猪圆环病毒2型DNA疫苗对小鼠的免疫效果

【目的】构建一种猪圆环病毒2型DNA疫苗,并对其免疫效果进行了研究。【方法】将表达猪圆环病毒2型ORF2基因的1套真核表达元件系统克隆插入到质粒载体pMD-18T,构建成pMD-18T-ORF2,转入E.coliDH5α,提取质粒,经肌肉注射途径对Balb/c小鼠分别在第1,14和28天进行免疫,用生理盐水代替pMD-18T-ORF2进行相同操作,作为对照组,通过监测免疫小鼠体液免疫和细胞免疫的状况,评估分析pMD-18T-ORF2免疫的效果。【结果】初次免疫后小鼠血清中特异性抗体水平持续升高,在第14天达到峰值,加强免疫抗体水平无显著变化;试验组脾淋巴细胞体外增值能力较对照组低(P<0.01);免疫pMD-18T-ORF2的小鼠脾脏NK细胞杀伤活性极显著高于对照组(P<0.01);试验组小鼠脾脏中Th细胞含量与对照组小鼠无显著差异(P>0.05),Tc细胞含量显著高于对照组(P<0.05),B细胞含量较对照组有所减小,但差异不显著(P>0.05)。【结论】构建的pMD-18T-ORF2对小鼠能产生相应的免疫反应,且细胞免疫的效果较体液免疫更显著,非特异性免疫亦有提高。     

猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗免疫效果的影响

为探索在猪圆环病毒2型(PCV-2)阳性猪场免疫猪圆环病毒疫苗对猪场实际临床生产中猪瘟疫苗免疫效果的影响,遂将某规模化猪场的一栋存在PCV-2感染的150头产房仔猪随机分为试验组和对照组,每组75头,试验组在14日龄免疫某进口PCV-2杆状病毒载体灭活疫苗,对照组不免疫,并分别在PCV-2疫苗免疫前和猪瘟疫苗二免后30天每组随机采血18头仔猪检测猪瘟抗体。结果显示:PCV-2疫苗免疫前两组仔猪的猪瘟抗体水平无明显差异,猪瘟疫苗二免后30天,试验组的猪瘟抗体平均值和猪瘟抗体离散度均显著好于对照组。表明,PCV-2的感染会对猪的免疫系统造成损害从而抑制猪瘟疫苗的免疫应答,在PCV-2阳性猪场免疫猪圆环病毒疫苗能够显著增强猪瘟疫苗的免疫效果。     

猪圆环病毒2型核酸疫苗的构建及其免疫效果

【目的】构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因疫苗,并对其免疫效果和安全性进行研究。【方法】将PCV2ORF2基因从pMD-ORF2*质粒(包含PCV2 SCH A株ORF2基因)酶切回收,插入到真核表达载体pcD-NA-3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA-ORF2,对该质粒进行酶切和PCR鉴定。将pcDNA-ORF2转染IBRS-2细胞,进行Western blotting检测。将构建好的pcDNA-ORF2制成核酸疫苗,按100μg/只腿部肌肉注射免疫Balb/c小白鼠,同时设pcDNA-3.1(+),PCV2全毒和PBS为对照,共免疫2次,间隔2周。分别于首免后第14天和56天采血,用ELISA法检测抗体;于首免后第56天,采用淋巴细胞增殖试验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)对小鼠的细胞免疫进行检测。取首免后56 d小鼠的心肝、脾、肺、肾和脑等实质器官,采用PCR方法检测pcDNA-ORF2核酸疫苗的安全性。【结果】Western blotting结果显示,pcDNA-ORF2构建成功,并在哺乳动物细胞中获得表达。pcDNA-ORF2核酸疫苗能诱导小鼠产生较强的细胞免疫和体液免疫应答。PCV2ORF2基因未整合到小鼠染色体上。【结论】pcDNA-ORF2可诱导小鼠产生免疫反应,其对小鼠是安全的。     

猪圆环病毒2 型疫苗研究进展

疫苗免疫接种是防控猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)的主要方式,PCV-2疫苗的研究与开发已成为国内外兽医工作者的关注热点.在国际市场上销售的商品化PCV-2疫苗主要包括亚单位疫苗、嵌合病毒疫苗和灭活疫苗,其中PCV-2灭活疫苗已在我国规模化猪场中广泛使用.综述了近年来国内外各类PCV-2疫苗研究进展及存在的问题,以期为猪圆环病毒病的防制与PCV-2新型疫苗的研发提供参考.     

转移因子对猪圆环病毒亚单位疫苗免疫效果的影响

为探寻转移因子(TF)对猪圆环病毒亚单位疫苗免疫效果的影响,将猪脾脏研磨,并反复冻融研磨液,离心获取冻融上清,用超滤法从上清液中提取转移因子。TF经理化检验合格后,以添加剂的形式与猪圆环病毒亚单位疫苗(Cap疫苗)混合,制成TF–Cap疫苗,并和未添加TF的Cap疫苗同时进行小鼠免疫试验。TF–Cap疫苗和Cap疫苗免疫的小鼠都设一免组和二免组,首次免疫后每隔10 d对实验鼠进行尾静脉采血,并用间接ELISA方法测定血清中猪圆环病毒2型(PCV2)的抗体水平。结果表明：用超滤法制得的TF,多肽含量为1.83 mg/mL;抗体检测数据显示,4个免疫组与对照组(注射生理盐水)的抗体检测值有极显著差异(P<0.01),而4个免疫组之间无显著差异(P>0.05),TF–Cap疫苗一免组的抗体水平与Cap疫苗二免组的抗体水平相当,表明在圆环病毒基因工程疫苗中添加TF可一定程度的提高免疫动物的抗体水平。     

人参皂苷Rb1药理作用及其联合兽用疫苗的应用

近年来,随着对人参皂苷Rb1的深入研究,发现其不仅具有促进机体代谢、抗衰老等功效,而且能较为显著地提高机体体液及细胞免疫应答水平,这为当前人参皂苷Rb1作为中药佐剂应用于兽用疫苗提高疫苗品质、增强疫苗免疫效果、减少疫苗副作用提供了新的研究方向。通过对人参皂苷Rb1药理作用及其联合兽用疫苗的应用研究进行总结,以期为人参皂苷Rb1后续疫苗的研究与应用提供一定理论支持。     

猪圆环病毒疫苗研制成功

中国农科院哈尔滨兽医研究所刘长明研究员主持的《猪圆环病毒2型（PCV2）灭活疫苗（LG株）》科研项目经过10年科技攻关,终获成功,疫苗免疫攻毒保护率达96％以上。该疫苗具有如下特点：一是抗原含量高;二是免疫原性强;三是安全性好;四是免疫效果好;五是抗母源抗体干扰;六是应用效果显著。     

猪圆环病毒2型的致病机理和疫苗研究进展

为了深入了解猪圆环病毒2型的致病机理和疫苗研究进展,介绍了猪圆环病毒2型感染引起猪免疫系统的损伤过程,其他病原对该过程的促进和诱导作用,刺激免疫系统影响病毒复制和临床病例发生,综述了有关疫苗研究情况。国内外在猪圆环病毒2型的致病机理和疫苗研究进展上有很多相关研究报道,可供借鉴。研究为探讨运用疫苗途径来预防控制该病的发生提供了依据。     

圆环康防治猪圆环病毒2型感染的效果观察

根据PCV-2病毒的生物学特性和致病特点,研制了用于防治PCV-2感染的中草药方剂——圆环康。结果表明:圆环康处理对PCV-2病毒具有明显的抑制作用。临床用于治疗早中期病猪,或混合、继发感染症状不明显的病猪及预防用药,猪场的平均治愈率达90%以上,且治愈后不反弹。而西药粉剂组治愈率平均为78.1%,不治疗组的自愈率为24.2%。对于存在混合或继发感染病情严重猪群,在采用圆环康的同时,配合干扰素、白介素、免疫球蛋白或转移因子等进行治疗,疗效更好。     

猪瘟活疫苗、猪圆环病毒2型基因工程疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗三种疫苗联合免疫效果的评估

试验旨在评估猪瘟活疫苗、猪圆环病毒2型基因工程疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗三种疫苗联合免疫的效果.试验选取7日龄健康仔猪500头,分为A组(联合免疫组)和B组(单苗免疫组).A组在21日龄,每头仔猪免疫1 mL猪圆环病毒2型基因工程疫苗、2mL猪肺炎支原体灭活疫苗和1头份猪瘟活疫苗,在55日龄每头仔猪免疫1头份猪瘟活疫苗...     

微生物转化人参皂苷Rb1为稀有皂苷F2

从橙汁中分离到的菌株CZ2能使人参皂苷Rb1转化为稀有皂苷F2和gypenoside-XVII.最佳转化培养基含酵母提取粉1 g/L、氯化铵0.5 g/L、磷酸氢二钾1 g/L、磷酸二氢钾0.5 g/L、硫酸镁0.25 g/L,pH值为4.0.菌株CZ对人参皂苷Rb1的生物转化机理为Rb1→Gpy-XVII→F2.     

猪圆环病毒2型标签重组病毒构建和免疫试验

猪圆环病毒2型（PCV2）能引起断奶仔猪衰竭综合症,为了获得利于纯化的病毒和新型标记疫苗,采用病毒重组技术,选择利于纯化的6个氨基酸His标签作为标记表位,插入PCV2 Cap蛋白 C端,拯救获得重组标记病毒rPCV2-His。间接免疫荧光和Western blot鉴定结果证明重组病毒所含的标签能稳定表达。通过镍柱纯化重组病毒,该病毒获得了纯化。纯化的重组病毒灭活后免疫小鼠,PCV2特异抗体显著提升,且能产生标记免疫抗体,小鼠攻毒显著降低体内PCV2含量。该重组病毒可作为PCV2新型疫苗研究重要材料。     

人参皂苷Rb1的药理作用研究

为开发利用单体皂苷,对人参皂苷Rb1的药理和毒理作用进行了阐述,揭示了人参皂苷Rb1有促智与抗老年痴呆作用,提示了人参皂苷Rb1在机体内代谢产物具有抗癌活性,Rb1又是促性强精的有效成分。     

猪圆环病毒疫苗对仔猪生产性能的效果评估

为评估圆环疫苗免疫对猪生长性能的影响,选取2 598头14日龄仔猪分为3组,分别免疫1头份猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)疫苗、0.5头份PCV2疫苗和生理盐水,通过对比仔猪生长性能指标对疫苗免疫效果进行评价。结果表明,疫苗剂量对断奶仔猪平均日增重和死亡率的影响差异不显著(P>0.05),70日龄时1头份疫苗免疫组平均日增重显著高于生理盐水处理组。     

猪圆环病毒2型感染对高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫应答的影响

采用阻断ELISA法对单独接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征组(hpPRRS,B组)及PCV2人工感染21 d后接种hpPRRS疫苗组(PB组)不同时期血清中的PRRSV抗体进行检测,同时对不同时期前腔静脉血进行CD4/CD8流式细胞术及血常规分析.结果表明,在接种后32 d B组白细胞含量极显著高于PB组(P＜0.01),接种后62 d B组淋巴细胞含量极显著高于PB组(P＜0.01),接种后75 d PB组幼稚型Th细胞含量显著高于B组(P＜0.05),接种后32、62及75 d B组Tc细胞含量为PB组的2.40、1.98和1.86倍,接种后32、48及62 d B组记忆/激活Th细胞含量分别为PB组的1.54、1.46及1.32倍.     

人参总皂苷和人参皂苷Rb1提取工艺的研究进展

阐述了人参总皂苷和人参皂苷Rb1的提取方法,包括醇提法、硅胶柱层析法、薄层层析法、高效液相色谱法、乙酰化衍生物分离法等方法,并对各自工艺的原理、使用进行了分析。     

猪圆环病毒2型分子生物学研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病因。目前流行的PCV2被分为PCV2a和PCV2b两个亚群。北美和其他国家PCVAD的暴发通常与主要基因型从PCV2a转变为PCV2b有关。本文对圆环病毒2型的分子结构及其表达产物的生物学活性的研究进展进行了综述,最后对分子差异和致病性进行了讨论。     

人参皂苷Rb2的药理学研究概况

综述了人参皂苷Rb2对脂代谢、糖代谢、视网膜色素上皮细胞、DNA、RNA以及蛋白质的合成、肿瘤细胞、中枢神经系统、心血管系统等方面的药理作用以及在动物体内的分布、代谢和药代动力学研究概况。     

猪2型圆环病毒病的防控

猪圆环病毒病是断奶仔猪及架子猪一种新的传染病。病猪表现为进行性消瘦,皮肤苍白或黄疸,呼吸急促、震颤、皮炎、母猪繁殖障碍等。猪2型圆环病毒病具有免疫抑制作用,致病机理以破坏猪免疫系统为主,造成免疫功能下降或丧失,进而继发感染其他疾病,极难控制。同时猪2型圆环病毒感染会导致猪B淋巴细胞耗损,引起免疫抑制,使多种疫苗丧失免疫效力,降低猪群免疫力和腱康水平     

猪圆环病毒2型的血清学检测

以大肠杆菌表达的猪圆环病毒2型(PCV2)重组衣壳蛋白(His-CAP2)为抗原,通过方阵ELISA滴定,确定了His-CAP2的最适包被浓度为6.4μg·mL-1,待检血清稀释度为1:40,建立PCV2的血清流行病学的间接ELISA监测方法.通过对已知PCV2血清及其他病毒血清的试验,表明该ELISA方法具有良好的特异性.利用该方法对来自苏中地区不同猪场的175份血清样本进行检测,PCV2抗体阳性检出率为70.29%,与临床上PCV2感染导致猪群发病的实际情况相符合,证实了此方法临床应用的可行性.