湖南省柑桔良种的脱毒与检测研究

1989～1992年经高温预热处理——微芽茎尖嫁接获得30个柑桔优良单株的79株茎尖嫁接试管苗.有10个单株的18株茎尖苗经指示植物、电镜及双向聚丙烯酰胺凝胶电泳检测证明不带裂皮病、碎叶病、衰退病和黄龙病,确定为无毒茎尖苗.另有10个单株的23株茎尖苗已初步检测不带上述各种病害.电镜检测20个单株母本树中,有10个观察到衰退病毒,4个观察到碎叶病毒,分别为供检单株的50%和20%.在双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测的25个单株母本树中,有8个带有裂皮类病毒,占供检单株的32%.指示植物嫩枝嫁接或边劈可提高检测效率.     

红玉柑微芽嫁接技术试验

研究了茎尖大小、茎尖来源对红玉柑茎尖微芽嫁接成活率的影响。试验表明,以枳橙为砧木,微芽嫁接茎尖大小以含3~4个叶原基其茎尖微芽嫁接成活率较高。以成年态茎段诱导产生的不定芽作为接穗进行茎尖微芽嫁接,嫁接成活率较高,且成年态茎段试管诱导不定芽作为微芽嫁接接穗,解决了微芽嫁接受季节限制的问题。     

砧木品种与茎尖嫁接成活率关系的研究

[目的]明确砧木品种与茎尖嫁接成活率的关系。[方法]分别以枳(Poncirus trifoliata)、枳橙(Ruta"Citrange")和甜橙[Citrussinensis(L.)Osbeck]作为茎尖嫁接砧木,采用倒"T"字法对黄果柑、长泰芦柑、玉环高橙以及玉环柚进行茎尖嫁接脱毒。[结果]黄果柑和玉环高橙用甜橙作砧木成活率最高分别为75.0%和60.0%,长泰芦柑和玉环柚用枳橙作砧木成活率最高分别为46.7%和18.2%。[结论]茎尖嫁接成活率的高低与砧木和脱毒品种的亲和性有关,同一品种选用不同的砧木其茎尖嫁接成活率有差异。     

枳砧甜橙黄化问题的研究

枳砧嫁接各种柑桔类品种,只有少酸类甜橙发生黄化。不同株系枳的单株嫁接甜橙,黄化程度有明显差异,用茎尖脱毒的暗柳橙接穗嫁接成苗后出现的黄化率反而高于用黄化的改良橙接穗。 在防虫网室中用实生暗柳橙接穗嫁接小叶大花系枳出现7.4％的黄化株和59.2％轻度黄化株,在这些黄化株上嫁接腊斯克枳橙不表现碎叶病症状,因而认为枳砧甜橙黄化系嫁接不亲和引起,与碎叶病毒无关。     

瓯柑微芽嫁接脱毒及试管苗的快速培育技术

研究了不同大小的瓯柑茎尖分生组织进行微芽嫁接脱除黄龙病病原的效果。在双目实体显微镜下,分别切取含有生长锥及1、2、3和4个叶原基的茎尖分生组织嫁接到黄化砧木上,以获得茎尖微芽嫁接苗,用PCR进行黄龙病分子检测。试验表明:用含1个和2个叶原基的茎尖嫁接获得的试管苗全部不带病毒;含有3个和4个叶原基的茎尖嫁接获得的试管苗其脱毒率分别为95.7%和73%,感病母株和长春花阳性对照可以扩增出535 bp的特异性片段;尽管在含2个叶原基条件下获得的STG成活率为47.7%,但可以达到理想的脱毒效果。试验还证明,瓯柑二次嫁接与茎尖嫁接直接移栽苗的生长量差异极显著。     

两种砧木对塔罗科血橙嫁接成活率及生长的影响

探讨4种嫁接处理对塔罗科血橙嫁接苗成活率及生长的影响,旨在探索适合重庆万州塔罗科血橙的最佳嫁接组合,为优质塔罗科血橙苗木的繁育提供科学依据,方便在以后的生产中进行推广应用;以枳和香橙做砧木,采用腹接芽接(SB)法,对春季和秋季嫁接的塔罗科血橙苗进行对比试验,共设4个处理(TSBS、FSBS、TSBA、FSBA),观察砧穗愈合进程并测定接穗萌芽率、死亡率和生长情况;不同嫁接处理使塔罗科血橙苗砧穗愈合进程、成活率及生长反映出不同的表现;以枳砧秋季嫁接表现为最好,愈合较快,成活率高,萌发生长速度较快且生长质量最好;综合效果表现为枳砧嫁接优于香橙砧嫁接,秋季嫁接优于春季嫁接,枳砧秋季嫁接优于香橙砧秋季嫁接,枳砧春季嫁接和香橙砧春季嫁接次之。     

柑桔对黄龙病病原与病毒混合侵染的反应

已知在福建省柑桔产区发生的由嫁接传染的病害有黄龙病、衰退病、裂皮病和碎叶病。由于长期以来柑桔采用无性繁殖的结果，造成这几种病害多以两种或两种以上的混合侵染形式存在。对苗期进行混合接种的试验结果表明，病状表现的严重程度与柑桔对该病原的抗性程度的密切关系，感病的病状明显，抗病的病状不明显或不表现；但各组合接种株与其过氧化物酶同酶的变化则表现出比较复杂的关系。福建省柑桔的主栽品种是芦柑、雪柑和福桔，它们对衰退病、裂皮病和碎叶病具有一定的抗性，所以这３种病原的混合侵染对本砧的柑桔生产没有造成严重的危害。     

11个柑桔碎叶病毒分离株致病力强弱的比较(初报)

 柑桔碎叶病主要危害以枳及其杂种作砧木的柑桔树.该病在美国、日本等国都有分布,在我国分布较为普遍,台湾、广东、福建、浙江、湖南、湖北、四川和广西等省均有报道,在浙江、湖南、福建和广西等省的枳砧柑桔园造成危害.台湾苏鸿基根据该病在腊斯克枳橙和特洛亚枳橙上的症状,将柑桔碎叶病毒划分为致病力强弱不同的株系.     

脐橙芽片腹接试验初报

本试验以茎粗0.2-0.3㎝枳砧、纽荷尔脐橙当年生成熟春梢接穗为试材，研究5月25日、6月10日和6月25日芽片腹接对纽荷尔脐橙嫁接成活率及苗木生长的影响。结果表明：从5月25日-6月25日采用茎粗0.2-0.3㎝枳砧与当年生成熟春梢进行芽片腹接成活率均在84.9%以上，与常规春季单芽切接成活率相近；但当年10月上旬苗木高度、茎粗和分枝数量，达不到国家标准《柑橘嫁接苗》的指标，不能当年嫁接当年出圃；在武平县气候条件下生产上广泛推广芽片腹接培育脐橙嫁接苗并在当年出圃是否可行需要进一步进行多年多点试验。     

柑桔碎叶病毒的脱毒

 夏天将带有碎叶病毒的粹潼脐橙、金堂早脐、新会橙、雪柑、蕉柑新1号、德森温州蜜柑盆栽苗置于玻璃房中,10～40天不同时间从其上采嫩芽进行茎尖嫁接,所获茎尖苗全部或部分无碎叶病毒.不同品种不同时间热处理后采其茎尖进行茎尖嫁接的脱毒效果木同.     

柑橘品种茎段离体培养条件的优化及微芽嫁接试验

【目的】优化柑橘品种茎段离体培养条件并开展微芽嫁接(试管内茎尖嫁接)试验,为培育无毒柑橘组培种苗提供参考依据。【方法】对温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条进行不同浓度HgCl_2和NaClO消毒,筛选适宜组培利用的柑橘外植体消毒方式、采集季节及激素配比;开展嫁接砧木种子消毒和微芽嫁接试验,分析两个柑橘品种微芽嫁接的萌发状况。【结果】温州蜜柑外植体的最适消毒方法为70%酒精+1.0‰HgCl_2消毒6 min处理两次;纽荷尔脐橙外植体的最佳消毒方法为70%酒精+15.0%NaClO处理两次;采集成年态柑橘茎段进行离体培养的最佳时期为夏季;在MS固体培养基中添加1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)和0.1 mg/L萘乙酸(NAA)均有利于两个柑橘品种外植体腋芽萌发。砧木种子最适消毒方法为剥去内外种皮+70%酒精+1.5%NaClO溶液处理;两个柑橘品种微芽嫁接的萌发率较低,分别为10.00%和6.67%,但嫁接成功后柑橘苗长势良好。【结论】于夏季剪取温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条带芽茎段,分别经70%酒精+1.0‰HgCl_2消毒6 min处理两次、70%酒精+15.0%NaClO处理两次,在添加1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA的MS固体培养基中接种,可获得最佳的培养效果。利用微芽嫁接技术嫁接的柑橘苗长势良好,可在提高其嫁接萌发率基础上推广应用。     

The effects of rootstocks on performances of three late-ripening navel orange varieties

Selection of rootstock is very important for citrus production. Besides its major role on resistance, the rootstock also can affect fruit production and quality. Currently, the main concerns on selection of rootstock for citrus production are compatibility and resistance, due to less information on the impacts of rootstock to the performance of scion varieties. This study aims to provide information on performances of navel orange varieties on different rootstocks. Three late-ripening navel orange varieties(Citrus sinensis var. Powell, Chislett and Banfield) grafted on seven rootstocks(Swingle citrumelo(C. paradisi× P. trifoliata), Carrizo citrange(C. sinensis×P. trifoliata), X639(C. reticulata×P. trifoliata), MXT(C. sinensis×P. trifoliata), Hongju(C. reticulata), Ziyang Xiangcheng(C. junos) and trifoliate orange(P. trifoliata)) were used as plant materials for comprehensive comparison of the performances on tree growth, fruit yield and quality in 21 scion–stock combinations. Investigation was carried out in these combinations in field nine years after planting. Vigorous growth of all the three late-ripening navel orange varieties was observed on Carrizo citrange with the largest canopy volume at 33.34 m3 and the highest yield at 29.43 kg per tree, but a low yield efficiency at 2.87 kg m–3. On the contrary, those on trifoliate orange had the smallest canopy volume at 10.79 m3 and the lowest fruit yield at 12.51 kg per tree, but the highest yield efficiency at 3.95 kg m–3. Rootstocks did not show significant effects on fruit size, fruit shape index, peel thickness and the edible rate of the fruits, but fruit quality was significantly affected by the rootstocks. Fruits from the trees grafted on trifoliate orange presented the best quality with significantly higher total soluble solids(TSS) content than those on Ziyang Xiangcheng and Hongju, and also the highest ratio of TSS/titratable acidity(TA). The TA content was observed from the fruits on X639 at 0.59 g 100 mL–1. Vitamin C(Vc) content of fruits on Hongju was the highest at 49.25 mg 100 mL–1. Growth vigor of the trees was positively correlated with fruit yield at an extremely significant level. The canopy volume was negatively correlated with yield efficiency, but positively correlated with compatibility index. Results of this study indicated that the rootstock has great impacts on the growth vigor of the tree, yield efficiency and quality of the fruit. In order to achieve good quality and yield efficiency for navel orange production, less growth vigor rootstock such as trifoliate orange is highly recommended.     

广东梅州柑橘黄龙病和病毒病的发生调查及其黄龙病菌原噬菌体多样性

【目的】调查柑橘黄龙病（Huanglongbing,HLB）和病毒病在广东省梅州市柑橘主产区的危害情况,分析该地区柑橘黄龙病菌（CLas）的原噬菌体多样性。【方法】以16S rDNA为模板设计引物,利用实时荧光定量PCR（qPCR)检测梅州市不同抽检地在2017—2019年3年间柑橘黄龙病的发病情况;同时分别采用已报道的柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）、柑橘裂皮病毒（Citrus exocortis viroid,CEVd）、柑橘褪绿矮缩病毒（Citrus chlorotic dwarf-associated virus,CCDaV）、柑橘碎叶病毒（Citrus tatter leaf virus,CTLV）和柑橘黄脉病毒（Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV）的特异性检测引物,提取样品的RNA,反转后以样品的cDNA为模板,通过普通PCR的方法分析梅州市抽检地区柑橘病毒病的发生情况。此外,以基于2种原噬菌体类型（SC1和SC2）对应的超变异基因区域设计的2对引物（Lap-TJ-F/Lap-TJ-R1和Lap-TJ-F/Lap-TJ-R2）,运用普通PCR方法分析该地区CLas菌株原噬菌体的遗传多样性。【结果】除2018年9月梅州大浦顺兴公司蜜柚基地的抽检样品外,梅州市其他被检地区均发现CLas。总体来说,梅州市的脐橙CLas检出率为55.3%,蜜柚为61.5%,沙田柚为61.7%。其中2017年采集自平原县大拓镇的蜜柚和沙田柚样品CLas检出率为100%,兴宁市白马镇的蜜柚为100%,沙田柚为80%;其他抽检地区的样品CLas检出率在16.7%—83.3%。虽然梅州市部分地区的检出率较高,但其病原菌的含量并不高,大部分处于柑橘黄龙病发病初、中期,属可防可控阶段;此外,梅州市柑橘病毒的总检出率不高,CTV、CTLV和CYVCV为梅州的主要病毒,CEVd和CCDaV没有检测到。CTV、CTLV和CYVCV在脐橙上的检出率依次为78.9%、7.9%和21.1%,蜜柚为15.4%、25.0%和9.6%,沙田柚为6.4%、2.1%和4.3%。基于Lap-TJ-F/Lap-TJ-R1和Lap-TJ-F/Lap-TJ-R2来研究CLas原噬菌体多样性的PCR扩增条带共有4种类型（SC1-1、SC1-2、SC2-1和SC2-2）,经过PCR电泳和测序得出,来自梅州市脐橙和沙田柚的CLas菌株以SC2-1型为主,蜜柚上以SC1-1型为主。【结论】梅州柑橘产区的柑橘黄龙病目前属于可防可控阶段,其病原菌菌株的原噬菌体在不同品种上具有其独特性;由于在抽检时发现有柑橘病毒病的存在,因此在种植过程中需加强种苗监管,同时应采取有效措施对柑橘黄龙病和柑橘木虱（Diaphorina citri）进行绿色防控。     

花生组培苗嫁接技术的研究

为解决花生组培再生苗及转基因苗驯化移栽成活率低的难题,本试验以花生实生苗作为砧木,对花生嫁接技术进行了研究。试验结果表明:超净台内无菌嫁接效果较好,以再生苗或实生苗为接穗进行无菌嫁接,其成活率均达90%以上,明显高于室内嫁接成活率(71%～72%);无菌嫁接时12～15d苗龄的砧木效果最好;将无菌嫁接苗在培养基中培养3～5d后进行驯化移栽为最佳时期;不同花生基因型嫁接苗成活率在87%～95%;嫁接苗移栽田间后,其成活率高达94%,且100%结果。     

药物浸种处理防治西瓜嫁接苗细菌性果斑病试验

【目的】筛选防治西瓜嫁接苗细菌性果斑病（BFB）的种子处理有效药剂,为防治BFB提供科学依据。【方法】先以17种药剂的200倍液对西瓜种子进行浸种处理,依据嫁接苗BFB的发病率初步筛选防治BFB的有效药剂;以初选有效药剂进行不同浓度、不同混合组合及不同浸种方法处理对嫁接苗BFB的防治效果试验。【结果】初试结果表明,2%春雷霉素处理西瓜嫁接苗BFB病株率较低,可用于下一步试验。复试结果表明,2%春雷霉素100、200、300、400、500倍液浸种处理有籽西瓜种子,嫁接后12d嫁接苗BFB发病率分别为1.0%、36.7%、94.3%、95.7%、98.1%;2%春雷霉素200倍＋乐无病、72%农用链霉素、72%农用硫酸链霉素800倍液浸种处理有籽西瓜种子,嫁接后12d嫁接苗BFB发病率为1.0%~2.4%;2%春雷霉素100、200、300、400倍液处理西瓜干种子,嫁接后12d有籽西瓜嫁接苗BFB发病率为0.5%~5.7%,无籽西瓜嫁接苗BFB发病率为8.1%~11.4%;2%春雷霉素400倍＋乐无病、72%农用链霉素、72%农用硫酸链霉素1000倍液处理西瓜干种子,嫁接后12d有籽西瓜嫁接苗BFB发病率为1.0%~2.0%,无籽西瓜嫁接苗BFB发病率为6.7%~9.5%。【结论】2%春雷霉素可作为防治西瓜嫁接苗BFB的首选特效药,推荐浓度为2%春雷霉素400倍或以2%春雷霉素400倍搭配其他杀菌剂使用。     

砧木、接穗的选择对美国山核桃嫁接成活率及生长的影响

以1年生山核桃实生苗为砧木,从美国山核桃采穗圃中采集优良穗条,按照接穗不同部位,砧木不同径级进行嫁接。通过对嫁接成活率以及苗木成活后生长情况的比较分析,结果表明:1)顶端穗条嫁接成活率最低,中部穗条嫁接成活率最高;2)砧木与接穗粗度差异越小嫁接成活率越高,差异越大则嫁接成活率越低;3)砧木越粗,嫁接后苗高生长越快,但对地径和嫁接口径并无显著影响。因此,选择适宜的砧木和穗条能够大大提高嫁接成活率,提供优质的嫁接苗。     

影响柑橘温室嫩芽嫁接成活率因素的探讨

通过柑橘温室嫩芽嫁接试验,研究了不同芽龄、不同管理条件、砧木木质化程度、不同季节对其嫁接成活率的影响。结果表明,不同芽龄的接穗、嫁接苗不同的生长条件、砧木嫁接部位木质化程度以及不同季节的接穗对嫁接成活率都有较大的影响。综合考虑,取芽龄约为10 d的春梢作为接穗,在实生苗的未木质化部位进行嫁接,嫁接苗在光照培养室中生长,成活率可达80%以上。     

兔眼越橘嫁接试验初报

报道了以云南越橘实生苗作砧木,5个兔眼越橘品种枝条作接穗的嫁接试验,结果表明:园蓝、杰兔品种的嫁接成活率较高,砧穗生长发育也较好;2月15日至5月15日的嫁接成活率高,砧穗生长期较长,是比较理想的嫁接时间;单芽切接、切腹接的成活率高,而且操作简便、工效高,是值得推广的嫁接方法;砧木年龄对成活率影响不大,但对嫁接苗后期的生长发育有影响,建议用3年生砧木;接穗年龄对成活率、嫁接苗后期的生长发育都有影响,建议用当年生、1年生枝条作接穗。