膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch) Bunge)组织培养再生体系的建立

本研究以膜荚黄芪的子叶、下胚轴、幼茎、幼叶为外植体,诱导愈伤组织及再生芽,建立膜荚黄芪组织培养再生体系。结果表明,子叶是最佳的外植体。在6-BA与2,4-D或NAA培养基组合中,以MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织及芽诱导培养基。黄芪再生植株较难生根,在IAA、IBA和NAA激素培养基组合中,以1/2MS+IBA 2.0mg/L或1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率50%左右。     

苜蓿高频再生组织培养体系的优化

以3个品种紫花苜蓿7日龄无菌苗的下胚轴为外植体,以MS培养基为基础培养基,研究不同浓度激素配比对紫花苜蓿离体再生体系中愈伤组织的形成、不定芽诱导以及生根的影响。结果表明:金皇后、甘农1号、阿尔冈金愈伤组织诱导的最佳培养基分别为MS+2,4-D 2.5 mg/L+6-BA 0.5mg/L、MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L、MS+2,4-D 3.0 mg/L+KT 1.0 mg/L;不定芽诱导的最佳培养基分别为MS+6-BA 2.0 mg/L+CH 0.5 g/L、MS+NAA 0.3 mg/L+KT 0.5 mg/L、MS+KT 1.2 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg/L。     

南瓜离体培养及植株再生的研究

研究了不同外植体、消毒方法、激素水平等对南瓜离体培养及植株再生的影响。结果表明:以子叶作为外植体可以通过愈伤组织途径之后形成再生植株;而以子叶节作为外植体可以直接诱导不定芽形成再生植株。诱导不定芽的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA;诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D;诱导南瓜不定根的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LIAA。     

野生卷丹不定芽诱导及再生体系的建立

为野生卷丹种质资源的繁殖、保存与利用提供依据,采用随机区组试验方法探究NAA、6-BA和2,4-D不同配比对野生卷丹鳞茎不定芽诱导及再生植株形成的影响。结果表明:相同6-BA浓度下,生长素对野生卷丹鳞茎不定芽的诱导作用依次为NAANNA+2,4-D2,4-D,最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.3 mg/L,平均产芽6.21个;最佳增殖培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA1.0mg/L,其增殖系数3.46;最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 1.0mg/L,平均生根6.20个。     

双单倍体南瓜后代子叶离体再生植株研究

【目的】探索一种快速扩繁南瓜双单倍体植株的技术,以扩大双单倍体植株的数量,提高其育种效率。【方法】以双单倍体南瓜后代子叶为外植体,在MS培养基中分别添加不同质量浓度的6-BA（1.0,4.0 mg/L）和NAA（0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L）,筛选最佳组合;在此基础上,继续添加不同质量浓度的2,4-D（0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L）,筛选3种激素的最佳组合。在MS＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的不定芽诱导培养基上,研究其对不同苗龄子叶的诱导效果。将不定芽接种在含不同质量浓度NAA (0.05, 0.1, 0.2, 0.5 mg/L)的MS生根培养基上,比较生根率和根系生长势。【结果】在诱芽培养基中,添加2种激素时,以6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的MS培养基诱导率最高,为66.67％,分化系数为3.89;添加3种激素时,以6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L＋2,4-D 1.5 mg/L的MS培养基诱导率最高,达80.95％,分化系数为4.12。当子叶展开后苗龄为3 d时,不定芽诱导率相对较大,为77.42％。不定芽在MS+0.1 mg/L NAA培养基上生根效果最好,根系生长健壮,生根率达100%。【结论】双单倍体南瓜后代子叶离体再生的适宜激素质量浓度组合为MS＋6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L;以展开后3 d苗龄的子叶作为外植体诱导效果最好;MS+0.1 mg/L NAA是不定芽诱导生根的最适培养基。     

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为野生卷丹种质资源的繁殖、保存与利用提供依据,采用随机区组试验方法探究NAA、6-BA和2,4-D不同配比对野生卷丹鳞茎不定芽诱导及再生植株形成的影响.结果表明:相同6-BA浓度下,生长素对野生卷丹鳞茎不定芽的诱导作用依次为NAA＞NNA+2,4-D＞2,4-D,最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,平均产芽6.21个;最佳增殖培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L,其增殖系数3.46;最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 1.0 mg/L,平均生根6.20个.     

激素水平对紫叶酢浆草分化增殖的影响

研究了不同外植体和激素水平对紫叶酢浆草组织培养的影响。结果表明:紫叶酢浆草的叶片比叶柄更容易分化出不定芽,是最适宜的外植体;诱导不定芽分化的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L,不定芽增殖的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,试管苗在MS+2,4-D0.5mg/L培养基上生根较好。     

苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

以苜蓿5～7 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+蔗糖10.0 g/L。     

香叶天竺葵组培快繁体系的研究

以香叶天竺葵无菌苗叶片为外植体,MS为基本培养基进行组培快繁研究,结果表明:愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;不定芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系长势良好.     

大蒜休眠芽愈伤诱导和植株再生

本研究以优良品系‘金乡大蒜'休眠芽为外植体,成功地建立了再生体系.基本培养基为MS,在添加了2,4-D 2.mg/L的培养基上最适于休眠芽愈伤诱导,愈伤诱导率为99.5%,黄色颗粒愈伤诱导率为100%,愈伤最佳继代培养基为MS+2,4-D 2-0 mg/L;在最佳分化培养基MS+6-BA3.0 mg/L上,黄色愈伤分化率为98.6%,芽最佳生长培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+KT1.0 mg/L+GA0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L,且适于芽生长的最佳温度为20℃;试管苗最佳生根培养基为MS+NAA0.2 mg/L,生根率达到92.4%;生根的试管苗移栽到装有田园土的土盆中,其存活率达到82%.本试验为今后开展大蒜遗传转化和体系胞突变体筛选工作奠定了良好的实验基础.     

秦岭野生宜昌百合的组织培养研究

为了有效地保存、扩繁秦岭野生宜昌百合资源,以秦岭野生宜昌百合为材料,研究了鳞片和叶片不同部位,以及不同激素配比对不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明,鳞片诱导不定芽的适宜培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,鳞片分化不定芽的能力为基部>中部>上部,三者之间差异极显著;叶片诱导不定芽的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D,叶片不定芽的诱导率为基部高,中部和尖部低,且基部与中部和尖部差异极显著;不定芽增殖的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;适宜生根的培养基为1/2MS+0.4 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭(AC)。以上结果表明,鳞片和叶片分化不定芽存在明显的位置效应,6-BA和NAA配合对不定芽增殖有良好的效果,NAA和AC配合适宜生根。     

白玉龙火龙果不同外植体的离体培养

【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂与浓度及其组合对白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节不定芽诱导及茎段增殖与生根的影响。【结果】白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节均能直接诱导不定芽发生。其中,16个正交处理均能诱导子叶节不定芽发生,其最优诱导培养基为WPM+0.50 mg/L TDZ+0.50 mg/L CPPU+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,诱导率为87.1%~100.0%;子叶仅1个处理未能诱导出不定芽,最高诱导率为36.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.50 mg/L TDZ+0.05mg/L CPPU+2.00 mg/L 6-BA+0 mg/L NAA;下胚轴仅5个处理能诱导出不定芽,最高诱导率仅3.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.05 mg/L TDZ+2.00 mg/L CPPU+1.00 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA。茎段去顶处理有利于腋芽的诱导萌发,去顶处理的最大增殖系数为4.2,不去顶处理的最大增殖系数为3.1,其最优增殖培养基为WPM+0.50 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA。NAA处理能促进茎段生根,适宜的生根培养基为1/2MS+0.1~0.5 mg/L NAA,生根率达100.0%。【结论】不同基本培养基、植物生长调节剂与浓度及其组合均能诱导白玉龙火龙果子叶、下胚轴和子叶节不定芽发生及茎段芽增殖和不定根产生。其中,不定芽诱导以子叶节最易诱导发生,其次为子叶,下胚轴较难;茎段芽增殖和不定根诱导均较容易。     

金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探

[目的]探索金边北海道黄杨再生体系建立的方法和条件。[方法]以MS为基本培养基,配置不同种类和不同浓度激素的培养基,对金边北海道黄杨幼嫩叶片和腋芽进行不定芽诱导培养、增殖培养和生根培养。[结果]MS可作为金边北海道黄杨再生体系的基本培养基。6-BA配合NAA有利于叶片、腋芽愈伤组织和不定芽的诱导,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基效果最佳,腋芽诱导率高达66.67%。较高浓度的6-BA配合较低浓度的NAA有利于丛生芽的增殖,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基增殖效果较理想,增殖率高达328.57%。MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖3%或1/4MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖2%可获得最佳生根效果。[结论]该体系的建立为金边北海道黄杨种苗快速繁殖提供参考依据。     

白菜类作物子叶高频再生体系的建立

以大白菜品种北京80号、油青矮脚45天菜心、四季菜心王的带柄子叶为外植体,研究不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂质量浓度对不定芽再生的影响。结果表明,北京80号的最佳培养基为MS+5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2mg/L AgNO3,再生频率为83.6%;油青矮脚45天菜心和四季菜心王的最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+2 mg/L AgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。3个基因型的带柄子叶在0.5～1mg/L 2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。4～5d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的质量浓度以12g/L为宜。通过不定芽继代培养和生根驯化建立白菜类作物较高再生频率的再生体系。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

白背三七组织培养技术

【目的】探讨不同激素配比对白背三七离体繁殖的影响,建立白背三七种苗再生繁殖体系。【方法】以当年生枝条为外植体,采用不同激素组合（0～0.1 mg/L 6-BA、0～0.2 mg/L KT、0～0.2 mg/L 2,4-D以及0～0.4 mg/L IBA、0～0.4 mg/L NAA）对带芽茎段进行不定芽诱导和增殖、壮苗和生根培养。【结果】在添加相同KT、2,4-D条件下,添加过高的6-BA（1.0 mg/L）会降低丛生芽增殖系数;而在相同6-BA、KT的条件下,添加2,4-D可提高芽的增殖,以在培养基MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.2 mg/L 2,4-D中茎段丛芽增殖系数最高,为15.4,丛生苗较壮、生长良好。不同IBA、NAA组合均可诱导丛生芽生根,但以培养基MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA的生根效果最好,接种10 d开始生根,15 d时生根率为85.3%,每株平均生根数为4~9条,移栽成活率可达82.3%。【结论】建立了白背三七种苗再生繁殖体系,可为白背三七的产业化生产提供技术支撑。     

大活组织培养及再生体系建立的研究

以大活的嫩茎为外植体,进行了大活组织培养及再生体系建立的研究。试验结果表明:MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L是愈伤组织诱导和继代增殖的理想培养基;在光照条件下MS+ZT 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L是愈伤组织分化的理想培养基;1/4MS+IAA 0.5 mg/L是不定芽生根和试管苗生根继代增殖的理想培养基。试管苗移栽成活率为92.1%,定植后成活率为96.8%。     

防风愈伤组织诱导及植株再生体系研究

以防风为材料,研究不同外植体、激素组合、培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,茎段是防风组织培养较为理想的外植体材料。诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA,最高出愈率为96.7%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高诱导率为75%;诱导根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,生根率达65%;组培苗的移栽成活率达80%。     

长寿花离体快繁研究

[目的]研究长寿花离体快繁的培养基配方和培养条件。[方法]以长寿花的幼嫩叶片作为外植体,以MS为基本培养基,诱导出不定芽进行快速繁殖,并比较添加4种浓度的BA和NAA对长寿花不定芽的诱导和生根效果的影响。[结果]长寿花幼嫩叶片的诱导和生长与生长素、细胞分裂素2种激素有关系,两者的配比直接影响了叶片的再生频率。长寿花叶片诱导和不定芽增殖的最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2 MS+NAA0.5 mg/L,不定芽在此培养基上的生根率最高,移栽成活率为95%。通过直接诱导可获得较高的不定芽诱导率,同时增殖培养的增殖系数达到10,大大缩短了常规育苗时间。[结论]该研究建立了长寿花组织培养的再生体系,为其快速繁殖及大规模的工厂化育苗提供科学依据。     

中国石竹叶片愈伤组织形成·分化及植株再生

[目的]为了研究中国石竹叶片愈伤组织的诱导及植株的再生。[方法]通过叶片愈伤组织诱导再分化和叶片直接诱导不定芽2种途径获得了石竹的再生植株。[结果]以植株中部带叶基的叶片愈伤组织诱导再分化效果最好。叶片愈伤组织在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L培养基中不定芽分化率最高(50%～60%)。幼叶在MS+NAA 0.3mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上培养47d可直接诱导出不定芽。与愈伤组织分化成芽相比,幼叶直接诱导不定芽芽数少,但生长快,苗较高。最佳增殖培养基是MS+6-BA 0.2mg/L+IAA 0.2mg/L,最佳生根培养基是1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+0.2%活性碳。[结论]叶片作为外植体具有来源丰富、取材方便、操作简单的优点,探讨植物叶片的再生分化特性具有实际的意义。