濒危药材明党参愈伤组织培养条件研究

[目的]研究培养条件对明党参愈伤组织生长及多糖积累的影响。[方法]分别采用单因素及正交试验的方法,以明党参叶片诱导产生的愈伤组织为材料,从外植体种类、激素种类及浓度、大量母液添加量、光照条件等培养条件比较愈伤组织生长情况及多糖含量。[结果]叶片外植体、大量母液1倍添加量、0.5 mg/L 2,4-D及暗培养等培养条件较有利于明党参愈伤组织生长及多糖的合成。[结论]该研究为培养生产明党参愈伤组织及多糖提供理论和方法依据。     

环草石斛野生植株与组培苗总生物碱和多糖含量的比较

对贵州产野生环草石斛植株和组培苗中有效成分(总生物碱和多糖)的含量进行了测定和比较分析。结果表明:不同来源的环草石斛中总生物碱含量顺序为:组培苗>野生样品>市售样品;多糖的含量顺序为:野生样品≥组培苗>市售样品。环草石斛组培苗具备直接提取原药成分的可能性。该研究结果为环草石斛次生代谢产物的工业化生产开辟了新途径并提供了基础数据。     

不同产地的石斛中总生物碱和多糖含量与其价格关系的探讨

[目的]探讨不同产地的几种石斛中总生物碱和多糖含量与其价格之间的关系。[方法]用溴甲酚绿酸性染料比色法和苯酚-浓硫酸比色法分别测定了不同产地的几种石斛中总生物碱和多糖的含量,并结合其价格进行分析比较。[结果]不同产地的几种石斛中总生物碱和多糖含量有所不同,其中贵州赤水产金钗石斛、贵州兴义产环草石斛、束花石斛、马鞭石斛为较优良种;各种石斛中总生物碱和多糖的含量与其市场价格基本成正相关。[结论]石斛中总生物碱和多糖含量与其价格之间有着密切的关系,产地对石斛中总生物碱和多糖含量以及价格有一定影响。该研究为石斛的市场定价和质量评价提供了参考。     

黄豆芽愈伤组织培养条件对Vc积累的影响

优化了黄豆芽愈伤组织培养条件,建立了合适的黄豆芽细胞悬浮培养体系。以在25℃无激素条件下自然生长的豆芽子叶、叶芽、芽茎、芽根等部位为外植体诱导愈伤组织,以次生代谢产物Vc积累最多为目标,考察外植体、基础培养基、萘乙酸(NAA)浓度以及pH值的影响。结果表明:叶芽在pH值为5.0的B5培养基中,能有效诱导愈伤组织,且目标产物Vc积累最多。低浓度NAA对黄豆芽愈伤组织诱导及次生代谢产物Vc积累影响不大,随浓度增加,影响加大。     

霍山石斛杂交种与亲本有效成分积累规律的研究

[目的]研究了霍山石斛杂交种与其亲本在3年的生长周期中多糖、生物碱及可溶性蛋白质含量变化的规律,以期为霍山石斛种质资源改良和合理采收提供理论依据。[方法]多糖含量、总生物碱含量及可溶性蛋白质含量分别采用浓硫酸-苯酚比色法、溴甲酚绿酸性染料比色法、考马斯亮蓝G-250染色法测定。[结果]杂交种2年茎与3年茎多糖和总生物碱含量均与霍山石斛接近;杂交种及其亲本多糖含量均为2年茎最高,3年茎下降较大;生物碱含量在3年中均为逐年增高。[结论]杂交种（F1代）药效成分含量积累表现为近霍山石斛的特性。若依照不同的用药目的,则可于第2年或第3年采收,比民间传统的＂存三去四＂法可提前1-2年。     

小麦胚芽愈伤组织培养条件对维生素E积累的影响

本研究通过优化小麦胚芽愈伤组织培养条件,建立了合适的小麦胚芽细胞悬浮培养体系。选用B5、N6和SH作为诱导培养基,采用液体悬浮培养,通过正交试验优选法确定最适培养条件。以次生代谢产物维生素E积累最多为目标,考察培养基、温度以及pH值的影响。结果表明,小麦胚芽在B5培养基中,于pH值5.0、25℃条件下培养144 h,能有效诱导愈伤组织,且目标产物维生素E积累最多。     

药用植物草麻黄细胞的悬浮培养

[目的]对草麻黄的子叶诱导出的愈伤组织,进行悬浮培养。[方法]采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织继代和悬浮培养研究。[结果]MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA为诱导子叶形成愈伤组织的理想培养基;MS+1.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L6-BA是愈伤组织的适宜继代培养基;2.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+300 mg/L水解酪蛋白(CH)是愈伤组织悬浮培养的适宜培养基,愈伤组织干重增加量为0.80 g。[结论]初步选择出草麻黄愈伤组织细胞的悬浮培养条件,为麻黄细胞扩大培养及有效成分提取奠定基础。     

绞股蓝染色体调控黄瓜次级代谢产物的研究

[目的]探究绞股蓝染色体对黄瓜次级代谢产物的调控作用,为黄瓜的种质资源创新及育种提供理论依据。[方法]选取黄瓜子叶为材料分离制备原生质体作受体,绞股蓝愈伤组织为材料分离染色体作为供体,采用电击法将绞股蓝染色体转至黄瓜原生质体细胞中,经看护培养诱导出再生愈伤组织。采用分光光度法和高效液相色谱(HPLC)法测定再生愈伤组织次生代谢产物。[结果]再生愈伤组织总黄酮含量达到1.248,比对照组高出4.37%,同时在愈伤组织中可检测到人参皂苷Rb1。[结论]绞股蓝的某些成分对黄瓜次级代谢产物起了一定的调控作用。     

不同诱导子对油樟内生菌次生代谢产物的影响

[目的]提高油樟内生菌次生代谢产物的积累。[方法]将不同诱导子(油樟油水浊液、油樟叶水提液和油樟愈伤组织)添加到油樟内生菌(YY26、YG42)的培养体系中,研究其对内生菌生长及其次生代谢产物(1,8-桉叶油素、松油烯-4-醇、α-松油醇)的影响。[结果]从内生菌生长情况来看,油樟愈伤组织对内生菌YY26的生长有明显抑制作用,而对YG42的生长有促进作用;油樟油水浊液对2种内生菌的生长都有一定的抑制作用;油樟叶水提液对2种内生菌的生长均无显著影响。从次生代谢产物积累来看,油樟叶水提液对2种内生菌产1,8-桉叶油素、松油烯-4-醇及α-松油醇具有较强的促进作用,且对1,8-桉叶油素的促进作用最强。当油樟叶水提液浓度为1.00%时,内生菌YY26的1,8-桉叶油素产量最高,比对照组提高了11.80倍;当油樟叶水提液浓度为2.50%时,内生菌YG42中的1,8-桉叶油素产量达到最大值,与对照组相比增加了7.73倍。油樟愈伤组织对总挥发性物质的促进作用最强,当其浓度为10.00%时,对内生菌YY26总挥发性物质的促进作用最强,比对照组提高了13.26倍。[结论]该研究在一定程度上提高了油樟内生菌(YY26、YG42)次生代谢产物的积累量,为其今后的工业化生产奠定了基础。     

培养条件对甘草不同外植体愈伤组织中黄酮形成的影响

[目的]筛选生产次生代谢产物黄酮的最佳外植体和培养基配方及培养条件。[方法]采用L1（4^5）正交试验设计和对比试验设计方法,研究ZT、ABA、Kr、6-BA和NAA5种外源激素在不同培养条件下对由甘草根和芽诱导的愈伤组织中黄酮形成的影响。[结果]测验表明,弱光照条件（100～300Ix）有利于黄酮产量的形成;根诱导的愈伤组织是黄酮产量形成的适宜外植体。F检验表明,5种外源激素对黄酮产量的形成存在极显著差异,对根诱导的愈伤组织中总黄酮含量的影响顺序是：KT〉6-BA〉ZT〉ABA〉NAA;对芽诱导的愈伤组织中总黄酮含量影响顺序是：6-BA〉KT〉NAA〉ABA〉ZT。经过优选获得最佳激素组合为：ABA 1．0mg／L＋KT 2．0mg／L＋ZT 1．0mg／L＋6-BA 1．0mg／L＋NAA 2．0mg／L.[结论]该研究为工业化生产次生代谢产物黄酮提供了理论依据。     

环草石斛和铁皮石斛试管苗叶片气孔特征比较(英文)

[目的]比较环草石斛和铁皮石斛试管苗叶片的气孔特征和光合特性。[方法]对环草石斛和铁皮石斛不同生长发育时期试管苗叶片的气孔进行扫描电镜观察,并用调制式荧光仪测定荧光诱导光响应曲线。[结果]在各个生长发育时期,环草石斛试管苗叶片的气孔密度均明显高于铁皮石斛,而气孔开放率则较低。随着生长时间的延长,环草石斛和铁皮石斛试管苗叶片气孔的大小变化不大,而气孔的数量则逐渐增加,气孔密度分别增加了83%和17.6%,两者均以播种生长240d时叶片的气孔开放率最高。在设定的3种光照强度下,环草石斛试管苗叶片气孔开放程度随光强的增加而增大,光强为54μmol/(m2.s)时气孔的开放度最大。在相同的培养条件下,环草石斛试管苗的最大电子传递速率14μmol/(m2.s)和光饱和点318μmol/(m2.s)均低于铁皮石斛20μmol/(m2.s),483μmol/(m2.s),其潜在的光合作用能力较差。[结论]不同种类石斛试管苗的气孔特性不同,因而光合速率也不同。通常组培室内的光强为27μmol/(m2.s),这样的条件下,两种石斛试管苗叶片气孔的开度都未达到最佳状态。若能遵循试管苗对光照强度的需求规律,选择合适的培养条件,增大气孔开度,提高光合速率,将更有利于试管苗的生长发育。     

环草石斛和铁皮石斛试管苗叶片气孔特征比较

[目的]比较环草石斛和铁皮石斛试管苗叶片的气孔特征和光合特性,揭示试管苗生长发育的生理生态机制。[方法]对环草石斛和铁皮石斛不同生长发育时期试管苗叶片的气孔进行扫描电镜观察,并用调制式荧光仪测定荧光诱导光响应曲线。[结果]在各个生长发育时期,环草石斛试管苗叶片的气孔密度均明显高于铁皮石斛,而气孔开放率则较低。随着生长时间的延长,环草石斛和铁皮石斛试管苗叶片气孔的大小变化不大,而气孔的数量则逐渐增加,气孔密度分别增加了83.0%和17.6%,两者均以播种生长240 d时叶片的气孔开放率最高。在设定的3种光照强度下,环草石斛试管苗叶片气孔开放程度随光强的增加而增大,光强为54μmol/（m2.s）时气孔的开放度最大。在相同培养条件下,环草石斛试管苗的最大电子传递速率14μmol/（m2.s）和光饱和点318μmol/（m2.s）均低于铁皮石斛20、483μmol/（m2.s）,其潜在的光合作用能力较差。[结论]不同种类石斛试管苗的气孔特性不同,因而光合速率也不同。遵循试管苗对光照强度的需求规律,选择合适的培养条件,增大气孔开度,提高光合速率,将更有利于试管苗的生长发育。     

培养基组成对环草石斛试管苗生长的影响

[目的]降低生产环草石斛试管苗的成本,为大规模生产种苗提供理论技术依据。[方法]比较白砂糖和分析纯蔗糖、自来水和蒸馏水以及有机物、微量元素、NAA等各成分对环草石斛试管苗生长的影响。[结果]自来水和白砂糖代替蒸馏水和分析纯蔗糖对环草石斛试管苗的生长无显著影响,而更有利于苗的生长;去除培养基中的有机物和微量元素对试管苗生长无明显影响;铁盐和NAA是试管苗生长不可缺少的成分。[结论]在环草石斛的试管苗生产中,自来水可以代替蒸馏水,食用白砂糖可以代替分析纯蔗糖,同时也可以去除培养基中的有机物和微量元素等。     

微波辅助提取啤酒酵母多糖及其抗氧化作用研究

[目的]研究微波辅助提取啤酒酵母多糖的最佳提取工艺及其抗氧化作用。[方法]以多糖提取率作为考察指标,采用单因素分析和正交试验对啤酒酵母多糖的提取工艺条件进行优化,并通过比色法研究其体外清除自由基的能力。[结果]啤酒酵母多糖最佳提取工艺条件为：微波时间10 min,微波功率540 W,浸润时间1 h,多糖得率为13.27%;酵母多糖具有清除自由基和超氧阴离子的能力,且其清除能力与多糖浓度呈明显的剂量关系,清除的50%的羟自由基和超氧阴离子自由基的多糖浓度分别为0.32和0.08 mg/ml。[结论]与常规水提取法相比,微波辅助提取法具有提取时间短、效率高、节约能源的优点;酵母多糖具有明显的抗氧化活性。     

金顶侧耳多糖体内免疫活性的初步研究

[目的]探究金顶侧耳多糖提取方法及对动物机体免疫功能的影响。[方法]通过液体培养金顶侧耳,以乙醇沉淀法从发酵液中提取金顶侧耳多糖,并采用蒽酮比色法和3,5-二硝基水杨酸法相结合测定多糖的得率。通过称量胸腺、脾脏的重量,计算胸腺指数和脾脏指数来探讨不同剂量的金顶侧耳多糖对小鼠免疫功能的影响。[结果]该法提取的金顶侧耳多糖得率为14.35%,随金顶侧耳多糖的剂量的增加,小鼠脾脏重量增加,注射多糖的小鼠免疫力明显高于环磷酰胺（CY）对照组,低于生理盐水对照组。[结论]金顶侧耳多糖能对CY有减毒作用,能够增强小鼠免疫功能。     

3, 5-二硝基水杨酸比色法测定荠菜多糖含量的研究

[目的]为荠菜多糖的开发提供一定的理论依据。[方法]采用3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法测定了荠菜还原糖的含量并通过单因素试验研究确定了其最佳测定条件。[结果]在0．5～1．5ml的范围内,吸光度随着DNS用量的增加而增大;当DNS的用量大于1．5m1时,吸光度基本不变。在4～6min内,吸光度随着加热时间的延长而显著增大;6min后吸光度基本稳定。在70～90℃内,吸光度随着反应温度的升高而显著增大;反应温度超过90℃后,吸光度随着反应温度的升高而趋于稳定。放置20min后吸光度达到最大。3,5-二硝基水杨酸比色法测定的荠菜还原糖含量为1．002％,总糖含量为7．3393％,多糖含量为6．3373％。[结论]该试验确定的DNS比色法的最佳测定波长为510nm,最佳DNS用量为1．5ml,最佳反应温度为90℃,最佳反应时间为6min,最佳放置时间为20min。     

苏丹草愈伤组织酚类物质提取工艺的研究

[目的]探索苏丹草愈伤组织酚类物质的最佳提取工艺。[方法]以3种不同类型的苏丹草愈伤组织为材料,采用Folin-Ciocalteu比色法研究了超声波破碎时间、乙醇浓度以及抽提次数对酚类物质提取效率的影响。[结果]提取苏丹草愈伤组织酚类物质的最佳工艺条件为:抽提液乙醇浓度50%,超声波破碎时间32 min,抽提次数3次。3种不同类型的苏丹草愈伤组织中,Ⅱ型愈伤组织的酚类物质含量最高。[结论]该研究为苏丹草的综合开发和深度利用提供技术支持。     

3类茶中水溶性多糖及蛋白质的含量分析

[目的]比较分析绿茶中的西湖龙井和碧螺春、红茶中的祈门红茶和立顿红茶以及普洱茶的云南特级地方标准样和临沧普洱茶的水溶性多糖和蛋白质含量。[方法]茶叶样品经沸水浸提和透析等前处理,采用蒽酮-硫酸法和硫酸-咔唑法分别测定茶叶多糖的中性糖和酸性糖含量,用Bradford法分析蛋白质含量。[结果]绿茶的总多糖平均值接近39.58 mg/g,红茶为30.73 mg/g,普洱茶为60.12mg/g,约是红茶的2倍。普洱茶的水溶性蛋白质含量约为18.57 mg/g,高于绿茶和红茶。[结论]3类茶中,均以普洱茶的水溶性多糖及蛋白质含量最高。