烟草黑胫病菌拮抗放线菌LY18的分离筛选与鉴定

为了寻找对烟草黑胫病具有生防潜力的放线菌,笔者采用平板对峙法,从烟草黑胫病发病烟田健株根际土壤中,分离得到1株对烟草黑胫病菌具有显著拮抗效果的放线菌株LY18,其发酵液的无菌滤液对烟草黑胫病菌菌丝的抑制率达70%以上。电镜观察发现,抑菌圈周围的烟草黑胫病菌丝破裂、瘪陷。通过对LY18的形态观察、培养性状观察、生理生化测定结合16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为Streptomyces rajshahiensis。     

云南省烟草黑胫病菌致病力分化的研究

将分离自云南省不同地区的２１株黑胫病菌（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｎｉｃｏｔｉａｎａｅＢｒｅｄａｄｅＨａａｎ）接种烟草品种Ｋ３２６、Ｇ２８和红大，测定其对不同烟草品种的致病力。经统计分析，发现其对烟草的致病力有差异。采用菌丝块创伤和不创伤两种接种方法测定致病力的结果不同。对不同地区的黑胫病菌间的致病力以及由烟草和非烟草寄主上获得的烟草疫霉菌株的致病力进行了比较，结果表明，云南省黑胫病菌的致病力较强，由烟草上获得的烟草疫霉菌株对烟草的致病力强于非烟草菌株。实验结果还发现，供试的３个烟草品种，以Ｋ３２６对云南省烟草黑胫病菌的抗病性最强，红大品种较感病。     

烟草黑胫病菌拮抗内生细菌的筛选

采用稀释分离法从黔南州采集的健康烟草组织中分离获得烟草内生细菌153株,通过平板对峙试验,从中筛选出2株对烟草黑胫病菌具有明显抑制作用的菌株LPN07和LPN09,其对黑胫病菌菌丝生长的抑制率分别为68.99%和65.97%。经16S rDNA序列分析,菌株LPN07和LPN09被鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)细菌。     

抗烟草黑胫病植物源活性物质的筛选

为筛选对烟草黑胫病有较高抗性的植物源提取物,采用菌丝生长速率法,对苦参、枳壳等45种中药材粗提液对烟草黑胫病病菌的抑制效果及施药方式进行了分析,结果表明:有土黄连、黄柏等19种中药材的提取物对烟草黑胫病病菌菌丝生长有显著的抑制效果,中药材提取物以混合杀菌方式对烟草黑胫病菌丝生长抑制作用效果最好;其中土黄连、黄柏、黄独、厚朴、前胡、雷公藤、苍术、油茶饼、瞿麦、巴戟天等16种中药材的提取物对烟草黑胫病菌丝生长有极显著的抑制效果,具有开发先导化合物的潜力;在大田生产应用上,施用中药材植物源药剂防治烟草黑胫病以灌根的施药方式较好。     

抗烟草黑胫病植物源活性物质的筛选

为筛选对烟草黑胫病有较高抗性的植物源提取物,采用菌丝生长速率法,对苦参、枳壳等45种中药材粗提液对烟草黑胫病病菌的抑制效果及施药方式进行了分析,结果表明:有土黄连、黄柏等19种中药材的提取物对烟草黑胫病病菌菌丝生长有显著的抑制效果,中药材提取物以混合杀菌方式对烟草黑胫病菌丝生长抑制作用效果最好;其中土黄连、黄柏、黄独、厚朴、前胡、雷公藤、苍术、油茶饼、瞿麦、巴戟天等16种中药材的提取物对烟草黑胫病菌丝生长有极显著的抑制效果,具有开发先导化合物的潜力;在大田生产应用上,施用中药材植物源药剂防治烟草黑胫病以灌根的施药方式较好。     

烟草黑胫病拮抗链霉菌筛选及田间防效试验

筛选用于防治烟草黑胫病的拮抗链霉菌,并可作为化学药剂补充或替代品。采用稀释平板法分离土壤链霉菌,采用平板对峙法筛选拮抗链霉菌,通过形态观察、生理生化试验及16S rRNA序列分析鉴定目标菌株,通过田间小区试验评价目标菌株的生防潜力和对烤烟的促生效果。从贵州省湄潭县采集烤烟根际土壤,分离到放线菌73株。从中筛选获得1株对烟草黑胫病菌拮抗效果良好的菌株MT35,该菌鉴定为郝氏链霉菌(Streptomyces halstedii)。结果表明,施用MT35后烟株茎围、茎高和叶宽均有增加,对烟草黑胫病的防效良好,相对防效为75.3%。筛选到1株对烟草黑胫病菌有强拮抗作用的郝氏链霉菌(S.halstedii)MT35,该菌对烟草黑胫病具有良好的田间防效且对烟株具有促生效果。     

烟草内生细菌Itb295对黑胫病菌的抑制及其鉴定

[目的]确定分离自健康烟草植株的内生细菌Itb295的分类地位和生防潜能。[方法]通过平板对峙培养法测定菌株Itb295对烟草黑胫病菌的抑制作用,并结合菌株形态、生理生化特性和16S rDNA序列(GenBank登录号JF496206)比对分析确定该菌株的分类地位。[结果]鉴定Itb295菌株为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株Itb295对黑胫病菌菌丝生长抑制率为34.64%,受抑制的黑胫病菌菌丝膨大、扭曲、分支增多,不能正常生长,抑菌效果的可逆性分析显示受抑制的菌丝在OA培养基上能够正常生长。[结论]为烟草黑胫病的防治及内生细菌Itb295的进一步研究提供了理论依据。     

广西烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性检测

【目的】研究广西烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性,为烟草黑胫病药剂防治提供科学依据。【方法】采用菌落生长速率法对从广西主要烟区采集分离到的196株烟草黑胫病菌株进行对甲霜灵的敏感性测定。【结果】甲霜灵对196株菌株的EC50在0.0691-1.0243μg/mL,平均EC50为0.3618±0.0297μg/mL;来自田林县的菌株TL05为最敏感菌株,EC50为0.0691μg/mL;来自靖西县画洞镇的菌株ZXHD12为最耐药菌株,EC50为1.0243μg/mL;各烟区烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性有一定差异,其中南丹、田林县的菌株较敏感,而隆林、靖西、德保、富川县的部分菌株较耐药;196株菌株中,敏感型、一般耐药型和耐药型菌株分别占1.53%、66.84%和31.63%。【结论】广西烟草黑胫病菌已对甲霜灵产生不同程度的抗性,甲霜灵作为生产上防治烟草黑胫病的主要药剂具有较大的风险,建议生产上甲霜灵与其他杀菌剂进行轮换使用。     

烟草黑胫病菌的分离及培养性状研究

烟草黑胫病是烟草(Nicotiana tabacum)的一种毁灭性病害。试验采集云南省昭通市的烟草黑胫病病株,采用组织分离法对病原菌进行分离、纯化,对其培养性状进行研究。结果表明,燕麦培养基适合烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica)的培养,菌丝生长旺盛;烟草黑胫病菌菌丝粗细不均匀,无隔膜,具有膨大体;孢子囊顶生,具脱落性,具1个或2个乳突。这些培养性状与前人研究结果相似,表明烟草黑胫病菌的培养性状较为稳定。     

广西烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性检测

【目的】研究广西烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性,为烟草黑胫病药剂防治提供科学依据。【方法】采用菌落生长速率法对从广西主要烟区采集分离到的196株烟草黑胫病菌株进行对甲霜灵的敏感性测定。【结果】甲霜灵对196株菌株的EC50在0.0691~1.0243 μg/mL,平均EC50为0.3618±0.0297 μg/mL;来自田林县的菌株TL05为最敏感菌株,EC50为0.0691 μg/mL;来自靖西县画洞镇的菌株ZXHD12为最耐药菌株,EC50为1.0243 μg/mL;各烟区烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性有一定差异,其中南丹、田林县的菌株较敏感,而隆林、靖西、德保、富川县的部分菌株较耐药;196株菌株中,敏感型、一般耐药型和耐药型菌株分别占1.53%、66.84% 和31.63%。【结论】广西烟草黑胫病菌已对甲霜灵产生不同程度的抗性,甲霜灵作为生产上防治烟草黑胫病的主要药剂具有较大的风险,建议生产上甲霜灵与其他杀菌剂进行轮换使用。     

木霉菌对烟草疫霉的拮抗作用

通过对峙培养试验测定木霉菌(Trichodermaspp.)对烟草疫霉菌(Phytophthora parasiticavar.nicotianae)的抑制作用,筛选出对烟草疫霉菌具有拮抗作用的绿色木霉(T.viride)菌株TG050609.平板对峙培养试验结果表明:该木霉菌对烟草疫霉菌菌落生长的抑制率为29.12%,且能寄生于烟草疫霉;其挥发性次生代谢产物和发酵滤液对烟草疫霉也有明显的抑制作用.盆栽防治试验结果表明,该木霉菌对烟草黑胫病的防治效果达到56.53%,优于58%甲霜灵锰锌WP.     

木霉菌防治烟草黑胫病研究进展

黑胫病是烟草生产上的重要土传病害之一,广泛分布于各个烟草种植区。综述了利用木霉菌防治烟草黑胫病的菌株筛选、防治效果、拮抗机制的最新进展,为烟草黑胫病的生物防治提供了参考。     

烟草主要真菌病害生防木霉的筛选

对峙培养结果表明18个木霉菌株对腐霉病（Pythium spp.）、链格孢（Alternaria alternata)、烟草疫霉（Phytophthora par-asitica var.nicotianae)、立枯丝核菌（Rhizoctonia solani)和胶孢炭疽菌（Collectotrichum gloeosporioides）均有不同程度拮抗作用,其中以TR13拮抗作用最好。重寄生现象观察结果表明,TR13能够重寄生烟草疫霉、胶孢炭疽菌和立枯丝核菌。     

烟草黑胫病菌拮抗内生细菌的筛选和鉴定

为寻找防治烟草黑胫病新途径，2001至2003年，从湖南永州和宁乡等地烟草黑胫病发病严重的田块采集健株，共分离到内生细菌株120株，经测定，8株内生细菌菌株在室内有较强的拮抗作用，这8株内生细菌与烟草黑胫病菌共培结果显示，55y，NN-3，YN-4和YN-10对烟草黑胫病菌抑茵效果均在66%以上．根据内生细菌形态特征和生理生化性状，初步鉴定内生细菌55y为假单胞杆菌属铜绿假单胞菌，NN-3为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌，YN-4，YN-10为芽孢杆菌属凝结芽孢杆菌，且这4菌株均为烟草内生细菌．     

绿针假单胞菌PL9菌株对烟草疫霉的拮抗作用研究

利用离体拮抗试验和烟草幼苗生物测定法研究了棉花根圈细菌绿针假单胞菌（Pseudomonas choloraphis)PL9菌株对烟草黑胫病原菌烟草疫霉（Phytophthora parasitica var.nicotianae)的拮抗作用，该菌株对烟草疫霉菌丝体有很强的抑制作用，并且可以完全抑制烟草疫霉游动孢子对烟草幼苗的侵染，其液体培养物浓缩过滤液也有相同的报制作用，拮抗作用机理研究结果表明，其拮抗作用可能与PL9菌株分泌的抗生素类物质有关。为了解PL9菌株在烟草根圈的定殖情况，采用全套发光酶基因（luxCDABE)标记的菌株PL9L进行跟 踪，结果表明该菌株可以在烟草根圈成功定殖。     

侧孢短芽孢杆菌B8发酵液中抑菌物质理化性质研究

从烟草根际土壤中分离到一株生防菌侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)B8,其发酵液对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)的抑菌圈直径可达到63 mm.为了明确生防菌株B8发酵液中抑菌物质的理化性质,对发酵液的稳定性进行了测定.结果...     

大蒜提取液对烟草黑胫病和青枯病的防治效果初探

研究了大蒜提取液对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var nicotianae)和青枯病菌(Ralstonia solanacearum)的抑制作用,并进一步测定了大蒜提取液防治烟草黑胫病的效果.结果表明,浓度大于1.5%的大蒜提取液对于烟草青枯病菌的抑菌半径与5000倍72%农用链霉素相当,浓度大于1.5%的大蒜提取液对烟草黑胫病菌的抑菌效果显著;而盆栽试验表明,只有稀释倍数小于10倍的大蒜提取液才对烟草黑胫病具有防治效果,而稀释倍数大于10倍的大蒜提取液对烟草黑胫病基本没有防治效果.     

烟草黑胫病生防菌的筛选鉴定及其防效

从毒鹅膏菌(Amanita phalloides)栖生土壤中分离筛选烟草疫霉(Phytophthora parasitica var. nicotianae)拮抗菌株，通过盆栽试验考察拮抗菌株对烟草黑胫病的防效。结果表明：从毒鹅膏菌栖生土壤中分离筛选的DE4–5菌株对烟草疫霉的抑菌率达78.22%；DE4–5具有广谱抗真菌活性；依据DE4–5的形态和生化特征初步判断为假单胞菌属(Pseudomonas)，结合16S rDNA保守序列及辅助gyrA基因片段序列分析，确定DE4–5为亚麻假单胞菌，定名为Pseudomonas lini DE4–5；生物活性测定显示，菌株DE4–5具有解磷和解钾能力，产IAA、蛋白酶、纤维素酶和脲酶；盆栽试验结果表明，菌株DE4–5预防组与治疗组的烟草黑胫病发病率分别为24.79%和39.24%，病情指数分别为26.31%和29.37%，防效分别达到69.14%和63.98%。     

烟草黑胫病菌的寄主范围

【目的】探究烟草黑胫病菌（Phytophthora parasitica var. nicotianae）的寄主范围,为烟草黑胫病菌的相关研究提供理论依据,为烟草黑胫病菌所致病害的综合防治提供决策依据。【方法】人工模拟烟草黑胫病菌在田间的侵染途径,采用菌丝块创伤和不创伤接种61种农作物及杂草的活体或离体组织,结合柯赫氏法则鉴定,对烟草黑胫病菌的寄主范围进行较为系统的大样本研究。【结果】烟草黑胫病菌在人工创伤条件下可侵染21科41属51种植物,在不创伤条件下可侵染10科15属16种植物,首次发现烟草黑胫病菌在人工创伤接种条件下可以侵染21科40属47种植物,在人工不创伤接种条件下可以侵染10科12属12种植物。【结论】烟草黑胫病菌在人工模拟条件下的寄主范围较为广泛,其中包括一些常见农作物和烟田常见杂草,当这些植物在有利于病害发生的高温阴雨潮湿气候条件下,在田间农事活动中受到机械创伤或遭受虫伤甚至没有损伤时,烟草黑胫病菌可能会对这些植物造成侵染,生产中应注意避免烟草同潜在寄主作物间作或连作。及时防除烟田杂草对烟草黑胫病菌所致病害的有效治理具有积极意义。