莴笋多酚氧化酶的酶学特性研究

采用分光光度法测定莴笋多酚氧化酶(PPO)活性,考察底物特异性、pH值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子及抑制剂对PPO酶活特性的影响,研究莴笋PPO酶学特性。结果表明,莴笋PPO的最适底物为邻苯二酚,最适pH值5.0,最适温度25℃;90℃热处理60 s莴笋PPO酶活基本完全丧失;莴笋PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=0.667 mol/L,Vmax=826.4 OD/min;Mg2+、Ca2+、Mn2+、Zn2+对PPO酶活有一定的的抑制作用,Cu2+和Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;五种抑制剂对抑制莴笋PPO酶活力均具有一定的作用,且抑制作用随抑制剂浓度的增大而加强,试验范围内抑制作用由强到弱依次为:抗坏血酸L-半胱氨酸Na HSO3柠檬酸EDTA,抗坏血酸对莴笋PPO酶活的抑制效果最佳。     

黑美人马铃薯结合态和游离态多酚氧化酶的酶学性质研究

为有效控制马铃薯加工过程中的酶促褐变,以黑美人马铃薯块茎为原料,分别提取游离态多酚氧化酶(sPPO)和膜结合态多酚氧化酶(mPPO)粗酶,并进行酶学性质研究.结果表明,黑美人马铃薯sPPO和mPPO的最大吸收波长分别为403 nm和406 nm.sPPO最适反应pH值为7,最适反应温度为25℃;mPPO最适反应pH值为7,最适反应温度为30℃.以绿原酸和间苯二酚为底物时,sPPO和mPPO均未检测到酶活力;以邻苯二酚为底物时,sPPO、mPPO的米氏常数(Km)分别为39.423、35.291 mmol/L,最大反应速度(Vmax)分别为0.019、0.290 mmol·L-1·min-1;以焦性没食子酸为底物时,sPPO、mPPO的Km分别为205.896、205.067 mmol/L,Vmax分别为0.008、22.321 mmol·L-1·min-1.亚硫酸钠、抗坏血酸对sPPO和mPPO酶活力抑制作用明显;植酸、草酸、柠檬酸和EDTA对sPPO和mPPO酶活力也有不同程度的抑制.以上结果说明:sPPO和mPPO酶学性质存在较大差异,mPPO酶活力要显著高于sPPO,建议在利用黑美人马铃薯进行加工时,重点考虑mPPO对酶促褐变的影响.     

菊芋多酚氧化酶性质的研究

对菊芋对多酚氧化酶的性质进行了系统的研究,结果表明：①菊芋多酚氧化酶（ＰＰＯ）有两个最适ｐＨ值,分别为５．４和８．０,最适温度为３０－３５℃;②底物浓度较低时,随底物浓度的增加ＰＰＯ活力成比例增加,而当底物浓度继续增加时,反应速度上升缓慢,后期有下降趋势;③菊芋ＰＰＯ对不同的底物其活性有很大差异。     

蜜梨果实多酚氧化酶酶学特性的研究

多酚氧化酶（PPO）是酶促褐变的关键酶,与果蔬加工制品的色泽、抗氧化能力密切相关。以蜜梨果实为原料,邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究蜜梨多酚氧化酶的酶学特性。结果表明：pH和温度对蜜梨PPO活性有明显的影响,其最适pH为4．5,最适温度为34℃。在加工过程中,可通过调节pH和温度来降低蜜梨PPO活性,减少褐变的发生：蜜梨PPO催化底物邻苯二酚的酶促反应动力学与米氏方程高度符合,R^2-0．9972,其动力学方程为专1/V=0．17371/[S]＋0．4775,最大反应速率Vmax=2．09U·min^-1,米氏常数Km=0．36mol·L^-1;蜜梨PPO具有一定的热稳定性,随着温度的提高。完全抑制PPO活性所需要的时间逐渐减少。采用短时高温（90℃,1min）的热处理,不仅可有效降低蜜梨加工过程中的酶促褐变．而且可减少蜜梨汁营养成分的损失．较好地保持其固有色泽。     

大果山楂多酚氧化酶的酶特性研究

以广西平乐大果山楂为原料,邻苯二酚为底物,采用分光光度法测定大果山楂多酚氧化酶(PPO)活性,考察p H、温度、热处理、底物浓度及抑制剂对PPO活性的影响,为控制其生产过程中酶促褐变提供参考。结果表明,以邻苯二酚为底物时,PPO酶促反应产物的最大吸收波长为420 nm,反应时间为3 min,最适p H为6.8,最适温度为45℃;90℃处理4 min,PPO基本失活,80℃处理6 min后,相对酶活性为19.75%;最适底物浓度为0.08 mol/L,PPO酶促动力学符合米氏方程,相应的参数Km=51.24 mmol/L,Vmax=54.53 U/min;在试验浓度条件下,5种抑制剂对大果山楂PPO活性均有抑制作用,氯化钠的抑制作用最弱,高浓度下,柠檬酸的抑制效果较EDTA、抗坏血酸、草酸要好。     

白肉枇杷多酚氧化酶酶学特性研究

以“白梨”枇杷 (Eriobotrya japonica Lindl.cv.Baili)果实为试材,采用硫酸铵分级盐析及透析法提取PPO研究其理化特性,包括温度、pH、抑制物对PPO活性的影响及其底物特性;测定果实\贮藏期间pH值变化。结果表明：PPO的最适温度为30~40℃,在30℃有较好的热稳定性;最适pH值为5.0和7.0,pH值为6.0和9.0时酶的稳定性较好;维生素C和L-半胱氨酸抑制物对PPO有较强的抑制作用,以维生素C抑制作用最强。     

超声波-曲酸复合处理对鲜切紫薯多酚氧化酶活性的影响

在单因素试验的基础上,通过响应面法优化超声波-曲酸（Ultrasonic-kojic acid, US-KA）复合处理抑制鲜切紫薯多酚氧化酶（Polyphenol oxidase, PPO）活性的条件。单因素试验结果表明：超声功率360 W,超声时间9 min,曲酸溶液浓度30 μg/mL时,抑制鲜切紫薯PPO活性效果最佳。响应面优化结果表明,超声功率320 W,超声时间544 s,曲酸溶液浓度28.3 μg/mL时,所得PPO活性为2 017.8 U/mL,与未处理组相比,其活性降低了42.36%,与理论值2 015.9 U/mL的相对误差在0.94%左右,且此回归模型具有高度显著性,可以用于分析和预测超声-曲酸抑制鲜切紫薯PPO活性的最佳条件。     

茶树菇多酚氧化酶动力学特性研究

采用分光光度法分析茶树菇多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)动力学特性,研究了底物浓度、pH值及温度等因素对PPO活性的影响,建立了茶树菇褐变的反应动力学方程.结果表明,茶树菇PPO最适温度50℃,最适pH4.0～5.0.用Michaelis-Menten机理描述得茶树菇PPO相应的动力学参数KM=2.59mol/L,Vmax=0.127U/min.此外还对茶树菇不同部位的PPO活性进行了调查分析.     

陆地棉纤维初始发育与胚珠过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶的关系的研究

比较研究陆地棉品种徐州１４２ 与其无絮突变体开花前４ｄ 至开花后６ｄ 胚珠内细胞壁结合的离子型蛋白质含量、过氧化物酶和ＩＡＡ氧化酶活性变化。结果表明, 过氧化物酶和ＩＡＡ氧化酶阻碍纤维的初始发育。     

多酚氧化酶的研究进展

本文主要从重要末端氧化还原酶一多酚氧化酶的分布、作用、提取方法及其活性测定、同工酶、多酚氧化酶的应用等方面进行论述。     

昆虫取食诱导棉花和玉米多酚氧化酶和过氧化物酶的活性研究

为了明确昆虫取食诱导植物间的通讯作用机制,研究了棉蚜取食和机械损伤诱导棉花及其邻近玉米,以及玉米螟取食和机械损伤诱导玉米及其邻近棉花的诱导防御机制。利用分光光度计法测定不同处理棉花和玉米的多酚氧化酶及过氧化物酶的活性。结果表明棉蚜取食和机械损伤诱导棉花多酚氧化酶和过氧化物酶的活性增加,棉蚜取食诱导棉花多酚氧化酶的活性是对照的1.61倍,机械损伤诱导棉花过氧化物酶的活性是对照的1.84倍,2种处理与对照相比差异均显著。玉米螟取食和机械损伤诱导玉米多酚氧化酶的活性增加但与对照比差异都不显著,而其相应过氧化物酶的活性显著高于对照,分别为对照的4.79和3.56倍。棉蚜取食和机械损伤诱导相应邻近健康玉米及玉米螟取食和机械损伤诱导其相应健康棉花的多酚氧化酶和过氧化物酶活性都没有增加。由此认为,多酚氧化酶和过氧化物酶在昆虫取食诱导的棉花和玉米通讯中的作用不明显。     

抑制荸荠中多酚氧化酶活性的研究

通过单因素及多因素试验,探讨抑制荸荠中多酚氧化酶活性的效果。L_9(3~3)正交试验结果表明:柠檬酸预煮液的质量分数0.5%,预煮温度100℃,预煮时间5 min为最优预煮条件。     

冻存茶鲜叶多酚氧化酶动力学特性研究

采用分光光度法对冻存处理的茶树鲜叶的多酚氧化酶(PPO)进行了活性测定,研究了底物浓度、pH值及温度对冻存茶鲜叶PPO活性的影响,建立了茶树鲜叶冻存-萎凋过程的反应动力学方程.结果表明,冻存茶鲜叶PPO酶活的最适条件为:pH值介于4.6～5.0之间,温度35～60℃.由Michelis-Menten方程1/v=1.16...     

Behaviour of Polyphenol Oxidase, IAA Oxidase and Catalase in Germinating Rice in Relation to Salt Tolerance

Activities of the enzymes polyphenol oxidase, indole-3-acetic acid (IAA) oxidase and catalase were compared from endosperms and embryoaxes of germinating rice ( Oryza sativa ) seeds of two sets of cultivars differing in salt tolerance, raised under increasing levels of NaCl salinity. Salt sensitive cvs. Ratna and Jaya were characterized by higher polyphenol oxidase activity in embryoaxes under salinisation as compared to salt tolerant cvs. CSR-1 and CSR-3. In endosperms of salt sensitive cultivars the enzyme activity decreased under salinisation whereas in tolerants it increased due to salinity. In vitro studies using desalted enzyme extracts showed a continuous increase in polyphenol oxidase activity with increasing concentration of NaCl (0–1000 mM) in the reaction medium. IAA oxidase activity increased due to salinity in embryoaxes of both sets of cultivars, the effect was greater in sensitive cultivars than tolerants. NaCl when incorporated in the reaction medium caused decrease in IAA oxidase activity. Activity of catalase decreased with increase in salinity with greater decrease in sensitive cultivars than tolerants. Results suggest possible different behaviours of oxidative enzymes in germinating seeds of rice cultivars differing in salt tolerance and that salt tolerance ability is associated with lower polyphenol oxidase and IAA oxidase activities and higher catalase activity in embryoaxes under salinisation.     

无核白葡萄多酚氧化酶基因的克隆与序列分析

为获得无核白葡萄中多酚氧化酶(PPO)的基因序列,以无核白葡萄果实为试材,进行基因同源克隆,得到多酚氧化酶基因CDS全长序列,其完整的编码框为1 824 bp,编码607个氨基酸(GenBank登陆号为KP271928);系统进化分析可知,其与葡萄科植物PPO基因同源性最高;生物信息学方法发现该蛋白分子量为67 392.44 Da,等电点为6.42,具典型的酪氨酸家族结构域,无信号肽结构,但有一个跨膜结构域,为亲水性蛋白;二级结构预测发现,PPO具有CuA与CuB两个结合区,分别嵌入蛋白活性腔中。该研究为进一步从分子水平探讨多酚氧化酶与褐变的关系奠定理论基础。     

软儿梨冷冻贮藏过程酚类物质与多酚氧化酶的区域化分布

为研究冷冻贮藏中不同部位酚类物质和多酚氧化酶的分布特征,以青海省地方梨优良品种‘软儿梨’果实为研究材料,采用高效液相色谱法和比色法测定软儿梨果实后熟(室温)、冻藏(-18℃)和解冻(室温)3个时期的果皮、果肉中总多酚、绿原酸的含量和多酚氧化酶活性。结果表明:软儿梨果实后熟后,酚类物质果肉?果皮,多酚氧化酶则果皮?果肉;冷冻贮藏过程中,不同部位的酚类物质和多酚氧化酶均呈现不同程度的升高,但绿原酸在果皮急剧下降、果肉中略有增加。解冻后总体呈下降趋势,2个部位总酚、多酚氧化酶下降明显,而果皮中的绿原酸变化不大。研究表明:软儿梨果实后熟后,酚类物质和多酚氧化酶分布呈现区域化,冷冻贮藏加剧了酚类物质和多酚氧化酶活性的积累,导致了软儿梨冷冻贮藏后果皮先于果肉发生了褐变。     

橄榄总多酚含量及多酚氧化酶活性与组培褐变关系的研究

摘要：本文采集了不同月份下橄榄的不同组织部位,包括老叶、成熟叶、嫩叶、叶柄、幼嫩茎段和去皮的幼嫩茎段、橄榄果实的胚等9个不同部位;研究了这些样品中总多酚含量、多酚氧化酶（PPO）活性和组织培养褐变的关系。研究发现三月份橄榄各部位的总酚含量、PPO活性和褐变率都较低;特别是去皮的幼嫩茎段具有最低的总酚含量和PPO活性, 在组培过程中褐变程度也最低,更易诱导出愈伤组织,是橄榄组织培养过程中选择的理想外植体。实验结果表明,橄榄外植体的褐变是受到酚类物质的含量和PPO的活性影响的,多酚含量与PPO活性越高,越容易引起外植体褐变。