口服当归多糖对点带石斑鱼非特异性免疫力的影响

[目的]研究口服当归多糖对点带石斑鱼非特异性免疫力的影响。[方法]将05、02、00、350和500 mg/kg当归多糖添加到基础饵料中饲喂点带石斑鱼28 d,研究血浆中酸性磷酸酶（ACP）、溶菌酶（LZM）、补体C3和C4含量、白蛋白/球蛋白比值（A/G）、血液白细胞数和白细胞吞噬能力。[结果]喂食当归多糖能提高血浆ACP、LZM活力、补体C3和C4含量,降低血浆A/G值。另外,喂食当归多糖能提高点带石斑鱼血液白细胞数和白细胞吞噬率。[结论]当归多糖能提高点带石斑鱼非特异性免疫力,饵料中当归多糖的建议添加量为50 mg/kg,连续喂食21 d。     

黄芪多糖对草鱼非特异免疫功能的影响

旨在探讨饲料中添加不同水平的黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)非特异性免疫指标的影响。将600尾健康草鱼随机分成Ⅰ-Ⅳ组,在基础饲料中分别添加黄芪多糖0、10.0、30.0、50.0 mg/(kg·d),于D0、D8、D15、D22、D29测定草鱼白细胞的吞噬百分比(PP)、吞噬指数(PI)及血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)与溶菌酶(LSZ)活力等指标,D29时对4组草鱼进行嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒实验。结果表明:与对照组相比,饲料中添加实验剂量的黄芪多糖可不同程度提高供试草鱼血液白细胞的吞噬百分比和吞噬指数,各实验组草鱼血清中T-SOD、CAT、LSZ活性均呈增加趋势,投喂实验剂量的黄芪多糖均可显著降低嗜水气单胞菌攻毒后草鱼的死亡率(P0.05)。研究表明,在饲料中添加适宜水平的黄芪多糖可提高草鱼的非特异性免疫功能和对嗜水气单胞菌感染的抵抗力,每千克鱼体质量的推荐剂量为10~30 mg/d。     

氨基多糖螯合盐对扣蟹非特异性免疫力的影响

[目的]探讨氨基多糖螯合盐对扣蟹非特异性免疫力的影响。[方法]通过在配合饵料中添加氨基多糖螯合盐,研究其对扣蟹非特异性免疫力[碱性磷酸酶(AKP)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、溶菌酶活性]的影响。[结果]氨基多糖螯合盐可以有效提高扣蟹AKP、ACP、SOD和溶菌酶活性。[结论]在饲料中添加氨基多糖螯合盐对于增强扣蟹非特异性免疫力有一定功效。     

香菇多糖对罗非鱼非特异性免疫力的影响

以初始体重(65.2±4.25)g的吉富罗非鱼(genetic improvement of farmed tilapia,GIFT)为研究对象,探讨饲料中添加香菇多糖对其生长和非特异性免疫力的影响.分别向基础饲料中添加0(CK)、1000、2000、3000 mg/kg香菇多糖,配制出4种试验饲料,进行为期6周的摄食生长试验.试验采取饱食投喂方式,每天投喂2次(06:30和17:30),试验期间水温为25 ～ 28℃,溶解氧含量在7mg/L以上.饲喂试验结束后测定试验鱼的生长及相关的免疫学指标.结果表明,饲料中添加香菇多糖试验组的吞噬指数和吞噬百分比、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性以及血清溶菌酶活性显著高于对照组(P＜0.05).因此,饲料中添加适宜含量的香菇多糖可显著提高香菇多糖非特异性免疫力,可以作为一种安全高效的免疫增强剂应用于罗非鱼的养殖生产.     

太子参多糖对福瑞鲤部分非特异性免疫功能和抗病力的影响

应用分离纯化的太子参多糖伴料投喂福瑞鲤(FFRC Strain Common Carp),分析其对福瑞鲤非特异性免疫功能的调节作用和抗病力的影响。试验共分5个组,第1组投喂基础饲料作为空白对照组,第2~5组分别投喂在基础饲料中按质量比添加0.1%、0.2%、0.3%、0.5%太子参多糖的太子参多糖饲料。连续投喂35d后,测定各组福瑞鲤血液中血清溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、补体C3,以及对嗜水气单胞菌(Js70322NA)的抗病力。结果表明:与空白对照组比较,0.1%太子参多糖试验组的血清LZM含量显著增加(P0.05),其他3个太子参多糖试验组血清LZM含量极显著增加(P0.01);各剂量组血清SOD、AKP活性均高于对照组,且剂量等于或高于0.2%太子参多糖试验组的血清SOD差异显著(P0.05);剂量等于或高于0.2%太子参多糖试验组的AKP活性差异极显著(P0.01);各太子参多糖试验组ACP活性、补体C3含量与对照组相比,均极显著增加(P0.01);福瑞鲤攻毒结果显示,剂量为0.3%和0.5%的太子参多糖试验组免疫保护力最高,数值为54.55%。说明太子参多糖对福瑞鲤的非特异性免疫功能有增强作用,能提高其抗病力,建议在基础饲料在添加0.3%的太子参多糖为最佳。     

免疫多糖对受免草鱼免疫应答的调节作用

在饲料中添加定量的免疫多糖,投喂经注射接种福尔马林灭活的柱状黄杆菌(Flavobacterium co-lumnare)菌苗的草鱼(Qerlopharyngodon idellus)28 d后,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率,探讨了免疫多糖对受免草鱼免疫应答的增强作用.结果表明,用添加200.0 nag/(kg.d)免疫多糖的饲料投喂受免草鱼,不仅可以使受免草鱼对灭活柱状黄杆菌的免疫应答水平提高,增强抵抗柱状黄杆菌人工感染的能力,而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用.     

马尾藻多糖对南美白对虾免疫调节作用

[目的]研究马尾藻多糖对南美白对虾免疫功能的影响。[方法]用含不同比例(0、0.10%、0.15%和0.20%)马尾藻多糖的虾饲料喂养对虾14 d,测定虾血淋巴液中溶菌酶、超氧化物歧化酶、酚氧化物酶和酸性磷酸酶的活性,计算攻毒感染后不同处理对虾存活率。[结果]含马尾藻多糖0.20%的虾饲料能极显著提高溶菌酶和酚氧化物酶活性,显著提高超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶活性和攻毒虾存活率,溶菌酶和酚氧化物酶含量分别达到(0.209±0.076)(、258.800±203.080)U/ml;含马尾藻多糖0.15%的虾饲料能极显著提高酚氧化物酶和超氧化物歧化酶活性,显著提高溶菌酶活性和攻毒虾存活率,酚氧化物酶和超氧化物歧化酶含量分别达到(321.267±218.406)和(0.453±0.190)U/ml。[结论]马尾藻多糖能显著增强南美白对虾的免疫功能,其加入量为0.20%时效果最好。     

免疫多糖对中华倒刺鲃非特异性免疫机能和疾病抵抗力的影响

在饵料中添加不同含量(0、2、4、8 g/kg)的免疫多糖,连续投喂中华倒刺鲃4周,分别于第2周末、第4周末检测血液白细胞总数、白细胞吞噬活性及血清、头肾和脾中溶菌酶活性,探讨口服免疫多糖对中华倒刺鲃非特异性免疫机能的影响.2周后对添加4 g/kg免疫多糖的试验鱼注射副溶血性弧菌,并于感染后0、1、2、4、8d取样检测血液白细胞总数、白细胞吞噬活性及血清、头肾和脾中溶菌酶活性,研究免疫多糖对中华倒刺鲃的免疫调节作用.结果表明,该免疫多糖可显著提高中华倒刺鲃血液白细胞总数、白细胞吞噬活性及血清、头肾和脾中溶菌酶活性,且在一定范围内,随着免疫多糖浓度的增加,免疫反应呈现增强的趋势;其中添加4 g/kg免疫多糖、投喂2周效果最佳,能显著增强中华倒刺鲃抵抗副溶血性弧菌感染的能力.     

免疫多糖(酵母细胞壁)对黄鳝免疫保护力的增强作用

在饲料中添加不同剂量的免疫多糖(酵母细胞壁),连续投喂经注射接种嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的黄鳝(Monopterus albus)28 d后,通过测定供试黄鳝的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性(SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS),探讨了将LPS作为免疫原、免疫多糖作为免疫刺激剂结合使用对受免黄鳝免疫保护力的增强作用。结果表明,用添加100.0 mg/kg免疫多糖的饲料投喂受免黄鳝,不仅可以提高受免黄鳝对A.hydrophilaLPS的免疫应答水平,也可以增强黄鳝的非特异性免疫力和抵抗A.hydrophila人工感染的能力,同时也证明了在饲料中添加免疫多糖对黄鳝的生长速度和肝脏功能均无不良影响。     

维生素C对胡子鲶血清免疫相关酶活性的影响

在胡子鲶Claris batrachus的基础饲料中分别添加0、500、1000、1500、2000mg／kg的维生素C(Vc),于第12、24、36、52d分别测定胡子鲶血清中免疫相关酶的活性,以研究Vc对胡子鲶的免疫增强作用。结果表明,Vc可显著提高胡子鲶血清中碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)和髓过氧化物酶(MPO)的活性,但对超氧化物岐化酶(SOD)、溶菌酶和过氧化氢酶(CAT)活性的提高不显著。     

黄芪多糖的提取工艺及含量测定研究

[目的]研究黄芪根中多糖的含量。[方法]采用分光光度法测定膜荚黄芪中多糖的含量,以葡萄糖为对照品,以苯酚-浓硫酸为显色剂,在波长486 nm处测定样品溶液的吸光度。[结果]标准曲线为A=51.654C＋0.0372,r=0.9998,RSD1为1.28%,RSD2为1.50%。[结论]该方法操作简单,灵敏度高。     

黄芪多糖和黄芪甲苷诱导RIMVECs分泌IFN-γ的研究

【目的】探明黄芪甲苷和黄芪多糖能否诱导RIMVECs分泌IFN-γ,为黄芪及有效成分的临床应用提供理论和参考依据。【方法】以体外培养的RIMVECs为模型,用ELISA法检测不同浓度的黄芪甲苷和黄芪多糖在不同时间诱导RIMVECs分泌IFN-γ的表达量。【结果】25μg/mL和50μg/mL黄芪甲苷能诱导RIMVECs表达IFN-γ,且随着时间延长表达逐渐升高,24h时达到峰值,具有明显的富集效应;25μg/mL和50μg/mL黄芪多糖也能诱导RIMVECs表达IFN-γ,随着时间延长RIMVECs细胞上清液中IFN-γ表达量逐渐增多,25μg/mL组IFN-γ表达量24h达到峰值;50μg/mL组IFN-γ表达量12h达到峰值,随后表达量降低。【结论】结果提示,黄芪甲苷和黄芪多糖的免疫调节作用可能是通过诱导RIMVECs分泌IFN-γ来实现,为黄芪的临床应用提供了试验依据。     

3种免疫增强剂对黄颡鱼非特异性免疫机能的影响

[目的]研究酵母细胞壁、黄芪多糖、芪参散这3种免疫增强剂对黄颡鱼非特异性免疫功能的影响,为其在水产养殖中的推广和应用提供参考。[方法]制备含有不同剂量酵母细胞壁、黄芪多糖、芪参散药饵连续投喂42天,并在试验的0、7、14、28天检测黄颡鱼血清的非特异性免疫指标,分析其对黄颡鱼免疫功能的影响。[结果]酵母细胞壁、黄芪多糖、芪参散这3种免疫增强剂对黄颡鱼血清补体C3、SOD、溶菌酶、血清白蛋白均有不同程度提高。免疫攻毒试验表明3种免疫增强剂均有一定的免疫保护作用,其大小次序为:酵母细胞壁组黄芪多糖组芪参散组,其中2和4 g/kg的黄芪多糖和酵母细胞壁组保护率最高,为50%。[结论]饲料中添加酵母细胞壁、黄芪多糖和芪参散均对黄颡鱼的非特异性免疫功能具有一定的促进作用。     

超声降解香菇多糖及其体外抗氧化活性的研究

[目的]研究超声降解香菇多糖及其体外抗氧化活性。[方法]用脉冲超声降解香菇多糖,通过单因素实验考察超声功率、多糖浓度及体系温度对降解过程中溶液特性粘度变化的影响,并研究降解前后香菇多糖的体外抗氧化活性的变化。[结果]超声功率的增大及体系温度的增加均有利于香菇多糖超声降解作用增强。香菇多糖浓度对降解作用影响由大到小的顺序为1.00g/dL>0.75g/dL>0.50g/dL>2.00g/dL,在香菇多糖浓度为1.0g/dL时降解速度较快。在抗氧化活性方面,降解后的香菇多糖(UD-LNT)较未降解的香菇多糖(LNT)在清除超氧负离子和羟基自由基上有一定的提高。[结论]该研究为进一步开发和利用降解香菇多糖提供理论依据。     

黄芪多糖提取及对小叶杨幼苗叶绿素含量的影响

[目的]研究黄芪多糖最佳提取工艺,及其对小叶杨幼苗叶绿素含量的影响.[方法]运用水煎法提取黄芪多糖,采用固液比、提取溶剂、提取温度和提取时间4个试验条件,进行单因素试验,并利用正交试验设计对提取工艺进行优化,所得黄芪多糖处理小叶杨幼苗,探究黄芪多糖对其叶绿素含量的影响.[结果]单因素试验最终获得最佳提取工艺为以5％醇碱为提取溶剂,固液比为1∶15,提取温度为60℃,提取1.5h.正交试验得出优化提取工艺为以5％醇碱为提取溶剂,固液比为1∶10,提取温度为60℃,提取1.0h.10 mg/ml的黄芪多糖能够显著提高小叶杨叶绿素a和总叶绿素的含量,而0.1 mg/ml黄芪多糖能够显著提高小叶杨叶绿素b的含量.[结论]黄芪多糖能够提高植物叶绿素含量,进而促进植物的生长发育.     

草鱼模拟肠液的开发及其在仿生消化仪上的应用

[目的]研制草鱼模拟肠液配方。[方法]根据草鱼成鱼的肠道淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性,pH以及钠离子环境,研制了一套草鱼成鱼的模拟肠液配方,并研究其在仿生消化仪上的应用。[结果]利用配制的草鱼模拟肠液进行体外仿生消化试验,发现饲料中干物质和粗蛋白的消化率与真实值的绝对差值均在10%左右,达到仿生消化的目的与要求。此外,经过仿生消化,外源植酸酶能够显著提高干物质消化率、粗蛋白消化率和代谢能值,促进植酸磷的释放。[结论]该研究结果可为草鱼的体外模拟消化提供更可靠的试验数据,并为水产其他动物模拟肠液的开发提供参考。     

PolyI：C体外诱导草鱼PKR基因的克隆与表达

[目的]克隆草鱼的PKR基因,为草鱼抗病毒基因研究奠定基础。[方法]依据GenBank上斑马鱼（AJ852023.1）和鲫鱼（AY293929.1）的PKR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计了3对简并引物;采用100μg/ml PolyI：C体外分别处理草鱼肾细胞（Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK）12、36、48 h,并提取处理后细胞的总RNA,逆转录后用降落PCR方法扩增这3个处理时间细胞中PKR基因。[结果]处理12 h时未扩增出PKR基因,处理36和48 h时都扩增到了PKR基因,并且表达量随处理时间的增加有所升高,扩增到的部分序列与鲫鱼和斑马鱼的该段序列同源性分别为100.00%和81.48%。[结论]试验成功获得了草鱼PKR基因的部分序列,PolyI：C高效诱导草鱼PKR蛋白表达将有助于开创治疗草鱼类病毒病的一种新思路。     

PolyI：C体外诱导草鱼PKR基因的克隆与表达

[目的]克隆草鱼的PKR基因,为草鱼抗病毒基因研究奠定基础。[方法]依据GenBank上斑马鱼（AJ852023.1）和鲫鱼（AY293929.1）的PKR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计了3对简并引物; 采用100μg/ml PolyI：C体外分别处理草鱼肾细胞（Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK）12、36、48h,并提取处理后细胞的总RNA,逆转录后用降落PCR方法扩增这3个处理时间细胞中 PKR 基因。[结果]处理12h时未扩增出PKR基因,处理36和48h时都扩增到了PKR基因,并且表达量随处理时间的增加有所升高,扩增到的部分序列与鲫鱼和斑马鱼的该段序列同源性分别为100.00%和81.48%。[结论]试验成功获得了草鱼PKR基因的部分序列,PolyI：C高效诱导草鱼PKR蛋白表达将有助于开创治疗草鱼类病毒病的一种新思路。     

超声波辅助提取香菇多糖的研究

[目的]优化影响超声波辅助水浸提法提取香菇多糖的因素,提高多糖的提取率。[方法]设计单因子试验和多因子的正交试验,研究料液比、超声波处理时间、浸提温度、浸提时间4个因子对香菇多糖提取率的影响。[结果]超声波辅助水浸提法提取香菇多糖的最佳条件为：料液比1∶25、超声波处理15 min、100℃浸提2.0 h。在该条件下,香菇多糖提取率为4.39%。[结论]通过优化提取条件提高了香菇多糖的提取率,为香菇多糖的开发利用奠定了基础。     

复合酶提取香菇多糖的研究

[目的]对复合酶法提取香菇多糖的工艺条件进行研究。[方法]将酸性蛋白酶和纤维素酶2种酶应用于香菇多糖的提取,同时研究提取反应中pH值、酶液量、料液比、反应时间对提取率的影响。[结果]复合酶法提取香菇多糖的最佳工艺为:pH值4.2,酶液量0.30 ml,料水比为1∶40,反应时间1.5 h。[结论]该研究为香菇多糖的提取与应用奠定了基础。