出口水产品中微生物污染调查分析及限量探讨

为了解出口水产品中微生物污染状况,并为制定微生物限量标准提供依据。采用GB/T 4789—2010的微生物检测方法,检测待出口水产品中菌落总数、大肠菌群、大肠杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌,并与国内外微生物限量标准进行比较。结果显示,374份检测样品中均未检出大肠杆菌及沙门氏菌;金黄色葡萄球菌的总检出率为1.87%;菌落总数基本符合标准,达标比例分别为:鱼制品93.3%,冷冻鱼类96.36%,虾类100%,软体动物85%,饭食类88.89%;大肠菌群为主要污染菌,上述种类符合标准的比例分别为:58.53%,77.38%,72.73%,45%,100%。     

乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果与分析

为提高实验室微生物检测能力,实验室参加由中国检验检疫科学研究院测试评价中心组织的乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌的检测能力验证计划。按照GB 4789.30—2016食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验第一法单核细胞增生李斯特氏菌定性检验对样品进行处理、培养,并对可疑菌落进行初筛及生化鉴定。样品18-X650未检出单核细胞增生李斯特氏菌25 m L,样品18-Y493未检出单核细胞增生李斯特氏菌25 m L。结果表明,中国检验检疫科学研究院测试评价中心组织对该次试验结果评价为满意,对第三方人员对实验室的检测能力判断提供参考。     

锡林浩特地区生鲜牛乳中微生物的调查与分析

通过对内蒙古锡林浩特市部分地区售卖的散装生鲜牛乳中的微生物进行检测,旨在分析季节及散卖生鲜牛乳对锡林浩特市生鲜牛乳质量的影响,以期为锡林浩特市散装生鲜乳销售环节的卫生质量安全监管及后期整顿提供基础数据。于2019年每个季节分别采集锡林浩特市不同片区4家散装售奶户生鲜牛乳,共16批次72份。通过国家标准方法,对散装生鲜牛乳中菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌进行测定。72份样品菌落总数平均值为1.19×106CFU/m L,基本符合国家标准,1号散户夏季生鲜牛乳菌落总数达到2.38×106CFU/m L,已超过国家标准规定限值;大肠菌群平均值为4.98×104CFU/m L,4家生鲜牛乳中的大肠菌群最高值均出现在夏季;1份秋季样品检测出金黄色葡萄球菌,数值为24 CFU/m L;所有样品均未检测出沙门氏菌。结果表明,2019年内蒙古锡林浩特市散装生鲜牛乳售卖环节存在一定的微生物污染问题,季节对生鲜牛乳中的菌落总数和大肠菌群有一定影响,其中菌落总数影响较大。     

噬菌体裂解酶结构域重构及其裂解功能分析

为了获得广谱噬菌体裂解酶,根据裂解酶结构及种属特异性,将金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶Ply187CHAP及酶K的SH3b重新合成,并同时将末端引入单核细胞增生性李斯特菌噬菌体裂解酶LysZ5结合结构域,构建具有能够裂解金黄色葡萄球菌及李斯特菌的多功能裂解酶。SDS-PAGE结果表明,融合结构域的重构酶蛋白Ply187KS-Z5大小约为58 kDa,其在金黄色葡萄球菌及李斯特菌平板表面能够形成透明裂解圈。分析对金黄色葡萄球菌及李斯特菌在生肉表面的裂解活性表明,嵌合酶蛋白Ply187-KS能够有效裂解金黄色葡萄球菌,作用1 h后菌落数降至2.16 log,而重构酶Ply187KS-Z5不仅裂解金黄色葡萄球菌并同时能够裂解李斯特菌,且重构酶针对金黄色葡萄球菌噬菌体的裂解活性与Ply187-KS裂解效果相当,从而表明裂解酶结合结构域重组将是获得高效广谱裂解酶的新途径。     

陈香茶品质安全性评价与分析

为探明陈香茶饮用的安全性,以不同产地的陈香茶为原料,采用国家标准测定方法对其主要的品质安全性指标进行评价和分析。结果表明,普洱散茶菌落总数最多,在本研究范围内未检测出黄曲霉素、致泻大肠埃希氏菌、大肠杆菌、沙门氏菌;有1个样品检出金黄色葡萄球菌;农药残留符合GB 2763-2005食品中污染物限量的要求;重金属铅的含量在0.38~4.70 mg/kg,符合茶叶卫生标准和食品中污染物限量要求;总灰分含量范围在5.42%~7.27%,水不溶性灰分含量在2.1%~3.81%,水溶性灰分占总灰分的50%以上,酸不溶性灰分在0.139%~0.793%,说明茶叶品质较好。总体来看,陈香茶的安全性是可靠的。     

酱牛肉裸露销售与简易包装销售中微生物变化的研究

在裸露条件下对无菌酱牛肉进行外部环境中微生物污染情况的试验。试验结果表明,使用灭菌后的酱牛肉样品直接暴露在市场环境中,按0h、1h、2h、4h、8h5个时段分别取样观察,结果显示金黄色葡萄球菌未检出,霉斑未形成。4h后菌落总数开始呈现明显上升趋势,从1h开始就有样品检出大肠菌群,6h时平均大肠菌群数就已经超过国家标准。而使用保鲜膜对灭菌后的酱牛肉样品进行简易包装后置于市场环境中,按0h、1h、2h、4h、8h5个时段分别取样观察,结果显示金黄色葡萄球菌未检出,霉斑未形成,8h后菌落总数未呈现明显上升趋势,大肠菌群未检出。说明简易包装能明显抵御外部环境中微生物的污染。     

速冻青刀豆HACCP体系中微生物控制效果的研究

为了提高出口速冻青刀豆产品的安全卫生质量,验证HACPP体系对产品微生物的控制效果,在青刀豆产品生产过程中运用HACCP原理,确定关键控制点及其控制措施,建立了完整的HACCP体系;并对执行该体系后的产品进行菌落总数、大肠菌群和大肠杆菌的检测,数据用数学建模方式分析。结果显示,产品菌落总数符合维布尔分布,以104cfu/g为标准,菌落总数指标的合格率达到99.22%;大肠菌群指标的合格率为98.33%;大肠杆菌(致病菌)指标的合格率为100%;证明HACCP体系在产品微生物总数的控制方面具有很好的效果,值得在速冻蔬菜产品中推广应用。     

新疆传统泡菜中乳酸菌的分离鉴定及其益生性能评价

从新疆地区自然发酵的泡菜中分离出5株性能优良的乳酸菌,经形态学分析和生理生化试验并结合16S rRNA分子鉴定,确定菌株R53为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus),R62、R63和R73为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),R2为类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides),并对其进行了益生性能评价试验.结果表明:在NaCl浓度为4％时,所有菌株均有较强的生长能力;在pH值为3.0的模拟胃液中培养2 h存活率仍达90％以上,在pH值为8.0的模拟肠液中培养6 h仍保留超过77％的存活率;R53、R62和R63菌株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)、大肠杆菌(Escherichia coli)和鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella ty-phimurium)4种食源性病原细菌均有一定的抑制作用,对常见的抗生素如红霉素、青霉素、氯霉素、氨苄西林和头孢唑啉均敏感.     

五株食源性致病菌特异性卵黄抗体的研制

目的：确定制备用作食品添加剂的引起食品中毒常见的5种致病菌的高免卵黄抗体的技术参数。方法：以食品中常见的由该实验室分离和鉴定的沙门氏菌,金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌,副溶血弧菌,变形杆菌五株地方性致病菌株的等量混合菌液用油佐剂乳化后免疫新开产的蛋鸡,收集高免蛋,利用水稀释法制备多克隆卵黄抗体,并用超滤法对其进行浓缩。结果：免疫后高免蛋收集的最佳时间为三免后第2~8周,水稀释法最佳稀释比例为1:6,pH值为5.2,通过超滤IgY浓度提高了6.48倍,IgY的纯度由原来的24.6%提高到42.3%。结论：通过上     

即食冷冻水产品加工过程卫生质量控制的研究

以即食冻熟螯虾仁为对象,研究了即食冷冻水产品加工过程中的环境、人员、产品接触面等的卫生状况,对从原料、半成品到成品整个加工过程的细菌总数、大肠菌群和金黄色葡萄球菌进行了跟踪检测,分析了加工全过程的微生物消长规律和污染来源,重点分析了剥虾仁过程中的二次污染状况,并根据HACCP原理,提出了冻熟螯虾仁生产过程卫生质量的控制策略。     

总大肠菌群革兰氏染色的关键控制点分析

以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌标准菌株为对照,以大肠杆菌标准菌株为总大肠菌群的代表菌,通过大量的染色试验,初步探讨菌种菌龄、涂菌状态、碘液媒染时间和酒精脱色时间4个关键控制点对水质检验中总大肠菌群革兰氏染色效果的影响,结果表明菌种菌龄22~26 h,涂菌状态用接种环边缘挑取少量典型菌分散涂布,碘液媒染时间20~60 s,酒精脱色时间30~50 s为最优方案。     

香菜根提取液在秋葵饮料中的应用

研究了香菜根提取液在秋葵饮料中的应用,结果表明,香菜根提取液以添加量1%加入秋葵饮料最佳,秋葵饮料中抗坏血酸≥1.4 mg/100 m L (以AA计),可溶性固形物≥7.5%(以20℃折光法计)。检测结果表明,秋葵饮料中菌落总数的数值≤100 CFU/m L,大肠菌群的数值≤3 MPN/100 m L,金黄色葡萄球、菌沙门菌及志贺菌不允许检出。     

地衣芽孢杆菌抗菌肽的纯化及抗菌特性分析

从地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）LY12发酵液中分离纯化抗菌肽,并得到抗菌肽抗菌特性。通过超滤、(DEAE-Sepharose FF离子交换层析、Sephadex G-15分子筛凝胶过滤层析、反向高效液相色谱（RT-HPLC）等方法纯化该抗菌肽。LC-ESI-MS质谱显示抗菌肽分子量为2750.785Da,同Tricine SDS-PAGE分析结果基本一致。体外抗菌试验结果显示,抗菌肽LYF12能够抑制丝状真菌、细菌的生长。对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、大肠杆菌（Escherichia coli）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、藤黄微球菌（Micrococcus aureus）、蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）、副溶血性弧菌（Vibrio parachaemolyticus）的最低抑菌浓度分别为9.8、19.8、20.7、7.2、9.6、10.2 和15.7μg/ml。抗菌肽显示出对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌及真菌具有较好的抗菌效果。从地衣芽孢杆菌LY12分离的抗菌肽在食品防腐中具有潜在的应用价值。     

滔罗定的体外抑菌作用及对人工混合感染鸡的疗效试验观察

研究了滔罗定的体外抑菌效果及对人工混合感染雏鸡大肠杆菌和沙门氏菌的治疗效果.采用试管两倍稀释法测定滔罗定对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌标准菌株和临床分离菌株的最小抑菌浓度.选择180只4日龄罗曼雏鸡随机分为健康组(Ⅰ),感染对照组(Ⅱ),氟苯尼考治疗对照组(Ⅲ)和滔罗定高、中、低剂量组(Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ)等6个不同处理组,进行人工致病治疗试验.试验结果:滔罗定对受试菌株的体外最小抑菌浓度≥256μg/ml.治疗试验中,与感染对照组相比,滔罗定高、中剂量组的死亡率分别降低了20.0%、16.7%,治愈率分别提高了23.3%、16.6%,差异均极显著(P＜0.01);滔罗定高、中剂量组的有效率和治愈率均高于氟苯尼考组,但差异不显著(P＞0.05).结果表明,滔罗定的体外抑菌效果较差,但对人工混合感染雏鸡大肠杆菌和沙门氏菌具有一定的治疗效果.     

成都市高校周边市场部分市售食品的微生物污染调查

为了了解成都市高校周边市场即食食品的微生物污染状况,研究食品种类、季节、包装、来源对食品微生物污染的影响。在不同季节随机采集奶制品、肉制品、糕点、凉拌菜等10类即食食品共703份,按GB/T4789和国家卫生标准进行检验和评价,对不同种类、季节、包装、来源的食品样品检测结果进行比较分析。结果表明：食品总的合格率为86.06%,奶制品、酱腌菜、果蔬饮料的合格率较高,在90%以上;豆制品、饮用水、肉制品的合格率比较低,在80%以下。不合格的食品绝大部分出现在夏秋季节。菌落总数和大肠菌群的合格率较低,沙门菌和金黄色葡萄球菌的检出率高。不同来源食品合格率之间有显著差异,其合格率表现为大型超市>小型超市>餐饮店>农贸市场>移动摊点。有包装的食品的合格率高于无包装食品的合格率。由此可见,高校周边市场即食食品微生物污染严重,致病菌的检出率高,应该加强对学生的食品安全教育和周边市场的卫生监督。     

芦荟蒽醌类物质的提取及其抑菌性研究

本试验利用超声波提取库拉索芦荟中蒽醌类物质,测定其含量,并对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌进行抑菌性研究。用滤纸片法、固体稀释法及最小抑菌浓度法（MIC）分别检测芦荟蒽醌类物质对各种菌的抑菌性,并比较分析3种方法的抑菌效果。由固体稀释法测定芦荟蒽醌提取液的抑菌效果可知,蒽醌类物质百分浓度越高,菌落数越少,显示出越高的抑菌性。最小抑菌浓度法（MIC）测出,芦荟蒽醌提取液对大肠杆菌、金色葡萄球菌的MIC为90%,对枯草芽孢杆菌的MIC为80%,显示出MIC都较高,说明低浓度的芦荟蒽醌类抑菌能力有限,需要较高的浓度才能抑制菌生长。     

菊糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群数量及排泄物氨气散发量的影响

取1日龄AA肉鸡240只,随机分成4组,分别饲喂添加含0.0%菊糖(对照组)、0.3%菊糖、0.1%枯草芽孢杆菌0、.3%菊糖 0.1%枯草芽孢杆菌的玉米-豆粕型日粮42 d。垫料平养,自由采食和饮水。于21,42日龄平板菌落计数法测定肉鸡盲肠菌群数量和纳氏试剂法测定排泄物氨气。结果表明:21日龄时,菊糖和枯草芽孢杆菌可降低大肠杆菌和沙门氏菌的数量,以菊糖 枯草芽孢杆菌组影响更为显著,但对总需氧菌和乳酸杆菌数量差异不显著;42日龄时,菊糖和枯草芽孢杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌数量降低的作用更加明显,对总需氧菌影响仍然不大,但可增加乳酸杆菌数量,从而调节肉鸡肠道微生态环境;菊糖和枯草芽孢杆菌能有效减少肉鸡排泄物氨气散发量,以菊糖 枯草芽孢杆菌组作用更为显著,有利于改善肉鸡鸡舍环境。     

高压脉冲电场与温和热对液态蛋协同杀菌动力学和工艺研究

本文研究了高压脉冲电场（PEF）与温和热（15、30和55℃）对蛋清的协同杀菌效果,建立了动力学模型。结果表明：PEF在15、30和55℃下对大肠杆菌的致死作用都较好地符合一级动力学模型（R2>0.97）,杀菌动力学常数K值在4.5-13.2×10-3 (1/μs)之间。杀菌动力学常数K是电场强度和温度的函数,温度越高,电场强度越大,其杀菌一级动力学常数越大,表明PEF与温和热的协同效应越强。本文还确定了PEF与温和热对蛋清液杀菌的工艺, PEF（35kV/cm,400μs）在55℃下能够显著增强对蛋清液中四种指示菌的杀菌效果。PEF（35kV/cm,400μs）在15℃下可使蛋清中大肠杆菌、沙门氏菌、李斯特菌和金黄色葡萄球菌分别下降3.2、3.6、3.4和2.8个对数值;当温度升至55℃,四种指示菌的致死率分别提高到5.4、5.8、6.5和4.3个对数值。     

奶牛乳头专用消毒剂消毒效力试验研究

通过对MEDPH奶牛乳头专用消毒剂进行实验室消毒试验、现场消毒试验及同类产品的对比试验,测定了其杀菌效果。实验室消毒试验表明,MEDPH奶牛乳头专用消毒剂使用液（含有效碘0.04%）对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌的最低杀菌浓度分别为0.01%（使用液4倍稀释）、0.01%（使用液4倍稀释）、0.02%（使用液2倍稀释）;最快有效时间为15s,杀菌率达99.99%,杀灭指数大于104。现场消毒试验表明,该消毒剂使用液对奶牛乳头表面细菌杀菌率达99.99%,杀灭指数大于104,且对奶中乳头无不良反应,安全可靠。对比试验表明：其杀菌效果和使用效果均优于“碘伏”,与“滴宝”效果相当。     

不同发酵剂制得的发酵牛肉调味基料的抑菌性研究

为了解不同发酵剂和发酵时间制得的发酵牛肉调味基料(Fermented Beef Flavorings,FBF)的抑菌性差异,试验分别以WBL-45(木糖葡萄球菌+肉葡萄球菌+清酒乳杆菌)、VHI-41(木糖葡萄球菌+戊糖片球菌+植物乳杆菌)和清酒乳杆菌(Lactobacillus sake,LS)为发酵剂制备FBF,试验分为3组:①CK组,牛骨肉末高压浸提-酶解-美拉德反应;②发酵12 h组,在酶解和美拉德反应之间添加发酵环节,接种3种发酵剂分别发酵12 h;③发酵16 h组,在第二种处理的基础上,将发酵时间延长至16 h。分别以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.typhimurium)、大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli)、乙型副伤寒沙门氏菌(Salmonella paratyphi B,S.paratyphi B)为指示菌,将FBF与指示菌菌液混合后于37℃培养24 h,通过测定OD_(600nm)计算抑菌性。结果表明:CK组对S. aureus、S. typhimurium、E. coli的抑制率分别为25%、4%、60%,对S. paratyphi B无抑制作用。发酵处理组抑菌性高于CK组。发酵12 h,三种发酵剂处理组对指示菌的抑制率约为37%～83%,当发酵时间延长到16 h,抑制率可增加到44%～86%。随着发酵时间的延长,不同组FBF抑菌性增强。其中,VHI-41组的抑菌性最佳。