利用PCR-DGGE方法研究添加复合菌剂对堆肥微生物群落的影响

为研究接种复合菌剂对堆肥微生物群落变化的影响,以奶牛粪便和稻草为原料进行堆肥试验,设添加复合菌剂BLD（由3株木质纤维素降解细菌组成,经测序鉴定分别为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、假单胞菌属中未鉴定种）和不加菌剂两个处理,利用传统平板培养与聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）方法相结合研究两种堆肥处理对微生物群落演替的影响。结果表明,基于传统培养方式,微生物数量呈升高-降低-升高-降低的趋势,且细菌数量明显大于真菌数量;DGGE图谱显示,两种堆肥处理的条带数呈现与传统培养相似的变化趋势。接种菌株在堆肥初期成功定殖,高温期成为优势菌株,降温期优势逐渐减弱。接种菌剂增加了堆肥中细菌数量,提高了堆肥微生物群落多样性,从而促进堆肥微生物群落演替,缩短堆肥腐熟时间。     

墙体材料及其组合对日光温室墙体保温性能的影响

堆肥是由群落结构演替非常迅速的多个微生物群体共同作用而实现固体废物资源化、无害化的动态过程。本文在综合国内外文献资料的基础上,结合本实验室的研究工作,从堆肥过程中微生物群落的演替、有机物降解菌的选育应用、变性梯度凝胶电泳(DGGE)在堆肥微生物研究中的应用等方面介绍了现代堆肥过程中微生物研究的进展及存在问题,并且指出堆肥过程中微生物菌系组成变化复杂和实验手段有限是限制本研究的主要因素,今后应重视利用分子生物学方法进行微生物的研究工作,并根据微生物之间的协同关系有目的地构建降解多种有机废弃物的高效稳定复合菌系,以适应复杂的堆肥环境。     

堆肥过程中的微生物研究进展

堆肥是由群落结构演替非常迅速的多个微生物群体共同作用而实现固体废物资源化、无害化的动态过程.本文在综合国内外文献资料的基础上,结合本实验室的研究工作,从堆肥过程中微生物群落的演替、有机物降解菌的选育应用、变性梯度凝胶电泳(DGGE)在堆肥微生物研究中的应用等方面介绍了现代堆肥过程中微生物研究的进展及存在问题,并且指出堆肥过程中微生物菌系组成变化复杂和实验手段有限是限制本研究的主要因素,今后应重视利用分子生物学方法进行微生物的研究工作,并根据微生物之间的协同关系有目的地构建降解多种有机废弃物的高效稳定复合菌系,以适应复杂的堆肥环境.     

磷脂脂肪酸分析方法及其在土壤微生物多样性研究中的应用

磷脂脂肪酸（PLFA）是活体微生物细胞膜的重要组分，不同类群的微生物可通过不同的生化途径合成不同的PLFA。一些PLFA可作为分析微生物量和微生物群落结构变化的“生物标记”。在土壤微生物分析中，越来越多地采用了PLFA方法。本文介绍了表征微生物的一些PLFA、从土壤中提取PLFA的方法以及用GC-MS分析PLFA的原理。本文还将常用的研究微生物多样性的几种方法进行了比较；传统的分析土壤微生物群落的方法依赖于培养技术，只能培养和分离出一小部分微生物群落；Biolog方法可用于研究土壤微生物群落生理多样性，即可反映微生物群落如何利用各种碳源底物，但对快速生长和适合在Biolog实验条件下生长的小部分群落成员有强烈的选择性；核酸分析方法的主要缺点是不能对土壤微生物进行定量分析；而PLFA方法相对于上述几种方法有诸多优势。本文通过一些实例证明PLFA方法的特色或独到之处，也分析了其缺点。采用PLFA方法并结合其他方法有助于获取土壤微生物群落多样性的更多和更全面而完整的信息。     

淹水培养过程中水稻土地杆菌科微生物群落结构变化特征

采用淹水非种植水稻土微环境模式系统,对水稻土进行1 h和1、5、10、20、30 d淹水培养,利用PCR-DGGE技术检测、多元统计分析淹水培养过程中地杆菌科微生物的群落结构和多样性变化规律及其影响因子。结果表明,淹水培养过程中地杆菌科微生物群落结构发生了明显的演替性变化：由r-对策优势种群演替至k-对策优势种群,且群落结构由不稳定向稳定演变（培养1 h和1 d处理间相似性最低,群落结构变化最大,20 d和30 d处理间相似性最高,群落结构变化最小）;该过程中,地杆菌科微生物物种丰富度指数和Shannon-Weiner指数在1 h处理中均为最小,5 d处理的最大;CCA相关性分析表明,淹水培养过程中Fe（Ⅱ）浓度与群落结构多样性指数呈正相关,证实该类微生物对于异化铁还原能力具有重要作用;测序结果表明,19个优势DGGE条带与来自水稻土中的未培养地杆菌科微生物亲缘关系相近。     

养猪发酵床不同发酵程度垫料微生物群落结构特征的PLFA分析

发酵床养猪是一种新型的养殖技术，可有效缓解养猪的环境污染问题，微生物在其中起关键作用。为明确养猪发酵床发酵过程微生物群落的变化规律，为发酵床的科学管理提供依据，本研究采用磷脂脂肪酸生物标记（phospholipid fatty acids，PLFA）法分析养猪发酵床不同发酵等级垫料的微生物群落结构特征。采用色差法将垫料分为3个发酵程度等级：1级、2级和3级，采集不同发酵等级表层（0~15 cm）和里层（30~45 cm）垫料样本，测定各样本的PLFA。结果表明，共检测到61种PLFA，发酵2级垫料的PLFA种类最多，发酵3级垫料的PLFA种类最少。在各垫料中，PLFA分布量均表现为细菌 > 真菌 > 放线菌。指示细菌、真菌、放线菌、革兰氏阳性细菌（G⁺）、革兰氏阴性细菌（G^-）的PLFA及总PLFA在各发酵等级表层垫料的分布量均显著大于其在里层垫料的分布量，最大值出现在发酵1级表层垫料中。与对照（未发酵垫料）相比，发酵垫料总PLFA含量均显著增加（P<0.05）。发酵3级表层垫料的真菌/细菌值最大，发酵2级表层垫料的G⁺/G^-值最大。多样性分析表明，Shannon指数和Pielou指数最大值出现在发酵2级垫料中，而Simpson指数最大值出现在发酵3级表层垫料中。聚类分析表明，当欧氏距离为233.15时，可将不同发酵等级垫料聚为3个类群，同一发酵级别的垫料聚在相同类群中；主成分分析表明，发酵1级表层和里层垫料单独归一类群，其他发酵等级垫料和对照垫料归另一类群中。综上，不同发酵等级垫料的微生物种群结构不同，发酵1级表层垫料微生物分布量最大，发酵2级垫料的微生物种类最多，相同发酵级别表层和里层垫料微生物群落结构相似。     

基于整合高通量绝对定量法的土壤微生物多样性分析

目前,常用的高通量测序技术只能得到微生物群落结构的物种种类和相对丰度,而整合高通量绝对定量法（iHAAQ）结合了高通量测序技术和qPCR技术,可以进一步计算得到微生物群落结构的绝对含量。相对丰度和绝对含量均是描述微生物群落结构的必备指标,其中相对丰度适合描述和评价微生物群落结构在单个样本内微生物之间的关系,而绝对含量更适于描述和评价微生物群落结构真实的数量变化以及在样本间微生物之间的关系。本研究基于发表的香蕉土传病害、再造沙地农业生态系统和微生物抑制剂作用3篇文献的高通量测序和qPCR数据,通过整合高通量绝对定量法获得3篇文献中古菌域、细菌域和真核生物域的真菌三类微生物群落结构的绝对含量数据,并进一步计算出这三类微生物整体（简称三域微生物）的绝对含量和相对丰度,从而对土壤微生物群落结构不同物种的相对丰度和绝对含量进行分析,旨在更加深入、准确地揭示土壤微生物群落及其生态功能。结果表明：（1）土壤中细菌的物种丰度和绝对含量高于古菌和真菌,在三域微生物中占据主导地位,缺乏绝对含量指标可能造成对微生物群落结构变化理解的偏差;（2）基于相对丰度和绝对含量数据分析,微生物群落结构α多样性指数结果相同,但β多样性指数结果不同;（3）在香蕉土传病害和再造沙地农业生态系统研究中,三域微生物的PCoA结果与细菌的结果较为相似,表明这两项研究中三域微生物群落结构主要受细菌的影响,但在微生物抑制剂的研究中未发现类似结果。整合高通量绝对定量法可以应用于所有同时进行高通量测序和qPCR测序的研究,在未来的土壤微生物群落结构研究中,采用高通量绝对定量法开展三域微生物群落的物种种类、相对丰度和绝对含量的整体评价,具有重要的生态学意义。     

基于整合高通量绝对定量法的土壤微生物多样性分析

目前,常用的高通量测序技术只能得到微生物群落结构的物种种类和相对丰度,而整合高通量绝对定量法（iHAAQ）结合了高通量测序技术和qPCR技术,可以进一步计算得到微生物群落结构的绝对含量。相对丰度和绝对含量均是描述微生物群落结构的必备指标,其中相对丰度适合描述和评价微生物群落结构在单个样本内微生物之间的关系,而绝对含量更适于描述和评价微生物群落结构真实的数量变化以及在样本间微生物之间的关系。本研究基于发表的香蕉土传病害、再造沙地农业生态系统和微生物抑制剂作用3篇文献的高通量测序和qPCR数据,通过整合高通量绝对定量法获得3篇文献中古菌域、细菌域和真核生物域的真菌三类微生物群落结构的绝对含量数据,并进一步计算出这三类微生物整体（简称三域微生物）的绝对含量和相对丰度,从而对土壤微生物群落结构不同物种的相对丰度和绝对含量进行分析,旨在更加深入、准确地揭示土壤微生物群落及其生态功能。结果表明：（1）土壤中细菌的物种丰度和绝对含量高于古菌和真菌,在三域微生物中占据主导地位,缺乏绝对含量指标可能造成对微生物群落结构变化理解的偏差;（2）基于相对丰度和绝对含量数据分析,微生物群落结构α多样性指数结果相同,但β多样性指数结果不同;（3）在香蕉土传病害和再造沙地农业生态系统研究中,三域微生物的PCoA结果与细菌的结果较为相似,表明这两项研究中三域微生物群落结构主要受细菌的影响,但在微生物抑制剂的研究中未发现类似结果。整合高通量绝对定量法可以应用于所有同时进行高通量测序和qPCR测序的研究,在未来的土壤微生物群落结构研究中,采用高通量绝对定量法开展三域微生物群落的物种种类、相对丰度和绝对含量的整体评价,具有重要的生态学意义。     

不同有机无机复混肥对小麦产量、氮效率和土壤微生物多样性的影响

通过田间试验,研究了菜粕堆肥、猪粪堆肥和中药渣堆肥有机无机复混肥与无机复混肥等价格施入对小麦产量、氮素利用率以及土壤微生物多样性的影响。结果表明,3种堆肥原料有机无机复混肥处理的小麦子粒产量（5838.8～6243.1 kg/hm2）为化肥处理（5880.4 kg/hm2）的99.3%～106.2%,差异不显著。猪粪处理和菜粕处理的小麦子粒的氮素累积量（分别为100.2 kg/hm2和95.8 kg/hm2）显著高于化肥处理（85.9 kg/hm2）和中药渣堆肥有机无机复混肥处理（84.5 kg/hm2）;3种有机无机复混肥的氮肥回收效率和氮素利用率（包括氮素生理利用效率和氮素子粒生产效率）都高于化肥处理的氮肥回收效率和氮素利用率。对各处理土壤DNA条带采用邻接法分析表明,施入外源有机物质(菜粕堆肥、猪粪堆肥与中药渣堆肥)可以改变土壤的微生物细菌群落结构,而施入化肥对土壤的微生物细菌群落结构影响较小。本试验条件下,施用3种堆肥原料的有机无机复混肥可以获得与施用化肥相当的小麦子粒产量,提高小麦的氮素回收和利用效率,改变土壤微生物细菌群落结构。     

生活垃圾微生物强化堆肥对放线菌群落的影响

为了探讨微生物强化堆肥对生活垃圾好氧堆肥过程及堆肥过程中放线菌群落的影响,在堆肥过程中接种高效细菌复合菌剂和真菌复合菌剂,并以不接种的堆体为对照,对堆肥过程的温度变化和木质纤维素的降解效率进行了测定,并借助于PCR-DGGE方法对堆肥过程中放线菌群落的动态变化和种群多样性进行研究。结果表明：微生物强化堆肥能缩短堆体起爆时间,并能有效提高堆体降温期和二次发酵期的温度;和自然堆肥相比微生物强化堆肥使半纤维素、纤维素和木质素的降解率分别提高8.95%、12.72%和10.13%。DGGE图谱显示：2种堆肥方式的放线菌多样性指数表现出极显著差异,微生物强化堆肥能增加堆体中优势菌群的种类和数量,能有效提高腐熟期的放线菌群落多样性,有利于堆肥腐熟。优势条带测序结果表明：在接种堆肥过程中检测到了放线菌门的棒杆菌属、分支杆菌属、链霉菌属、热孢菌属、迪茨菌属、糖丝菌属和放线菌属。     

Impact of cattle grazing and inorganic fertiliser additions to managed grasslands on the microbial community composition of soils

A study was undertaken to determine if cattle grazing on managed grasslands had an impact on the microbial community composition of soils. Microbial community molecular profiles of bacteria, actinomycetes, pseudomonads and fungi were generated by polymerase chain reaction (PCR) amplification of rDNA sequences from community DNA isolated from soils. PCR products were profiled using denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and analysed by principal co-ordinate analysis. PCR–DGGE profiles indicated that cattle grazing had an impact on the pseudomonad community structure only, and that the addition of inorganic nitrogen (N) fertiliser impacted on bacterial, actinomycete and pseudomonad community structure. There was no difference in the community profiles of fungi from grazed and N fertilised grassland plots. Analysis of phospholipid fatty acid (PLFA) profiles revealed that both cattle grazing and N fertiliser impacted on microbial community structure. The abundance of individual PLFAs differed between treatments, with bacterial (15:0), actinomycete (10Me18:0) and fungal (18:2ω6) PLFAs not affected directly by grazing cattle and N fertiliser, however, there were significant grazing–fertiliser interactions. Bacterial plate counts were highest in the N fertilised plots and fungal plate counts were highest in the cattle grazed plots. Analysis of molecular microbial community profiles with PLFA and background soil data revealed several significant correlations. Notably, soil pH was positively correlated with PCO1 of the pseudomonad community profiles and negatively correlated with the fungal PLFA 18:2ω6. Fungal DGGE profiles were negatively correlated with the fungal PLFA 18:2ω6, and bacterial and fungal plate counts positively correlated with each other. Correlation analysis using PC1 from PLFA profile data showed no significant relationship with soil organic matter, pH, total C and total N. The results indicate that cattle grazing and N fertiliser addition to grasslands impact on the community composition of specific groups of micro-organisms. The consequences of such changes in population structure may have implications regarding the dynamics of nutrient turnover in soils.     

Investigating microbial community structure in soils by physiological, biochemical and molecular fingerprinting methods

Several biochemical and molecular methods are used to investigate the microbial diversity and changes in microbial community structure in rhizospheres and bulk soils resulting from changes in management. We have compared the effects of plants on the microbial community, using several methods, in three different types of soils. Pots containing soil from three contrasting sites were planted with Lolium perenne (rye grass). Physiological (Biolog), biochemical (PLFA) and molecular (DGGE and TRFLP) fingerprinting methods were employed to study the change in soil microbial communities caused by the growth of rye grass. Different methods of DNA extraction and nested PCR on TRFLP profiles were examined to investigate whether they gave different views of community structure. Molecular methods were used for both fungal and bacterial diversity. Principal component analysis of Biolog data suggested a significant effect of the plants on the microbial community structure. We found significant effects of both soil type and plants on microbial communities in PLFA data. Data from TRFLP of soil bacterial communities showed large effects of soil type and smaller but significant effects of plants. Effects of plant growth on soil fungal communities were measured by TRFLP and DGGE. Multiple Procrustes analysis suggested that both methods gave similar results, with only soil types having a significant effect on fungal communities. However, TRFLP was more discriminatory as it generated more ribotype fragments for each sample than the number of bands detected by DGGE. Neither methods of DNA extraction nor the nested PCR had any effect on the evaluation of soil microbial community structure. In conclusion, the different methods of microbial fingerprinting gave qualitatively similar results when samples were processed consistently and compatible statistical methods used. However, the molecular methods were more discriminatory than the physiological and biochemical approaches. We believe results obtained from this experiment will have a major impact on soil microbial ecology in general and rhizosphere–microbial interaction studies in particular, as we showed that the different fingerprinting methods for microbial communities gave qualitatively similar results.     

接种木质纤维素分解复合菌系对堆肥发酵进程的影响

以具有高效木质纤维素分解能力的复合菌系作为接菌剂,接种到以牛粪、鸡粪和麦秸为材料的堆肥化过程中,测定了各发酵参数和物质成分的变化.利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)和末端限制性片断多态性(T-RFLP)分析方法,研究了堆肥发酵过程中微生物群落的动态.结果表明,接菌对堆肥化过程中温度、水分和pH值的影响不大.经63 d发酵之后,接菌处理的半纤维素、纤维素和木质素的减重率比不接菌处理分别高4.3%、3.0%和3.4%.接菌处理的各个发酵阶段C/N比也明显低于不接菌处理.DGGE和T-RFLP的结果显示,接菌后堆肥发酵初期复合系中的 Ureibacillus thermosphaericu、Pseudoxanthomonas taiwanensis、Tepidiphilus margaritifer、Rhizobiaceae str.M100、C thermobutyricum 和Bacillus thermoamylovorans 菌株大量定殖于堆肥体系中,DGGE图谱中可见接种处理堆肥体系中的条带数少于不接菌处理,而同一水平线的条带亮度明显高于不接菌处理.DGGE和T-RFLP的结果都表明接菌处理的微生物多样性少于不接菌处理.可见接种微生物在堆肥体系中占据优势,抑制了部分杂菌生长,促进了发酵进程.     

不同处理方式对奶牛粪细菌群落多样性及群落结构的影响

以腐熟牛粪、新鲜牛粪以及蚯蚓粪为材料,提取其微生物总DNA,利用细菌16SrDNAV3区扩增及变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）法,分析了3种材料中细菌的多样性以及细菌群落结构的相似性。结果表明,蚯蚓粪的细菌多样性最丰富,腐熟牛粪次之,新鲜牛粪的细菌多样性最小。蚯蚓粪和腐熟牛粪的细菌群落结构有40%的相似性;蚯蚓粪和新鲜牛粪的细菌群落结构的相似性为25%;新鲜牛粪和腐熟牛粪的细菌群落结构的相似性则为35%。     

放牧与围栏内蒙古针茅草原土壤微生物生物量碳、氮变化及微生物群落结构PLFA分析

以内蒙古贝加尔针茅草原、大针茅草原和克氏针茅草原为研究对象,采用氯仿熏蒸法和磷脂脂肪酸（PLFA）分析方法研究了放牧与围栏条件下内蒙古针茅草原土壤微生物生物量和群落结构特征的变化情况。研究表明放牧与围栏草地土壤微生物生物量和群落结构差异显著。氯仿熏蒸法分析结果表明内蒙古针茅草原土壤微生物生物量碳的含量介于166.6-703.5mg·kg^-1之间,微生物生物量氮含量介于30.34-92.15mg·kg^-1之间,其中贝加尔针茅草原土壤微生物生物量碳、氮最高,大针茅草原次之,克氏针茅草原则最低。放牧条件下,贝加尔针茅草原、大针茅草原土壤微生物生物量碳、氮显著低于围栏草地,克氏针茅草原则无显著变化。PLFA分析结果显示,内蒙古针茅草原土壤微生物群落PLFAs种类、含量丰富,共检测出28种PLFA生物标记磷脂脂肪酸,并且以直链饱和脂肪酸和支链饱和脂肪酸为主,相对含量占总量的2/3左右,其中贝加尔针茅草原土壤微生物含量最丰富,其围栏样地土壤的PLFA含量达到27.3nmol·g-1,大针茅草原和克氏针茅草原依次降低。围栏条件下,各类型草原土壤细菌脂肪酸与总PLFA含量均显著高于放牧草地,真菌脂肪酸含量则因草原类型不同各有差异;放牧导致各类型草原革兰氏阳性细菌PLFAs/革兰氏阴性细菌PLFAs（GPPLFAs/GNPLFAs）比值显著降低,而除了克氏针茅草原,细菌PLFAs/真菌PLFAs比值则显著升高。PLFAs主成分分析表明,放牧和围栏处理对内蒙古针茅草原土壤微生物群落结构产生影响,且围栏处理的影响程度大于放牧处理。经相关分析表明,氯仿熏蒸法和PLFA分析方法之间有很好的一致性,且土壤微生物PLFAs与土壤有机质、全磷、硝态氮显著相关。     

蘑菇生长过程中覆土内微生物群落结构的变化特征

The culturable bacterial population and phospholipid fatty acid (PLFA) profile of casing soil were investigated at different mushroom (Agaricus bisporus) cropping stages. The change in soil bacterial PLFAs was always accompanied by a change in the soil culturable bacterial population in the first flush. Comparatively higher culturable bacterial population and bacterial PLFAs were found in the casing soil at the primordia formation stage of the first flush. There was a significant increase in the ratio of fungal to bacterial PLFAs during mushroom growth. Multivariate analysis of PLFA data demonstrated that the mushroom cropping stage could considerably affect the microbial community structure of the casing soil. The bacterial population increased significantly from casing soil application to the primordia formation stage of the first flush. Casing soil application resulted in an increase in the ratio of gram-negative bacterial PLFAs to gram-positive bacterial PLFAs, suggesting that some gram-negative bacteria might play an important role in mushroom sporophore initiation.     

鸡粪好氧堆肥过程中氨氧化古菌群落结构的动态变化

应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（PCR DGGE）技术,研究了好氧堆肥过程氨氧化古菌（ammonia oxidizing archaea, AOA）的群落结构和多样性变化。结果表明,不同堆肥时期鸡粪好氧堆肥AOA菌群的群落结构发生了明显的变化。与AOA HH 2(GU2258721)亲缘关系较近的b条带(相似性96%)和未培养泉古菌属［uncultured crenarchaeote NM 152(HQ8752251)］的m条带(相似性99%)是堆肥过程一直存在的AOA菌属。条带c、 b、 f、 i和条带m、 k、 l、 n代表的种属分属两个大类。AOA群落的Shannon Weiner指数（H）、 均匀度指数（EH）均表现为第30 d＞第5 d＞第25 d第45 d＞第3 d第12 d＞第1 d第15 d。对AOA种群数据与不同时期堆体温度、 pH、 全氮、 铵态氮、 亚硝态氮和硝态氮等环境因子的冗余分析表明,堆体温度、 全氮、 亚硝态氮和硝态氮对氨氧化古菌群落演替有着显著的影响（P0.05）,AOA的群落结构在堆肥第1 d、 第5 d、 第25 d、 第30 d、 第45 d变化较大。说明这些参数能有效控制鸡粪好氧堆肥过程中AOA的群落结构。     

The impact of long-term CO2 enrichment and moisture levels on soil microbial community structure and enzyme activities

Soil organic matter is the most important reservoir of terrestrial organic C and minor changes in the balance may have a significant impact on the climate. However, the response of microbial decomposers of soil C to global changes is not fully apprehended. This is particularly the case with regard to the interactive effects of the various climatic changes. Here, we present data from the Giessen Free Air CO₂ Experiment (Gi-FACE, University of Giessen, Germany) in which the CO₂ concentration at a grassland site was increased by 20% relative to atmospheric levels during a period of 10 years. The site included a slope that resulted in differences in average soil moisture. The effects of CO₂ and soil moisture on soil microbial community structure, measured by Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE), PhosphoLipid Fatty Acids (PLFA) and enzyme activity profiles were determined. Total carbon, nitrogen and phosphorous contents were also determined. Soil moisture explained a large part of the variance in the microbial community structure data, by affecting fungi and bacteria. Furthermore, the CO₂ treatment had no significant effect on either overall PLFA or DGGE profiles, despite the fact that the fungal:bacterial PLFA ratio was altered. Overall enzyme activity profiles were also only affected by soil moisture levels, although the CO₂ treatment induced a significant increase of the acid phosphatase activity. Finally, neither soil moisture nor elevated CO₂ induced changes in the soil C stock.     

敌敌畏杀虫剂对桃树叶际微生物群落结构的影响

采用平板计数法和磷脂脂肪酸（PLFA）分析方法评价了喷施敌敌畏杀虫剂后对桃树叶际微生物群落的影响。平板计数法分析结果表明,经80%敌敌畏乳油的1000倍液喷雾处理后,可培养微生物数量低于喷水对照。PLFA分析结果显示,桃树叶际真菌标记物18：1ω9t磷脂脂肪酸（PLFAs）含量最高,超过总PLFAs含量的60%;喷施杀虫剂后,叶际微生物PLFAs的含量、种类均有所增加,明显有别于喷水对照;并且增加敌敌畏处理次数会增强其对叶际微生物群落影响的显著性。PLFAs主成分分析表明,处理1d后不同样品的叶际微生物群落结构差异最明显,7d后,不同处理样品的叶际微生物群落结构差异变小。