一个稀释度间接ELISA法测定IBDV抗体效价的研究

应用样品一个稀释度间接ＥＬＩＳＡ法对产蛋母鸡及其小鸡进行传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗体效价测定，同时用病毒中和试验（ＶＮ）作比较检测。结果表明，该ＥＬＩＳＡ法比ＶＮ法敏感、精确、简便，所有样品只测定一个稀释度的Ｐ／Ｎ值，再根据线性回归方程（ｒ１=０．８８９８，Ｐ≤０．０５）计算抗体效价，达到省时省力、节约材料、减少试验误差和一次可进行大批样品检测的目的。２种方法相关性较高（ｒ３=０．８４９２，Ｐ＜０．０１），小鸡母源抗体衰减与日龄呈线性关系（ｒ２=－０．８７５８，Ｐ＜０．０１），ＩＢＤＶ母源抗体半衰期为６．３ｄ。     

不同季节蛋鸡饲料养分浓度的研究Ⅱ.高温期罗曼蛋鸡日粮的优化研究

在高温夏季（１９９３年７月１日～９月３０日，合肥地区，开放式鸡舍，舍温２７．９～３８．７℃，平均３２．３℃），用６种不同配方的日粮饲喂处于相同生境的６组２３～３６周龄罗曼蛋鸡。按罗曼公司推荐的饲养标准配制第１组日粮；对第２～６组日粮养分浓度作适当调整。饲养结果表明：各组间罗曼蛋鸡产蛋率、饲料转化率和产蛋饲料成本有显著（Ｐ＜０．０５）或极显著（Ｐ＜０．０１）差异。其中，第５组鸡产蛋率（８３．９３％）和饲料转化率（４３．６４％）均为最高（Ｐ＜０．０１），比第１组鸡产蛋率（７８．９１％）和饲料转化率（４１．２６％）分别提高６．３６％（Ｐ＜０．０５）和５．７７％（Ｐ＜０．０５）；第５组鸡产蛋饲料成本（２．５５元／ｋｇ）比第１组鸡产蛋饲料成本（２．９２元／ｋｇ）降低１４．５１％（Ｐ＜０．０１）。第５组日粮配方（％）为：玉米６１．０、小麦麸３．０、大豆粕１７．０、鱼粉４．０、菜籽饼４．３、蛋氨酸０．１４、赖氨酸０．０５、骨粉０．８、石粉８．５、磷酸氢钙０．８、食盐０．３１、禽用微量元素添加剂０．１２、罗曼多维素０．０１８。     

低剂量γ射线辐照对鸡胚胎发育的刺激效应

用０．５，１．０，Ｇｙ＾６０Ｃｏγ射线孵前辐照滨白蛋鸡和ＡＡ肉鸡商品代种蛋，孵化试验表明，低剂量γ射线照射对鸡胚胎发育有明显的刺激效应，使一些在孵化中不能发育的受精卵得到正常发育，滨白蛋鸡辐照组种蛋胚胎发育的卵数比对照组高５．４６％～６．７２％（Ｐ〈０．０１），孵化率比对照组高４．４％（Ｐ〈０．０１）。ＡＡ肉鸡种蛋辐射组胚胎发育的卵数比对照高５．４６％～５．５４％（Ｐ〈０．０１），孵化率０．５Ｇｙ     

奶牛分娩前后血浆类固醇激素水平变化与胎衣不下的关系

应用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定了２０头怀孕奶牛（其中胎衣不下（ＲＦＭ）牛和正常（ＮＲＦＭ）牛各１０头］产前１０天到产后２天外周血浆孕酮（Ｐ４）、１７β－雌二醇（１７β－Ｅ２）和雌酮（Ｅ１）的水平。结果表明，产前６～３天，ＲＦＭ牛血浆Ｐ４水平略低于ＮＲＦＭ牛（Ｐ＞０．０５），而于产前２天突然跃升并显著高于ＮＲＦＭ牛（Ｐ＜０．０５）。血浆１７β－Ｅ２水平，ＲＦＭ牛于产前７天到分娩当天显著低于ＮＲＦＭ牛（Ｐ＜０．０５），尤其是产前７天和５天。血浆Ｅ１水平，产前１０～１天ＲＦＭ牛显著低于ＮＲＦＭ牛（Ｐ＜０．０５），尤其是产前８天和４天极显著低于ＮＲＦＭ牛（Ｐ＜０．０１）；而分娩当天，ＲＦＭ牛却显著高于ＮＲＦＭ牛（Ｐ＜０．０５）。此外，Ｐ４／１７β－Ｅ２的比值，在分娩前６天和２天ＲＦＭ牛极显著和显著高于ＮＲＦＭ牛（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。上述结果表明，分娩前６天时，雌酮水平显著下降和Ｐ４／１７β－Ｅ２比值显著升高可以作为奶牛胎衣不下的指征。     

生长因子对卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育的影响

为了探讨生长因子（ＥＧＦ，ＰＤＧＦ）对牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎体外发育的影响，本研究进行了两个实验。实验１：在卵母细胞体外成熟（ＩＶＭ）中，将卵母细胞平均随机的放入表皮生长因子浓度为０，２．５，２５，５０μｇ／Ｌ的成熟培养液和对照组中。实验２：在早期胚胎体外培养（ＩＶＣ）过程中，将受精卵平均随机分配入５个不同培养液的处理组：（１）ＴＣＭ－１９９＋１０％阉公牛血清（ＳＳ）；（２）ＴＣＭ－１９９＋ＥＧＦ＋ＰＤＧＦ；（３）ＴＣＭ－１９９＋ＥＧＦ；（４）ＴＣＭ－１９９＋ＰＤＧＦ；（５）ＴＣＭ－１９９＋无生长因子、其中ＥＧＦ：５０μｇ／Ｌ，ＰＤＧＦ：０．１μｇ／Ｌ。２，３，４，５组有０．１％ＰＶＡ和０．３％ＢＳＡ，并与颗粒细胞单层协同培养。卵母细胞的体外成熟（ＩＶＭ）、体外受精（ＩＶＦ）和早期胚胎体外培养（ＩＶＣ）的方法与Ｌｕ等（１９８７）报道的相同。结果表明：浓度为５０μｇ／Ｌ的处理组分裂率与对照组无差异（８９．０％，９２．４％，Ｐ＞０．０５），而浓度为０，２．５，２５μｇ／Ｌ的处理组分裂率均显著低于对照组（７８．６％，８２．３％，８４．３％，Ｐ＜０．０５），在囊胚率和第７ｄ一级胚胎率上各组均无差异。ＥＧＦ在体     

不同胎次奶山羊血浆及乳汁cAMP和cGMP含量的变化

采用蛋白竞争结合分析法及放射免疫分析法及放射对西农莎能奶山羊２－５胎泌期血浆及乳汁ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量进行了测定。结果表明，不同胎次血浆ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量差异不显著（Ｐ〉０．０５），而乳汁中ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量明显高于血浆中含量（Ｐ〈０．０１）；不同胎次乳汁ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量随胎次变化有相应的消长，但变化不显著（Ｐ〉０．０５）。乳汁中ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ随产奶量增加而呈正相关。     

受精温度对牛卵母细胞体外受精及随后胚胎发育的影响

将经过２０～２４ｈ体外成熟培养后的牛卵母细胞在含５％ＣＯ２，９５％空气，最大相对饱和湿度和温度分别为３７℃（Ｇ１），３８℃（Ｇ２）和３９℃（Ｇ３）的培养条件下进行体外受精，以观察受精温度对牛体外受精及其随后胚胎发育的影响。结果显示，不同受精温度对牛卵母细胞体外精子入卵率（９３．６％～１００％）及受精卵裂率（７８．５％～８０．３％）无明显影响；而早期胚胎卵裂发育速度、体外囊胚发育速度及体外囊胚发育率和孵化率均随着受精温度的升高呈上升趋势。在ＩＶＦ４２～４６ｈ，Ｇ３发育到５细胞以上卵裂周期阶段的早期胚胎比率（４０．３％）非常显著地高于Ｇ２（２４．３％）和Ｇ１（１８．８％，Ｐ＜０．００１）；而相应处于２细胞阶段的胚胎比率（Ｇ３为１４．６％）则十分显著地低于Ｇ２（２５．２％）和Ｇ１（３０．１％，Ｐ＜０．０１）。Ｇ３的囊胚体外孵化率（７５．８％）也非常明显地高于Ｇ２（５１．９％）和Ｇ１（４７．９％，Ｐ＜０．００）。结果表明，受精温度（３７～３９℃）主要影响早期胚胎的质量，从而影响到其随后的囊胚发育率、发育速度及其孵化率，而对卵母细胞的受精、卵裂率无明显影响。     

指导的基因在动物乳腺特异性表达载体的构建

为了实现外源蛋白质在动物乳腺中特异性表达,采用ＰＣＲ法扩增了ＢＬＧ ３’端含第６,７外显子及ｐｏｌｙ（Ａ）加尾信号下游约２００ｂｐ的０．８７ｋｂ片断。以山羊ＢＬＧ ５’的３．２ｋｂ（含第１,２外显子）启动子,山羊ＢＬＧ ３’０．８７ｋｂ序列,鸡α－珠蛋白基因簇π基因上游的－２．４￣－５．３ｋｂ ＨｉｎｄⅢ序列,绿色荧光蛋白ＧＦＰ及原核载体ｐＧＥＭ－７ｚｆ构建了ｐＧＥＭ－７ｚｆ－ＧＦＰ－ＭＡＲ－５’     

中国小麦品种醇溶蛋白Gli—1和Gli—2编码位点等位基因 …

利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ａ－ＰＡＧＥ）方法,鉴定分析了我国部分重要小麦品种或种质醇溶蛋白Ｇｌｉ－１和Ｇｌｉ－２编码位点等位基因组成特点。３６个品种的研究结果表明,我国小麦品种在醇溶蛋白几个主要位点上均存在较大的变异度,Ｎｅｉ氏遗传变异系数（Ｈ）达０．７７５。６个位点一共检测到５９个不同的醇溶蛋白等位基因,其中出现频率较高的有８个等位基因,即Ｇｌｉ－Ｂ２ｇ（５５．５６％）、Ｇｌｉ－Ｄ１ｋ（５０％     

生物素缺乏及肉鸡和种鸡日粮中添加生物素效果的研究

５４０只１日龄红布罗商品代雏鸡随机分为９组，第１组饲喂以小麦为基础的诱发日粮，第２和第３组在１组基础上分别添加３００（μｇ／ｋｇ日粮）生物素和动物脂肪（前期２％，后期３％）。第４至９组饲以玉米－豆饼型日粮，前后期分别添加０，５０，９０，１２０，１５０，２００和０，５０，７０，９５，１２０，１６０（μｇ／ｋｇ日粮）的生物素。结果表明：生物素缺乏造成足底皮肤炎，肝脏脂肪酸成分发生变化：不饱和脂肪酸（棕榈油酸）显著增加（Ｐ＜０．０１），饱和脂肪酸（硬脂酸）减少（Ｐ＜０．０５）。２９日龄绝食２４ｈ，饲喂诱发日粮的鸡，血糖、肝糖原和肝脏总脂肪含量下降，血浆甘油三酯增加，但无显著差异（Ｐ＞０．０５）。玉米－豆饼型日粮中添加不同水平生物素，绝食后血糖、肝糖原和甘油三酯含量未发生显著变化，随生物素添加水平提高，对足部皮肤状况有一定的改善作用，前期添加１５０或２００（μｇ／ｋｇ日粮）生物素对增重和饲料报酬较好，而后期添加生物素影响不大。种鸡试验选用３３６只２０周龄育成种鸡随机分为３组，分别饲以添加有０，１００，１５０μｇ／ｋｇ生物素的日粮。初步结果表明：生物素对蛋重无影响，日粮添加１００和１５０μｇ／ｋｇ生物素可提高受精率０     

苜蓿细胞悬浮培养与耐受高浓度PEG变异体的筛选

本文对紫花苜蓿的细胞悬浮培养、悬浮细胞系的建立、离体辐射效应和高浓度ＰＥＧ耐受性变异体的筛透进行了研究。结果表明：１．高浓度的２，４．Ｄ（５～１０ｍｇ／Ｌ），低浓度的ＡＢＡ（０．１～２ｍｇ／Ｌ），高浓度的蔗糖（６％～９％），较高的离子强度，以及逐步缩短继代时间，均有利于胚性悬浮细胞系的快速建立。相反，细胞分裂素，高浓度的ＮＨ和ＧＡａ的存在，不利于悬浮系的建立。细胞分裂素（４ＰＵ３０，ＫＴ或ＢＡ）可促进细胞的团聚，不利于细胞的分散。此外，低浓度的２，４－Ｄ，４ＰＵ３０（或ＢＡ，ＫＴ）和ＡＢＡ的配合使用，在悬浮培养基中可形成大量的体细胞胚。２．辐射处理悬浮细胞的最适剂量为２０～６０Ｇｙ。３．未经改造的初期悬浮培养物远较悬浮细胞系对高水势敏感。４．胚性悬浮细胞系经２０Ｇｙ的γ射线处理，筛选出了对１５％ＰＥＧ水势（约－１１巴）耐受性的克隆６个，并获得了一批再生植株，从２０％ＰＥＧ（约－１５巴）筛选出１个抗性克隆。抗性细胞系对高浓度ＰＥＧ和ＮａＣｌ产生的水势在细胞水平表现出很强的抗性。     

β－转换生长因子对牛体外受精卵体外发育的影响

本研究主要检测ＴＧＦ－β对牛早期胚胎体外发育和移植后的成活率的影响。在试验１和试验２，添加０．３～７．０ｎｇ／ｍＬ的ＴＧＦ－β至无论是复杂培养液还是各成分已知的简单培养液中，囊胚中内细胞团细胞都不同程度地增长，比对照组的囊胚多０．５～１．０倍；此外在含有３．０～５．０ｎｇ／ｍＬ的ＴＧＦ－β的培养液中的囊胚，其孵化率显著地高于对照组。在试验３中，添加３．０ｎｇ／ｍＬ的ＴＧＦ－β显著地促进与不同细胞共同培养的囊胚内细胞团的细胞增长，在颗粒细胞或输卵管细胞及其两者组合当中的单层细胞上的囊胚表现突出。在试验４中，用ＴＧＦ－β培养所获得的囊胚移植于受体母牛，约４５～９０ｄ将受体屠宰检查中发现，ＴＧＦ－β的囊胚成活率高于无ＴＧＦ－β的囊胚．试验结果表明，ＴＧＦ－β可促进体外发育的囊胚内细胞团的细胞增长以及提高囊胚移植后的成活率。     

酵母发酵鸡、牛粪饲料的研制及其经济价值的研究

以５４株饲料与食用酵母菌株为原始株，在粪水梯度培养基中，经４５代的驯化和紫外线、亚硝酸盐诱变，选育出适应于鸡、牛粪为基料而快速繁殖的新的酵母菌株。用驯化酵母菌发酵鸡粪为基料的酵母料的蛋白质含量为（１７．９６±１．１６）％；以牛粪为基料的酵母料的蛋白质含量为（１４．８９±１．３３）％。１５０头猪分３组饲喂，以鸡、牛粪为基料的酵母料组均比猪的配合料组成本低１／３，成本利润率是配合料的３．８倍（Ｐ＜０．０１），产值利润率是配合料组的２．８倍（Ｐ＜０．０１），效益显著     

体细胞因子对牛卵母细胞体外受精的影响

本研究系统探讨了体细胞因子对牛卵母细胞体外受精的影响。在受精液中添加５％或１０％的牛卵泡液（ＢＦＦ）明显降低牛卵母细胞受精后的分裂率（３８．３％和４０．４％比对照８７．５％，Ｐ＜０．００１）和囊胚发育率（１７．４％和８．３％比对照４０．４％，Ｐ＜０．００１）。然而，在受精液中加入５０％的内膜细胞受精条件液明显提高牛卵母细胞受精后的囊胚发育率（４３．１％比３４．８％，Ｐ＜０．０５），虽然该处理对牛卵母细胞受精后的分裂率无明显影响。在体外受精系统中加入颗粒细胞的受精条件液，新鲜的输卵管细胞，输卵管细胞的单层细胞或输卵管细胞的受精条件液对牛卵母细胞的分裂率及囊胚发育率均无明显影响。相反，新鲜输卵管细胞组获得较低的分裂率（８１．７％）和囊胚发育率（３２．２％）。这些结果表明：ＢＦＦ对牛卵母细胞的体外受精具抑制作用，而内膜细胞的条件液则具促进效应。ＢＦＦ的这种受精抑制因子可能来自血清而不是卵泡细胞。     

斑点免疫金银染色技术检测鸡传染性法氏囊病毒的研究

本研究成功建立了检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗原的斑点—免疫金银染色技术（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ），并确定了操作流程的最佳试验条件。应用该法对纯化ＩＢＤＶ抗原的最低检出量为０．１９５３ｎｇ／点，其敏感性为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的８倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ具有较高的特异性。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对５４份自然感染法氏囊样品检测的阳性率为９６．３％和９２．５％（χ２＝３．１１７９，Ｐ＞０．０５），统计学分析两者无显著差异。研究表明本法具有敏感、特异性强、经济、安全等优点，可用于ＩＢＤＶ感染的特异诊断。本研究为免疫金技术应用于畜禽传染病的诊断和研究打下了基础     

苄嘧黄隆及甲黄隆的气相色谱分析方法研究

本文研究了苄嘧黄隆和甲黄隆的气相色谱分析方法。采用（１）５％ＯＶ－１０１／Ｃｈｒｏ－ｍｏｓｏｒｂＧＡＷＤＭＣＳ（０．２５～０．１８ｍｍ）；（２）５％新戊二醇己二酸聚酯／ＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂＧＡＷＤＭ－ＣＳ（０．２５～０．１８ｍｍ）的两条色谱柱，邻苯二甲酸二戊酯为内标，氢火焰离子化检测器，标准偏差（ＳＤ）≤０．０６４％，变异系数（ＣＶ）≤２．１％，平均回收率为９６．７％～９８．８％。     

玉米──豆粕型日粮添加不同酶制剂对育肥蛋公雏效果的影响

在以玉米、豆粕为主的日粮中分别添加华芬酶、八宝威和溢多利,以不加酶作对照,探讨不同酶制剂对育肥蛋公雏饲养效果的影响。试验采用随机设计法,饲养期７０ｄ。结果表明,华芬酶组的日增重极显著高于对照（ＣＫ）组（Ｐ＜０．０１）;八宝威组显著高于ＣＫ组（Ｐ＜０．０５）;溢多利组与ＣＫ组差异不显著（Ｐ＞０．０５）。华芬酶组、八宝威组、溢多利组和ＣＫ组的饲料报酬分别为２．５７∶１、２．６５∶１、２．７１∶１和２．７５∶１,前三组分别比ＣＫ组提高６．５５％、３．６４％和１．４５％。经济效益以华芬酶组最好,其次为八宝威,溢多利较差,三个组的经济效益分别比ＣＫ组提高了１１．３０％、７．２０％和２．２６％。因此,在育肥蛋公雏玉米－豆粕型日粮中添加酶制剂,应首推华芬酶。     

家兔超数排卵结果报道

在１９９１～１９９３年间，应用国产和进口的促卵泡素（ＦＳＨ）及国产的孕马血清促性腺激素（ＰＭＳＧ）和人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ），对１３６只母兔进行超数排卵处理试验。结果显示，国产的高活性ＦＳＨ对母兔有良好的超排作用。试验母兔中有８５％表现超排效应，平均每只母兔可回收到３１．１个卵，几乎相当于对照组（自然发情组，８．５个／只）的４倍。母兔对超排的反应表现出明显的季节性，春季时的处理效果极显著地优于秋季。其中ＦＳＨ组在春、秋季的回收卵数分别为３５．０个／只与１１．９个／只，差异十分显著（Ｐ＜０．００１）；ＰＭＳＧ组也表现类似效果。另外，注射ＨＣＧ后不同回收时间对卵回收数的影响也很大。在注射了ＨＣＧ１３．５ｈ后卵母细胞的回收数非常显著地比１３．５ｈ前高，两者几乎相差１倍（３６．０：１８．３）。同时，母兔左、右侧卵巢排卵数也表现出明显差异，不论是自然发情或人工超排，母兔右侧卵巢的排卵数均显著地高于左侧卵巢。     

黄瓜同种异体嫁接组合形成过程中特异蛋白质的产生

用ＰＡＧ等电聚焦、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ梯度电泳和双向电泳分析了黄瓜同种异体嫁接组合不同发育时期的全蛋白变化。结果表明：与愈伤处理比较，嫁接后第２天到第１０天嫁接组合的不同发育时期，稳定地出现三种新合成的特异蛋白质；通过分子量（ＭＷ）和等电点（ｐＩ）的分析表明这三种特异蛋白质的分子量：等电点分别为：１７．６ｋＤ：４．８５，１５．２ｋＤ：６．２６，２０．６ｋＤ：７．６。最后，对高等植物的嫁接亲和性机理问题     

牛卵泡液对牛卵母细胞体外成熟的影响

本研究系统探讨了牛卵泡液（ＢＦＦ）对牛卵母细胞体外成熟的影响。在成熟培养液中添加１０％的ＢＦＦ，明显提高牛卵母细胞体外成熟后的囊胚发育率（４５．１％比２８．２％，Ｐ＜０．０５），虽然该处理对牛卵母细胞体外成熟后的受精分裂率无明显影响（８７．５％比８７．５％）。然而，当ＢＦＦ在成熟培养液中的浓度提高到４０％时，卵母细胞体外成熟后的受精分裂率（６８．６％）和囊胚发育率（１６．６％）均明显下降（Ｐ＜０．０５）。来自不同大小卵泡（２～５ｍｍ，５．１～８ｍｍ和大于８ｍｍ）ＢＦＦ的卵母细胞体外成熟培养效果无明显差异，只是来自大于８ｍｍ卵泡的ＢＦＦ将卵母细胞粘在一起，明显地降低成熟培养后的可用卵母细胞数。在成熟培养液中加入激素（２．５×１０３ｉｕ／Ｌ促性腺激素（ＨＣＧ），５０ｉｕ／Ｌ促乳素，０．０５ｍｇ／Ｌ胰岛素、睾酮和雌二醇）对ＢＦＦ的卵母细胞成熟培养效果无影响。这些结果表明，在成熟培养液中添加一定浓度的ＢＦＦ可促进牛卵母细胞获得胚胎发育能力，ＢＦＦ的这一作用与其来源的卵泡大小和激素的存在与否无关。