高三尖杉酯碱、血栓通与地塞米松联合对翼状胬肉成纤维细胞的抑制效果

用中药高三尖杉酯碱（Ｈｏｍｏｈａｒｒｉｎｇｔｏｎｉｎｅ）及血栓通（ＸｕｅＳｈｕａｎＴｏｎｇ）与地塞米松（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）联合应用，对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞抑制的结果表明：前两药的给药浓度分别在１０－６Ｍ／Ｌ及３ｇ／Ｌ时，抑制率为５０．４％及６４．３％，均有明显的抑制作用及相应的细胞形态学改变。当高三尖杉酯碱给药浓度为１０－４Ｍ／Ｌ时．其细胞增殖抑制率达９１．８％，镜下基本见不到正常细胞。而当两药分别与地塞米松联合应用时，呈现比单一药物应用时的药量减少而药效增强。     

篦子三尖杉产高三尖杉酯碱内生真菌的分离和筛选

为了从珍稀濒危药用植物篦子三尖杉中分离、筛选产高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)的内生真菌,通过分离培养,获得20株培养性状不同的菌株,皆未发现产孢结构。PDA液体发酵后提取和浓缩各菌株的总生物碱成分,HPLC分析发现,菌株12号和20号在HHT保留时间(2.532 min)上有显著吸收峰,保留时间分别为2.493和2.563 min。初步表明,该菌株具有HHT生产能力,可为深入研究微生物源药用活性成分HHT提供可能。     

篦子三尖杉产高三尖杉酯碱内生真菌的分离与鉴定

为从药用植物篦子三尖杉中分离筛选产高三尖杉酯碱的内生真菌,采用枝叶外植体表面消毒后接种在PDA平板基上培养的方法分离筛选内生真菌,并对分离菌株进行了HPLC分析和ITS分子鉴定。结果表明:筛选出的10个菌株菌落形态和显微结构有明显差异,其中,gyzy-7、gyzy-8、gyzy-9和gyzy-11具产孢结构;gyzy-6、gyzy-8和gyzy-9可产生高三尖杉酯碱;gyzy-6为裂褶菌属,gyzy-8为叶点霉属,gyzy-9为平革菌属真菌。从篦子三尖杉中初步分离出产高三尖杉酯碱的内生真菌。     

2年生三尖杉生长和2种酯碱种源变异及初步选择

为了探讨三尖杉Cephalotaxus fortunei幼龄收获阶段生长、干物质积累和药用成分等种源变异和地理模式,并为福建明溪选育出多个药用优良种源,在福建明溪、浙江淳安和安吉等3个地点开展种源区域试验。研究结果表明,2年生三尖杉树高、地径、分枝数、各器官干物质积累量以及枝、叶药用成分均存在显著的种源变异。三尖杉生长和干物质积累量的种源分化可较多地归因于长叶和短叶类型间的差异。较之于短叶类型三尖杉种源,长叶类型三尖杉种源的生长和干物质积累量大,其种源间分化也较大。除种源效应外,栽植地条件对三尖杉生长影响显著。测定结果表明,不同类型间叶片三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱质量分数差异较小,而枝条2种酯碱质量分数差异却较大,且长叶类型枝条的2种酯碱质量分数均值高于短叶类型。相关分析发现,种源干物质积累量和枝叶2种酯碱质量分数较多地受其产地经度的控制,而与产地纬度的相关性较小。根据福建明溪点的测试结果,以枝叶三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱产量为选育指标选择出福建武夷山、柘荣等优良药用种源。表8参14     

福建三尖杉活性成分研究Ⅰ.三尖杉酯碱的提取与光谱鉴定

采用乙醇回流提取法得到三尖杉药用成分的粗提物,然后利用有机物梯度萃取、逆流分布法分离,结合氧化铝柱和薄层层析法对粗提物进行分离提纯,最后利用四大光谱:质谱(MS)、红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)和核磁共振光谱(NMR)对提纯的化合物进行结构鉴定,确定三尖杉体内含有抗癌活性成分三尖杉酯碱。     

一株产高三尖杉酯碱内生真菌gyzy-6的分离与鉴定

高二尖杉酯碱(HHT)是重要的抗自血病药物,主要从珍稀濒危三尖杉属植物中提取.从贵州蓖子三尖杉中分离培养出20株菌落形态和显微结构有明显差异的菌株,经HPLC分析各菌株的发酵提取物,初步证明菌株gyzy-6能够生产高三尖杉酯碱.gyzy-6菌株ITS序列的系统发育分析结果表明gyzy-6为裂褶菌属真菌.     

内生真菌gyzy-20生产高三尖杉酯碱的成分分析及条件优化

[目的]为充分发掘篦子三尖杉（Cephalotaxus oliveriMast）内生真菌的应用价值。[方法]采用HPLC对内生真菌菌株gyzy-20的发酵提取组分进行鉴定,并采用正交试验进一步优化生产工艺。[结果]菌株gyzy-20的代谢产物中有高三尖杉酯碱生成,提取时间对高三尖杉酯碱含量的影响较大。优化的生产工艺为：碳源为葡萄糖,发酵10 d后超声5 min,添加2倍体积二氯甲烷萃取3 h,优化后的发酵和提取方法可提高高三尖杉酯碱的含量1.5倍以上,达到0.26μg/ml。[结论]该研究可为利用微生物发酵生产HHT提供可能。     

高三尖杉酯碱注射液含量的毛细管电泳法测定

建立了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量测定的高效毛细管电泳法。磷酸二氢钠-硼砂为电泳介质,乙醇为有机添加剂,在20kV高压,pH6.98的条件下检测了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量。在最佳的试验条件下,高三尖杉酯碱标准品峰面积（y）与质量浓度（p）之间呈现良好的线性关系,该法的线性范围为0.005-0.080mg.L^-1。着重探讨了缓冲溶液浓度、种类、酸碱度及其操作电压对检测的影响,结果表明毛细管电泳法测定高三尖杉酯碱注射液的含量,不仅操作简单、准确,而且重复性好。     

海南粗榧内生真菌细极链格孢CH1307产高三尖杉酯碱的发酵条件

以海南粗榧内生真菌细极链格孢CH1307发酵产高三尖杉酯碱的产量为指标,采用响应曲面法分析葡萄糖质量浓度、硫酸镁质量浓度、复合维生素B质量浓度及摇床转速对该菌株液态发酵的影响。结果表明。细极链格孢CH1307液态发酵产高三尖杉酯碱的关键因子值分别为葡萄糖32．0226g·L-1,硫酸镁0．0966g·L-1,复合维生素B0．1239g·L-1,转速146．4742r·min-1时CH1307发酵最好,代入方程的HHRT产量为190．6370μg·L-1。     

地塞米松对特发性血小板减少性紫癜外周血淋巴细胞凋亡及Fas/FasL的影响

目的 :观察地塞米松对特发性血小板减少性紫癜 (ITP)外周血淋巴细胞凋亡及 Fas、Fas L表达的影响及其临床意义。方法 :用流式细胞仪检测 30例 ITP患儿治疗前后外周血淋巴细胞凋亡率及 Fas、Fas L蛋白表达。结果 :治疗前淋巴细胞凋亡率及 Fas、Fas L蛋白表达与对照组相比差异无统计学意义 (P>0 .0 5)。治疗后血小板增加时淋巴细胞凋亡率增加 ,Fas、Fas L蛋白表达上调 ,与治疗前相比差异有显著性意义 (P<0 .0 1 )。结论 :地塞米松可显著促进 ITP患儿外周血淋巴细胞的凋亡 ,上调淋巴细胞 Fas、Fas L的表达 ,有助于清除激活的淋巴细胞。     

CK19、PCNA和P53在甲状腺病变中的表达

目的:了解CK 19、PCNA、P 53在甲状腺病变中的表达及其诊断意义。方法:采用免疫组化SP法检测60例甲状腺病变(甲状腺乳头状癌36例,结节性甲状腺肿乳头状增生14例,甲状腺瘤10例)中CK 19、PCNA、P 53蛋白的表达。结果:CK 19在36例甲状腺乳头状癌中呈阳性表达,多为强阳性;14例结节性甲状腺肿乳头状增生中3例阳性,呈小灶性阳性,阳性表达者为伴有真乳头的乳头状增生;10例甲状腺瘤中4例阳性,呈小灶性阳性和点状阳性表达,阳性表达者为增生活跃的小滤泡腺瘤和不典型腺瘤。36例甲状腺乳头状癌中30例PCNA阳性,多为中等或强阳性表达,14例结节性甲状腺肿中4例PCNA阳性,10例甲状腺腺瘤中3例PCNA阳性,多为弱阳性,PCNA在甲状腺乳头状癌阳性表达比结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤高,差异有统计学意义(P<0.01)。36例甲状腺乳头状癌中15例P 53阳性,多为弱阳性表达,在结节性甲状腺肿和甲状腺瘤中P 53均呈阴性表达,经两两比较的z检验,三种病变中的P 53表达差异无显著性(P>0.05)。结论:局灶性CK 19阳性可见于良性病变,弥漫性阳性是甲状腺乳头状癌的特征,有助于隐匿性乳头状癌与良性结节的鉴别诊断和甲状腺组织内是否存在微小转移灶的判断。PCNA对甲状腺病变的鉴别诊断起参考作用,P 53在甲状腺病变的鉴别诊断中意义不大。     

苯巴比妥和地塞米松对鸡细胞色素P450的诱导作用

将60只40日龄依莎公鸡随机等分为对照组、苯巴比妥(PB)诱导组和地塞米松(DEX)诱导组,进行体外肝微粒体酶活性测定和体内安替比林(AP)消除动力学试验,研究苯巴比妥和地塞米松对鸡肝微粒体细胞色素P450的诱导作用。结果表明,与对照组相比,PB组和DEX组的肝微粒体酶活性显著提高(P<0.01),AP的代谢速率显著加快(P<0.01)。表明苯巴比妥和地塞米松对鸡肝微粒体体细胞色素P450具有明显的诱导作用。     

高蛋白饲粮致雏鹅痛风的临床病理学研究

【目的】研究高蛋白饲粮对1～14日龄雏鹅生长性能、血液生化指标及肝脏、肾脏组织的影响,并对其痛风致病机理进行初步探讨。【方法】选用体质量相近的1日龄雏雁鹅72只,随机分成3组:A、B和C组分别饲喂粗蛋白质量分数为16%、20%和24%的饲粮,每组3个重复,每个重复8只。【结果】A组鹅的生长性能高于B、C组;血清总蛋白、白蛋白和球蛋白的水平随着饲料蛋白水平增加而升高,但差异不显著;C组血清尿酸、丙氨酸氨基转移酶、尿素氮、乳酸脱氢酶的水平显著高于A、B组,而C组总胆红素水平显著低于A、B组。C组肝脏组织中的白细胞介素–1β、白细胞介素–8、黄嘌呤氧化酶活性和肾脏中肿瘤坏死因子–α活性显著高于A、B组。A组肝脏、肾脏组织正常;B组肝脏组织有轻微炎性细胞,肾脏组织正常;C组肝脏细胞出现坏死、水肿和炎性浸润,肾小管空泡变性,肾小球萎缩。C组鹅出现痛风症状。【结论】在饲养条件相同的情况下,饲喂粗蛋白质量分数为24%的饲粮影响雏鹅的生长性能和血清尿酸等部分血液生化指标,引起肝脏和肾脏组织一定程度的损伤以及输尿管有尿酸盐沉积等痛风变化。     

原发性肾病综合征并发急性肾功能衰竭的临床与病理分析

目的；观察原发性肾病综合征(iNS)并发急性肾功能衰竭(ARF)的临床与病理。方法：对42例iNS并发ARF患者临床和病理改变进行分析。结果：iNS并发ARF的发生率为5．87％，临床上以少尿型为主(78．6％)．起病均在iNS的急性期。42例患者临床表现为大量蛋白尿、高度水肿，病程中无明显诱因出现少尿，尿素氮与血清肌酐增高。肾脏病理检查肾小球以轻微改变为主，其中微小病变型16例．轻度系膜增生型肾炎2l例；肾小管间质的病变却表现为广泛肾间质水肿及小管上皮细胞灶性坏死。经利尿、强的松等治疗后，36例患者肾功能逐渐恢复正常。结论：iINS并发ARF多发生于肾小球轻微改变者；尽早明确iNS并发ARF，并给予适当治疗，绝大多数患者肾功能可以恢复。     

安神除烦汤治疗失眠临床观察

目的观察自拟安神除烦汤治疗中老年人失眠症的临床疗效。方法 60例患者按就诊先后顺序随机分为治疗组与对照组各30例。治疗组服用安神除烦汤,对照组服用舒乐安定,疗程均为60 d。结果两组治疗失眠症疗效相当,治疗组总有效率为93.3%,对照组为90.0%;两组焦虑自评量表(SAS)评分均较治疗前明显下降(P<0.01),治疗组下降幅度明显优于对照组(P<0.05)。不良反应发生率治疗组明显低于对照组(P<0.01)。结论安神除烦汤治疗中老年人失眠症疗效确切,能明显改善患者的焦虑抑郁状态,具有良好的药物安全性。     

喉癌PCNA和survivin的表达与肿瘤化疗敏感性的关系

目的观察喉癌组织PCNA和survivin的表达水平与肿瘤化疗敏感性的关系。方法随机选取36例喉癌,给予顺铂、5-氟尿嘧啶和平阳霉素为方案联合化疗,取各例在治疗前的喉癌活检组织的石蜡标本,用免疫组化检测PCNA和survivin的表达情况,分析其表达水平与肿瘤化疗敏感性的关系。结果喉癌组织中PCNA表达阳性者对化疗的敏感性明显高于PCNA阴性表达者（90.0%vs37.5%,P〈0.01）;survivin表达阳性的喉癌组织与表达阴性的喉癌组织对化疗的敏感性则差异无统计学意义（65.2%vs69.2%,P〉0.05）。结论 PCNA的表达可能增强喉癌对化疗的敏感性,而sur-vivin的表达对喉癌化疗敏感性可能无影响。     

血液透析联合血液灌流治疗尿毒症脑病28例临床观察

目的评价血液透析加血液灌流（HD＋HP）对尿毒症脑病患者的治疗作用。方法尿毒症脑病患者28例,在常规治疗基础上予HD＋HP治疗,观察其临床疗效及尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、血钾（K＋）、血钠（Na^＋）、血氯（Cl^-）、血钙（Ca^2＋）、二氧化碳结合率（CO2CP）、β2-微球蛋白（β2-MG）等指标变化。结果临床治愈19例,好转5例,无效4例。患者治疗后BUN、Scr、β2-MG、K＋、Cl^-、Na^＋水平均明显下降（P〈0.01或0.05）,Ca^2＋和CO2CP水平均明显升高（P〈0.01）。结论HD＋HP能有效清除尿毒症毒素,是治疗尿毒症脑病的有效治疗方法。