富钼酿酒酵母菌株的选育及其生物学功能研究

以酿酒酵母单倍体菌株SY10作为出发菌株,采用紫外线、微波复合诱变处理其原生质体,选育出1株对钼高抗性突变株SY10-186-8,其抗性水平为400 mmol/L,是出发菌株的5.71倍。生物学功能结果表明,与出发菌株相比,该突变株拮抗紫外线、清除羟基自由基和超氧自由基能力以及黄嘌呤氧化酶活性均显著增强。经50世代培养,该突变菌株遗传稳定性良好,达90%以上。     

基于诱变和抗性突变的多杀霉素高产菌株的选育

为提高菌株发酵液中多杀霉素产量,本试验利用常温常压等离子体(ARTP)诱变、紫外(UV)诱变和抗性突变技术处理刺糖多孢菌株DS0322-3,结合高通量筛选和摇瓶发酵选育多杀霉素高产菌株。结果显示,通过ARTP诱变和UV诱变育种,筛选获得384株突变菌株,其中有9株突变菌株的效价较原始菌株增加10%以上,且1株效价较原始菌株增加20%以上,经过ARTP诱变30 s,得到的突变菌株AR1019-4效价为547.78 mg/L,较原始菌株增加了21.88%。以ARTP诱变得到的高产突变菌株AR1019-4为出发菌株,通过抗性突变筛选技术筛选获得1 152株突变株,其中13株突变菌株的效价较出发菌株增加10%以上,且2株效价较出发菌株增加15%以上,在0.5 mg/L的氯霉素平板上得到的突变菌株Chl 1215-5效价为637.12 mg/L,较出发菌株增加了16.31%;12 mg/L的庆大霉素抗性突变筛选到了突变菌株Gen 1207-8,效价为597.59 mg/L,该菌株的Spinosyn D组分由10%～15%增加至30%～35%左右,经遗传稳定性试验验证,突变菌株Chl1215-5和Gen1207-8可稳定遗传。试验结果表明ARTP诱变、紫外诱变和抗生素突变技术对选育多杀霉素高产菌株具有重要意义。     

高产洛蒙真菌素的洛蒙德链霉菌S015的诱变筛选

通过洛蒙真菌素的结构类似物吩嗪-1-羧酸(Phenzine-1-catboxylic acid,PCA)对1株洛蒙真菌素的产生菌——洛蒙德链霉菌野生菌株S015诱变,筛选到突变株S015-P34,其洛蒙真菌素的产量达到了(106.0±4.4)mg/L,是野生株的3.2倍;通过作用于核糖体的抗生素利福平和庆大霉素分别对菌株S015诱变,筛选到突变株S015-R6和S015-G11,洛蒙真菌素的产量分别达到了(103.4±0.1)mg/L和(81.2±2.5)mg/L,是野生株的3.2倍和2.5倍;最后,结合PCA和利福平的复合抗性筛选,得到突变株S015-R646,洛蒙真菌素的产量为(168.0±2.2)mg/L,是野生型菌株的5.1倍;又通过添加0.1 mmol/LFeCl_3发酵培养,使突变株S015-R646的洛蒙真菌素产量达到(258.7±5.7)mg/L。这试验结果可为其他产吩嗪类活性物质的链霉菌的高产菌株的诱变筛选提供参考。     

拮抗木霉菌株T32的紫外线诱变改良

采用紫外线诱变处理与含药(百菌清)培养基驯化相结合的方法,对拮抗木霉菌株T32进行改良,获得了4株在百菌清杀菌剂2 000 mg/L浓度水平下仍能较好生长的抗性菌株,并通过测定其生长速率、产孢量、敏感性、拮抗作用以及遗传稳定性等指标,筛选出了性状优良的抗性菌株T32-5-10m。试验结果表明,经诱变的木霉菌株T32-5-10m与亲本木霉菌株T32相比较,其抗药性提高了20倍,生长速率和产孢能力均高于亲本菌株,连续转接10代,其抗药性十分稳定,且对供试3种土传病原真菌的抑制率达87.56%～89.11%。     

重金属抗性大豆根瘤内生菌的筛选及生物学特性

对努鲁尔虎山脉北麓内蒙古敖汉旗段和河南商丘地区采集大豆[Glycine max(L.)Merr]根瘤进行内生菌的分离纯化,对获得的74株菌株分别进行重金属(Pb2+、Cu2+、Cr6+、Hg2+)抗性测定,对筛选菌株进行生物学特征研究。结果筛选出4株抗性较强的优良菌株,即SQLD42、SQLD47、SQLD67和SQLD71。对重金属的抗性大小表现为:Pb2+(5 mmol/L)Cu2+(1.6 mmol/L)Cr6+(1.2 mmol/L)Hg2+(0.075 mmol/L)。筛选的4株菌均来源于努鲁尔山北麓的内蒙古敖汉旗段,其抗逆性与宿主植物大豆的生长环境密切相关。     

农用抗生素瑞拉菌素高产菌株的选育

以委内瑞拉链霉菌秦岭变种RL-1(Streptomycesvenezuelae var.qinlingensis RL-1)为出发菌株,应用链霉素抗性筛选法,将经过紫外线诱变处理后的孢子涂布于含有链霉素最小抑制浓度(10μg/mL)的培养基平板上,获得146株链霉素抗性突变株,并从中筛选到对稻瘟病菌拮抗性能为出发菌株的3.77倍、且遗传稳定性良好的高产菌株Glx-93.进一步生测试验表明,突变株Glx-93对5种病原真菌和4种病原细菌的抗菌活性比原始菌株有显著提高.     

利用抗生素抗性筛选技术和基因组重排技术选育刺糖多孢菌提高多杀菌素产量

以刺糖多孢菌(5accharopolyspora spinosa)ATCC49460为出发菌株,通过抗生素抗性筛选技木和基因组重排技术,提高次生代谢产物多杀菌素的产量。结果表明:通过抗生素抗性筛选技术获得的链霉素抗性菌株(Str-70)多杀菌素产量提高3.3倍,庆大霉素抗性菌株(Gen-139)多杀菌素产量提高2.9倍。将以上两种菌株再次作为出发菌株进行四轮基因组重排,获得的同时具有两种抗性的菌株(SG4-34)多杀菌素产量提高6倍。     

谷胱甘肽产生菌株航天育种初探

以谷胱甘肽产生菌酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)Y-15为出发菌株,经"实践八号"育种卫星搭载后,以放线菌素D作筛选标记,获得一株抗性突变体HY-90,经摇瓶发酵,谷胱甘肽产量达到123.04 mg/L,是出发菌株的1.7倍,其胞内含量为14.86 mg/g,是出发菌株的1.5倍。此外,本试验还对谷胱甘肽乙醇抽提法作了优化。结果表明:将酵母干菌体按质量体积比1∶90∶10,用40%的乙醇和25%的偏磷酸进行抽提,可提高提取率。     

高毒力杀蝗绿僵菌的紫外线诱变选育

以金龟子绿僵菌M105复壮菌株M1053为出发菌株,通过紫外线诱变选育,获得Pr1酶活是出发菌株1.36倍的诱变株M105-52。经测定,诱变株的遗传性能稳定,紫外线抗性和杀蝗毒力均有显著提高。     

梧宁霉素高产菌株选育的研究

亚硝酸与紫外线复合诱变、紫外线诱变、亚硝酸诱变对菌株WN-4的孢子依次进行处理,采用链霉素抗性突变株筛选和琼脂块筛选法,得到一株梧宁霉素高产菌株W11;其生物效价是出发菌株的1.27倍。     

不同叶色水稻农艺性状的比较

以1个超绿水稻Gw19-3和4个常规水稻品系SG9-4、SY10-1、WS62-8、WS22-7为试验材料,对其农艺性状进行了初步的研究.结果表明:超绿水稻在株高、剑叶长度、单株穗教、每穗实粒数、结实率和千柱重等方面与其它品系存在差异.株高、剑叶长,千粒重、每穗实粒数等性状差异达到显著水平.     

光合细菌和生物炭对污染土壤中铬的稳定化效果及小白菜生长的影响

为了研究光合细菌和生物炭对铬污染土壤的修复效果,采用光合细菌球形红细菌(Rhodobacter sphaeroides)H菌株和生物炭为修复材料,模拟铬污染土壤为研究对象,通过盆栽试验研究了H菌株、生物炭、H菌株和生物炭联合对铬污染土壤中铬的稳定化效果以及对小白菜的株高、根长、叶绿素和可溶性糖含量的影响。结果表明:修复30 d后,H菌株和生物炭联合修复的效果要优于单施H菌株和生物炭,并且当菌株添加量为10~8CFU·g~(-1)和生物炭添加量(质量比)为1%即T6处理时,修复效果最好,较单加H菌株和生物炭,铬的生物可利用性分别降低了8.03%和9.11%,土壤中的过氧化氢酶、脲酶、转化酶和碱性磷酸酶活性比不添加菌株和生物炭即CK处理分别升高了58.72%、98.25%、136.58%和61.03%。T6处理对铬胁迫下小白菜的促生效果显著,与CK组相比,小白菜植株地上部分和根系的铬含量分别降低了26.67%和14.84%,极大地促进了铬胁迫下小白菜植株的生长,叶片的叶绿素和可溶性糖含量分别升高了30.08%和17.39%。经XPS和XRD分析结果推测H菌株和生物炭的主要修复机制为混合还原和静电吸附,二者对铬污染土壤具有较好的修复效果,且对小白菜具有较好的促生效果。     

杨木APMP废液的生物转化及应用

[目的]研究杨木APMP废液培养枯草芽孢杆菌SY1菌株(Bacillus subtilis)的适宜条件和转化液对番茄病原菌的拮抗作用。[方法]通过单因素实验对培养条件进行了初步优化;利用平板扩散法测定转化液对番茄病原菌的抑制作用。[结果]杨木APMP废液培养SY1菌株较适宜的条件为:pH值8.0,装液量75/250 m l,接种量5%,温度35℃;在此培养条件下SY1菌株的活芽孢数达3.96×108CFU/m l,废液COD转化率达59.52%。同时发酵液对供试的4种病原菌均有较强的抑菌作用。[结论]该研究为利用杨木APMP废液培养枯草芽孢杆菌的工业深层发酵提供了依据。     

11株草茎点霉培养特征、致病力及RAPD分析

从辽宁的沈阳、抚顺、鞍山等地采集的鸭跖草叶斑病病叶上共分离得到11个菌株。这些菌株在培养形态、生长速率、产孢能力、致病能力和产毒能力方面差异显著。其中SY1菌株的生长速率最快,SY4菌株的产孢能力最强。SYAU-06菌株的致病力最强,接种在鸭跖草叶片上发病率达到97.33%,病情指数为87.23,显著高于其他菌株。在液体培养基中SYAU-06菌株的产毒量最多,毒素的致病性也最强,在鸭跖草叶片上可形成面积为13.63 mm2的病斑。11个菌株基因组DNA经RAPD分析表明,不同菌株间扩增图谱差别明显,表现出各菌株间明显的遗传多态性。经聚类分析显示草茎点霉不同菌株的RAPD类群与致病力有一定的相关性。     

转Bt＋CpTI基因棉对烟粉虱种群动态影响及其几丁质酶和β-1，3-葡聚糖酶活性变化

本研究调查了转Bt＋CpTI基因棉SGK321棉田、其亲本常规棉SY321棉田以及间作棉田烟粉虱成虫种群的数量，测定了不同时期SGK321棉与SY321棉叶片中几丁质酶、β-1，3-葡聚糖酶的活性及蛋白质的含量。结果表明：在整个生长期间，SGK321棉田烟粉虱的种群数量一直高于SY321棉田和间作棉田。烟粉虱取食的SGK321植株叶片几丁质酶活性呈下降-上升-下降-上升的趋势；SY321上部叶片中呈下降-上升-下降-上升的趋势，其下部叶片为先下降后上升趋势；SGK321叶片中β-1，3-葡聚糖酶活性变化呈下降-上升-下降-上升趋势，而SY321叶片基本上均呈先下降后上升趋势；SY321与SGK321上部叶片中蛋白质相对含量均呈先上升后逐渐下降趋势，下部叶片与上部叶片相似但略有不同。SGK321与SY321处理植株叶片几丁质酶活性之间没有明显差异；SGK321处理植株叶片β-1，3-葡聚糖酶的活性多数时期高于SY321。探讨了棉花防御反应与棉田烟粉虱种群数量差异的相关性，以利于揭示双价抗虫棉对烟粉虱的影响及其生理防御机制，为烟粉虱的综合治理以及棉花育种等提供理论依据。     

实时实地氮肥管理对水稻产量和稻米品质的影响

【目的】探讨实时实地氮肥管理对水稻产量和品质的影响。【方法】试验于2004和2005年在大田条件下，以两优培九、汕优63为材料研究了不同叶绿素仪（SPAD）预设阈值指导下的实时实地氮肥管理方式的产量与产量形成以及相应的稻米品质特性。【结果】在实时氮肥管理（RTNM）模式下，两优培九和汕优63各施氮处理比不施氮处理增产幅度分别达21.12%～57.65%和15.00%～31.18%。在实地氮肥管理（SSNM）模式下，两优培九和汕优63 SSNM处理比不施氮小区增产幅度分别达45.44%～50.71%和28.53%～32.40%。两优培九SPAD阈值分别由34～45的RTNM模式下，当SPAD阈值介于38～41之间时（氮肥用量120～165 kgN•ha-1）可以改善稻米的外观品质和加工品质；汕优63则以SPAD阈值36～39（氮肥用量：120～165 kgN•ha-1）范围内有利于改善米质。SSNM模式下以SPAD施肥阈值为37-39（氮肥用量130 kgN•ha-1）进行氮肥运筹能显著改善两优培九的加工品质、外观品质和营养品质；SSNM模式下汕优63以SPAD阈值为35～37时稻米品质相对较好，同时产量也比较高。【结论】实时实地氮肥管理能较好地协调水稻产量和品质的关系，关键措施是依据品种特性确定适宜的预设SPAD阈值。在本试验条件下，实时实地氮肥管理模式两优培九以SPAD 38～39、汕优63以SPAD 35～37左右时能获得较高的产量和部分地改善米质，可以作为生产上应用实时实地氮肥管理时的推荐阈值。     

利用种子储藏蛋白电泳分析小麦材料SY95-71及其亲本的遗传变异

运用种子储藏蛋白电泳方法 ,对来源于六倍体小黑麦Eronga83和普通小麦品种凡 6杂交培育的小麦材料SY95 - 71进行了遗传变异分析。酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (APAGE)对种子醇溶蛋白的组成分析认为 ,与小麦亲本相比 ,SY95 - 71缺少了 1D染色体上的Gli-D1带 ,这在普通小麦品种 (系 )中较为少见 ,其他醇溶蛋白带均来自双亲 ,而与小黑麦亲本更为接近。SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)对高分子谷蛋白亚基的组成分析认为 ,SY95 - 71的位点Glu -A1和Glu -D1与两个亲本不同 ,而Glu -B1来自Eronga83,这些遗传变异是来源于培育过程中的基因重组。另外对SY95 - 71的感条锈病性与储藏蛋白位点的变异的关系以及六倍体小黑麦对小麦种质创新的价值进行了讨论。     

不同来源绿僵菌菌株对椰心叶甲的毒力测定

 利用绿僵菌菌株SY-2,WC-1,SX-2,HK-5 QH-4,HY-4,YP-6,SS-2对椰心叶甲幼虫和成虫的毒力进行了测定, 采用时间-剂量-死亡率模型分析了绿僵菌对椰心叶甲的毒力。结果表明,其致病力强弱与菌株种类和接种剂量有密切关系,在1.0×106-1.0×108个/mL孢子悬浮液接种处理后第10天,椰心叶甲3龄幼虫累积死亡率均为74%～92%,接种SY-2菌株的孢子浓度在1.0×108个/mL情况时,对3龄幼虫的死亡率为96.70%,LT50为3.8d,与HY-4,YP-6,和SS-2,(死亡率88.36%)相比具有显著差异（P<0.05）;在1.0×106~10×108个/mL孢子悬浮液接种处理后第10天,椰心叶甲成虫累积死亡率53%～76%,接种SY 2菌株的孢子浓度在1.0×108个/mL情况时,对成虫的死亡率为85.03%,LT50为5.4d,与SS-2（死亡率为70%）相比,SY-2,WC-1和SX-2具有显著差异（P<0.05）;另外,观察发现,SY-2菌株具有很强的2次侵染能力。     

南瓜中铬的化学形态及其含量研究

对8个品种老熟南瓜中铬含量进行了测定,分析了铬的不同化学形态及分布。结果表明:不可溶态总铬(CrT1)占总铬含量的8.92％,可溶态总铬(CrTS)占总铬含量的91.08％,三价铬(Cr3+)占CrTS的91.25％,六价铬(Cr6+)占CrTS的8.75％,可溶态有机铬(CrO)占CrTS的4.03％;不同栽培种(中国南瓜和印度南瓜中的西洋南瓜)的铬含量高低无规律性,不同栽培品种之间铬含量差异明显。