再生芽的伸长;添加0.5mg/LAgNO3可以促进不定芽发生,5～6d苗龄的外植体分化再生频率较高;在供试的6个试验材料中,M8,M10的再生频率较强,分别达到96%和90%。高频率不定芽诱导分化培养基为:MS+IAA0.6mg/L+6-BA0.5mg/L+AgNO30.5mg/L;不定芽伸长的培养基为MS+IAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L+AgNO30.5mg/L;高效生根诱导培养基为MS+IAA0.2mg/L+NAA0.1mg/L。     

甜瓜黄醉仙子叶再生体系的初步建立

[目的]选出最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织和不定芽的培养基,以及适宜其不定芽伸长和生根的培养基。[方法]以甜瓜黄醉仙子叶为外植体,研究添加不同浓度BA和IAA激素组合的MS培养基对其愈伤组织和不定芽诱导及不定芽伸长的影响,以及添加不同浓度IBA激素组合的MS培养基对其生根的影响。[结果]最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织培养基是MS+0.5 mg/L BA+2.0mg/L IAA和MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L IAA,最适宜其子叶不定芽诱导的培养基是MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L IAA,不定芽伸长的最适宜培养基是MS+1.0 mg/L IAA,生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L IBA。[结论]初步选出一套完整适宜甜瓜黄醉仙子叶再生体系建立的培养基。     

辣椒子叶再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立

以中椒2号辣椒为材料,建立了高效的辣椒子叶再生体系和卡那霉素筛选体系。结果表明,最佳的不定芽诱导培养基为MS+BA5.0 mg/L+IAA0.5 mg/L+AgNO36.0 mg/L,最佳的不定芽伸长培养基为MS+BA5.0 mg/L+IAA0.5 mg/L+GA32.0 mg/L+AgNO36.0mg/L,最佳的生根培养基为MS+IAA1.0 mg/L,卡那霉素最终筛选浓度为50 mg/L。     

‘黄河蜜3号’高效再生体系的建立

以厚皮甜瓜‘黄河蜜3号’近轴端、远轴端子叶以及下胚轴作为外植体,在多种激素配比组合的培养基上进行分化诱导不定芽试验,并对发生的不定芽伸长和无根苗发根进行培养基的筛选.结果表明:适合‘黄河蜜’不定芽诱导的外植体材料为近轴端子叶,培养基激素组合为MS+2.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1IAA;伸长培养基激素组合为MS+0.1 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1IAA;生根培养基为1/3MS.     

陆地棉子叶离体培养诱导不定芽植株再生

以陆地棉种子无菌苗的子叶为外植体材料,研究不同苗龄的子叶、激素组合、硝酸银等对子叶诱导不定芽的影响.试验结果:15 h苗龄的子叶,在附加BAP 3.0 mg/L、IAA 1.0 mg/L、2ip 1.0 mg/L和AgNO3 5.0 mg/L的不定芽诱导培养基上,珂字棉312和泗棉3号的不定芽诱导频率分别为70%和60%左右.