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1997年成年体细胞核移植绵羊“多莉”的诞生,标志着动物体细胞克隆时代的到来。哺乳动物体细胞核移植技术从此受到了人们的广泛关注,应用该方法,各国学者相继生产出了体细胞克隆绵羊、牛、小鼠、山羊、猪、猫、兔、骡、马和大鼠等多种哺乳动物。那么该技术的应用价值究竟体现在哪些方面呢?一、在生命科学的基础研究领域该技术打破了生命科学中动物已分化细胞不具有发育全能性的传统概念,改写了部分生物学基础理论;为研究受精卵与早期胚胎核、质相互作用提供了新的方法;为研究哺乳动物细胞分化机制、细胞衰老和分化机理提供了新的手段;为基因… 相似文献
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哺乳动物细胞核移植有关机理研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
综述了哺乳动物细胞核移植的有关机理,包括哺乳动物早期胚胎基因组的转录激活与分化,体细胞核全能性的恢复,核受体卵母细胞的激活和NPF在细胞周期中的变化及其调节细胞周期的机理,对哺乳动物细胞核移植存在问题及未来发展方向进行了讨论。 相似文献
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随着体细胞核移植相继在多种动物中取得成功 ,异种细胞核移植技术在拯救濒危野生动物、人类干细胞克隆和细胞核质互作研究等方面具有特殊意义 ,受到广泛重视并取得了很大进展。文章对异种细胞核移植技术研究现状进行了综述 ,并对其应用前景和存在的问题进行了探讨。 相似文献
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哺乳动物体细胞核移植的研究是当今生命科学研究的热点之一。小鼠由于其繁殖周期短、材料来源比较容易,成为重要的模式动物。对小鼠体细胞核移植的国内外研究现状进行了综述,为进一步研究其他哺乳动物核移植提供了理论依据。 相似文献
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哺乳动物体细胞核移植技术(Somatic Cell nuclear transfer,SCNT)近几十年的发展取得了巨大的成就,但由于需要繁琐的技术、昂贵的显微操作仪且核移植效率不理想,阻碍了核移植克隆的规模化发展。近年来科学界运用了新的革新方法—体细胞手工克隆(Handmade Somatic Cell Cloning,HCM),其操作无需显微操作仪,对操作人的技术要求不高,是纯手工核移植技术。该技术不仅简化操作程序,还提高核移植效率,对今后哺乳动物核移植研究有重要的推动作用。该综述将从核移植技术的研究与进展方面,探讨限制手工克隆(HCM)的因子并以此来优化手工克隆技术。 相似文献
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随着同种动物克隆后代的不断降生,人们又开始尝试异种动物体细胞核移植。用兔的卵母细胞作为核受体进行牛的体细胞核移植,研究表明,颗粒细胞作为供核体与兔去核卵母细胞的融合率(60.5%,57.9%)稍高于皮肤成纤维细胞的融合率(52.2%,48.4%),但两者间差异并不显著。颗粒细胞与皮肤成纤维细胞均采用饥饿培养和接触抑制培养两种不同的方式进行诱导处理,融合卵在电激活后能够卵裂并发育的情况差异显著(72.6%对51.4%;70.4%对52.2%)。有少数重构胚发育至囊胚,证明在哺乳动物异种重构胚早期发育中,异种细胞核与细胞质间是相容的。 相似文献
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总结了目前植物基因分离的方法及其成就 ,概括出 6种植物基因分离的方法 ,即序列克隆法、功能克隆法、转座子标签法、图谱分离法、消减杂交法和差异表达分析法 (c DNA- RAPD、DD- PCR、RDA和 SSH) ,并对其特点和适用范围进行了评述 . 相似文献
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克隆启动子方法的比较及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
基因的表达调控已成为分子生物学研究热点之一。启动子是基因表达调控的重要顺式元件,启动子的克隆对于研究基因表达调控、构建基因工程载体、表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的启动子陷阱技术筛选启动子到PCR方法的应用,基于PCR克隆启动子技术有:载体锚定PCR、反向PCR、接头PCR、交错热不对称PCR等,为克隆启动子提供了更可靠,更合理的方法。文章着重介绍了几种启动子的克隆方法,分析了它们的优缺点,并展望了今后的研究前景。 相似文献
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电子克隆技术及其在植物基因工程中的应用 总被引:20,自引:0,他引:20
电子克隆是随着基因组计划和EST计划的实施而发展起来的,是利用生物信息学手段进行基因克隆的新方法。它具有投入低、速度快、技术要求低和针对性强等优点。因此,电子克隆技术必将成为植物基因工程中获得新基因的重要手段。阐述了电子克隆应用所依据的数据库与生物信息资源,介绍了利用电子克隆获得功能基因的方法,及其在植物基因工程中的应用现状与前景。 相似文献
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胚胎移植方法和受体母猪因素对克隆猪生产效率的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
【目的】建立高效的胚胎移植技术体系,以提高克隆猪的生产效率。【方法】比较不同移植方法和不同受体母猪状况的胚胎移植分娩率和克隆猪的出生效率,利用体外发育能力相似的不同品种和发育阶段的克隆胚胎混合移植确定最佳的受体母猪发情同期时间。【结果】克隆胚胎经由输卵管伞移植比输卵管打孔移植具有更高的移植分娩率和克隆猪效率(2.2% 和0.4%,P<0.01),而胚胎移植后辅助人工授精会降低克隆效率(0.6% 和 2.2%,P<0.01)。利用经产母猪作为移植受体比青年猪受体具有更高的克隆效率(3.0%和0.8%,P<0.01)和平均窝产仔数((5.5±0.7)头和(2.7±0.3)头,P<0.05)。受体母猪发情时间比胚胎激活时间晚12—36 h组的克隆效率分别为显著(P<0.05)和极显著(P<0.01),高于晚0 h和早12—24 h 组的克隆效率(2.0%、0.5%和0%)。最佳的受体母猪发情时间为晚于克隆胚胎激活后24 h,克隆效率达3.0%。【结论】选择自然发情时间晚于克隆胚激活后24 h的经产母猪为受体,通过输卵管伞端移植胚胎,能够获得较高的克隆效率,是猪克隆胚胎移植的较理想方法。 相似文献
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应用细胞核移植技术,把未分化或处于不同发育阶段的胚胎分裂球或细胞移入成熟的去核卵母细胞,并使之融合,成为G_0代克隆卵。将G_0代克隆卵移入同期发情的山羊输卵管中培养5d,回收得到克隆胚,选择其中正常发育至8~16细胞的克隆胚,将其胚胎细胞再移入成熟的去核卵母细胞,并进行电融合,构成G_1代再克隆卵。129枚G_0代克隆卵和143枚G_1代再克隆卵移入同期发情的山羊输卵管,获得G_0代克隆羊2只和G_1代再克隆羊4只。介绍了产生克隆动物的各个技术环节以及这些环节与克隆动物出生率的关系。 相似文献
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通过PCR产物克隆测序和直接产物测序的方法对禾本科小麦族仲彬草属10个物种的rDNA内转录间隔区(ITS)及5.8SrDNA进行了序列测定和系统发育分析。结果表明:该属植物ITS区直接产物测序与克隆测序存在较大差异,克隆测序序列反映的系统发育关系与形态学、地理分布、细胞学、分子标记分析结果基本一致。因此,采用克隆测序的方法对仲彬草属植物系统发育分析比直接测序方法更为可靠。 相似文献