不同灭菌方法对茜草组织培养污染率控制的研究

利用不同灭菌方法对茜草外植体进行处理,观测组织培养污染率、愈伤组织诱导率。实验表明:10%高锰酸钾溶液浸泡3分钟效果最佳,污染率30%,愈伤组织诱导率25%;75%酒精溶液灭菌10s处理效果较差,污染率60%,愈伤组织诱导率为10%。     

成年火龙果植株茎段愈伤组织诱导、增殖及分化研究

【目的】为建立和优化火龙果的再生体系。【方法】以成年植株茎段作为外植体,研究了不同表面灭菌方法、不同取样时间及取样部位对外植体污染、褐化的影响,以及不同植物生长调节剂浓度及配比、培养条件等对茎段愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。【结果】适宜幼嫩茎段表面灭菌的方式为75%酒精消毒30 s+0.1%HgCl_2消毒6～8 min,适宜成熟茎段表面灭菌的方式为75%酒精消毒30 s+0.1%HgCl_2消毒12～15 min;以春季萌发的10～20 cm枝条诱导愈伤组织效果较好,最适愈伤组织诱导的培养基为MS+TDZ 0.4 mg/L+KT 0.8 mg/L,暗培养7 d,再转入光照培养,愈伤组织为黄绿色、致密状,外表有颗粒状突起。愈伤组织增殖培养基以MS+TDZ 0.4 mg/L+KT(或ZT) 0.8 mg/L效果较好,增殖系数在8倍以上。在愈伤组织分化过程中,添加20%～30%的椰子水对不定芽的形成具有一定促进作用,但分化率较低。【结论】以成年火龙果植株茎段建立的再生体系,愈伤组织分化率总体表现较低,最高分化率仅13%,因此还有待进一步加强和完善。     

沙葱再生体系的建立

【目的】建立沙葱组培快繁体系,为沙葱的规模化生产提供理论依据.【方法】以沙葱茎段为外植体,MS为基本培养基,探讨不同灭菌时间对种子污染率的影响,不同取材季节对沙葱愈伤组织诱导的影响,不同激素配比对愈伤组织、不定芽的诱导及生根的影响.【结果】种子的最佳灭菌时间为10min,污染率为6.7%.春季为沙葱的最佳取材季节,春季的沙葱茎段的出愈率、污染率分别为70.0%、15.7%.在2mol/L 6-BA和2mol/L NAA的激素配比下诱导的茎段出愈率最高,为72.5%,愈伤组织质地疏松;在1mol/L 6-BA和1mol/L NAA的激素配比下不定芽出芽时间12~15d,出芽率76%.在培养基1/2MS+0.5mol/L NAA上的生根率为88.9%、根长4.32cm、根粗0.86mm,为最适的生根培养基.【结论】沙葱种子的最佳灭菌时间为10min,茎段的最适的取材季节为春季,茎段脱分化最佳培养基为MS+2mol/L 6-BA+2mol/L NAA,不定芽最佳诱导培养基为MS+1mol/L 6-BA+1mol/L NAA,最适生根培养基为1/2MS+0.5mol/L NAA.     

滇桂艾纳香的灭菌和愈伤组织诱导

对滇桂艾纳香的不同部位进行不同灭菌处理、不同基本培养基、不同激素种类及浓度的比较试验,结果表明:茎尖在8%NaCIO8' 0.1%HgCl28'的灭菌处理效果最好,菌污染率仅为3.48%;外植体不同部位的灭菌效果由好到差依次为茎尖、叶片、嫩茎、花苞、老茎;愈伤组织诱导率为茎尖＞嫩茎＞叶片＞花苞＞老茎;最佳基本培养基为MS,愈伤组织的诱导率达到86.67%;不同种类及浓度的激素处理,分别以6-BA1.0 mg/L、KT1.5 mg/L时较为适宜.     

一串红高效离体再生体系研究

为建立一串红高效再生体系,研究了0.1%HgCl2不同灭菌时间对一串红种子和外植体污染率和启动率(发芽率)的影响,以及不同激素组合对一串红外植体茎段、带节茎段和叶片愈伤组织诱导率及其分化率的影响.结果表明:采用0.1%HgCl2处理9 min是一串红外植体较为理想的表面灭菌时间,而一串红种子处理8 min有较低的污染率和较高的发芽率;采用无菌苗的茎段和叶片能诱导出质量较好的愈伤组织,但其进一步分化产生不定芽的能力较差,而采用带节茎段诱导愈伤获得了较多的分化苗,且1.5 mg·L-16-BA+1.0mg·L-12,4-D+0.2 mg·L-1NAA配方适于一串红愈伤组织的诱导,2.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA组合是适宜一串红愈伤组织分化的激素配方.此外,含0.5 mg·L-1NAA的1/2MS固体培养基能使一串红分化苗生根率在90%以上,且移栽后一串红成活率可达80%以上.     

赫章县野生多星韭植物组织培养技术初探

为了保护和利用赫章县野生多星韭资源,试验以野生多星韭叶片作为外植体,进行了次氯酸钠不同浓度和不同灭菌时间对多星韭叶片灭菌效果的影响;以及叶片不同部位、不同NAA和6-BA浓度配比对多星韭叶片愈伤组织诱导的研究。结果表明,以野生多星韭叶片为外植体诱导愈伤组织时,5%次氯酸钠灭菌10min外植体污染率最低,为20.16%;以野生多星韭叶片基部为外植体时愈伤组织的诱导率最高,为65.34%;在野生多星韭叶片愈伤组织的诱导中,NAA与6-BA的最适配比为1.0mg/LNAA+1.0mg/L6-BA,愈伤组织的诱导率高达67.14%。     

柠条锦鸡儿组培研究

以柠条锦鸡儿嫩枝为试材,观察了不同灭菌时间以及不同激素浓度对柠条外植体萌芽率、生根、愈伤组织诱导的影响,结果表明,柠条锦鸡儿茎段用0.1%升汞灭菌8 min时,污染率最低;以MS+0.2 mg/L 6-BA为培养基进行增殖培养时萌芽率最高,为80%;以1/2MS+0.5 mg/L IAA为生根培养基时生根率可达53%;以MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D为愈伤组织培养基时诱导率为63%,且愈伤组织出现早,生长良好。     

头花蓼愈伤组织诱导及分化

研究了2种外植体(叶片、茎段)、消毒方法、培养基种类、活性炭、植物生长调节剂等因素对头花蓼愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,最佳消毒方法为以0.15%HgCl2消毒叶片6min和10%NaClO消毒茎段9min;不同培养基诱导愈伤组织发生率依次为MS1/2MSB5;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L有利于愈伤组织形成;MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.2mg/L有利于愈伤组织增殖;MS+6-BA 8mg/L+IBA 0.1mg/L有利分化,分化率为83.33%,产生不定芽平均数为5.1个。培养基中附加100mg/L活性炭,褐化率仅为6.80%,愈伤组织生长和分化效果较好。     

黄精叶钩吻愈伤组织诱导研究

以珍稀濒危植物黄精叶钩吻为材料,研究不同外植体和激素配比对愈伤组织诱导的影响.结果表明,0.1％ HgCl2为最佳灭菌剂;茎段出愈率高,为愈伤组织诱导的最佳外植体;诱导茎段产生愈伤组织的最佳培养基为MS+ 1.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA,诱导的愈伤组织量大、颜色翠绿、质地致密.     

长春花愈伤组织诱导研究

以长春花幼嫩顶芽与茎段为外植体，研究了不同灭菌剂及处理时间对外植体的灭菌效果及外植体材料对愈伤组织诱导的影响。结果表明，长春花顶芽为外植体，用75%酒精灭菌30 s+0.1%升汞灭菌300 s效果较好，此条件下外植体污染率为5.5%、褐变率为9.3%。愈伤组织诱导培养基以MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋2.0 mg/L 2，4-D效果较好，诱导率可达86.6%。以长春花顶芽为外植体时产生愈伤组织的时间较旱，出愈率为92.6%，愈伤组织团块大、致密，表面有小疣突，预期有较好的不定芽分化能力。     

不同因素对油樟愈伤组织生长的影响

[目的]筛选油樟组培条件。[方法]以油樟带芽茎段为外植体,通过愈伤组织诱导率、污染率、褐变等指标研究无机盐、光照、抗生素等因素对愈伤组织生长影响。[结果]愈伤组织在2种培养基上均能明显增殖,且MS的培养效果好于1/2MS。由带芽茎段诱导的新生愈伤组织略带绿色。继代培养后,黑暗中诱导和培养的愈伤组织为淡黄色或白色,光照下培养的愈伤组织为褐色。愈伤组织诱导率和外植体污染率都随抗生素浓度的增加而降低,25～50mg/L的链霉素处理出愈率最高(60%～72%),污染率最低(0～15%),死亡率也最低(0)。在相同浓度下,使用链霉素外植体死亡率最低。[结论]MS培养基+25～50mg/L链霉素是油樟组培的最佳条件。     

培养基和植物激素对青钱柳茎段和叶片愈伤组织诱导的研究

为建立青钱柳组培快繁体系以解决青钱柳资源贫乏问题,以青钱柳茎段和叶片为外植体,对影响青钱柳愈伤组织诱导的基本培养基、激素种类及浓度等关键因素进行了研究。结果表明,基本培养基以改良MS诱导茎段愈伤组织效果最好,诱导率可达89.09%;MS诱导叶片愈伤组织效果最好,诱导率可达81.82%;2,4-D比NAA能够较快地诱导外植体产生愈伤组织,其中2.0 mg/L 2,4-D诱导率最高,可达88.57%,且形成愈伤组织多。2,4-D2.0 mg/L 6-BA1.0 mg/L的组合对青钱柳茎、叶诱导愈伤组织效果最佳,茎、叶诱导率分别可达91.57%和86.14%,且诱导出的愈伤组织生长快。     

百香果茎段愈伤组织诱导分化研究

本研究以百香果茎段为试验材料,采用不同的消毒方法,研究不同消毒处理对百香果消毒效果的影响,并筛选出愈伤组织诱导分化的最佳培养基配方。结果表明：百香果茎段使用洗衣粉溶液浸泡5min,结合75%酒精30 s+HgCl212min的消毒效果最好,污染率最低仅20%,愈伤组织诱导与分化的最适培养基为：MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率为70%,分化率为40%。此研究为百香果脱毒及组培快繁体系的建立奠定基础。     

芦荟愈伤组织诱导的初步研究

以库拉索芦荟的茎段、茎尖、叶片和根为外植体，以MS为基本培养基，添加不同浓度的2，4-D，NAA，KT或其组合，并附加AgNO3，Vc，研究外植体种类、大小，接种方式，激素配比，以及AgNO3，Vc对库拉索芦荟愈伤组织诱导及生长情况的影响．结果表明，外植体以2cm长度的茎段较好；接种方式以横放效果较好；NAA15mg／L 2，4-D4mg／L KT0．1mg／L的激素组合愈伤组织诱导率达到90％；添加AgNO3诱导出的愈伤组织生长旺盛，富有光泽，以10mg／L效果较好；添加Vc对愈伤组织的褐化有一定的抑制，以5mg／L效果较好．     

南方红豆杉愈伤组织培养研究

对南方红豆杉叶、茎的愈伤组织诱导条件及最适培养基组成成分进行了探讨.结果表明:2,4-D浓度2.0 mg/L比0.5 mg/L或1.0 mg/L处理的叶、茎愈伤组织诱导率高;嫩茎愈伤组织的诱导率因不同类型的激素组合以及激素不同质量浓度而不同,培养基MS 2,4-D 2.0mg/L,MS 2,4-D 2.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L,MS 6-BA 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L,1/2 MS NAA 2.0 mg/L IBA 1.0 mg/L,茎诱导率分别为100%,90%,75%,75%,相对其比较对象而言,这些培养基的诱导率最高.     

天门冬组织培养条件的优化

以天门冬(Asparagus cochinchinensis)幼嫩茎段为外植体,考察1 g/L HgCl2灭菌时间对外植体的消毒效果,以及激素浓度组合对外植体愈伤组织、不定芽的诱导和不定芽生根的影响.结果表明,1 g/L HgCl2处理7 min,外植体褐化率和污染率较低;MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L KT培养基中的愈伤组织诱导率最高,且生长势最强,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L KT培养基中的出芽率最高;1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA培养基中生根率最高,可达76％.     

大花金挖耳无菌外植体的获得及愈伤组织诱导的初步研究

以大花金挖耳(C arp esium m acrocepha lum F ranch.et Sav)种子为材料,进行了种子消毒和愈伤组织诱导及继代的初步研究。结果表明,对大花金挖耳种子进行消毒的最佳条件为,以体积分数70%的乙醇消毒5 m in后,再用50%的N aC lO3处理30 m in。在大花金挖耳无菌苗的根形成愈伤组织的正交试验中,基本培养基对愈伤组织诱导率的影响最大,NAA次之,6-BA影响最小,对愈伤组织诱导的较优组合是B5+NAA 3.0 m g/L+6-BA 0.2m g/L,诱导率为100%;在优化诱导愈伤组织的激素浓度配比试验中,B5+NAA 2.0~3.0 m g/L+6-BA 0.2~0.4m g/L对大花金挖耳愈伤组织的诱导率为100%,且产生的愈伤组织多为淡黄色、质地疏松、生长势极好、褐化时间长,适合于大花金挖耳愈伤组织的诱导。在培养基中分别添加500 m g/L VC和10 000 m g/L PVP能抑制大花金挖耳愈伤组织的褐变,且有利于愈伤组织的继代。     

正交试验优化余甘子愈伤组织诱导培养基研究

以余甘子无菌幼苗作为材料,通过正交试验研究影响余甘子愈伤组织诱导的因素,以完善余甘子组织培养体系。结果表明:以茎或叶作为外植体,在MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA培养基中,愈伤组织诱导率达87.9%以上,愈伤组织生长良好。     

蓼蓝组织培养再生体系的建立

[目的]建立蓼蓝组织培养再生体系。[方法]以半野生蓼蓝种子、幼叶和茎段为外植体,探讨不同浓度植物激素配比的培养基对其愈伤组织诱导、继代、分化及生根的影响。[结果]以蓼蓝茎段为外植体进行组培是适宜的;诱导和继代最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L,平均诱导率可达73.33%;分化最佳培养基为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,平均分化率可达51.67%;生根适宜的培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根后移栽成活率达100%。[结论]该研究为优良蓼蓝快速繁殖提供了新的途径,并为其种质资源的保存与利用提供了依据。     

香蕉雄花和组培苗假茎胚性愈伤组织诱导的初步研究

从外植体来源、生长调节剂种类及浓度等方面研究影响巴西蕉胚性愈伤组织诱导的因素。结果表明,以未成熟雄花为外植体,MS培养基+1 mg/L 2,4-D+1 mg/L IAA+1 mg/L NAA较适宜胚性愈伤组织诱导,26℃暗培养条件下,未成熟雄花的胚性愈伤组织诱导率为3%～4%。在MS培养基+0.7 mg/L 2,4-D+4 mg/L 6-BA中,以不同品种假茎为外植体的脱分化愈伤组织诱导率最高可达75%,但只有巴西(青杆)和海南本地米蕉可以诱导出胚性愈伤组织,诱导率分别为0.1%和0.5%.