牦牛转移因子对藏绵羊外周血淋巴细胞转化功能的影响

为研究牦牛转移因子(transfer factor,TF)对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的作用,试验采用MTT法探索不同浓度淋巴细胞、犊牛血清(FCS)、刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)对淋巴细胞增殖的影响。在最佳条件下,探讨牦牛TF对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的影响。结果表明,当藏绵羊淋巴细胞浓度为5.4×10⁶个/mL,犊牛血清含量为8%,ConA为1 μg/mL时,刺激效果最佳,且TF单独或协同丝裂原时,对淋巴细胞都有促进增殖的效果,且最佳浓度为1.5 mg/mL。体内注射TF后,各剂量组在注射第3天时,淋巴细胞再次受到TF单独或协同ConA刺激时,其增殖效果与细胞组单独增殖效果比较,差异不显著(P>0.05),至第5~7天时,其增殖效果明显高于细胞组,差异显著(P<0.05)。注射2 mL剂量组转化增殖效果优于1 mL和3 mL剂量组,差异显著(P<0.05)。说明牦牛TF能够有效增强机体免疫力,是一种很好的免疫增强剂。     

绿原酸对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析绿原酸（CHA）对小鼠脾脏淋巴细胞增殖、分泌功能的影响。无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入诱导剂刀豆蛋白（ConA）和脂多糖（LPS）以及0、40、80、160μg/mL不同浓度的CHA,经过不同时间培养后,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的增殖,ELISA和Griess法分别检测淋巴细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果表明：低浓度和中浓度CHA提高ConA/LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖和存活,而高浓度CHA明显抑制其细胞增殖转化;CHA促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞分泌NO;CHA对T淋巴细胞分泌TNF-α影响不大,中浓度CHA可显著促进脾脏B淋巴细胞分泌TNF-α,高浓度反而抑制其分泌;CHA促进环磷酰胺处理的小鼠脾脏T和B淋巴细胞体外增殖,但对其NO分泌量影响不明显。结果提示：CHA可能通过影响淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而表现免疫调节作用。     

猪转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响

无菌采取犬抗凝血，分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验，探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素（PHA-P）、犊牛血清（FCS）对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上，研究不同浓度猪转移因子（transfer factor, TF）对犬淋巴细胞增殖的影响，增殖的结果用MTT法测定。试验结果表明，当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml，PHA-P为12.5μg/ml，FCS为10%时，淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下，猪TF浓度在0.195~25mg/ml时，对淋巴细胞转化增殖均有明显促进作用，猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml，且猪TF单独作用于淋巴细胞的效果优于与PHA-P的协同作用。试验结果证实，异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果，同时本研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了试验依据。     

犬、猪转移因子对犬淋巴细胞体外转化增殖影响的比较研究

无菌采取犬抗凝血，分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验，探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素P（PHA-P）、犊牛血清（FCS）对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上，研究不同浓度犬、猪转移因子（transfer factor, TF）对犬淋巴细胞增殖的影响，增殖的结果用MTT法测定。结果表明，当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml，PHA-P为12.5μg/ml，FCS为 10%时，淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下，犬、猪TF浓度在0.195~25mg/ml时，对淋巴细胞转化增殖均有促进作用，但犬、猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml，且犬、猪TF单独作用于淋巴细胞的效应明显优于与PHA-P的协同作用。结果证实，同源或异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果，同时研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了实验依据。     

犬淋巴细胞转化增殖试验最佳条件的确定

本试验选择杂种牧羊犬作为实验犬，用MTT法检探讨了不同浓度犊牛血清（FCS）、淋巴细胞、植物血凝素P（PHA-P）和刀豆蛋白A（ConA）对犬淋巴细胞增殖的影响。确定了犊牛血清含量为10%，淋巴细胞浓度为5×106个/mL，用丝裂原PHA-P 刺激的最佳浓度为12.5ug/mL时，MTT法测定能够刺激犬淋巴细胞转化增殖，但t检验分析表明其促进淋巴细胞增殖的效果并不显著；当其它条件不变，所用的丝裂原为Con A时，它在浓度为0.5～2.5μg/mL范围内均可以显著刺激T细胞的增殖（P<0.05），且在浓度为2.5μg/mL时刺激效果最佳     

玉屏风复合多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

摘要：为探讨玉屏风复合多糖对免疫功能损伤的调节和保护作用，以环磷酰胺80mg/kg诱导的免疫低下小鼠为实验动物模型，通过检测小鼠的脾脏指数、脾淋巴细胞增殖能力、血清溶血素和血清中IL-2等指标，观察不同剂量玉屏风复合多糖（100，200，400mg/kg）对小鼠脾脏指数、脾淋巴细胞增殖能力、血清溶血素和血清IL-2的影响。结果发现，玉屏风多糖能使免疫抑制小鼠的脾脏指数升高，促进脾淋巴细胞的增值；玉屏风多糖可促进正常小鼠血清溶血素抗体的生成，对抗环磷酰胺所致的小鼠血清溶血素抗体分泌减少；玉屏风复合多糖能提高正常小鼠和免疫抑制的小鼠血清的IL-2水平，尤其以中、低剂量组效果较好。结果证实，玉屏风多糖能对抗环磷酰胺诱导的小鼠免疫抑制，提高免疫功能，对小鼠的脾脏功能也有保护作用。     

Caffeoyl Glycoside对小鼠免疫细胞功能的影响

本实验室从胡黄连根茎分离到1,6-di-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside单体Caffeoyl Glycoside（CG）,体外试验测定其对小鼠免疫细胞功能的影响。通过MTT法检测CG对Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖,NK细胞对K562细胞杀伤活性的影响,以及小鼠腹腔巨噬细胞（PMΦ）能量代谢水平;CG对PMΦ吞噬中性红能力的影响。CG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原（Con A或LPS）作用均能够显著增强小鼠脾淋巴细胞、PMΦ的增殖能力（P〈0.05或P〈0.01）,CG单独作用就能显著提高NK对K562细胞的杀伤活性（P〈0.05或P〈0.01）。CG在体外对小鼠主要免疫细胞的增值和功能方面具有显著的促进作用（P〈0.05或P〈0.01）。研究结果显示CG具有特异性与非特异性的免疫增强作用。     

蟾酥注射液对小鼠免疫细胞影响的实验研究

为了观察蟾酥注射液对小鼠的免疫细胞增殖及其分泌细胞因子的作用,采用中药免疫药理学方法,选择不同浓度的蟾酥注射液作为试验组,分别与小鼠的脾淋巴细胞以及LPS或者ConA共同孵育48 h,检测细胞增殖水平的变化;将蟾酥注射液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养,检测蟾酥注射液对巨噬细胞吞噬中性红能力的影响;将蟾酥注射液与自然杀伤细胞共培养,检测蟾酥注射液对NK细胞杀伤能力的影响;取脾细胞与蟾酥注射液共培养上清,ELSIA法检测蟾酥注射液对几种重要的细胞因子（IFN-γ、IL-2、IL-12）分泌水平的变化。结果显示蟾酥注射液在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原（Con A或LPS）作用能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖能力（P〈0.05或P〈0.01）;蟾酥注射液单独作用可以显著提高巨噬细胞吞噬中性红的能力;蟾酥注射液能够显著提高小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤活性;同时蟾酥注射液能够显著增强小鼠脾淋巴细胞分泌Th1型细胞因子。说明蟾酥注射液在体外能够显著提高几种主要免疫细胞的增殖和功能,研究结果显示蟾酥注射具有显著的非特异性免疫增强作用。     

Caffeoyl Glycoside对小鼠免疫细胞功能的影响

本实验室从胡黄连根茎分离到1，6-di-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside单体Caffeoyl Glycoside（CG），体外试验测定其对小鼠免疫细胞功能的影响。通过MTT法检测CG对Balb／c小鼠脾淋巴细胞增殖，NK细胞对K562细胞杀伤活性的影响，以及小鼠腹腔巨噬细胞（PMφ）能量代谢水平；CG对PMφ吞噬中性红能力的影响。CG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原（ConA或LPS）作用均能够显著增强小鼠脾淋巴细胞、PMφ的增殖能力（P〈0．05或P〈0．01），CG单独作用就能显著提高NK对K562细胞的杀伤活性（P〈0．05或P〈0．01）。CG在体外对小鼠主要免疫细胞的增值和功能方面具有显著的促进作用（P〈0．05或P〈0．01）。研究结果显示CG具有特异性与非特异性的免疫增强作用。     

苜蓿多糖对小鼠淋巴细胞增殖和NK细胞活性影响的研究

为了探讨苜蓿多糖对小鼠免疫功能的影响，从苜蓿中提取苜蓿多糖，通过体外苜蓿多糖对淋巴细胞增殖和NK细胞活性影响的研究，初步确定其免疫调节活性。采用MTT法，检测苜蓿多糖对正常Balb/c小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响和NK细胞对K562细胞杀伤活性的影响。结果表明：苜蓿多糖可以单一激活促进小鼠脾淋巴细胞的增殖，可以协同ConA刺激T细胞增殖，或协同LPS刺激B细胞增殖，提示苜蓿多糖能够调节机体的细胞免疫和体液免疫功能；苜蓿多糖可以显著地增强NK细胞对K562靶细胞的杀伤活性，提示苜蓿多糖能显著地增强机体非特异性免疫功能。因此，说明苜蓿多糖具有很好的免疫调节效果。     

黄芪多糖对氟苯尼考诱导的免疫抑制小鼠保护作用

为了调节动物免疫状态和改善机体防御能力提供试验依据。利用MTT法和ELISA法探讨黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用，建立氟苯尼考诱导免疫抑制小鼠模型，通过称重计算脾脏指数；MTT法检测T、B淋巴细胞增殖反应；双抗夹心ELISA方法检测小鼠血清中IgG，IgG1，IgG2b抗体水平。结果表明：黄芪多糖能够提高免疫抑制小鼠的脾脏指数，在ConA或者LPS刺激下提高T、B淋巴细胞增殖率，提高抗体水平。黄芪多糖在一定剂量下对氟苯尼考诱导的免疫抑制小鼠有一定的保护作用。     

蟾酥注射液对小鼠淋巴细胞影响的研究

为了研究蟾酥注射液对机体淋巴细胞免疫功能的影响，选择不同浓度的蟾酥注射液作为试验组，分别与小鼠的脾淋巴细胞共同孵育48 h，检测细胞增殖水平的影响；用ELSIA法检测蟾酥注射液对几种重要的细胞因子(IFN-γ、IL-2和IL-12)分泌的影响；应用流式细胞技术检测蟾酥注射液对小鼠脾中T淋巴细胞CD4/CD8表达和细胞周期的影响。结果显示，蟾酥注射液在一定剂量范围内能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖能力；能够显著增强IFN-γ、IL-2和IL-12分泌；能够显著提高小鼠脾中CD4+ CD8-和CD4- CD8+表型的T淋巴细胞亚群百分率；能够显著提高小鼠脾中淋巴细胞进入S期的百分率。表明蟾酥注射液在体外能够显著提高淋巴细胞的增殖及功能，说明蟾酥注射能显著地增强机体特异性免疫功能。     

海参加工废液中皂苷的提取及其抗肿瘤作用的研究

从海参废液中提取海参皂苷,通过建立S180皮下肿瘤小鼠模型,研究其对肿瘤小鼠的抑瘤作用,以及对免疫器官的影响。采用经口灌胃和腹腔注射2种方式给药后,将小鼠称重,断颈处死,然后剥离的肿瘤组织、胸腺、脾脏,称重并进行统计学分析。结果表明:海参皂苷能显著抑制S180皮下瘤小鼠的肿瘤生长;通过2种给药方式相比较,腹腔注射给药方式抑瘤效果(60.29%,P<0.01)明显优于经口灌胃给药方式(37.70%;P<0.05);与阳性对照环磷酰胺相比,海参皂苷对小鼠的生长影响较小,而且提高小鼠的脾脏指数和胸腺指数,对小鼠免疫器官有促进作用。本实验为今后海参皂苷抗肿瘤活性的进一步研究提供了有效依据.     

β-甘露聚糖酶对AA+鸡生产性能和免疫功能的影响

为了探讨日粮中添加β-甘露聚糖酶对AA+鸡生产性能和免疫功能的影响，选取1日龄健康的AA+肉鸡180羽，随机为2个处理组，每个处理3个重复，每个重复30只。试验分为对照组(基础日粮)和试验组（基础日粮+ 400g/Tβ-甘露聚糖酶），试验期42天。结果表明β-甘露聚糖酶能不同程度的提高AA鸡各生长阶段的日增重和饲料转化率，但差异显著（P>0.05），明显提高42d血液中免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的含量，差异显著。21d、42d的免疫器官指数、T淋巴细胞转化率和ND抗体水平也有不同程度的提高，与对照组相比，差异不显著（P>0.05）。说明β-甘露聚糖酶能提高肉用鹌鹑生长性能和增强免疫的功能。     

大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结中淋巴细胞增殖的影响

为了研究大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结中淋巴细胞增殖与活化的影响,并揭示大豆异黄酮提高奶牛免疫性能的作用机理。试验采用6×2(浓度×时间)实验设计,各浓度梯度的大豆异黄酮(100.00、25.00、5.00、1.00、0.25、0.05μg/mL)与淋巴细胞共育培养48h和60h后,用酶标仪在570nm处测得各孔的OD值。结果表明:(1)添加0.05～25μg/mL大豆异黄酮能够促进奶牛肠系淋巴结中淋巴细胞的增殖,在添加量为5μg/mL时达到极显著的促进作用,但大豆异黄酮添加剂量达100μg/mL时显著抑制肠系淋巴结淋巴细胞的增殖;(2)100μg/mL和25μg/mL大豆异黄酮添加组极显著抑制奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.01),而1μg/mL浓度组则显著促进奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05),其余各浓度组对奶牛脾脏淋巴细胞有抑制作用,但差异不显著。     

紫衫醇对小鼠不同组织巨噬细胞功能的影响

为了探讨紫杉醇（Paclitaxel,PA）对小鼠不同组织巨噬细胞增殖和功能的影响。无菌操作制备小鼠腹腔、骨髓和脾脏巨噬细胞,在体外细胞培养体系中分别加入不同浓度40、80、160 ng/mL的PA和脂多糖（LPS）共培养,采用MTT法检测细胞增殖,ELISA和Griess法分别检测细胞分泌TNF-α和NO量,瑞氏-吉姆萨染色法测定腹腔巨噬细胞吞噬能力。结果表明：PA促进腹腔巨噬细胞和LPS诱导的腹腔和骨髓巨噬细胞增殖,但抑制脾脏和骨髓巨噬细胞以及LPS诱导的脾脏巨噬细胞增殖;PA抑制不同组织巨噬细胞分泌TNF-α,但促进腹腔和脾脏巨噬细胞分泌NO;PA提高了腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。PA对小鼠不同组织巨噬细胞的免疫功能均有影响,这为进一步阐明PA的免疫调节机理提供了新的理论依据。