复方酸制剂体外抗新城疫病毒试验

[目的]探讨复方酸制剂体外抗新城疫病毒（NDV）的活性,为研制新型抗NDV制剂提供理论依据。[方法]采用鸡胚成纤维细胞（CEF）培养法,观察细胞病变（CPE）,并用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性,计算病毒抑制率,评价复方酸制剂的体外抗NDV作用。[结果]随着复方酸制剂浓度的增加,CPE逐渐减弱,病毒抑制率明显升高,当浓度为1.0mg/ml时,病毒抑制率可达70.04%。[结论]复方酸制剂在体外具有明显的抑制NDV增殖作用。     

银杏叶复方制剂对实验性脾虚证模型小鼠内脏器官发育及其抗氧化酶活性的影响研究

采用利血平复制脾虚证小鼠模型,观察银杏叶复方制剂对实验性脾虚证模型小鼠内脏器官发育及其抗氧化酶活性的影响。结果表明,①银杏叶复方组小鼠胃、肾的指数较脾虚模型组有所提高但差异不显著(P>0.05);银杏叶复方组小鼠小肠、脾的指数显著高于脾虚模型组(P<0.05),与对照组差异不显著(P>0.05);脾虚模型组小鼠的肝、肺指数显著高于银杏叶复方组(P<0.05),银杏叶复方组小鼠的肝、肺指数与对照组差异不显著(P>0.05),提示银杏叶复方有促进脾虚小鼠脾胃发育和促进肝脏的解毒作用,对脾虚模型小鼠的肾、肺功能亦有改善作用。②银杏叶复方组小鼠脾脏、肾脏中MDA含量较脾虚模型组显著降低(P<0.05),而肝脏组织中SOD和GSH-Px含量较脾虚模型组显著提高(P<0.05),同时脾脏、肾脏和肝脏中T-AOC含量较脾虚模型组显著提高(P<0.05)。提示银杏叶复方对脾虚小鼠的脾脏、肾脏和肝脏的功能有良好的保护作用。     

抗鸡新城疫复方中药制剂药理作用与临床试验研究

对山茶叶、轮叶党参、卵叶芍药、苦味西葫芦、狼毒大戟5种中草药的提取物进行了体外、体内抗鸡新城疫病毒(NDV)筛选，并对以山茶叶、黄芪等组成的复方中药制剂进行了抗病毒效果评价与药理作用研究及临床治疗试验。结果表明：山茶叶抗NDV作用较强，其对NDV的灭活率和抑制率分别为56．14％和58．59％，由山茶叶、黄芪等组成的复方中药制剂对NDV的灭活率和抑制率分别为59．19％和67．5％。抗病毒效果明显优于单方的山茶叶和对照药物黄连，对NDV50％(IC50)抑制浓度为1：610．5，说明其有较强的抗病毒作用，对鸡大肠杆菌耐药菌株、鸡沙门氏茵耐药菌株、金黄色葡萄球菌耐药菌株、鸡霉形体有抑制作用。可明显增强机体免疫力。     

银杏叶复方对脾虚证小鼠肠道推进功能、 抗疲劳和抗氧化作用的影响

采用利血平复制脾虚证小鼠模型,观察银杏叶复方对脾虚证小鼠肠道推进功能、抗疲劳和抗氧化作用的影响。结果表明,与脾虚模型组相比,银杏叶复方能显著提高脾虚证小鼠肠道推进率和游泳时间(P<0.05),显著提高小鼠肝糖原(HG)含量(P<0.01)、血清过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活力(P<0.05),显著减少血清中乳酸(LD)、尿素氮(BUN)和一氧化氮(NO)含量(P<0.05)。银杏叶复方是通过减轻血清中过量的一氧化氮对机体的损伤作用,参与调节肠道运动功能,提高了脾虚证小鼠肠道吸收功能;银杏叶复方的抗疲劳作用则与其降低运动后血清尿素氮含量,提高肝糖元的储备量,增强清除乳酸能力有关。     

银杏叶复方对脾虚证小鼠细胞因子、免疫球蛋白和血浆内几种神经肽含量的影响

采用利血平复制脾虚证小鼠模型,观察银杏叶复方对实验性脾虚证模型小鼠细胞因子、免疫球蛋白、血浆内几种神经肽含量和体重变化的影响。试验分为三组,即对照组、脾虚证组和银杏叶复方组。结果表明,①脾虚证小鼠IL-1、IL-2含量较对照组显著降低(P<0.05),IL-4、IL-6含量较对照组显著增加(P<0.05),银杏叶复方组上述各项指标与对照组相比差异不显著(P>0.05),但TNF-α含量较对照组和脾虚证组则显著提高(P<0.05)。②脾虚证小鼠的血浆IgG、IgM含量显著低于对照组(P<0.05),银杏叶复方组IgG、IgM含量显著高于脾虚证组(P<0.05),与对照组差异不显著(P>0.05);脾虚证组小鼠血浆IgA含量均低于对照组和银杏叶复方组(P>0.05)。③脾虚证小鼠血浆β-EP(β-内啡肽)含量高于对照组(P>0.05),银杏叶复方组血浆β-EP恢复接近对照组(P>0.05)。④脾虚证小鼠血浆CGRP(降钙基因相关肽)含量较对照组和银杏叶复方组显著提高(P<0.05),NPY(神经肽Y)含量较对照组和银杏叶复方组则显著降低(P<0.05),银杏叶复方组小鼠体重的减轻幅度低于脾虚证组(P>0.05),脾虚证组小鼠体重的减轻幅度显著高于对照组(P<0.05),由于脾虚证小鼠血浆中CGRP过高,NPY含量减少导致摄食行为降低体重下降。结果显示,脾虚证小鼠细胞因子网络调节系统的失衡与其较高的β-EP含量有关,即脾虚证小鼠存在神经-内分泌-免疫网络之间调节失衡,引起脾虚时的机体免疫功能低下,经银杏叶复方治疗后上述免疫失调得到明显纠正。     

复方中药提取物对REV诱发的免疫抑制鸡的免疫增强作用

 【目的】探讨复方中药提取物对REV诱发的免疫抑制鸡的免疫增强作用,建立测试某些中药制剂免疫增强作用的实验模型。【方法】分别在临床健康鸡和在1日龄感染网状内皮增生病病毒（REV）诱发了免疫抑制状态的鸡测试了中药制剂对鸡的免疫增强作用。【结果】随饮水饲喂黄芪、党参、淫羊藿和甘草复方中药浸出物,在健康鸡对鸡新城疫病毒（NDV）和H5亚型禽流感病毒（H5-AIV）灭活疫苗免疫后的血凝抑制（HI）抗体滴度没有明显影响。但是在REV诱发了免疫抑制的鸡,该中药浸出物可显著提高对NDV和H5-AIV的HI抗体滴度（P＜0.01）,虽然仍显著低于未经REV感染的对照鸡。【结论】REV诱发的免疫抑制状态下的鸡,可作为测试某些中药制剂免疫增强作用的一种实验模型。     

复方糖苷抗新城疫病毒感染作用

采用2种方法研究了复方糖苷抗新城疫病毒(Newcastle disease Virus,NDV)感染作用。一是鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)培养法,通过观察NDV CPE的形成及测定CEF OD值的变化,计算病毒抑制率等指标,综合评价复方糖苷在细胞水平上抗NDV作用,并从直接灭活病毒、阻断病毒吸附与生物合成及释放等环节,探讨了复方糖苷的抗NDV途径。二是将复方糖苷稀释成1 200,1 000,800,600,300μg/m L 5种浓度与100 EID50 NDV液混合后接种9日龄SPF鸡胚,于72 h后统计鸡胚的存活数并测定尿囊液血凝效价(HA),依此判定复方糖苷在鸡胚内抗NDV作用。结果表明:随着药物浓度的增加CPE的特征逐渐减弱,OD值明显升高,病毒抑制率增大,当复方糖苷质量浓度为600μg/m L时对NDV具有显著的直接杀灭与阻断吸附作用。HA在1 200,1 000μg/m L时均为0。表明复方糖苷具有显著的抗NDV感染作用。     

4种中药成分复方抗NDV感染CEF细胞筛选效果分析

将氧化苦参碱、黄芪多糖、甘草酸和栀子苷等4种中药成分按一定比例分别配成复方1、2、3、4,并根据对鸡胚成纤维细胞(CEF)安全浓度的测定结果,分别稀释成高、中、低3种浓度,分别与新城疫病毒(NDV)加入到已培养24 h的单层CEF中,通过MTT法测定 OD值,分析其对鸡NDV病毒增殖的影响.结果表明:先加中药后加病毒时,复方1、2、3的高、中、低3个浓度组和复方4的高、中浓度组,对病毒增殖有显著的抑制作用;先加病毒后加中药时,复方1的高、中、低3个浓度组,和复方2的中、低2个浓度组,以及复方3的高、中浓度组,复方4高浓度组对病毒增殖有显著的抑制作用;中药与病毒同时加入时,复方1、3、4的高浓度组,能够显著抑制病毒增殖.综合不同加药方式测试结果,4种中药复方抑制NDV的能力依次为复方1>复方3>复方2和复方4.     

中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊免疫功能、抗氧化性及增殖凋亡基因表达的影响

试验旨在研究由金银花、黄连、蒲公英等药材组成的中草药复方制剂,对青脚麻鸡法氏囊组织结构、抗氧化功能、细胞因子和抗体分泌及增殖凋亡相关基因(PCNA和Caspase-3)表达的影响。采用单因子试验设计,将400羽青脚麻鸡按照体重相近原则分为对照组(基础日粮)和试验Ⅰ-Ⅲ组(分别添加0.5%、1.0%和1.5%中草药复方制剂),每组5个重复(n=20),试验期56 d。结果表明,28日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊细胞因子(IL-2和IFN-γ)、IBDV抗体和GSH-Px含量及PCNA mRNA和蛋白表达量(P0.05),降低Caspase-3 mRNA和蛋白表达量(P0.05)。56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊IFN-γ、IBDV抗体和GSH-Px含量(P0.05),降低MDA含量及Caspase-3蛋白表达量(P0.05)。显微观察可见,28和56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可显著增加法氏囊小叶和淋巴小结面积(P0.05),降低法氏囊Caspas-3阳性细胞数量,说明日粮中添加1.0%中草药复方制剂对法氏囊组织结构及免疫抗氧化功能均有明显改善,对法氏囊增殖和凋亡相关基因表达有明显调控作用。文章分别从分子和组织水平揭示中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊生长发育和免疫功能的影响及可能机制,为新型中草药复方制剂研发及其在青脚麻鸡生产中的应用提供科学依据。     

银杏叶复方对肉兔小肠黏膜形态及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

为研究银杏叶复方对肉兔小肠黏膜形态及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响,试验选择40只30日龄统一断奶的雌性健康新西兰兔,随机分为4组,每组5个重复,每个重复2只。基础日粮为玉米-豆粕-草粉型,其中对照组Ⅰ组饲喂基础日粮,试验Ⅱ、Ⅲ、IV组饲喂分别在基础日粮中添加0.50%、1.00%和1.50%的银杏叶复方,试验期30 d。结果表明,1.00%和1.50%银杏叶复方组的空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(V/C)显著高于对照组(P<0.05),0.50%和1.00%组回肠V/C比值也显著高于对照组(P<0.05);1.00%和1.50%银杏叶复方组的空肠淋巴细胞数量显著高于对照组(P<0.05),0.50%银杏叶复方组的十二指肠杯状细胞数量显著高于对照组(P<0.05)。基于试验结果推断:饲粮中添加1.00%的银杏叶复方制剂,可维持和养护断奶肉兔的小肠黏膜组织。     

中药复方抗鸡新城疫病毒作用研究

[目的]探讨中药复方抗鸡新城疫病毒（NDV）的作用机理,为临床合理使用抗病毒性药物提供科学的理论依据。[方法]以白花蛇舌草、金银花、黄芪和甘草组成中药复方,制备成中药复方流浸膏并配制成不同浓度梯度的药液;测定中药复方对鸡成纤维细胞（CEF）最大无毒浓度,并测定NDV在CEF上半数感染力（TCID50）;设中药复方不同浓度组,正常细胞和NDV感染细胞对照组,采用3种不同的作用方式作用于各组以检测中药复方抗NDV活性,采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法（MTT法）测定OD值,以治疗指数为评价指标。[结果]中药复方对CEF的最大无毒浓度为2-6g/ml,NDV对CEF的TCID50为10-7.3;第①种作用方式中药复方的最小有效浓度是2-10g/ml,第②种作用方式为2-8g/ml,第③种作用方式为2-7g/ml。[结论]第①种作用方式对病毒的灭杀作用最强,第②种作用方式次之,第③种对病毒的灭杀作用最弱。表明中药复方不仅具有细胞外直接杀灭病毒作用,而且还具有抑制病毒吸附、穿入、复制和成熟的某一环节,为研究中药抗病毒的作用机理及临床应用提供了可靠的试验依据。     

腐植酸类肥料对银杏叶黄酮含量的影响

为了对银杏叶开发提供理论依据,研究了腐植酸复合肥对银杏叶黄酮含量的影响。结果表明:施肥能显著提高银杏叶黄酮含量,在投入养分量相等的条件下,腐植酸复合肥处理的银杏叶黄酮含量比无机肥处理的高。银杏叶黄酮含量与腐植酸复合肥用量呈显著二次函数关系,645kg/hm2为适宜用量,黄酮含量最高,与其它处理比较差异显著。     

黄芪和板蓝根超微粉的粒径观察及其抗鸡新城疫病毒效果

为探讨黄芪、板蓝根超微粉的抗病毒作用,应用激光粒度分析仪和扫描电镜观察了黄芪和板蓝根超微粉的粉体粒度及其破壁情况,通过鸡胚接种试验观察2种中草药超微粉对鸡新城疫病毒的抑制作用。结果表明:黄芪和板蓝根超微粉的粒度分布中心D_(50)分别为10.10μm和8.31μm;2种中草药超微粉的破壁情况良好,电镜下只能观察到不完整的细胞壁,为组织碎片。黄芪和板蓝根超微粉对新城疫病毒最小抑制剂量分别为1 562.5、781.2μg/m L,以板蓝根抗病毒效果较好。     

银杏叶黄酮的微波提取及其抗氧化性研究

[目的]研究银杏叶黄酮类物质的微波提取工艺,测定银杏叶黄酮的体外抗氧化能力,为大规模提取、开发黄酮类化合物及综合利用银杏叶资源提供依据。[方法]采用微波法提取银杏叶黄酮,单因素试验考察乙醇浓度、料液比、辐射时间、回流温度对银杏叶黄酮提取率的影响。试验测试银杏叶黄酮对超氧阴离子、羟自由基清除作用。[结果]微波提取的影响因素顺序为乙醇浓度〉料液比〉辐射时间〉回流温度。银杏叶黄酮对超氧阴离子、羟自由基均有较强的清除作用,且随着黄酮添加量的增大而增强。[结论]银杏黄酮微波提取的最佳条件为乙醇浓度50％,料液比1：25,回流温度70℃,微波时间120s,该条件下总黄酮提取率为11．02％。银杏叶黄酮具有良好的抗氧化作用,是一种天然有效的抗氧化剂。     

"病毒克"颗粒剂对NDV在鸡胚成纤维细胞中增殖的影响

为评价中药“病毒克”颗粒剂体外抗新城疫病毒(NDV)的活性,采用细胞培养技术,通过细胞病变抑制法和MTT比色法检测“病毒克”颗粒剂在鸡胚成纤维细胞(CEF)中对新城疫病毒增殖的影响。结果表明“病毒克”颗粒剂对CEF的半数中毒质量浓度(TC50)为61.35 mg/mL,抗NDV的半数有效质量浓度(EC50)为3.2 mg/mL,治疗指数(TI)为19.2,“病毒克”颗粒剂对新城疫病毒具有直接灭活作用和阻断其感染CEF的作用,并存在明显的量效关系(P<0.01);在感染后9 h内以14 mg/mL剂量给予“病毒克”颗粒剂,对新城疫病毒复制的抑制率为42.8%~76.5%。说明“病毒克”颗粒剂对新城疫病毒在鸡胚成纤维细胞中的增殖具有明显的抑制作用。     

叶用银杏林营造技术要点

从叶用银杏在人们康养生活中的重要意义到目前市场对银杏叶的巨大需求和精准扶 贫中的脱贫攻坚作用,阐述了叶用银杏栽植的广阔前景。详细提出了在银杏园建设中所涉及的 园址选择、整地作床、播种植苗、苗木管理等各生产环节的技术标准和要求,对指导叶用银杏林的 营造起到了规范作用。     

甲氧苄啶与中药复方联用抗菌增效作用的研究

探索甲氧苄啶对中药复方体外抗菌增效的最优添加剂量.根据传统中兽医理论,自拟中药复方由黄芩、板蓝根、蒲公英和连翘按1∶1∶2∶1比例组成.采用平板计数的方法,测定了甲氧苄啶与中药复方联用作用于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌1、2、4和8h后的细菌数,计算杀菌率,并用最小二乘法对杀菌率进行拟合,得出甲氧苄啶的最优添加剂...     

银杏干叶球磨法超微粉碎的试验研究

根据几种常见的超微粉碎技术特点,结合银杏干叶超微粉碎必须保持其药用功能因子不损失的技术要求,选择球磨超微粉碎法对银杏干叶进行了超微粉碎试验．结果表明,以m（研磨球）：m（银杏叶）=15：1进行干法球磨3h,所得粉末粒度均匀,平均粒径3．367μm．电子显微镜下能观察到单个细胞破壁后破碎的粒子团,且干结不透明,表明银杏干叶细胞已破裂．