免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断上的应用

免疫胶体金标记技术是近年来随着医疗技术水平的发展提高而研究的一项新型免疫标记技术,该技术主要以胶体金作为示踪标志物,在抗原抗体反应中具有良好应用效果。鉴于此,就免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断上的应用进行了简单的分析。     

一种杂色曲霉素胶体金免疫快速检测试纸条的研制

通过制备杂色曲霉素半抗原,研制出一种能够检测饲料中杂色曲霉素的胶体金免疫层析试纸条,检测限为1μg/kg,检测时间仅为15 min,假阳性率和假阴性率均为0,符合《农残办技术材料要求及审查程序》要求。试纸条能够在基层实验室的大批量样本检测中得到应用,具有实际意义,并且未见胶体金免疫层析法的相关文献报道,具有创新性。     

甜瓜细菌性叶枯病菌胶体金ICA检测试纸条的研发与应用

甜瓜(Cucumis melo)作物上会存在甜瓜细菌性叶枯病菌(Pseudomonas syringae pv.lachrymas)和瓜类细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)两种细菌病害,二者混合发生,症状极其相似,不易区分.为了快速、准确地在田间检测区分出两种病害,本研究利用甜瓜细菌性叶枯病菌单克隆抗体制备了免疫层析试纸条,并建立一种快速、简便地现场检测甜瓜细菌性叶枯病菌的胶体金免疫层析分析方法(immunochromatography assay, ICA).在定性检测中,本方法对甜瓜细菌性叶枯病菌的定性检测限为2.5×103cfu/mL,与细菌性果斑病菌不存在交叉反应,具有很强的特异性.在半定量检测中,甜瓜细菌性叶枯病菌在2.5× 103～1×105 cfu/mL浓度范围内,T线和C线读数的比值与甜瓜细菌性叶枯病菌浓度的对数值呈显著的线性关系,线性方程=0.392 2x-1.263 8,相关系数R2达到0.988 1.因此,本研究制备的快速、简便、经济的高特异性甜瓜细菌性叶枯病菌ICA是一种非常实用的检测方法,不仅可以在田间实时原地快速检测甜瓜细菌性叶枯病菌,同时还能与瓜类细菌性果斑病菌进行有效区分,为甜瓜等瓜类种植业的发展带来很大帮助.     

电镜免疫胶体金定位水稻内生细菌的研究

本研究首次报道了电镜免疫胶体金对水稻内生细菌的定位，用硫酸铵沉淀结合梯度离心提取表面消毒后离的大田水稻内优势菌巨大芽孢杆菌的特异性胞内蛋白，制备兔抗血清为金标一抗，进行微皮固定的组织超薄切片免疫胶体金的染色电镜观察，组织切片中菌体有大量金颗粒沉积，证明表面消毒后分离的巨大芽隐杆菌为水稻内生细菌，大多寄生在植物组织的胞间隙，偶尔也在胞质内存在。     

MODIS水稻面积提取中独立成分端元丰度校正方法

为了解决独立成分分析中端元丰度校正结果同实际丰度相差较大的问题,该文提出了一种基于回归分析的独立成分端元丰度校正方法。具体是:首先应用ICA对遥感时序数据进行分解,获取目标地物的ICA分解结果;再抽选一定量的样本,将样本目标地物的真实丰度与ICA分解结果进行回归;最后根据回归关系推算每个像元的目标地物丰度。基于MODIS时序数据,将该文方法和线性拉伸方法应用于江苏兴化地区的水稻面积提取,并将2种方法的提取结果同水稻准真值图像进行对比。分析结果表明,该文方法得到的水稻丰度图像的均方根误差、偏差在不同的空间尺度下均小于线性拉伸方法,而不同空间尺度下的决定系数(R2)均高于线性拉伸方法。与线性拉伸方法相比,该文方法能获得更接近实际情况的端元丰度校正结果,增强了ICA在农作物面积提取中的应用能力,为大尺度农作物识别和面积提取提供了依据。     

水稻OsBTB蛋白在非亲和/亲和互作中表达方式的初步研究

为了解水稻OsBTB蛋白在非亲和/亲和互作中的表达情况,构建含OsBTB全长基因的原核表达载体,经诱导表达及纯化获得OsBTB蛋白。以OsBTB蛋白为抗原制备兔多克隆抗体,经间接ELISA法测定抗体效价为1∶2000。Westernblot分析确认该抗体与OsBTB蛋白可以特异结合。应用该抗体检测受不同稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)生理小种侵染的相应水稻(Oryzasativa)品系中OsBTB蛋白的表达,结果表明OsBTB蛋白的表达方式呈多样性,该蛋白在非亲和反应中的表达时间明显早于其在亲和反应中的表达。免疫胶体金技术确认OsBTB蛋白存在于细胞核内。     

免疫分析技术在兽药残留检测中的应用

兽药残留对环境和人类健康构成严重威胁,使得动物源性食品安全问题日益突出,迫切需要开发简便、价廉、快速的兽药残留快速检测技术.目前各种免疫分析技术已广泛应用于兽药残留快速检测领域,本文主要概述了酶联免疫分析法(ELISA)、量子点荧光免疫分析(QIA)、放射免疫分析法(RIA)、荧光偏振免疫分析(FPIA)、胶体金免疫层析法(GICA)及蛋白质芯片免疫分析技术.     

家蚕质多角体病毒RDRP基因的克隆、表达及定位

应用分段RT-PCR的方法从家蚕质多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedmsis virus,BmCPV）中国株的dsRNA中成功地克隆了RDRP基因(RNA-dependent RNA polymerase),基因序列全长3691bD,并登录GenBank,序列号为AY496445。利用质粒载体pET-28b成功地构建了表达质粒pET28b-RDRP,并用IPTG诱导的方法在大肠杆菌(Escherichia coil)BL21（DE3)中获得表达,分子量约为138kD。以重组蛋白的兔抗为一抗,15mm山羊抗兔IgG-胶体金为二抗,进行免疫标记,电镜定位,结果显示在病蚕中肠的柱状细胞的游离病毒粒子和多角体内的病毒粒子上均能结合胶体金颗粒,标记率为35％左右,证明BmCPV病毒的RDRP复合物确实位于病毒衣壳上。     

猪伪狂犬病三种抗体检测方法的比较

为探索满足猪伪狂犬病防治需要、准确、实用的诊断方法,选用乳胶凝集试验、胶体金免疫层析技术、酶联免疫吸附试验三种诊断方法,以求筛选出一种简单、快捷、灵敏、特异的临床检测方法。结果表明:乳胶凝集试验具有敏感、简便、快捷等优点,但其特异性差和假阳性率较高;胶体金免疫试验的成本低廉,对设备的要求不高,但敏感性、特异性等均较差;酶联免疫吸附试验从准确性、灵敏性、特异性等方面都得到比较好的效果。     

氟喹诺酮类药物残留多元快速检测试纸条的研制

为研制一种快速、简便的胶体金免疫层析法的试纸条,用于对动物源食品中氟喹诺酮类药物残留检测,研究以沙拉沙星(SALX)多克隆抗体与胶体金结合为金标抗体,将纯化好的金标抗体喷涂在玻璃纤维垫上;包被抗原SALX-OVA和山羊抗兔二抗分别包被在硝酸纤维素膜上,制成免疫层析快速检测试纸条,并对试纸条的性能进行测定。结果表明,该快速检测试纸条的灵敏度为30ng/ml,检测时间为5～10min,不但可对沙拉沙星残留进行检测,而且还可对诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的残留进行检测。表明试纸条可对氟喹诺酮残留进行多元快速检测。     

畜禽产品兽药残留的免疫学检测方法探讨

随着人们对畜禽产品兽药残留问题的日益重视,兽药残留检测方法逐渐增多。介绍畜禽产品中兽药残留的主要免疫学检测方法,包括酶联免疫法、胶体金检测技术、荧光定量检测、化学发光检测、放射免疫分析法及生物芯片检测技术,对每种方法特点及应用现状做一简介。希望为兽药残留检测的深入研究提供一些参考。     

免疫分析技术在环境激素检测中的应用

概括介绍了免疫分析技术在环境激素类污染物检测中的应用,分析了它存在的问题,介绍了免疫技术的发展趋势。     

酶免疫分析在农药分析中应用的进展

本文简要综述了酶免疫分析在农药分析中的应用情况，并介绍了酶标试剂盒，旨在为酶免疫分析在我国的研究和应用提供参考。     

免疫分析在农药残留检测中的应用和发展

通过分析免疫分析技术的基础——抗原抗体制备技术,进一步论述了主要免疫方法(放射免疫分析、酶免疫分析、荧光免疫分析、化学发光免疫分析等)的发展过程及其在农药残留检测中的应用。重点介绍了近年来免疫分析的新发展,尤其突出了免疫分析和理化分析联用技术这一痕量分析的新主流。探讨了免疫分析技术存在的问题和免疫分析的未来发展趋势。     

应用田间行走式红外光谱进行土壤碳含量估测研究

对应用田间行走式设备获取的土壤红外光谱数据,通过特征变换和特征选择相结合,以提高所建立土壤碳校正模型的预测精度。首先应用独立成分分析（ICA）、主成分分析(PCA)和小波分析(WA)对土壤红外光谱数据进行特征变换,然后分别应用无信息变量消除法(UVE)、连续投影算法(SPA)、无信息变量消除结合连续投影算法(UVE-SPA)、基于遗传算法和偏最小二乘法的变量选择法(GA-PLS)来进行特征选择,基于所选择的特征建立了土壤碳校正模型。结果表明,通过ICA进行特征变换,然后进行特征选择,可以建立比直接对光谱数据进行波长选择精度更好的预测模型;而WA或PCA与特征选择方法结合,只能获得与对光谱数据直接进行波长选择相近的效果。因此,针对田间条件下通过行走式设备获得的光谱数据由于受复杂的环境条件下干扰多的情况,可以将ICA与特征选择方法结合起来对光谱数据进行特征变换和选择,以建立更可靠的土壤碳含量预测模型。     

应用田间行走式红外光谱进行土壤碳含量估测研究

对应用田间行走式设备获取的土壤红外光谱数据,通过特征变换和特征选择相结合,以提高所建立土壤碳校正模型的预测精度。首先应用独立成分分析(ICA)、主成分分析(PCA)和小波分析(WA)对土壤红外光谱数据进行特征变换,然后分别应用无信息变量消除法(UVE)、连续投影算法(SPA)、无信息变量消除结合连续投影算法(UVE-SPA)、基于遗传算法和偏最小二乘法的变量选择法(GA-PLS)来进行特征选择,基于所选择的特征建立了土壤碳校正模型。结果表明,通过ICA进行特征变换,然后进行特征选择,可以建立比直接对光谱数据进行波长选择精度更好的预测模型;而WA或PCA与特征选择方法结合,只能获得与对光谱数据直接进行波长选择相近的效果。因此,针对田间条件下通过行走式设备获得的光谱数据由于受复杂的环境条件下干扰多的情况,可以将ICA与特征选择方法结合起来对光谱数据进行特征变换和选择,以建立更可靠的土壤碳含量预测模型。     

噬菌体免疫PCR技术及其在真菌毒素检测中的应用

噬菌体免疫PCR(Phage-mediated immuno-polymerase chain reaction,PD-IPCR)技术融合了噬菌体展示技术、特异性抗原-抗体和PCR技术,是三者相结合而派生出来的一项新分析技术。本文介绍了PD-IPCR技术的发展历程、技术原理及类型和技术流程中的关键实验方法,列举了一些噬菌体免疫PCR技术及其在真菌毒素检测中的应用,并结合PD-IPCR技术特点,分析了PD-IPCR技术在真菌毒素混合污染同步检测和污染预警研究等方向上的重要应用前景。     

免疫电镜技术在植物病毒研究中的应用

免疫电镜技术通过将免疫学与超微结构形态学相结合,利用抗原—抗体的专化性反应对抗原或抗体进行精确定位。介绍免疫电镜技术的原理、发展阶段及其在植物病毒研究中的应用。     

基于籽粒RGB图像独立分量的玉米胚部特征检测

玉米胚部特征是重要的农艺性状之一,目前主要通过手工方法进行测量。为实现通过机器视觉图像处理的方法进行玉米胚部特征的自动检测,提出一种基于独立分量分析ICA的玉米胚部测量方法,并建立了检测模型。首先对玉米籽粒的RGB图像进行ICA分析,发现具有最大熵的独立分量IC代表着胚部与籽粒其他部分的对比。根据此IC能够实现玉米胚部的准确分割。然后,提取了玉米胚部面积等9个特征。和手工检测结果相比,面积误差为0.7%,决定系数达0.984,其他8个特征的误差总体也都在2%以下。与前人的基于颜色模型区域生长的检测结果比较,检测准确度有明显提高。表明采用基于ICA的方法检测的结果准确可靠,能够用于玉米胚部的自动检测。     

免疫化学方法在小麦贮藏蛋白研究及品质改良中的应用

本研究综述了小麦胚肥贮藏蛋白免疫化学特性及共在贮藏蛋白免疫同源性，小麦品质性状测定及品质育种中的应用。