尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）的生长特性

【研究目的】研究尖孢镰刀菌的生长特性，寻找培养过程的异质性指标。【方法】供试菌株为黄瓜尖孢镰刀菌F-H.6.5-030318-J2和花生尖孢镰刀菌F-P.5.0-030710，培养基采用PSA培养基，装液量为100ml/250ml，接菌量从培养7d的平板上打取3个6mm的菌片，培养温度为25±1℃，摇床转速为110r/min，培养10d，观察测定发酵液颜色、OD值、pH值、菌丝干重变化，并利用聚类分析方法划分生长阶段。【结果】在培养过程中，尖孢镰刀菌发酵液的颜色、OD值、pH值和菌丝干重都会随着培养时间而变化。在相同的培养条件下，来源于不同寄主的尖孢镰刀菌菌株之间在颜色和OD值变化存在着显著性差异，而pH值和菌丝干重变化未表现出显著性差异。来自黄瓜和花生的尖孢镰刀菌菌株的生长分为3个阶段：1~2d为适应阶段，3~5d为对数生长阶段，6~10d为稳定阶段。【结论】尖孢镰刀菌在培养过程的色素变异和OD值的变化可作为菌株培养的表征性特征     

瓜菜良种简介

蜜龙网纹甜瓜,碧龙网纹甜瓜,黄帝彩椒1号,豫椒15号,豫墨7号西瓜,豫艺新量2号番茄,赣新特长露地王豇豆 ，甜瓜新品种——日本砧石甜宝，黄瓜新品种——津园5号，微型番茄——艾斯佳F1，台湾新一号无籽西瓜（新先锋），抗裂京欣王1号（新先锋），     

甜瓜与本世纪匈牙利的一个已灭绝的地方种相比较的遗传变异Ⅰ．47个品种的rDNA、SSR、SWP分析

按照二元分类法，香瓜属包括9个（林奈，1753）至13个（Naudin，1859）及34个（Andres，2004）种。其中的甜瓜（Cucumismelo）和黄瓜（C．sativus）是分布于全球的具有经济重要性的两个种。按三元分类法，甜瓜种分为两个亚种，分别是网纹甜瓜（C.melo ssp melo）和白瓜C.melo ssp．agrestis）两个亚种。网纹甜瓜又再分为互交可育品种群如网纹甜瓜（reticulatus）、夏朗德甜瓜（cantalupensis）、冬甜瓜（1inodorus）、蛇形甜瓜（flexuosus）、越瓜（conomon）、柠檬瓜（chito）、苹果瓜（dudaim）、真桑瓜（makuwa）。     

瓜类尖孢镰刀菌致病物质β-D-葡萄糖苷酶活性与致病性的相关性分析

【研究目的】研究瓜类尖孢镰刀菌β-D-葡萄糖苷酶活性与致病性的关系,为菌株致病性强弱快速测定提供一种新的辅助方法;【方法】测定了19株来自不同瓜类寄主尖孢镰刀菌菌株的致病性及致病物质β-D-葡萄糖苷酶活性,构建菌株的发病率(y)与酶活(x)的曲线模型;【结果】菌株致病性测定结果表明,同一寄主及不寄主来源的菌株致病性有差异。供试菌株中有12个强致病菌株,发病率在80%以上;2个中等致病菌株,发病率分别为60%和70%;2个弱致病菌株发病率均为30%,以及3个非致病菌株。菌株β-D-葡萄糖苷酶活测定结果表明,同一寄主不同菌株的酶活存在明显差异,来自黄瓜、甜瓜和西瓜寄主菌株酶活变化范围依次为（21.57-54.89）、（16.28-41.83）和（14.98-32.43）U•ml-1;不同寄主（黄瓜、甜瓜和西瓜）菌株的β-D-葡萄糖苷酶活也存在差异,平均酶活为黄瓜（34.08 U•ml-1）甜瓜（27.86 U•ml-1）西瓜（20.95 U•ml-1）;【结论】菌株的β-D-葡萄糖苷酶活性与其致病性关系分析表明,当酶活性小于30 U•ml-1l时,菌株发病率与酶活呈正相关;当酶活大于30 U•ml-1,菌株的发病率大于90%。     

六种杀菌剂对黄瓜尖孢镰刀菌的毒力测定试验

本试验分离与纯化黄瓜枯萎病病原菌，鉴定出病原菌为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporumSchl.）。采用含毒培养基生长速率法测定六种杀菌剂的抑制效果，以菌落直径为实验观察指标，测量对照组和处理组的菌落直径，以抑制率测定杀菌剂对尖孢镰刀菌的抑制效果。结果表明：药后72h，杀菌剂丙环唑的EC50值为0.9039，其毒力指数最大，对尖孢镰刀菌的抑制效果最佳；代森、异菌肽的EC50值为2.8939、6.8186，效果较好；醚菌酯、嘧霉胺的EC50值为29.3951、30.4126，效果一般；苯醚甲环唑的EC50值为143.2943，毒力指数最小，抑制效果较差。     

不同基因型烤烟对镰刀菌根腐病的抗性鉴定与评价

为明确不同基因型烤烟对烟草镰刀菌根腐病的抗性,利用10个烟草品种（系）,采用粗毒素幼芽接种、带菌菌谷接种、孢子悬浮液培养等方法进行抗性鉴定。结果表明,供试品种对尖孢镰刀菌抗性表现出显著差异;对尖孢镰刀菌表现出抗的品种（系）有4个,分别是‘Y2001’、‘Y2002’、‘长脖黄’、‘664-01’;对尖孢镰刀菌表现出感的品种（系）有6个,分别是‘7710’‘、7713’‘、Y2007’‘、Y2008’‘、中烟100’、‘小黄金1025’。3种接种方法鉴定结果基本一致,共筛选出4个抗性品种（系）。     

河北省冬小麦种子表面粘附真菌的分离鉴定

从唐山、秦皇岛等5个地区收集45个冬小麦品种（系），通过洗涤检验法和吸水纸培养检验法，在供试的45个冬小麦品种种子表面分离到9个属真菌。分别为；链格孢属的细链格孢菌（Alterndrid tenuis Nees）和小麦链格孢菌（A.triticold Prasada）、丹尼链格孢菌（A.dennisii M.B.Ellis）；离蠕孢属的小麦根腐离蠕孢菌9Bipoldris Sorokinidnd Shoem.）；镰刀菌属的禾谷镰刀菌（Fusdrtum grdminedrdm）和尖孢镰刀菌（F.oxysporum）；弯孢霉属（Curvularia）；突脐孢属（Exserohilum）；德氏霉属的小麦穗氏霉菌（Drechslerd tritici-repentis Shoemaker）；茎点霉属的勒韦茎点霉菌（Phomd leveillet Boerema）；哈氏霉属的顶孢哈氏霉菌（Hdrzia acremonioides Harz.）；侧隔霉属（Pleurophraium）。其中Alternaria分离频率最高，达58.06%，其次是Bipolaris和Fusarium，分别为22.11%和7.44%，对分离得到的各种孢子进行萌发率测定结果表明，离蠕孢属（Bipolaris）孢子萌发率最高，有6种真菌对小麦具有致病性。     

甜瓜种子大小对发芽势,发芽率及幼苗质量的影响

种子大小是决定种子质量和种子外观的一项重要指标。在蔬菜作物上，研究种子大小与种子重量对种子萌发、幼苗质量、产品及品质关系的报道较多，试验结果表明，在不同的蔬菜上，种子大小与种子重量对发芽等因子的影响是不相同的。例如，番茄和辣椒种子的田间发芽率与种子大小是正相关关系(CochranH.I.,1974和JacobsonR.andGlobersonD，1980）；洋葱种子重量与种子发芽无关（BedfordL．V．andMackyD．B.，1973）；萝卜（KubkaT.,HorynskiJ．andHulewiczT.，1974），黄瓜（SwittleD．A．andWilbiamsonR.E.1978）青花菜（TompkinsD.R.1996），甘兰（刘政道，1989）等的种子重量与幼苗大小和质量却是相关关系。本试验以甜瓜种子为材料，研究种子大小与种子重量对种子活力及幼苗质量的关系。     

尖孢镰刀菌古巴专化型SIX7基因分析

SIX蛋白编码基因最早由尖孢镰刀菌番茄专化型入侵的番茄木质部蛋白质组中发现,且成功用于区分尖孢镰刀菌番茄专化型的3个生理小种。一些SIX编码基因亦在引起香蕉枯萎病的Fusarium.oxysporum f. sp. cubense（简称Foc）中有报道,为区分Foc不同生理小种或亚型,比较分析了Foc中的SIX7基因序列及其特异性。以现有的SIX7基因序列设计合成引物,通过PCR扩增并测序,比较分析国内不同地理区域及来源于澳大利亚与南非的Foc1、Foc2、Foc3、Foc4共56株菌株中的SIX7基因,并以8个以上其他专化型或其他种或属病原菌共39株菌株分析了SIX7基因序列的特异性。研究发现所设计合成的SIX7基因引物序列仅能从供试的亚热带4号生理小种(ST4)中扩增出663 bp的目的条带。亚热带4号生理小种(ST4)中仅有的SIX7基因序列结合Foc4特异性引物Foc-1/Foc-2可快速区分Foc4亚型,提供了快速区分香蕉枯萎病病样内的Foc4亚型的分子鉴定手段,可指导蕉农及时采取有效防控香蕉枯萎病的措施。     

采后链格孢侵染对甜瓜果实苯丙烷代谢的影响

以伽师瓜和86-1甜瓜为试材,损伤接种浓度为1×106 CFU/mL链格孢孢子悬浮液20 μL,置于6~8 ℃冷库贮藏,测定果实苯丙烷代谢相关酶和产物含量,研究两种甜瓜抗链格孢侵染过程中苯丙烷代谢相关酶和产物积累能力的差异,探讨伽师瓜耐藏机制。结果表明：损伤接种Alternaria alternata后,伽师瓜果实的发病率及病斑大小均低于86-1甜瓜;贮藏前期,甜瓜果实中苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸-4-羟化酶（C4H）、4-香豆酰辅酶A连接酶（4CL）活性及总酚、类黄酮的含量迅速升高,表明苯丙烷代谢在A.alternata与甜瓜果实互作的早期发挥了积极的作用,贮藏后期,苯丙烷代谢的抗病作用显著降低;链格孢侵染处理诱导了甜瓜果实PAL、C4H、4CL等酶活性的升高,增加了总酚和类黄酮等植保素的生成含量,说明苯丙烷代谢对甜瓜果实黑斑病有重要作用,伽师瓜果实PAL、4CL和C4H活性以及总酚、类黄酮含量高于86-1甜瓜果实,说明伽师瓜苯丙烷代谢活性高于86-1甜瓜,伽师瓜具有更强的抵御抗链格孢侵染的能力。     

几种杂交蔬菜种子纯度鉴定指示同工酶的初步筛选

该文以萌发３天的幼芽或胚轴为材料，用等电聚焦电泳技术分析研究番茄、辣椒、西瓜、青瓜和苦瓜杂交种子的酯酶（ＥＳＴ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）、苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）和谷草转氨酶（ＧＯＴ）同工酶，发现番茄种子的ＡＣＰ及ＡＤＨ同工酶、辣椒种子的ＡＣＰ及ＭＤＨ同工酶、西瓜种子的ＥＳＴ和ＡＣＰ同工酶、青瓜种子的ＡＣＰ同工酶以及苦瓜种子的ＡＣＰ和ＭＤＨ同工酶均有较强的品种特异性和稳定的酶谱，     

葫芦科14-3-3(GRF)基因家族的鉴定及进化分析

14-3-3蛋白是植物中一类高度保守的蛋白家族,因其特异识别并结合靶蛋白的磷酸化位点而广泛参与植物生长发育和逆境胁迫响应过程。为系统地了解14-3-3(GRF)基因家族在葫芦科作物中的基本特征和进化关系,本研究利用生物信息学从葫芦科7个物种基因组内共鉴定出83个14-3-3(GRF)基因,其中西瓜中有10个、甜瓜中9个、黄瓜中10个、瓠瓜中9个,3个南瓜属物种基因组各15个。理化特性表明14-3-3(GRF)蛋白的分子量约为30 k D,且大都为酸性氨基酸(pI<7.0)。相对于西瓜、甜瓜、黄瓜和瓠瓜,基因组复制事件是3个南瓜属物种内14-3-3(GRF)基因数目增多的主要原因。进化分析显示,葫芦科14-3-3(GRF)基因家族可进一步被划分为ε类和非ε类亚组,且后者的基因结构(外显子数目,内含子相位)较为保守。本研究结果首次完成了14-3-3(GRF)基因家族在葫芦科作物的鉴定、基因结构、基因家族扩增、共线性及进化分析,为更深入研究该家族基因的生物学功能提供参考。     

芽孢杆菌Pb-4菌株鉴定及其抑菌活性的研究

拮抗菌Pb-4是一株对多种植物病原菌有较强抑制作用的菌株。为了明确拮抗菌Pb-4的分类地位和抑菌机理,通过形态观察、生理生化特征和16S rRNA基因序列同源性比对及系统发育树分析,对Pb-4菌株进行鉴定。并采用平板对峙培养法测定Pb-4菌株的抑菌谱,显微观察其抑菌作用,采用硫酸铵沉淀和乙醚、苯提取得到抑菌活性物。通过加热处理,明确高温对Pb-4菌株抑菌活性的影响。结果表明,Pb-4菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌;Pb-4菌株对番茄枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、青椒枯萎病菌、辣椒疫霉病菌、苹果腐烂病菌均有抑制作用,其抑菌活性具有广谱性。该菌菌液能明显抑制枯萎病菌孢子的萌发,并对病菌菌丝有致畸作用;对番茄枯萎病菌的抑制生长率达93%,经100,121℃高温处理后的抑菌活性分别是未处理菌液的98.9%和80.1%。从菌液中提取的蛋白、酶、抗生素类活性物质对枯萎病菌的生长繁殖均有很强的抑制效果。为Pb-4菌株在病原菌防治中的广泛应用提供强有力的理论依据。     

Development and Characterization of Microsatellite Markers from an Enriched Genomic Library of Cucumber (Cucumis sativus)

The development, characterization and application of cucumber ( Cucumis sativus L.) microsatellite markers was accomplished using a library-enrichment procedure. Fifty-seven primer pairs flanking the microsatellite repeats were used for DNA amplification. Sixteen C. sativus accessions were assessed for polymorphisms using 45 primer pairs. The average number of alleles per locus was 3.6, and up to seven alleles were found at one locus. The maximum polymorphism information content value was 0.78 with an average of 0.47. The cucumber microsatellite makers could be useful for seed purity control in hybridity testing. Some of these cucumber markers were transferable to other cucurbit species (i.e. melon, watermelon, pumpkin and bitter gourd).     

外源水杨酸对提高黄瓜萌发种子抗冷性的效应

以黄瓜(津优40号)种子为材料,研究了不同浓度的水杨酸（SA）溶液（0.00g/L、0.01g/L、0.05g/L,0.1g/L、0.15g/L、0.2g/L）浸种对黄瓜萌发种子抗冷性的影响。结果表明,该试验条件下所有浓度的SA均能提高黄瓜种子发芽率(GR)、发芽指数(GI)和活性指数(VI);提高黄瓜萌发种子的过氧化物酶(POD)的活性,降低膜脂过氧化的程度和过氧化氢酶(CAT)的活性,提高了黄瓜萌发种子对低温胁迫的适应性;在10℃低温胁迫条件下,外源SA的最适宜作用浓度为0.05g/L。     

甜瓜种子中黄瓜花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的RT-LAMP可视化检测方法

本研究旨在针对甜瓜种子中携带的黄瓜花叶病毒(CMV)和小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV),建立可视化环介导等温扩增检测方法。根据CMV和ZYMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列,分别设计并筛选出2套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,通过对反应体系中主要影响因素的优化,建立适用于快速检测CMV和ZYMV的RT-LAMP检测方法。对优化后的2种LAMP检测方法进行特异性和灵敏度验证。结果表明,建立的2种LAMP检测方法分别能够特异性地检测出CMV和ZYMV,检测灵敏度较常规RT-PCR分别高出10倍和100倍,并且可通过肉眼观察直接对反应结果进行判定。该方法的建立为基层及现场快速检测甜瓜种子的带毒情况提供了新方法。     

棚栽嫁接西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒病发病动态及其田间扩展研究初报

为明确棚栽嫁接西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒病发生规律,对该病害的发病、蔓延和影响因素进行研究。毛竹搭建塑料大棚,无毒土壤上常规或低密度移栽健康嫁接西瓜苗,移栽后6、30天剪除部分瓜苗顶叶或倒2叶约半片后,将伤口浸渍在毒源中进行接种诱发,常规密度移栽苗自然生长,低密度移栽苗经整枝始终保持单株独立;健康植株用毒源污染剪刀、手指后整枝或毒源与健康藤蔓摩擦诱发。调查病田病株自然扩展以及拔除清除病健株后直播种子和套种瓜苗的控病效果。目测法定期调查显症病株,酶联免疫双抗体夹心检测法确定病株。接种后植株染病率高。低密度移栽苗：移栽后6天接种的瓜苗24天显症、34天突增、85天高峰,分别比移栽后30天接种的植株长4、4和30天;未接种的也在移栽后70天显症、95天高峰。常规密度移栽苗接种株也有类似趋势。显症病株率和带毒株率与日平均温度关系密切。病株中不同藤蔓上的叶片和相同藤蔓内的叶片既表现显症,也有隐症,甚至终生带毒隐症。病健藤蔓摩擦病株率100.0%,而染毒手指、剪刀整枝病株率则为91.7%和83.3%。病田内病情自然扩展先相邻连续,后点片;病地拔除清除病健株后,直播瓜苗和套种嫁接苗带毒株率分别为82.4%和77.0%,控病效果17.6%和23.0%。棚栽嫁接西瓜苗（植株）从感染黄瓜绿斑驳花叶病毒病到表现症状需要20天左右的潜伏期,继之产生显症病株突增和高峰,温度高,潜伏期短、进入突增和高峰快;隐症病株表现在株间、不同分枝藤蔓叶片间和相同藤蔓不同叶片间;移栽密度对发病无明显影响。田间扩展再侵染先相邻后点片,除了其他途径外,病健藤蔓接触摩擦传病作用大;病地当年连作重发的机率高。     

Variability in Namibian landraces of watermelon (Citrullus lanatus)

An on-station experiment was carried out in northern Namibia to compare local landraces of watermelon to modern varieties. Three groups of local watermelon are distinguished by farmers in Namibia: watermelons for fresh consumption, cooking melons used for porridge, and seed melons for oil pressing. The present study was carried out to estimate agronomic potential of the local landraces and verify whether agronomic characteristics would justify the local groupings. Important agronomic and fruit-quality traits (yield, earliness, fruit weight, fruit number, rind thickness, soluble solids, seed weight, and tolerance to biotic and abiotic stress) were measured in seven landraces (three watermelons, three cooking melons and one seed melon)and compared to three modern cultivars frequently grown in Namibia. The study revealed that well-adapted, productive Citrullus lanatuslandraces are available, and cultivated by local farmers throughout the northern regions of Namibia. Based on a combination of agronomic characteristics these local varieties could be grouped into three distinct types: watermelons, cooking melons, and seed melons, in agreement with farmers classification. Landrace water melons were characterized by smaller, less sweet fruits with larger seed and a thicker rind compared to modern varieties. Yield level was comparable but development was later and fruit number in some cases higher. Cooking water melons were less sweet than local water melon with large fruits comparable in size to modern cultivars. The only included seed watermelon had small fruits with large seeds and low soluble sugars. Yield varied from 118 t/ha for a giant cooking melon, out yielding all other accessions, to only 10t/ha for the seed melon type, but with considerable variation within groups. The earliness of commercial varieties maybe of interest in developing a mixed portfolio of short- and long-cycle landraces, whereas plant vigour, resistance and seed characters in some of the Namibian landraces may be important traits for breeding for both local purposes and for commercial varieties. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.