银白杨叶片不定芽再生影响因素的研究

该文以银白杨无菌试管苗叶片为外植体 ,进行了不同培养基及不同因子对银白杨叶片不定芽诱导的研究 ,建立了叶片不定芽再生植株体系 ,为今后的遗传工程改良奠定了基础 .结果表明 :银白杨叶片不定芽诱导的最适培养基是MS附加 6 BA和NAA(5∶1) (即MS +6 BA 0 5mg L +NAA 0 1mg L +蔗糖 2 5 % +琼脂 0 5 5 % ,pH 5 8) ,不定芽再生率达 95 %以上 ;当 6 BA NAA <5时 ,叶片不定芽再生率和再生系数均降低 ,当 5≤ 6 BA NAA≤ 30时 ,随着比值的增大 ,不定芽再生率明显下降 ,不定芽再生系数也减少 ;叶片不定芽再生能力强的最佳取材位置是自试管苗顶端向下伸展叶的第 1～ 3片叶 ;生根试管植株叶片的不定芽再生能力强于无根试管植株 ;叶片不定芽诱导的最佳光照时间为每天 14h .     

两个蓝莓品种离体叶片不定芽再生体系的建立

以Sunrise和Geo两个蓝莓品种试管苗叶片为外植体材料,以改良的WPM为基本培养基,研究了暗培养时间、叶片放置方式和不同浓度激素组合（ZT、IBA、TDZ）对2个蓝莓品种叶片不定芽再生的影响。结果表明：最适的暗培养时间为14d,近轴面放置效果最好,不同基因型不定芽再生能力不同,Sunrise品种在WPM＋4．0mg／L ZT＋0．3mg／L IBA＋1．0mg／L TDZ＋20g／L蔗糖＋6g／L琼脂培养基中生长最好,离体叶片不定芽再生频率达100％,再生不定芽数可达4．5个以上;Geo品种最适宜培养基为WPM＋4．0mg／LZT＋0．3mg／LIBA＋20g/L蔗糖＋6g／L琼脂,叶片不定芽再生频率达到100％。     

菊花叶片不定芽再生体系的研究

以7个不同菊花品种的叶片为外植体，探讨了基因型、苗龄、叶片着生部位、Vc、活性炭、AgNO3以及不同生长调节剂组合等因素对菊花叶片不定芽再生的影响.试验结果表明，基因型是影响不定芽再生的重要因素；15～35d苗龄的无菌苗中、上部幼嫩叶片不定芽再生能力较高；高浓度NAA有利于提高‘紫妍’叶片外植体的再生能力和消除褐化现象；AgNO3未能促进叶片外植体的再生；适宜‘紫妍’再生的培养基是MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.5mg/L和MS+6BA 2mg/L+NAA1mg/L；适宜‘L12M57’再生的培养基是MS+6BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L和MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L      

八月红梨叶片不定芽诱导研究

采用正交试验设计研究了基本培养基、BA和 IAA 3个因素及其组合对八月红梨 (Pyrus communisL .)叶片不定芽再生的影响。结果表明 ,基本培养基的种类对叶片不定芽的诱导起主要作用 ,诱导叶片再生的最优组合是 NN6 9+BA 5 .0 m g/L +IAA 0 .5 mg/L ;用同质量浓度葡萄糖代替蔗糖 ,对叶片再生频率的影响不显著 ,用白砂糖代替蔗糖 ,显著降低了叶片再生频率 ;Ag NO3质量浓度在 0 .1～ 1.5 mg/L时 ,对叶片再生有促进作用 ,培养基中附加 Ag NO30 .5 mg/L ,可显著提高叶片再生频率     

胡杨离体培养分化增殖途径的比较研究

采用含 30mg L蔗糖 ,并附加 5 0 0mg L水解乳蛋白和 4 0mg L腺嘌呤的B5培养基为基本培养基 ,就离体条件下胡杨 (PopuluseuphraticaOliv.)茎段、叶片、嫩根以及茎段愈伤组织不定芽分化增殖途径进行研究 .结果表明 ,维持一定的BA与NAA比值对胡杨不定芽的分化增殖较为重要 ,其中茎段和愈伤组织诱导不定芽以附加 0 5mg LBA、0 1mg LNAA的培养基表现最好 .茎段不定芽再生率及愈伤组织分化增殖率分别为 1 0 0 %和 80 % ;离体叶片以添加0 6mg LBA、0 1mg LNAA的诱导效果最佳 ,诱导率高达 1 0 0 % ,且增殖系数为 1 0 7.离体嫩根则以添加 0 5mg LBA、0 2mg LNAA的处理效果最好 ,诱导率为 35 % .采用繁殖周期、增殖系数、有效芽健壮程度、黄化率等指标 ,对胡杨离体培养 4种分化增殖途径进行比较分析表明 ,胡杨离体茎段培养与叶片诱导不定芽是胡杨试管苗生产的两条良好途径     

软籽石榴(Punica granatum L. cv. Yushizi)叶片再生体系的研究

为建立软籽石榴的离体高效再生体系,试验以新梢为材料建立了软籽石榴的无菌体系,并试验了不同激素组合对软籽石榴增殖效果的影响;以叶片为外植体研究了不同培养基组合对不定芽再生频率和伸长的影响。结果表明,茎段增殖培养的最适培养基为MS+6-BA 0.3 mg/L+KT 0.3～0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L;叶片不定芽诱导的最适培养基为MS+TDZ 0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L,在不定芽诱导培养基中添加0.6 mg/L的GA3对不定芽的伸长效果较好。在1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+AC0.5 g/L培养基增殖培养所得芽苗生根效果最优。     

罗汉果叶片培养及其不定芽形成的细胞学观察

以罗汉果叶片为外植体,探讨了不同基本培养基、不同培养方式、不同植物生长调节剂对不定芽分化的影响,并对不定芽的形成进行了细胞组织学观察。结果表明：基本培养基以改良MS较为适宜,在附加6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L的固体培养基中,平均每块愈伤组织再生芽高达5．6个。叶片正面接触培养基的培养方式芽分化率达到90．3％。芽苗在1／2MS＋NAA0．2mg／L＋IBA0．5mg／L＋蔗糖20∥L的固体培养基中诱发生根效果最好。硝酸银对不定芽分化具明显效果,分化率达到86．7％。细胞学观察发现,不定芽起源于叶片紧密愈伤组织表层。     

‘辽峰’葡萄叶片不定芽再生研究

以‘辽峰’葡萄试管苗叶片为试材,探讨了基本培养基、不同激素组合和暗培养对试管苗叶片不定芽诱导的影响。结果表明,基本培养基、不同激素组合和暗培养对叶片不定芽再生均起着重要的作用,叶片不定芽诱导最佳培养基为1/2 MS+NAA 1.2 mg/L+TDZ 3.0 mg/L,先暗培养14 d后转入光下常规培养,‘辽峰’叶片不定芽再生效果最好,不定芽再生率高达88.09%。     

葡萄砧木“1202”离体再生体系的建立

以葡萄砧木"1202"为试材,研究了不同外植体类型、不同植物生长调节剂浓度及配比、不同外植体放置方式等对其不定芽再生频率的影响。结果表明:叶片的再生效果最好,不定芽率达68.78%;葡萄砧木"1202"叶片不定芽再生的最适培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.5 g/L,pH 5.8;叶片最佳放置方式为远轴面接触培养基。将再生不定芽置于3/4 MS+IBA 0.35 mg/L培养基上诱导生根,生根率达80%。再生植株培养35～50 d后移栽炼苗,成活率可达90%。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

‘Damas1869’李离体叶片不定芽再生影响因素分析

以‘Damas1869’李试管苗幼嫩叶片为试材,对影响离体叶片再生的培养基种类、激素浓度、叶片放置方式、暗培养时间、琼脂用量等关键因素进行研究。结果表明:F14培养基再生效果最好,明显优于MS和WPM培养基;最佳激素配比为4.0 mg/L TDZ+0.5 mg/L IBA,用4.5 g/L琼脂配制偏软的再生培养基,叶片近轴面向下接触培养基,暗培养5 d后转光下培养有利于提高离体叶片的再生效率,再生率可保持在73.5%左右,平均每叶再生3~5个芽。     

“晶瑶”草莓叶片再生体系的建立

以草莓"晶瑶"为试材,研究了暗培养时间、培养温度、激素配比、硝酸银浓度、不同植物凝胶等对不定芽再生的影响,建立了"晶瑶"草莓叶片的离体再生体系。结果表明:硝酸银对"晶瑶"草莓叶片再生有抑制作用;暗培养15 d、28℃的培养温度、以Phytagel为凝固剂有利于"晶瑶"草莓叶片再生;TDZ 1.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L是较好的诱导培养基激素配比,此时不定芽的再生率达到76.77%,平均再生芽数达到4.3个。     

葡萄不同器官直接再生不定芽研究

以葡萄继代试管苗的叶片﹑叶柄、茎段和根为试材,进行器官直接再生体系建立的研究。结果表明:MS是诱导葡萄器官直接再生较好的基本培养基,葡萄叶片是最佳的诱导材料;不定芽的诱导以MS+BA(1.5～2.0mg/L)+IBA(0.01mg/L)的激素组合最好,“红地球”、“维多利亚”、“甘农18号”的叶片均直接产生了较高的不定芽;在BA1.5～2.0mg/L最适范围,生长素浓度过高不利于器官直接产生不定芽。     

丽格海棠组织培养外植体再生体系建立关键技术的研究

以丽格海棠的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体进行组织培养,着重研究丽格海棠的最佳外植体,最佳培养基配方及接种模式的关键技术。研究表明初代培养基本培养基为MS,激素配比为6-BA0 5mg/L+NAA0 1mg/L,培养30d可获得较多的不定芽。外植体分化能力的研究表明丽格海棠的不同类型外植体能力大小为:叶>茎>花茎>叶柄;从叶片的不同部位来看,叶中>叶侧>叶边缘;从不同叶龄来看,中等成熟叶>幼叶>完全成熟叶>芽叶。叶片的接种模式:反放比正放好。     

酿酒葡萄“赤霞珠”叶片和叶柄离体再生系统建立的研究

以赤霞珠叶片、叶柄为材料,研究了细胞分裂素(TDZ)、不同基本培养基、叶柄砧有无对其不定芽再生的影响。结果表明:TDZ对赤霞珠离体叶片、叶柄不定芽再生有诱导作用,对叶片、叶柄的最高诱导率分别为18.06%和28.57%;叶片再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L,叶柄再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.01mg/L,叶片不定芽生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+20g/L蔗糖。     

不同抗生素对矮牵牛叶片培养的敏感性试验

[目的]探讨不同抗生素对矮牵牛叶片再生的影响。[方法]以开花前顶部新展开的矮牵牛叶片为外植体,接种于添加不同抗生素(卡那霉素、头孢唑林钠和潮霉素)的基本培养基MS+2.0μg/ml BA+0.2μg/ml NAA上,研究不同抗生素对叶片再生的影响。[结果]20 mg/L卡那霉素、5 mg/L潮霉素可明显抑制矮牵牛叶片愈伤组织的形成和不定芽分化,而头孢唑林钠在400 mg/L以上时才会对不定芽分化产生不良影响。[结论]为建立矮牵牛的遗传转化体系提供了试验参考。     

基于AFLP标记的河八王种质资源遗传多样性分析及分子身份证构建

以广西地区的15份河八王无性系为材料,采用AFLP标记结合毛细管电泳进行分析,计算多态性引物的总扩增条带数、多态性条带数和多态性条带比率。进行遗传相似系数和UPGMA聚类分析,并建立分子身份证。25对AFLP引物组合在15份河八王种质资源中共扩增出2 208个位点,其中多态性位点1 914个,多态性比率(PPB)为87.11%。UPGMA聚类分析表明,供试的15份河八王种质资源其遗传相似系数变化范围在0.656~0.878,在相似系数为0.706时,可划分为3个类群。结合特征带和不同引物组合方法可有效建立河八王种质资源特异分子身份证,置信概率达到99.99%。所供试河八王种质具有较丰富的遗传多样性水平,基于3对AFLP引物组合104条谱带构建的15份河八王种质分子身份证具有唯一性,AFLP标记是在分子水平上鉴定河八王种质的有效方法。     

罗汉果的组织培养与快速繁殖

[目的]进一步探讨罗汉果高效再生系统的建立条件。[方法]通过研究外植体苗龄、激素组合等因素对罗汉果离体繁殖影响,建立了罗汉果高效再生系统。[结果]3~9 d苗龄子叶与不定芽分化的关系研究表明,在3~6 d内,子叶不定芽的分化率随着苗龄的增加而增加,以6 d的子叶出芽效果最好(83.3%),随后不定芽分化率逐渐下降。BA和IBA不同浓度组合对子叶不定芽诱导的影响表明,在MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.65%琼脂(pH值5.8)培养基上子叶外植体不定芽的诱导率达到85.7%;在1/2 MS+IBA1.0 mg/L液体培养基上无菌苗发根率可达91.7%。抗生素敏感性试验表明,当培养基中添加10和20 mg/L的潮霉素即能完全抑制不定芽和不定根的分化。[结论]IBA与BA配合使用对罗汉果不定芽的分化有明显的促进作用。     

昌红苹果离体叶片不定芽的诱导及植株再生

 以昌红苹果的组培苗为试材,研究建立叶片的离体再生体系。用30~40 d继代的新梢顶部1~3节新展开的叶片作为外植体,分别接种在分化的培养基上,黑暗处理15 d, 昌红苹果叶片不定芽的最高再生率为100%。在6号培养基上,昌红苹果叶片的再生能力最高; 诱导叶片不定芽适宜的培养基为MS+TDZ 1.0 mg /L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30 g/L+ 琼脂 5.5 g/L。