运用ISSR分子标记鉴定杉木 × 侧柏远交杂种

 为了对杉木Cunninghamia lanceolata与侧柏Platycladus orientalis远交杂种的真实性进行鉴定,进行预备试验,从100条UBC primer Set#9（800 ～ 900）引物中,筛选出9条多态性引物。对杉木 × 侧柏远交组合A4（1419） × B1所得杂交后代中选择的4株超级苗等材料,提取DNA,进行聚合酶链式反应（PCR）扩增,并按母本、远交子代和父本顺序,对PCR产物进行电泳实验。结果发现,4株超级苗在7条引物中,共找到16条父系特征谱带,在另外2条引物中检测到父母的共同谱带。由此可以肯定,杂交所得超级苗是杉木与侧柏远缘杂交产生的杂种。杉木与侧柏远缘杂交是可配的,杉木远缘杂交育种是一条多性状改良途径。图3表1参17     

运用ISSR分子标记鉴定杉木×侧柏远交杂种

为了对杉木血肌inghamia lanceolata与侧柏Platycladus orientalis远交杂种的真实性进行鉴定,进行预备试验,从100条UBCDrimer Set#9（800-900）引物中,筛选出9条多态性引物。对杉木×侧柏远交组合A4（1419）×B1所得杂交后代中选择的4株超级苗等材料．提取DNA．进行聚合酶链式反应（PCR）扩增,并按母本、远交子代和父本顺序,对PCR产物进行电泳实验。结果发现．4株超级苗在7条引物中,共找到16条父系特征谱带,在另外2条引物中检测到父母的共同谱带,、由此可以肯定．杂交所得超级苗是杉木与侧柏远缘杂交产生的杂种。杉木与侧柏远缘杂交是可配的,杉木远缘杂交育种是一条多性状改良途径。图3表1参17     

ISSR分子标记及其应用

本文简述了ISSR分子标记的原理、基本操作程序,介绍了ISSR分子标记技术反应条件的选择及其在遗传多样性分析等方面的应用。     

12个北美冬青品种的ISSR亲缘关系分析

北美冬青Ilex verticillata作为切枝观赏和景观美化植物在中国花卉市场受到越来越多的关注。为给北美冬青新品种选育提供保障,采用简单重复序列间扩增多态性（ISSR）分子标记分析了北美冬青品种间的亲缘关系,从12个ISSR引物中筛选出4个多态性引物;对12个北美冬青品种进行了扩增,共获得63个条带,其中多态性条带占90.48%,所选引物的多态性较高,可用于鉴定北美冬青品种间的相对亲缘关系;12个北美冬青品种间的遗传相似系数为0.54~0.87,亲缘关系相对较近;品种间的遗传相似系数聚类结果表明,各品种间存在不同程度的亲缘关系,其中I. verticillata ‘Jim Dandy’和I. verticillata ‘Cacapon’间亲缘关系最近。研究结果为北美冬青品种的选育奠定了理论和实践基础。     

ISSR分子标记鉴定香菇单孢杂交后代的研究

以香菇栽培品种大山18和云南野生菌株11-1作为亲本,采用单孢杂交技术初步获得84个杂交菌株。通过对亲本菌株ISSR引物进行筛选,得到1个条带图谱清晰稳定、含有2个亲本各自特异扩增条带的引物。用该引物对84个杂交菌株及其亲本进行ISSR扩增,结果表明:有45个杂交菌株扩增出2个亲本的特异条带,推断这45个杂交菌株应是真正的杂合子,表明ISSR标记可以作为香菇杂合子鉴定的一种手段。     

RAPD、ISSR分子标记联合鉴定毛木耳菌株的研究

以10个不同来源的毛木耳菌株为试验材料,采用随机扩增多态性(RAPD)、简单重复序列间扩增(ISSR) 2种分子标记技术对供试菌株进行鉴定及遗传多样性分析。结果表明,RAPD、ISSR分子标记的多态性比率分别为100%、93.75%。RAPD、ISSR联合使用比单独使用更能准确鉴别毛木耳菌株。综合RAPD、ISSR的多态性位点进行UPGMA聚类分析,供试菌株间相异距离为0.13～0.87,遗传多样性较丰富。在相异距离为0.60时,所有供试菌株被分为5个群体,包括2个复合群体和3个单一群体。2个复合群体中,菌株43、43-28为一个群体,相异距离为0.48,说明这2个菌株遗传距离较近。菌株大光、白背毛木耳、781、黄背木耳、台耳134这5个菌株为另一大的群体,相异距离为0.40,遗传距离较近。白背毛木耳可能是名称混淆的菌株。川毛10号、99丰、43-1为3个单独群体。供试菌株有丰富的遗传多样性,5个群体之间菌株遗传距离较远,可作为育种亲本的选配菌株。     

粤引大脆蜜青枣的ISSR分子标记鉴定分析

使用ISSR分子标记技术对粤引大脆蜜等10个青枣品种进行基凶组DNA多态性分析,结果表明:粤引大脆蜜是一个新的种质类型,不存在同物异名现象;但青枣种质资源之间的遗传多样性较低;ISSR分子标记技术适用于青枣品种的鉴定及亲缘关系的分析.     

应用ISSR分子标记对茶树种质资源进行分子鉴定

ISSR标记是一种基于微卫星序列发展起来的十分有效的分子标记,已在植物种质鉴定和遗传多样性等方面广泛应用。本文采用ISSR分子标记法对分布于重庆、四川的14份茶树种质资源进行了分子鉴定,通过构建指纹图谱、特殊标记的存在或缺失和标记组合来可将它们区别开。结果显示ISSR分子标记在鉴定茶树种质资源方面非常快捷和有效。     

ISSR分子标记在芦柑提纯复壮研究中的应用

采用ISSR(Inter-simple Sequence Repeat)分子标记技术,从随机引物中筛选出能稳定扩增的14条引物,利用2条引物对供试的10个芦柑样品进行PCR扩增,获得了与母本完全一致的条带,从而可以确定鉴定样本为珠心苗。     

抚育间伐对成熟期杉木人工纯林生长量的影响

为解决成熟期的杉木Cunninghamia lanceolata生长受抑制问题, 选择生态疏伐、卫生伐等2种处理对成熟期的杉木人工纯林进行抚育间伐, 运用方差分析的方法, 对60块标准地中杉木生长量的试验数据进行比较分析。结果表明:生态疏伐、卫生伐与对照比较, 树高因子生长影响不显著(P>0.05), 而胸径、单株材积因子生长影响均达到极显著差异(P<0.01), 且生态疏伐的影响较卫生伐影响大。由此可见, 给成熟期的杉木人工纯林以足够的生长空间, 虽然对林分树高因子生长没有影响, 却能有效地促进林木胸径生长, 增加单株材积, 获得更多优质、高产、高效的木材, 提高单位面积的生态效益和经济效益。     

杉木优良无性系龙15与闽33双系种子园遗传改良效应分析

分别以未经遗传改良杉木Cunninghamia lanceolata的普种、多系种子园（1代、1．5代和2代种子园）为对照。连续4a采集种子。测定种子品质,连续2a营建试验林,进行2（a）次4地点5重复的子代遗传测验,对无性系龙15与闽33双系种子园的遗传改良增益,反交效应以及遗传效应进行了系统的研究。结果表明,双系种子园种子品质现实增益为6．76％～20．44％,除涩籽率外,种子千粒质量、种子生活力和种子活力均优于多系种子园：子代生长在6年生时的材积现实增益达46．14％,比多系种子园大10．63％～21．10％。种子品质和子代侧枝性状的正交与反交存在不同程度差异,子代生长、高径比和冠幅的正交与反交基本相等。树高、胸径和材积生长,主要是由基因加性效应控制,非加性效应也占有较大比例。种子千粒质量、发芽指数和活力指数等表现出超显性效应。图2表4参16     

矮生杉木的解剖特性

为揭示杉木Cunninghamia lanceolata矮生的原因,以矮生杉木和正常杉木为材料,对其生长特性、枝条和叶片解剖结构进行了比较研究。结果表明：矮生杉木在枝条年生长量方面极显著低于正常杉木,其中矮生杉木主干、主枝年伸长量均值分别为25．54和24．59cm．正常杉木相应均值分别为89．61和57．52cm;在枝皮率方面．矮生杉木和正常杉木的均值分别为76．50％和37．70％,差异极显著;在管胞平均面积方面,矮生杉木（241．9016μm^2）极显著小于正常杉木（308．8946μm^2）。然而,矮生杉木的平均管胞密度（3375个·mm^-2）却极显著高于正常杉木（2456个·mm^-2）;矮生杉木的枝条单位长度的叶片数量（主干为14片．cm^-1,主枝为10片．cm^-2）极显著多于正常杉木（主干和主枝均为7片·cm^-1）;但两者在栅海比（衡量植物生长势的一个指标）方面无明显差异。图2表3参13     

杉木纤维素合成酶类似蛋白基因ClCslD1的克隆及其生物信息学分析

纤维素合成酶类似蛋白(CSL)作为一种重要的膜蛋白与纤维素合成酶具有相类似的蛋白结构,都含有D,D,D,QXXRW保守区.利用其他物种中的CesA基因的保守序列设计简并引物,采用反转录-聚合酶链式反应(RTPCR)结合cDNA末端快速扩增技术(RACE)成功地从杉木Cunninghamia lanceolata中扩增出一个含有完整阅读框架的cDNA序列,长度为4 150 bp,开放阅读框架为3 396 bp,编码1 132个氨基酸并含有保守的D,D,D,QXXRW天冬氨酸残基序列.应用美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库对获得的基因进行序列分析比对,发现它属于CslD基因家族,命名为ClCslD1基因.多重序列比对结果分析表明,该蛋白与来自颤杨Populus tremuloides,水稻Oryza sativa,拟南芥Arabidopsis thaliana等的同源基因相似性高达71％以上.利用生物软件对其进行生物学分析,为进一步研究其在植物纤化中的功能奠定基础.     

光皮桦SSR分子标记体系的建立

采用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）-硅珠法提取光皮桦Betula luminifera嫩叶DNA,利用近缘种日本白桦B. platyphylla var. japonica和欧洲白桦B. pendula的引物,建立光皮桦简单重复序列标记（SSR）反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链式反应（PCR）反应的因素进行分析。结果表明：在20 μL反应体系中,模板DNA用量、Mg²⁺浓度、脱氧核糖核苷酸（dNTPs）浓度、引物浓度、T_aq DNA聚合酶用量分别为60 ng,1.500 mmol·L^－1,0.175 mmol·L^－1,2.500 mmol·L^－1,1.0 × 16.67 nkat时结果最好;引物退火温度比日本白桦扩增时提高1 ℃时效果佳。PCR扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后随机挑取其中3对引物扩增的多态性片段进行克隆测序,对引物的通用性做进一步检验,序列经比对后得到的与原物种序列相似度（max ident值）均在95.0%以上。可见,近缘种日本白桦和欧洲白桦的SSR引物可以在光皮桦上应用。图7表2参17     

ISSR分子标记及其在树木遗传育种研究中的应用

在比较ISSR和其它分子标记的原理和特点的基础上,综述了ISSR分子标记在树木遗传多样性研究、亲缘关系及系谱分析、优良种质和品种鉴定及遗传连锁图谱的构建等领域的研究进展,指出了目前ISSR分子标记在树木遗传改良和辅助育种等研究领域存在的问题,并提出今后的研究方向。     

不同林分更新模式对林分水源涵养能力的影响

通过野外调查和试验测定,分析了杉木×火力楠混交林、杉木×米老排混交林及杉木纯林林冠层、林下植被层、凋落物层和土壤层的水源涵养能力的差异.研究结果表明:(1)林冠层最大持水量杉木×火力楠混交林最大持水量＞杉木纯林最大持水量＞杉木×米老排混交林最大持水量;(2)杉木×火力楠混交林草本层生物量、自然持水量及最大持水量均大于灌木层;(3)凋落物层最大持水量表现为杉木×米老排混交林最大持水量＞杉木×火力楠混交林最大持水量＞杉木纯林最大持水量;(4)0 ～60 cm土壤总贮水量从大到小表现为杉木×火力楠混交林、杉木×米老排混交林、杉木纯林.综合水源涵养能力大小依次为杉木×火力楠混交林、杉木×米老排混交林、杉木纯林.     

杉木速生优良无性系的选育

对217个福建省杉木优良无性系4个年度的测定结果进行了分析，产对各生长性状的遗传参数进行了估算，结果表明，各主要生长性状的差异在无性系间均达到显著或极显著水平，通过遗传测定，从217个优良无性系中评选出23个速生优良无性系，与杉木第1代种子园子代相比，入选的优良无性系具较高的生产力水平和增产效果，适宜于在福建省北部或其他生态条件相近的地区推广应用。表5参4。     

豇豆与饭豆种间杂种的获得及其鉴定

对豇豆和饭豆进行种间杂交试验,30个正反交组合中有3个杂交组合获得种子,它们分别是豇豆A65×饭豆B24、豇豆A27×饭豆D1、豇豆A136×饭豆A163。对获得的种间杂种及其双亲进行表型性状、生理指标及分子标记鉴定分析结果表明,豇豆A136×饭豆A163杂交组合所获杂种为假杂种,其他2个杂交组合所获杂种为真杂种。利用豇豆与饭豆种间杂交将饭豆的有利性状基因导入豇豆中,拓宽豇豆的遗传背景,为豇豆种质资源的创新与新品种选育提供基础。