苹果花药石蜡切片制片技术改良及其解剖学观察

石蜡切片是常规制片技术中应用最普遍的方法,主要用于观察组织细胞结构。本研究以苹果花药作为实验材料,通过改良脱水,染色等制片环节,即增加脱水时乙醇的浓度梯度,以及用埃里希氏(Ehrlich)苏木精染色15min,得到了染色更均匀,细胞完整度更高的玻片标本。实验结果表明,用改良后的制片方法得到切片组织更完整,更能清晰的辨认出花粉细胞的结构,利于观察。     

一种适用于植物组织的快速石蜡制片法

为了建立一种快速石蜡制片方法,减少实验过程中有毒试剂的使用量。该文以葡萄、桃、花叶锦带等的部分组织为实验材料,采用石蜡切片法,通过改良透明、包埋试剂、染色等制片环节,进行石蜡制片研究。试验结果表明：该法不但简化了实验步骤、将制片周期缩短为原来的1/3,而且其制得的切片质量与常规方法无区别,同时也减少了实验过程中有毒试剂的使用量,整体上提高了植物石蜡制片的效率。     

‘蓝塔’圆柏茎段组织石蜡切片技术研究

【研究目的】为了得到‘蓝塔’(Sabina chinesis ‘Lanta’)圆柏茎段横切面的石蜡切片制作方法，从而为进一步研究其扦插生根解剖学发生机理奠定基础。【方法】选择‘蓝塔’圆柏当年生16 cm长茎段，剪取基部5 mm为材料，对传统石蜡制片法软化、粘片、染色等步骤进行改良。【结果】结果表明：20%盐酸浸泡24 h和水煮4天优于浓盐酸浸泡24 h、水煮10天、甘油-乙醇浸泡10天这3种软化方案；合理的脱水、透明时间为每级2 h ；最优切片厚度为10 μm；采用明胶粘片剂与40%乙醇的混合液较传统粘片方法不易脱片；番红染色60 min、固绿10 s得到的切片染色清晰且省时间。【结论】该研究为‘蓝塔’圆柏茎段切片技术提供了一套具体的操作步骤，同时也为与‘蓝塔’圆柏茎段结构相似树种的研究提供技术参考。     

3种组织固定液对大菱鲆肝脏切片质量影响和效果比较

为查明3种组织固定液对大菱鲆肝脏石蜡切片质量的影响,筛选效果最佳的固定液。本实验选用波恩氏(Bouin)、戴维森氏(Davidson)和4%多聚甲醛(Paraformaldehyde, PFA)3种组织固定液,对大菱鲆的肝脏进行固定,制作石蜡切片,通过苏木素-伊红(H-E)和免疫组织化学(Immunohistochemistry)染色,观察组织细胞形态学特征,利用统计学方法分析细胞完整度和免疫组化阳性率情况。结果发现,3种固定液对大菱鲆肝组织石蜡切片固定效果存在显著差异,Bouin固定液组织H-E染色细胞结构清晰、形态完整,Davidson固定液H-E染色组织溶解、细胞结构不清晰,但能分辨出核质界线,4%多聚甲醛组H-E染色鲜艳,但核质分界不清晰。完整肝细胞比例,4%PFA显著低于Bouin和Davidson固定液(P<0.05),且Bouin和Davidson固定液无显著差异(P>0.05)。肝组织增殖细胞核抗原(proliefrating cell nuclear antigen, PCNA)免疫组化染色阳性率3种固定液存在显著差异,Bouin固定液显著高于4%PFA和...     

粳稻颖果石蜡切片中染色时间的摸索及其解剖结构的观察

以典型粳稻品种辽粳294和盐丰47花后不同天数的颖果为试材,对传统石蜡切片技术中固绿步骤的染色时间进行试验.结果表明,花后不同天数的颖果染色最佳时间差异很大,即发育的前期颖果幼嫩,固绿染色时间反而较长,需要20～25s,而后期随着颖果逐渐充实,染色时间相对缩短,只需10～20s.利用改良后的方法,对颖果结构进行观察发现,花后第4天～第22天颖果果皮结构石蜡切片完整清晰,第4天～第12天颖果整体结构完整清晰,染色分明.观测表明,两品种颖果背部维管束截面均近似椭圆形,从整体上看,两品种颖果背部维管束表现为从基部到顶部由粗到细的象牙形管-束状结构,由居中的导管束和周边的若干筛管束构成.通过改进的切片方法可以对颖果的解剖结构进行清晰地观察.     

蜀葵根尖染色体制片技术优化和核型分析

本研究以蜀葵‘春庆’(Althaea rosea‘Spring Celebrities’)为材料,从预处理试剂、固定时间、解离试剂和时间四个角度,优化常规染色体制片技术,获得了一套蜀葵染色体制片技术,并以此为基础进行核型分析,获得完整核型指标。根据研究结果,使用冰水混合物预处理24 h,卡诺氏液固定处理24 h,接着1 mol/L HCl解离处理90 min后,用卡宝品红染色5 min,在100×油镜下观察,可以观察到结构完整、分散清晰的蜀葵染色体制片。蜀葵为二倍体,核型公式为K(2n)=38=22m+12sm+4st,核型不对称系数为64.91%,核型分类属于2B型,染色体相对长度组成为2n=38=8L+8M2+12M1+10S。这些核型指标为研究蜀葵的进化和育种提供了重要的参考数据。     

苜蓿根尖制片技术研究

为了探索苜蓿根尖压片技术方法,为苜蓿染色体制片提供参考依据。试验以苜蓿幼苗的根尖为材料,通过对预处理液、预处理时间、固定时间、染色液及染色时间进行筛选,摸索一套适合苜蓿染色体制片的技术。结果表明：苜蓿制片过程中以8-羟基喹啉为预处理液,预处理2.5 h,用卡诺氏固定液固定20 h,用1 mol/L HCl在60℃条件下解离8 min,用45%的醋酸在室温下软化20 min,以姬姆萨为染液染色3 h,压片效果较好。该研究为苜蓿倍性的直接鉴定提供了方法。     

京水菜花芽分化的形态解剖学研究

采用实体解剖和石蜡连续切片的方法对京水菜花芽分化过程进行了形态学上的观察研究。结果表明,京水菜花芽分化可分为花序分化期和花器官分化期。花序分化期生长点分化各级花枝,花枝形成后其上的花芽进入花器官分化期。花器官分化期由花萼分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期、雌蕊分化期组成。     

浅析影响石蜡切片质量的关键因素

摘要：石蜡切片技术是组织学、发育生物学研究的主要实验方法,同时也是病理学中观察病理变化的重要手段,广泛地应用于临床病理诊断、教学和科研工作中。但是许多实验人员未经过严格而系统的培训,操作中由于经验不足,操作不当,常出现切片碎裂、切片脱落、染色不均、模糊不清及细胞结构染色对比不明显等现象而影响观察。笔者在阅读了大量的石蜡切片相关文献的基础上,结合自身体会,将影响石蜡切片质量的关键因素分为了实验试剂、时间和温度的选择三方面,分析了其对石蜡切片过程各环节的影响和可能出现的问题,并详述了如何控制这三方面以提高切片质量。     

一种小扁豆内皮层及凯氏带的观察方法

用普通显微镜对幼根石蜡切片观察时,内皮层及凯氏带图像缺乏三维显示效果,为此提出一种获得小扁豆内皮层及凯氏带三维显示效果图像的方法.利用石蜡制片技术和普通光学显微镜获得小扁豆内皮层及凯氏带的数码照片,用word软件对这种二维平面图像进行光学信息解析,即可获得具有三维立体效果的解剖学图像.结果表明,小扁豆内皮层及凯氏带的二维平面图像经光学信息处理后,可获得具有三维立体效果的、类似扫描电镜的数码照片,能清楚地观察到小扁豆的内皮层及“凯氏带”结构,并发现二维平面图像中的所谓“凯氏带”,是由内皮层细胞的原生质体在制片过程中脱水收缩形成,不是真正的“凯氏带”结构.普通光学显微镜的成像光及其数码照片中蕴含着大量的、有关成像物体的三维结构和化学成分等信息,这些丰富的光学信息目前尚未能进行深入解析.     

体视显微镜法观察烤烟花芽分化的研究

对低温诱导后的烤烟茎端分生组织花芽分化过程进行了体视显微镜法观察,镜检结果表明,该方法比扫描电镜法和石蜡切片法具有明显的简便性和快捷性。此方法对茎端部位的空间特征的凸显性优于扫描电镜的方法,具有较好的整体性;同时与扫描电镜法观察到的烤烟侧枝花序分化相一致,这是石蜡切片法难以捕捉和发现的。     

保护地桃花芽分化观察

2000年6月到10月对保护地桃品种早醒艳桃的花芽进行取材,采用扫描电镜技术和制作石蜡切片系统地研究了保护地桃花芽分化的过程。结果表明：保护地桃花芽分化时间从7月中旬到9月下旬,7月末到9月中旬是早醒艳桃花芽集中分化期。研究发现花芽分化与温度、不同类型枝条、同一枝条不同节位以及营养物质积累有密切关系。     

蝴蝶兰成花差异基因的筛选与分析

为探明蝴蝶兰花芽分化调控的内在分子机制,以及花芽分化过程中的关键基因,本研究以蝴蝶兰不同分化时期的花芽进行转录组测序,筛选调控植株成花转变的关键基因并进行实时荧光定量PCR (qRT-PCR)验证。测序共得到44.42 Gb的原始数据,分别注释到7个公共数据库(Swiss-Prot, Nr, KEGG, KOG, Pfam,eggNOG和GO)。其中成功被GO注释到的Unigenes有16 181条;被KEGG注释到的Unigenes共有8 099条,分别注释到207个代谢通路。差异表达基因分析表明,2个花芽分化时期的蝴蝶兰共获得6 088条差异表达基因,其中上调表达有3 319条,下调表达有2 769条。通过查阅文献寻找出36个与蝴蝶兰花芽分化有关的基因。光周期调节途径中得到CRY1和PHYA;生物节律相关基因PIF4和EMF1;年龄途径相关基因SPL等;以及开花整合因子基因CO、FT、LFY等。选取GA序列、FD序列、FT序列、CO序列4个相关基因进行q RT-PCR验证,结果与测序结果相符。本研究为蝴蝶兰花芽调控提供一定的理论指导。     

植物花芽分化机理研究进展

花芽分化是有花植物发育中最为关键的阶段，同时也是一个复杂的形态建成过程。这一过程是在植物体内外因子的共同作用，相互协调下完成的，了解植物的花芽分化的机理对于制定合理的栽培措施进行花期调控实施观赏植物的周年生产及实现植物的遗传调控具有重要意义。本文综述了植物花芽分化过程中，环境因素，植物体自身因素，生长调节剂等因子对其花芽分化的影响，并且就植物花芽分化的调节机制作了一个概述和探讨。     

乙烯利、多效唑对龙眼防冲梢作用研究

以15年生‘石硖’结果树为试材,在顶芽萌动期喷施不同浓度的乙烯利和多效唑,观察其对龙眼花芽分化的影响,筛选出适合的龙眼预防冲梢药剂。结果发现在春季龙眼花穗顶芽刚开始萌动,芽体变软时喷施乙烯利233 mg/L+多效唑90 mg/L,或者乙烯利300 mg/L+多效唑90 mg/L对龙眼预防冲梢、促进花穗形成效果最好。     

植物花芽分化研究进展

花芽分化是有花植物发育中最为关键的阶段,同时也是一个复杂的形态建成过程。这一过程是在植物体内外因子的共同作用和相互协调下完成的。了解植物花芽分化的机理对于制定合理的栽培措施、进行花期调控等具有重要意义。本文就植物花芽分化过程中的形态结构、环境因素、植物体自身因素以及生长调节剂对花芽分化的影响及植物花芽分化的调节机制做了一个概述,并对花芽分化过程中基因对成花的作用做了简要探讨。     

八仙花花芽分化形态观察及成花机理研究

以八仙花“经典红”为试验材料,利用扫描电镜定期观察花芽形态发育进程,在花芽分化后期将植物进行控温促花处理,观察其开花情况,分析温度对八仙花成花的影响。结果表明,八仙花的花芽分化过程分为5个阶段,分别是营养生长期、花芽膨大期、分生组织分化期、花原基形成期以及花器官形成期；经过不同时间低温处理的八仙花均能提前开花,但未经过低温春化的植物,花品质受到一定的影响；八仙花花芽分化与温度具有显著相关性,20-25℃开始生长点膨大,15-20℃进入分生组织分化期,10℃形成花原基,5℃形成花器官并打破休眠,整个过程历时约4个月。