布鲁氏菌病流行病学研究综述

布鲁氏菌病是一种重要的人畜共患病.有多种因素可以影响布鲁氏菌病在不同家畜中的流行.布鲁氏菌病的流行同气候条件、地理、家畜种类、性别及年龄等有关.本文对布鲁氏菌病的流行病学进行了综述,并介绍了多种可用于流行病学调查的血清学和病原学检测及诊断方法.     

环县畜间布鲁氏菌病防控现状及对策

布鲁氏菌病是一种全世界范围内广泛传播的人兽共患传染病,严重制约着畜牧业的健康发展,在家畜中以牛、羊、猪最为易感,该病大面积流行将会对人们的生产、生活造成极大的威胁。本文对环县羊布鲁氏菌病流行、防控现状进行了分析,并提出了相应的对策,以期为当地布鲁氏菌病的防控提供参考。     

山西省奶牛布鲁氏菌病流行现状及防控

布鲁氏菌病简称布病,是由布鲁氏菌引起的以流产和发热为特征的一种急性或慢性人畜共患传染病,严重影响畜牧业高质量发展和公共卫生安全,危害人类生命健康。山西省作为布病一类地区,奶牛群间布病流行率长期偏高,是造成人布病感染的一项重要原因。该文主要从山西省奶牛布病的流行现状、防控策略及防控建议等方面进行阐述,以期为山西省奶牛布病的有效防控提供参考。     

规模化养殖场布鲁氏菌病的诊治

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种是严重危害人类健康和畜牧业生产发展的人畜共患病。近年来,布鲁氏菌病的发病几率呈不断上升的流行趋势,而家畜养殖正在朝向规模化养殖方向快速发展,对规模化养殖场布鲁氏菌病的诊断、检测、免疫、综合性防控措施等方面进行了综述,以期为制定中国布鲁氏菌病综合防控策略提供参考。     

奶牛布鲁氏菌病的预防和治疗

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患病。目前,布病大范围流行,并逐年增长,严重影响了我国奶牛业的发展。同时,人类健康也受到严重威胁。因此,必须对布病进行全面了解,才能避免布病的发生。本文从布鲁氏菌病的病原、流行特点、临床症状、诊治、预防措施进行介绍,以期为我国奶牛养殖提供参考。     

羊布鲁氏菌病的综合防治

羊布鲁氏菌病是由布鲁氏杆菌感染引起的一种严重的人畜共患传染性疾病,该病对家畜和人的健康危害较大。布鲁氏菌病可感染羊、牛等多种动物。随着我国养羊业的快速发展,羊饲养量逐年上升。但由于养殖户缺乏疫病检疫知识,造成疫病检疫滞后,导致布鲁氏菌病四处传播。一旦感染该病,羊主要表现为体温升高、流产等,该病在世界范围内造成严重的危害。因此,广大养殖人员需增强对该病流行特点、临床症状及诊断治疗措施的了解,不断提高防疫力度,降低羊布鲁氏菌病对我国养殖业造成的危害。本文归纳总结了羊布鲁氏菌病的诊断及综合防控措施。     

布鲁氏菌病的流行特点及防控

布鲁氏菌病是一种人畜共患的全身传染病。其发病率与地区、季节、年龄、职业、性别均有关系,在畜牧生产中,应十分注意布病的防控。本文论述了布鲁氏菌病的流行特点,及其防控,为畜牧业中布鲁氏菌病的防控做参考。     

新疆牛羊布鲁氏菌流行株种及生物型鉴定

【目的】掌握新疆畜间布鲁氏菌病流行株的流行病学特征,为新疆制定切实可行的布鲁氏菌病综合性防控措施提供科学依据和技术支撑。【方法】应用传统分离病原方法从牛羊病料中获得疑似布鲁氏菌11株,应用分子生物学方法对分离菌株进行布鲁氏菌属与种型鉴定,应用常规生化试验对AMOS-PCR鉴定的羊种Brucella进行生物亚型鉴定。【结果】9株分离株均为布鲁氏菌,而且经AMOS-PCR分型方法鉴定均为羊种菌。进一步采用传统细菌分类鉴定,9株布鲁氏菌均为羊种生物3型。【结论】新疆近两年人感染布鲁氏菌的流行菌株为羊种生物3型,应用AMOS-PCR方法可以安全、快速对布鲁氏菌流行株进行种型鉴定而确定传染源,为新疆制定布鲁氏菌病的综合防制策略莫定基础。     

猪布鲁氏菌病的发生与防治

猪布鲁氏菌病是一种人畜共患的传染病,可给养殖户带来严重的经济损失。本文阐述了猪布鲁氏菌病的流行特点、危害、防控措施,以供养殖户参考。     

山羊布鲁氏菌病的流行病学、临床症状及防治措施

在我国畜牧业持续发展过程中,布鲁氏菌病作为一种常见疾病,也是一种由布鲁氏杆菌引发的人畜共患病,对山羊生殖系统及人体健康带来严重威胁,这也是我国将山羊布鲁氏菌病作为畜牧业疾病防控过程重要目标的主要原因。本文对山羊布鲁氏菌病流行病学、临床症状、诊断手段进行分析,分别针对健康羊群、受疾病感染威胁羊群、染病羊群的防治手段进行研究。     

抗牛布鲁氏菌独特型抗体在牛体中的免疫应答

首次将新疆分离的布鲁氏菌牛Ⅲ型强毒菌株研制成单克隆抗体.选用ELISA效价高的单克隆抗体A₇免疫家兔,经提纯制成抗独特型抗体疫苗,对杂种牛和土种黄牛进行免疫试验.通过平板凝集、试验凝集和Coomb''s试验证明,凝集抗体消失很快,不完全抗体则可维持1年以上,这表明抗细菌性抗体在体内存在时间较长,为独立型疫苗的应用提供了很好的依据.     

牛布鲁氏菌毒力基因Virb8间接ELISA检测方法的建立与应用

【目的】布鲁氏菌virb8蛋白是布鲁氏菌的重要毒力因子,本研究拟构建含布鲁氏菌Virb8基因的原核表达载体,利用纯化蛋白作为包被抗原,建立检测牛布鲁氏菌血清抗体的间接ELISA方法（iELISA）。【方法】根据GenBank中的牛型布鲁氏杆菌Virb8序列,设计一对引物,以布鲁氏菌疫苗株S2全基因组DNA为模板扩增Virb8的基因,将目的基因克隆入PEASY-T3,经测序正确后,与载体pET-32a(+)连接,构建重组表达质粒pET-32a-Virb8,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达融合蛋白pET-32a-Virb8,经SDS-PAGE及Western-blot分析鉴定后,采用Ni-NTA Spin Kit纯化目的蛋白,利用所建立的iELISA方法对235个临床奶牛血清样本进行检测,并与虎红平板凝集实验进行比较。【结果】成功构建了含Virb8的表达载体,经多次对表达条件的优化,大量表达了目的蛋白,建立的iELISA方法具有稳定、灵敏的特点,与虎红平板凝集试验的符合率可达97.02%。【结论】所建立的iELISA方法是一种有效的牛布鲁氏菌病血清学诊断的方法,为进一步研究其免疫原性和抗感染保护作用奠定了基础。     

布鲁氏菌病病原快速检测方法的建立

根据编码牛种布鲁氏菌外膜蛋白（OMP-2）基因的核苷酸序列设计1对PCR引物，并对PCR扩增条件进行优化，建立了快速检测布鲁氏菌病病原的PCR方法。特异性检测表明，该引物对牛种、羊种、猪种布鲁氏菌制备的模板DNA均能扩增出193bp目的基因片段，但不能扩增大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠结肠炎耶氏菌（0：9型）的目的基因片段；敏感性检测显示，乳样的检测灵敏度达50cfu／mL、纯化的布鲁氏菌DNA检测灵敏度达1．5pg，可重复性和稳定性十分理想。可见，该布鲁氏菌病病原PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性，能为快速诊断布鲁氏菌病提供技术支撑。     

猪型布鲁氏菌Omp31基因的抗原表位预测与分析

 布鲁氏菌的外膜蛋白在维持细胞结构方面发挥着重要作用,其中,有些外膜蛋白与细菌本身的毒性相关,成为了重要的抗原决定簇相关分子。Omp31分子就是猪型布鲁氏菌的一个重要的抗原表位分子,在研制亚单位疫苗方面有重要作用。本论文以猪型布鲁氏菌Omp31基因作为研究对象,利用DNAStar生物学软件对Omp31分子的立体结构、分子的表面可能性、亲水性、蛋白骨架区的柔韧性、分子的抗原指数进行了详细分析。结果显示：猪型布鲁氏菌Omp31分子一级结构的氨基酸序列中存在4段可能的抗原表位区段,其中,51~80氨基酸残基组成的区段和193~228氨基酸残基组成的区段的抗原指数较高,成为抗原决定簇的可能性很大。     

羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测

[目的]构建含羊布鲁氏菌16M Omp25基因的酵母双杂交诱饵质粒,检测诱饵质粒表达产物对cdc25H酵母细胞有无毒性作用以及对报告基因有无激活作用。[方法]聚合酶链反应(PCR)扩增布鲁氏菌Omp25基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos上,构建诱饵重组质粒pSos-Omp25,经测序正确后,将其将转化到酵母菌cdc25H感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用。[结果]序列测定证明重组诱饵质粒pSos-Omp25构建成功;重组质粒表达产物对cdc25H酵母细胞无毒性,对报告基因无激活作用。[结论]利用SOS恢复系统(SRS)成功构建了羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白酵母双杂交诱饵质粒,为筛选与羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白相互作用的蛋白创造了条件。     

布鲁氏菌外膜蛋白BP26细胞毒性作用的研究

【目的】布鲁氏菌外膜蛋白BP26是布鲁氏菌的重要毒力因子,本研究采用bp26基因缺失株和BP26蛋白分别与胚胎滋养层细胞(HPT-8)作用,探讨布鲁氏菌bp26基因的生物学功能。【方法】采用Ni柱亲和层析法纯化BP26蛋白,overlap技术构建布鲁氏菌bp26基因缺失株,用BP26蛋白和bp26基因缺失株分别侵染HPT-8细胞,观察细胞形态变化,ELISA检测上清中的细胞因子。【结果】 从布鲁氏菌疫苗株M5-90克隆出bp26基因并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中成功表达,获得纯化的BP26蛋白,经SDS-PAGE验证正确,Western-Blot鉴定具有免疫原性。将目的片段bp26基因的上下臂插入到自杀载体pGEM-7zf中,电转至布鲁氏菌疫苗株M5-90感受态细胞中,成功筛选出了具有遗传稳定性的bp26基因缺失株。用BP26蛋白与bp26基因缺失株分别侵染HPT-8层细胞,BP26蛋白使细胞变形且贴壁不牢,缺失株导致细胞大量脱落溶解,ELISA检测蛋白侵染HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α和LDH均高于PBS对照组,差异极显著（P＜0.01）, 而细胞因子IL-10的分泌下降。缺失株侵染HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α均高于M5-90对照组,LDH和IL-10均低于M5-90对照组,差异显著（P＜0.05）。【结论】成功获得了布鲁氏菌BP26蛋白和M5-90Δbp26缺失株,BP26蛋白可以引起HPT-8细胞的炎性反应,有细胞毒性作用,bp26基因缺失株对HPT-8细胞有损伤作用,bp26基因在布鲁氏菌侵染宿主细胞过程中起重要作用。     

石林县山羊布氏杆菌病血清学检测

[目的]了解山羊布氏杆菌病在石林县的流行状况。[方法]通过虎红平板凝集试验和试管凝集试验于2006～2011年对石林县山羊血清进行布氏杆菌血清学检测。[结果]2006～2007年石林县山羊布氏杆菌阳性检出率较高,分别为3.41%和3.51%。2009～2011年石林县山羊布氏杆菌阳性检出率分别为0.50%、0.28%和0.38%。[结论]石林县属于山羊布病控制区。     

Dot-PPA-ELISA联合检测猪PRV.Brucella和Chlamydia抗体方法的建立和应用研究

首次将Dot-PPA -ELISA用于联合检测猪衣原体、伪狂犬病毒和布氏杆菌抗体 ,并进行了较大规模的田间猪血清检测。实验对制作诊断膜片的工艺流程和关键材料做了细致研究 ,并进行同步监测、分析。确定了本方法的最佳反应条件和阳性标准。联合诊断膜片 (简称膜片 )具有良好特异性、灵敏性和稳定性。诊断膜片在 4℃保存 8个月、室温 (15～ 2 5℃ )保存 2个月、37℃保存 1个月灵敏性 ,特异性不变。 1∶6 4、1∶12 8、1∶6 4为联合检测猪伪狂犬病、衣原体病和布氏杆菌病抗体的阳性标准。结果表明 ,Dot -PPA -ELISA联合检测法操作方便、快速 ,结果客观 ,易于判读 ,诊断膜片便于寄送、保存 ,性能稳定、可靠 ,并能同时检测多种疫病等优点 ,适宜应用于猪衣原体病、伪狂犬病和布氏杆菌病抗体的联合检测     

奶牛布鲁氏菌病病原PCR检测方法的建立

为了弥补血清学和细菌学方法检测和诊断奶牛布鲁氏菌病存在的不足,根据编码牛种布鲁氏菌31KDa外膜蛋白基因的核苷酸序列设计了1对PCR引物,通过对影响PCR扩增条件的优化,建立了快速检测奶牛布鲁氏菌病病原的PCR方法。特异性检测表明,在同一反应条件下,该引物对引起奶牛布鲁氏菌病的牛种、羊种、猪种布鲁氏菌制备的模板DNA均能扩增出384bp目的基因片段,而对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、马流产沙门氏杆菌、溶血性链球菌、嗜肺巴氏杆菌制备的模板分别进行扩增均呈阴性。敏感性检测显示,最低可检出1.5pg的模板DNA。结果表明:本试验所建立的奶牛布鲁氏菌病病原PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性。     

应用Dot PPA ELISA检测猪布氏杆菌病抗体的研究

本试验以布氏杆菌ＳＡＴ 为对照试验,建立了Ｄｏｔ ＰＰＡ ＥＬＩＳＡ 检测猪布氏杆菌病抗体的方法,该法检测的猪ＩｇＧ 含量可达６９９２×１０－ ９ｇ,灵敏性高,不同猪抗ＰＲＶ、ＰＰＶ、ＨＣＶ、ＪＥＶ、ＣＨＬ 等阳性血清发生交叉反应,特异性强;此外该法还具有操作简便、快捷不需特殊试验条件、结果客观、肉眼易于判断、反应膜片可长期保存等优点。适宜在广大基层单位应用,对布病的快速诊检有着十分重要的意义。