白僵菌菌株毒力与Pr1蛋白酶活性相关性研究

利用专一性短肽底物Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA对不同突变体菌株进行Pr1蛋白酶活性测定,同时应用玉米螟3龄幼虫对不同突变体菌株进行毒力测定,求算LT50值。以不同突变体菌株的Pr1蛋白酶比酶活为自变量,菌株毒力LT50值为因变量,进行相关性分析,得到突变体菌株的Pr1蛋白酶比酶活与毒力LT50值的线性回归方程:y=-2.411 6x+31.405,r2=0.521 6。由线性回归方程可以得出:不同突变体菌株的Pr1蛋白酶比酶活与菌株毒力LT50值呈负相关趋势,说明菌株的Pr1蛋白酶活性越高,菌株的LT50值就越低,菌株的毒力也就越大。两者相关系数r=-0.722 2,在0.05水平上相关显著,因此建议将Pr1蛋白酶的酶活性作为菌株初筛时的一个补充指标,但由于Pr1蛋白酶比酶活与菌株毒力LT50值相关性未达极显著水平,所以不建议将Pr1蛋白酶的酶活性作为菌株初筛时的替代指标。     

台湾黑僵菌F061菌株孢外酶活性及其对柑橘粉蚧毒力的相关性

室内测定台湾黑僵菌F061菌株的孢外酶活性及其对柑橘粉蚧的毒力,并通过线性回归分析探讨两者的相关性。结果表明:供试菌株的2种胞外酶活性均在1.00×10~8和1.00×107孢子·mL~(-1)2个处理时较高,其中蛋白酶活性达7.63U·mL~(-1)和7.61U·mL~(-1),几丁质酶活性达5.45U·mL~(-1)和5.67U·mL~(-1);供试菌株对柑橘粉蚧的LT50也在1.00×10~8和1.00×107孢子·mL~(-1)2个处理时较短,分别为4.98d和5.39d;线性回归分析表明,供试菌株对柑橘粉蚧的LT50与菌株蛋白酶活性呈显著负相关,与菌株几丁质酶活性呈中度负相关。可见,台湾黑僵菌F061菌株蛋白酶活性比几丁质酶活性强,在侵染柑橘粉蚧过程中起更直接的作用。     

化学杀虫剂对绿僵菌胞外蛋白酶和几丁质酶活性的影响

研究了几种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)胞外蛋白酶和几丁质酶活性的影响。结果表明,化学杀虫剂对绿僵菌的胞外蛋白酶和几丁质酶活性影响较大,供试的12株金龟子绿僵菌大部分菌株的胞外蛋白酶和几丁质酶活性均明显降低,仅有Ma202、Ma207菌株的胞外蛋白酶和几丁质酶活性略有提高。     

绿僵菌几丁质酶活性及其对椰心叶甲毒力的相关性分析

用液体培养法和琼脂平板透明圈法研究了6个绿僵菌菌株的几丁质酶产酶水平与其对椰心叶甲毒力的关系。结果显示,各菌株的毒力大小顺序为JF813E>JF86CJ、F883>Ma4>JF83G>JF842;对椰心叶甲成虫的LT50值在6.3~8.0d之间;液体培养法所测酶活变化范围为5.9~38.4 IU/mL,琼脂平板法所得比值在1.37~2.43之间。表明不同绿僵菌菌株的产酶水平存在明显差异,且产几丁质酶水平的高低与其对椰心叶甲的毒力有一定的相关性;几丁质酶活性可以作为一个参考指标对绿僵菌菌种进行初步筛选,但不能完全代替毒力测定而成为菌种质量性状的检测指标。     

继代移殖对球孢白僵菌蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活性的影响及与毒力的相关性

为探讨继代移殖对球孢白僵菌蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活性的影响及与毒力的相关性，以筛选得到的高毒力菌株B5、 BXS与低毒力菌株B11、BZ为出发菌株，通过连续接种松墨天牛幼虫获得H1、H2、H3、H4继代移殖菌株，而连续在PPDA培养基上转接，获得R1、R2、R3和R4继代移殖菌株。分别对各原始菌株与继代移殖菌株进行蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活性与毒力测定，并将每种酶活性与相应菌株对松墨天牛的半致死时间（LT50）作相关性分析。结果表明:高毒力菌株B5、BXS与低毒力菌株B11、BZ在PPDA培养基上继代移殖，随着各菌株对松墨天牛的毒力逐代下降，其蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活性也逐代降低；来源于松墨天牛的B5、BXS、B11菌株通过松墨天牛幼虫继代移殖后随着毒力逐代提高，3种酶活性也逐代上升，但来源于松毛虫的BZ菌株逐代之间3种酶活性差异不显著；相关性分析表明4个原始菌株与继代移殖菌株彼此间的LT50与3种酶活性间均呈极显著的直线负相关。      

基质诱导培养蜡蚧轮枝菌蓟马防控菌株的胞外酶活性及毒力变化

测定比较蜡蚧轮枝菌V07、V16063、V3450和Vp28等4株蓟马防控菌株在基质诱导培养前后的胞外酶活性及毒力变化。结果表明:基质诱导培养后供试菌株的胞外酶活性均有不同幅度的提高,蛋白酶活性提高幅度次序为V3450V16063V07Vp28,几丁质酶活性提高幅度次序为Vp28V07V3450V16063,但这种提高不会最终改变他们胞外酶活性的高低次序;基质诱导培养后供试菌株对榕母管蓟马成虫的毒力也均有明显提升,提升幅度次序为V16063V3450V07Vp28,但不同菌株间毒力的高低次序也不会因基质诱导培养而改变。可见,基质诱导培养虽可不同幅度地提高蓟马防控菌株的孢外酶活性及毒力,但不会改变不同菌株间孢外酶活性及毒力的高低次序。     

球孢白僵菌胞外酶的活性与其毒力的相关性

为了研究球孢白僵菌胞外酶的活性与其毒力的相关性,以黄粉虫为标准试虫测定9株球孢白僵菌的毒力,并分别测定其胞外蛋白酶、几丁质酶和脂肪酶的生产水平。相关分析表明,3种胞外酶活性与毒力的线性关系分别为y_1=-13.815 4x+185.954 4,r_1~2=0.495 7;y_2=-10.976 0x+58.977 0,r_2~2=0.432 5;y_3=-1.122 3x+8.469 5,r_3~2=0.830 3。由r~2值可以看出,胞外脂肪酶活性与毒力的线性关系最明显,脂肪酶活性可作为大量菌株毒力初筛的参考性指标。     

球孢白僵菌胞外蛋白酶产生水平及其与毒力关系的研究

检测了球孢白僵菌不同类型分离株的胞外蛋白酶产生水平,总体显示出继代培养将降低菌株胞外蛋白酶活性,胞外蛋白酶产生水平与菌株毒力有一定的协同性,但相关不显著。     

金龟子绿僵菌胞外蛋白酶活性与毒力的相关性

为研究金龟子绿僵菌蛋白酶活性与毒力的关系,以黄粉虫为试虫测定金龟子绿僵菌的毒力,采用Folin-酚试剂法对其胞外蛋白酶活性进行测定,并分析蛋白酶活性与毒力的关系。结果表明,不同菌株的蛋白酶活性差异较大,酶活性与毒力存在一定线性关系。胞外蛋白酶的活性可作为金龟子绿僵菌毒力判定的指标之一。     

Dh菌株胞外蛋白酶及几丁质酶的活性测定

对Dh菌株的胞外蛋白酶及几丁质酶的活性进行了测定，发现该菌的胞外蛋白酶足以碱性蛋白酶为主，兼含中性和酸忡蛋白酶组成的复合酶系，其中中性蛋白酶对酸碱和温度的稳定性较好，最适作用温度为45C；该茼胞外蛋白酶在虫尸培养基和明胶培养基上均可活跃地产生，不同温度下在明胶-琼脂平板培养基上培养3d后用15％HgCl处理后菌落周围显示出清晰透明的环状，产酶量在33C时达到最大值，随后减少；几丁质酶产酶高峰出现在4～5d。     

不同地理来源球孢白僵菌菌株的生物学特性

采集并分离来源于吉林省10个地区的15株野生球孢白僵菌菌株,比较了各菌株孢子萌发率、菌落直径、产孢量、胞外蛋白酶产生水平等指标的差异.结果表明:孢子萌发率高的菌株类型为孢子型,菌落生长迅速的菌株类型为菌丝型,介于孢子型和菌丝型菌株生物学特性之间的菌株类型为混合型;胞外蛋白酶产生水平与菌落形态特征不具相关性.筛选出菌株D4-2-1、CHL20可作为生物防治菌株.     

假大白菇深层发酵过程中胞外酶活性的变化

本文首次对假大白菇深层发酵过程中的5项生理指标与6种胞外酶的活性进行了测定,结果表明,菌丝生物量在第10 d达到最大值;pH值先降后升;胞外还原糖与蛋白质浓度分别于第5 d、第6 d达到峰值;胞外多糖含量在第6 d出现峰值;淀粉酶、CMC酶、纤维素脱脂棉酶与滤纸酶的酶活变化趋势相近;愈创木酚氧化酶与邻苯二酚氧化酶的酶活性很小。     

灰树花胞外多糖发酵条件优化研究

灰树花是一种营养丰富的药食两用真菌,其胞外多糖是一种具有抑制肿瘤、抗HIV、调节免疫等生理活性的真菌多糖.研究了碳源、氮源、生长促进剂和无机盐对灰树花产胞外多糖的影响,结果表明,灰树化产胞外多糖较佳的培养基组合为每升培养基添加葡萄糖50 g、黄豆粉40 g、豆油1 g、KH2PO44 g、MgSO4 2 g,每升培养基可得到灰树花胞外多糖3.78 g.     

金顶侧耳不同生长期几种胞外酶活性变化

用发酵的棉籽壳盆栽金顶侧耳,测定其生长发育期间的胞外酶活性变化。结果表明:金顶侧耳具有完整的胞外纤维素酶系,胞外羧甲基纤维素酶(CMC酶)、滤纸纤维素酶(FP酶)和半纤维素酶(HC酶)活性高峰对应于子实体的生长发育期,胞外蛋白酶和果胶酶活性在原基出现后升高并一直维持在较高水平,胞外淀粉酶、漆酶和过氧化物酶活性均随栽培时间的延长逐渐下降。     

栽培基质对巴西蘑菇胞外酶活性的影响

以棉籽壳和麦草2种培养基为对照，探讨巴西蘑菇在棉籽壳和麦草混合培养基中生长期间几种主要胞外酶的活性变化。结果表明：在3种培养基中，羧甲基纤维素酶(CMC酶)、滤纸纤维素酶(FP酶)、半纤维素酶(HC酶)、淀粉酶(唧ylase)和漆酶(1accase)活性变化趋势大致相同；棉籽壳麦草混合培养基中的这5种胞外酶活性总体上均比棉籽壳培养基和麦草培养基中的这5种胞外酶活性高；将棉籽壳和麦草2种主料搭配使用比用单一主料栽培巴西蘑菇生物学效率高，这与棉籽壳麦草混合培养基中较高的胞外酶活性有关。     

鸡腿菇对总状炭角菌生长发育及其胞外酶活性的影响

将总状炭角菌分别与鸡腿菇、平菇、香菇、黄伞进行平板对峙培养和出菇试验,并测定不同浓度鸡腿菇培养滤液对总状炭角菌胞外酶活性和生物量的影响。结果表明,总状炭角菌仅与鸡腿菇有很强的伴生关系,有鸡腿菇生长的地方才能生长总状炭角菌;在供试体积分数(10%-40%)范围内,随着鸡腿菇培养滤液体积分数的增加,总状炭角菌的生物量增大,羧甲基纤维素酶(CMCase)、漆酶(Laccase)和邻苯二酚氧化酶(Pyrocatechase)的活性增高,对照及体积分数40%鸡腿菇培养滤液高温处理和未高温处理的总状炭角菌生物量分别是3.22,5.00和6.57 mg/mL;对照与体积分数40%鸡腿菇培养滤液高温处理的总状炭角菌CMC酶、漆酶和邻苯二酚氧化酶活力分别为0.063和0.11 U,0.583和1.4 U,0.217和0.7 U。可见,鸡腿菇培养滤液中含有促进总状炭角菌菌丝生长和胞外酶活性提高的活性物质。     

白灵菇生理生化研究进展

近年来,珍稀食用菌白灵菇越来越受到科技工作者的关注,对其分析与研究的范围也更加广泛和深入。综述了白灵菇的营养成分、胞内胞外多糖、菌丝体生长因子、生长调节物质、生长发育过程中胞外酶活性等生理生化方面研究的最新进展。     

鸡腿菇胞外多糖发酵条件的研究

以胞外多糖产量为指标对鸡腿菇(Coprinus comatus)的发酵条件进行研究.结果表明,其最佳培养基组成为:玉米粉3.0%,酵母粉1.0%,葡萄糖 2.0%,KH2PO4 0.20% ,MgSO4·7H2O 0.15%,VB1 15 mg·L-1;培养温度22℃,pH6.1,发酵时间为96 h.     

周毛德克斯氏菌胞外多糖化学组分分析

对周毛德克斯氏菌胞外多糖提取、纯化方法的研究表明该多糖最佳培养时间为３０±２ｈ，粘度为６．７７－９．２７Ｐａ·ｓ，离心可除去菌体，添加质量分数为１×１０－２的ＮａＣｌ可减少沉淀多糖所需的乙醇用量３／５．经高效液相色谱法对该胞外多糖组分分析，结果表明其由鼠李糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、果糖和两种未知成分组成．     

胞外呼吸菌在污染物迁移与转化过程中的应用进展

胞外呼吸菌是在厌氧条件下氧化有机物产生电子，进而将电子传递至胞外电子受体并产生能量维持自身生长的一类微生物，在重金属和有机污染物迁移转化过程中发挥着重要作用，且菌群的协同作用效果较单一微生物更为显著。胞外呼吸菌在自然环境中广泛存在，主要集中在变形菌门（Proteobacteria）、放线菌门（Acidobacteria）和厚壁菌门（Firmicutes），且多数为革兰氏阴性菌，其中希瓦氏菌（Shewanella oneidensisi MR-1）和地杆菌（Geobacter sulfurreducens）是研究较为深入的胞外呼吸模式菌。目前已知的5种胞外电子传递机制包括直接电子传递、电子穿梭体、应电运动、纳米导线和细胞间电子传递机制，各种机制非独立存在而是共同作用以促进污染物降解。文章从胞外呼吸菌的种类、胞内与胞外电子传递机制等方面进行综述，并着重论述了胞外呼吸菌在污染物迁移转化中的最新应用进展，为更好地发挥其环境效应提供参考。