玉米转座因子Ac在转基因烟草及其后代中的转座行为

用带嵌合基因３５Ｓ－Ａｃ－ＧＵＳ的农杆菌双元载体转化普通烟草品种Ｎｃ８９，对转基因植株及其回交后代，进行ＧＵＳ组织化学分析，检测到转座因子Ａｃ在部分Ｔ０代和ＢＣＦ１代植株中转座。用Ａｃ作探针，与上述Ｔ０代和ＢＣＦ１代植株的基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，结果表明，Ａｃ从原来所在的Ｔ－ＤＮＡ解离，并整合到烟草基因组的其它位点。     

抗菌肽分泌型载体的构建及转基因马铃薯中蛋白的胞外分泌

马铃薯青枯病是一种维管束病害。为使抗菌肽分泌到细胞外以提高抗菌能力，将抗菌肽ｍ Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ或Ｓｈｉｖａ Ａ基因分别和大麦（淀粉酶的信号肽序列连接后，克隆到经改造的植物表达载体ｐＢＩ１２１中，构建成分泌型表达载体。经冻融法转入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４，叶盘法转化马铃薯栽培品种米拉，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明外源基因已整合到马铃薯基因组中。用透射电镜观察到加接信号肽序列的转基因植株茎、叶的细胞     

Bt毒蛋白基因叶绿体转化载体的构建及其生物杀虫试验

本工作设计和构建了全长３．５ｋｂ Ｂｔ毒蛋白基因和２．１ｋｂ、１．８ｋｂ两种３＇端缺失Ｂｔ毒蛋白基因并分别包含烟草叶绿体同源片段ＲＴＰ和ＴＯ的叶绿体转化载体ｐＴＲＳ１、ｐＴＲＳ２和ｐＴＲＳ３，对它们菌体总蛋白进行生物杀虫试验表明所有载体的Ｂｔ毒蛋基因都得到了表达，并且对二龄棉铃虫有１００％的毒杀作用，对三龄棉铃虫的致死率也很高，尤其是含全长Ｂｔ毒蛋白基因的ｐＴＲＳ１可高达９５％以上。因而它们都可以     

转BT基因棉对棉田植物,节肢动物影响的调查

为有效地控制日益猖獗的棉铃虫危害,河北省从１９９５年开始含有转ＢＴ基因棉花品种。我们就“转ＢＴ基因棉地棉田植物、节肢动物的影响”进行了跟踪对比调查研究。初步认为：转ＢＴ基因棉对棉田植物群落结构没有影响,对其它植物的生长未发现不良影响,对田间非耗标节肢动物发现不良影响。转ＢＴ基因棉的种植大大减少,棉田化学农药的施用量,降低了对环境的污染,具有良好的生态效应;转ＢＴ基因棉田的生物多样性高于普通棉田,维     

传染性支气管炎病毒S1纤突糖蛋白基因的克隆及部分序列分析

大纤突Ｓ糖蛋白是传染性支气管炎病毒重要的免疫相关性蛋白之一，参考已发表的ＩＢＶ－Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因ＤＮＡ序列，合成一对特异性引物，以ＩＢＶ－ＲＮＡ为模板，应用ＲＴ－ＰＣＲ方法，获得传染性支气管炎病毒上海分离株Ｓ２Ｔ２－Ｓ１纤突糖蛋白基因，长度１．６５ｋｂ，利用引物设计中的ＢａｍＨ和ＨｉｎｄⅢ位点将其克隆到载体ｐＳＩ（＋）中。对该基因进行限制性酶发分析，结果与已报道的相一致。     

转BT基因棉对棉田植物、节肢动物影响的调查

为有效地控制日益猖獗的棉铃虫危害,河北省从１９９５年开始试种含有转ＢＴ基因棉花品种。我们就“转ＢＴ基因棉对棉田植物、节肢动物的影响”进行了跟踪对比调查研究。初步认为：转ＢＴ基因棉对棉田植物群落结构没有影响,对其它植物的生长未发现不良影响,对田间非靶标节肢动物未发现不良影响。转ＢＴ基因棉的种植大大减少了棉田化学农药的施用量,降低了对环境的污染,具有良好的生态效应;转ＢＴ基因棉田的生物多样性高于普通棉田,维持了棉田的生态平衡,对可持续发展起到了良好的促进作用。     

烟草花药特异启动子的克隆,活性测定及雄性不育基因和恢复基…

采用聚合酶链式反应方法（ＰＣＲ），以烟草叶片ＤＮＡ为模板扩增得到１．５ｋｂ花药特异启动子ＴＡ２９的基因片段。然后克隆到ｐＧＥＭ７２ｆ（＋）的ＳｍａＩ位点上。序列分析结果表明，该基因片段两端２８０ｂｐ区段的碱基序列与资料报道的完全相同。经转化离体组织测定，该启动子具有花药特异启动活性。该启动子经与核酸酶Ｂａｒｎａｓｅ及其相应的抑制剂Ｂａｒｓｔａｒ基因分别融合后构建成雄性不育基因和恢复基因。     

猪骨髓抗菌肽 PMAP-37 基因片段的克隆及不同体重的表达差异

从杜长大母猪的股骨骨髓中提取基因组RNA，用RT-PCR 扩增抗菌肽PMAP-37 基因，获得1 条约282 bp 的片段，以pGEM-T Easy vector 为载体，将该基因片断克隆到大肠杆菌(Escherichia coli )DH5α 中。从筛选的阳性克隆中分离出PMAP-37 基因，测定其序列。分析表明，该片段为PMAP-37 cDNA 的部分序列，编码167 个氨基酸组成的多肽。研究得到的基因片段与报道的猪骨髓抗菌肽PMAP-37 cDNA 部分序列同源性达到98%。以PMAP-37 基因片段的克隆为基础，构建了优化的半定量RT-PCR 法，以18S rRNA 为内标，研究不同体重猪骨髓抗菌肽PMAP-37 基因表达的差异。结果发现，从刚出生到20 kg，PMAP-37 基因表达呈上升趋势，在20～40 kg，PMAP-37 基因表达呈下降趋势，40～60 kg，PMAP-37 基因表达又呈上升趋势，在60～90 kg，PMAP-37 基因表达呈下降趋势。     

雪花莲外源凝集素基因的克隆,序列分析和植物表达载体的构建

雪化莲外源凝集素对同翅目害虫有强烈的抑制作用，本研究从雪花莲叶片中分离出总ＲＮＡ。通过ＲＴ－ＰＣＴ方法扩增出了雪花莲外源凝集素基因，并将其克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＫＳ（＋）的ＥｃｏＲ Ｖ位点。     

水稻psb A启动子诱导的GUS基因在烟草叶绿体中的瞬间表达

利用水稻ｐｓｂＡ基因的启动子与ＧＵＳ基因融合构成叶绿体瞬间表达载体ｐＲＧ６，通过基因枪法将该质粒导入烟草叶片细胞叶绿体中，得到ＧＵＳ基因的瞬间表达。ＧＵＳ反应产生的监色沉淀局限于细胞内某一特写区域，而在核质表达载体ｐＢＩ１２１转化的细胞中蓝色沉淀分布于整个细胞质中。实验表明单子叶植物叶绿体水稻ｐｓｂ Ａ基因的启动子可以十分有效地在双子叶植物烟草细胞叶绿体中起作用，在观察时采用了植物组织切片中的二甲