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相似文献
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1.
鸡γ干扰素对H5亚型禽流感疫苗的免疫增强作用   总被引:6,自引:0,他引:6  
利用表达鸡γ干扰素的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)或灭活疫苗联合应用,接种SPE鸡、无母源抗体商品鸡和含有母源抗体商品鸡,研究鸡γ干扰素的免疫增强作用。结果发现,rFPV-IFN-γ和rFPV-HA联合应用诱导的HI抗体应答水平同rFPV-HA单独免疫相近;rFPV-IFN-γ和灭活疫苗联合应用后HI抗体应答水平略低于灭活疫苗单独免疫组。攻毒后,对于SPF鸡和无母源抗体商品鸡,rFPV-IFN-γ与rFPV-HA或灭活疫苗联合免疫诱导的保护率同相应疫苗单独免疫相当,均为95%~100%;对含有母源抗体的商品鸡,10^6PFU的rFPV-HA与10^5PFU的rFPV-IFN-γ联合免疫组保护率(33.5%)高于rFPV-HA单独免疫组(11.4%~16.8%),而其它剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合应用不能提高免疫保护效力;rFPV-IFN-γ与灭活疫苗联合免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率同灭活疫苗单独免疫组相近。结果表明,rFPV-IFN-γ不能促进疫苗诱导的HI抗体应答;适当剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合免疫含有母源抗体的商品鸡,可提高免疫保护效力,发挥免疫增强作用。  相似文献   

2.
采用生长速率法测定了6种杀菌剂对苹果轮纹病菌的毒力。结果表明,氟硅唑、戊唑醇、多菌灵对菌丝的抑制作用最为明显,氟硅唑在处理剂量为0.800 μg/mL时,抑制率为96.04%;戊唑醇在处理剂量3.200 μg/mL时,抑制率为96.21%;多菌灵在处理剂量0.320 μg/mL时,抑制率为92.20%。氟硅唑和多菌灵对苹果轮纹病菌的毒力较强, EC50分别为0.038 52 μg/mL和0.067 54 μg/mL;其次为戊唑醇和吡唑醚菌酯,EC50分别为0.154 8 μg/mL和1.504 23 μg/mL;苯醚甲环唑和异菌脲EC50分别为4.357 08 μg/mL和4.875 82 μg/mL。苯醚甲环唑对苹果轮纹病菌的毒力最弱。  相似文献   

3.
从含A/duck/FuJian/01/02(W-DKFJ)株病毒的鸡胚尿囊液中提取总RNA,用RT-PCR扩增PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS全基因片段,将其分别克隆至PBD载体中.利用8质粒反向遗传操作系统,将重组的PBD质粒共转染293T细胞,成功拯救了该病毒.并命名为R-DKFJ.10(6)EID(50)的W-DKFJ和R-DKFJ分别经鼻腔接种BALB/c小鼠后,观察到两组小鼠体重均明显下降,并且在10d之内全部死亡.与此同时,在感染小鼠后第3天在脑、脾、肾、肺脏等脏器巾分离到病毒,两组小鼠肺脏病毒含量分别为7.4±0.4和7.1±0.1.其MLD(50)分别为O.5log(10)EID(50)/ML和0.98lOg(10)EID/mL.结果表明,救获病毒R-DKFJ与其亲本野生毒W-DKFJ在对哺乳动物模型BALB/c小鼠致病性方面保持着一致的生物学特性.  相似文献   

4.
禽流感病毒(Avianinfluenzavirus)正在逐渐获得突破种间屏障感染哺乳动物的能力,揭示其获得此种能力的分子机制已经成为禽流感病毒的研究热点。A/Chicken/Guangdong/04(H5N1)是一株高致病性禽流感病毒,同时对BALB/c小鼠也具有高致病力。实验通过反向遗传操作技术对该病毒进行拯救,获得了拯救毒R-A/Chicken/Guangdong/04(R-CG)。R-CG与其亲本毒A/Chicken/Guangdong/04(W-CG)在胚半数感染量(EID50)、细胞培养半数感染量(TCID50)、对SPF鸡和BALB/c小鼠致病力等生物学特性保持一致。即R-CG与W-CG对鸡都为高致病力,静脉接种指数分别为2.88和2.91;R-CG与W-CG一样,以106EID50鼻腔感染BALB/c小鼠后,均能引起小鼠死亡,在小鼠脑、肺、肾和脾脏中都能分离到病毒,说明拯救的病毒与亲本毒一样,都可在小鼠体内有效复制,对小鼠具有高致病性。本实验成功地拯救了A/Chicken/Guangdong/04,拯救病毒R-CG可作为背景毒株,为研究禽流感病毒突破种间屏障感染哺乳动物的分子机制奠定了实验基础。  相似文献   

5.
采用生长速率法,在离体条件下测定了蛇床子素对6种植物病原真菌的室内抑制效果。结果表明,蛇床子素对供试6种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,其中对向日葵菌核病病菌的毒力最强,其EC50值为3.628 μg/mL,相关系数为0.942 9;对西瓜蔓枯病病菌的毒力次之,其EC50值是3.940 μg/mL,相关系数为0.992 5;对葡萄灰霉病病菌的的毒力居第3位,其EC50值为4.153 μg/mL,相关系数为0.988 8;对葡萄炭疽病、棉花枯萎病病菌的毒力也较强,其EC50值分别为5.569、4.996 μg/mL,相关系数分别为0.937 7、0.962 1;对玉米茎基腐病病菌的毒力最弱,EC50值为11.371 μg/mL。  相似文献   

6.
为比较不同剂量非甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)免疫佐剂与J亚群禽白血病病毒(Subgroup J Avian leukosis virus,ALV-J)gp85重组蛋白联合免疫后诱导母鸡血清抗体和母源抗体的效果,利用原核表达系统制备包含gp85基因的重组蛋白作为免疫原,与不同剂量CpG免疫佐剂联合接种成年海兰褐父母代种母鸡(Gallus domesticus),首免后2周加强免疫一次,于接种前和接种后每周动态检测血清抗体,接种后部分鸡只每周收集种蛋,检测卵黄抗体。结果显示,利用原核表达系统制备的gp85重组蛋白能与ALV-J单克隆抗体JE9特异性结合;与3个不同剂量CpG联合免疫成年种母鸡后均诱导鸡只产生一定效价的血清抗体,首免后28 d效价最高;所诱导的卵黄抗体效价首免后第4周最高。其中以50μg/羽剂量的CpG联合重组蛋白接种鸡只诱导的血清抗体和卵黄抗体效价和阳性比例最佳,100μg/羽剂量的CpG次之。3个不同剂量的CpG与ALV-J gp85重组蛋白联合免疫均能诱导母鸡产生一定的血清抗体和卵黄抗体,50μg/羽剂量的CpG联合免疫的效果明显优于较高剂量的免疫效果。本研究为使用CpG联合ALV-J gp85重组蛋白诱导母鸡产生母源抗体,阻断ALV-J早期感染提供科学依据。  相似文献   

7.
杀虫剂对甘蓝蚜与七星瓢虫的毒力及选择性研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
试验研究杀虫剂对甘蓝蚜及其天敌七星瓢虫幼虫的毒力及选择性结果表明,15种供试杀虫剂中以吡虫啉对七星瓢虫幼虫和甘蓝蚜的选择性最高,其选择性毒力比值(瓢虫LD50/甘蓝蚜LD50)为174.29。5种有机磷类杀虫剂中以马拉硫磷的选择性最高,其次为敌敌畏,其选择性毒力比值分别为35.73和25.32;7种菊酯类杀虫剂中以氟氯氰菊酯和氯氰菊酯的选择性最高,其选择性毒力比值分别为55.16和30.00。故吡虫啉、氟氯氰菊酯和马拉硫磷等选择性较高的杀虫剂对甘蓝蚜相对毒力高,而对其天敌瓢虫相对安全,为防治菜田甘蓝蚜的理想品种。  相似文献   

8.
60Coγ射线对受精鸡蛋及当代鸡生长变化的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用^60Coγ射线对受精鸡蛋进行了不同剂量的刺激,结果表明,不同品种受精鸡蛋的出雏率,孵化率在300rad达到最大值,之后随剂量的加大而降低,受精鸡蛋经低剂量刺激有利于雄性鸡的生长,对雌性鸡生长有抑制作用,较高剂量能促使当代鸡提早开产下蛋,这些变异能否遗传后代,有待进一步研究。  相似文献   

9.
家鸡催乳素放射免疫测定法的建立   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文建立了测定鸡血浆样品中催乳素(chPRL) 的放射免疫测定方法。所用试剂为标准chPRL( AFP 10328B) ,碘标chPRL( AFP 4444B) ,一抗为免抗chPRL(AFP 151040789) 抗血清,二抗驴抗免IgG 抗血清。碘标采用氯胺T 改进法,减少了氯胺T 的用量,并省略了偏重亚硫酸钠的使用,碘标chPRL 比放射性为29μCi/ug 。测定的灵敏度为0-34ng/ ml, 标准曲线的ED75 、ED50 和ED25 分别为1-30 ,3-71 和10-60ng/ ml。样品批内和批间变异低于15 % 。母鸡血浆样品倍比稀释产生的结合抑制曲线与标准曲线平行;测定不同繁殖状态母鸡血浆样品chPRL 显示出显著差异且变化规律符合繁殖活动的变化。证明本方法可用于测定家鸡血浆chPRL 浓度。  相似文献   

10.
猪链球菌2型可能的毒力基因分布   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)毒力菌株HA9801与无毒力菌株12^#之间的抑制性差减杂交(SSH)实验,获得了可能与SS2菌株毒力相关的5个基因片段,分别是转录调节子(15^#,和154^#片段),氨基酸通透酶(210^#片段),ABC转运子(9^#片段)及表面锚定蛋白(187^#片段)。根据5个片段的序列,设计了5对引物,用PCR方法对不同来源、不同核糖型及不同毒力的35株SS2菌株进行检测。结果表明,这5个片段存在于所有的脑膜炎分离株,缺失于所有的肺炎分离株、心内膜炎分离株、败血症分离株及无毒力菌株,但其中154^#片段则在1株肺炎分离株中存在。从而表明,这5个片段可能与脑膜炎有关,可望用于脑膜炎分离株的检测。  相似文献   

11.
应用鸡胚绒毛尿囊膜接种的方法,从一个疑患传染性法氏囊病的鸡群中分离到2株传染性法氏囊病病毒(IBDV)(分别命名为YL 051和YL 052);利用反转录-聚合酶链式反应技术扩增分离株VP 2基因的高变区序列,并采用限制性内切酶分析技术和核苷酸序列测定技术,对分离株进行致病型鉴定及其基因差异的分析。结果表明:分离株YL 051属IBDV的超强毒株(vvIBDV),而YL 052株既具有强毒株的特征即七肽区(SW SA SG S)和279D,但同时也具有284T的弱毒株特征,可能属于介于强毒株与弱毒株之间的一个中间型。与国内外参考毒株的序列比较分析发现:YL 051与其他vvIBDV的核苷酸同源性达94%~97%;YL 052则与经典毒株STC、疫苗株B 87的核苷酸同源性均为94.3%。  相似文献   

12.
摘 要:1999-2002年本试验室从我国南方健康鸭体内分离到21株H5N1亚型禽流感病毒,对其进行系统地生物学特性和遗传演化分析发现,其中A/Duck/FuJian/01/02(简DKFJ)和A/Duck/Guangxi/53/02(简DKGX) 属于同一基因型, 对鸡都呈高致病性,但对哺乳动物模型Balb/c小鼠的致病性明显不同: DKGX对小鼠呈低致病性(MLD50>106.5),DKGX株反向基因操作系统本试验室已经建立,而DKFJ对小鼠呈高致病性(MLD50<100.5)。为了研究这两株病毒对哺乳动物模型Balb/c小鼠致病性差异的分子机制,本研究构建了对DKFJ的8质粒反向基因操作系统,并通过细胞转染技术成功拯救了该病毒(R-DKFJ)。R-DKFJ在对哺乳动物模型Balb/c小鼠的致病性保持了与亲本野生毒(W-DKFJ, MLD50<100.5)一致的生物学特性,并且对小鼠呈全身感染,即106EID50鼻腔感染小鼠后第三天在脑、脾、肾、肺脏等脏器检测到病毒。DKFJ反向基因操作系统的成功建立为阐明H5N1亚型禽流感病毒对哺乳动物模型Balb/c小鼠的致病机制等方面奠定了基础。  相似文献   

13.
应用竞争结合原理建立了卵清蛋白基因表达的放射免疫分析法。采用氯胺T法标记卵清蛋白,~(125)Ⅰ-OA比活度达32~43μCi·μg~(-1),冻干后在常温下保存,有效期2~3个月;以(鸡)卵清蛋白作免疫原制备出的抗血清特异性强,与其他生物大分子无交叉反应,亲和常数为3.8×10~9L/M,50%结合率为1:1.6×10~5(最终稀释度);用双抗-PEG作分离剂沉淀免疫复合物,其方法灵敏度为0.17ng,可检范围为0.25~16ng,批内、批间变异系数分别为2.99%和8.96%。该方法能有效地直接检测类卵清蛋白含量,可作为一种特异、灵敏、简便、可靠的分析技术,应用于卵清蛋白基因表达生物基因工程研究。  相似文献   

14.
Due to its carcinogenicity and mutagenicity, furazolidone has been prohibited completely from being used in food animal production in the world since 1995. To monitor the illegal abuse of furazolidone, a polyclonal antibody-based indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ic-ELISA) was developed for the determination of tissue-bound furazolidone metabolite 3-amino-2-oxazolidone (AOZ). The highly specific antibody was targeted for PAOZ, the benzaldehyde derivative of AOZ. The 50% inhibition values (IC 50) of 0.91 microg/L for AOZ was achieved with the most sensitive antibody Ab-B1 by altering ELISA conditions. In the ELISA, sample extraction and cleanup were performed by an is MAX cartridge following combined hydrolysis of the tissue-bound AOZ and derivatization of the homogenized tissues with benzaldehyde. The limits of detection (LOD) calculated from the analysis of 20 known negative tissue samples (swine liver, swine muscle, chicken liver, chicken muscle,and fish muscle) were 0.3-0.4 microg/kg (mean+3 SD). Recoveries of AOZ fortified at the levels of 0.4, 1, and 5 microg/kg ranged from 55.8 to 96.6% in the tissues. The coefficients of variation were less than 20% over the range of AOZ concentrations studied. The linear detection range was between 0.1 and 25.6 microg/L. Validation of the ELISA method with swine muscle and liver from furazolidone-treated pigs was carried out using HPLC, resulting in a similar correlation in swine muscle (r=0.99) and in swine liver (r=0.98). The results suggest that this ELISA is a specific, accurate, and sensitive method of detecting AOZ residues in animal edible tissues.  相似文献   

15.
从自然发酵鸡粪中分离筛选出2株(编号JS4、JS8)高温蛋白分解菌,能产较高活性的中性蛋白酶。对JS4、JS8菌株的形态、培养特征和生理生化特性进行鉴定,JS4、JS8菌株分别属于枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。将2菌株复合接种发酵鸡粪,以中性蛋白酶活性作检测指标,研究鸡粪发酵条件。结果表明,最佳发酵条件为含水量为50%、接种量为1%、添加辅料为麸皮、pH值为7.0。  相似文献   

16.
研究了硝酸磷肥中总氮量的测定,在测定过程中,在浓硫酸的存在下,硝酸根与过量尿素发生反应,过量尿素水解成铵根离子,加入一定量的中性甲醛,生成定量的酸,用碱标准溶液滴定,所得结果和国标法(真值)比较,相对误差在0.4%以内,具有较高的准确度和精密度。文章还对测定条件做了正交实验,选择了最佳实验条件,通过试验,说明了这种方法的可行性。  相似文献   

17.
在猪链球菌2型江苏分离株中发现新的orf2毒力相关基因   总被引:21,自引:0,他引:21  
摘要: 根据文献报道的猪链球菌(Streptococcus suis )2型一种新的毒力基因相关序列,设计和合成一对引物,以猪链球菌2型江苏分离株HA9801的DNA为模板,扩增推导的毒力基因的完整阅读框,并定向克隆到质粒载体pET-32a(+)中,经测序表明,与国外推测的毒力基因完全同源。此外,以猪链球菌和其它链球菌猪源的国内分离株的基因组DNA为模板,通过PCR技术,检测这一推测毒力基因的出现率。该基因在猪链球菌2型的阳性率为7/8,在其它猪源链球菌的阳性率为9/23,在猪源链球菌的总检出率为51.6%(16/31)。  相似文献   

18.
An indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with chemiluminescent (CL) detection for chloramphenicol (CAP) in chicken muscle was developed. CAP-specific polyclonal antibody was raised in rabbit with a CAP-succinate derivative conjugated with bovine serum albumin. Luminol solution was used as the substrate of horseradish peroxidase. The detection limit was 6 ng/L. The CL-ELISA was 10 times more sensitive compared to the colorimetric-ELISA. When CAP was spiked in chicken muscle at levels of 0.05-5 microg/kg, recoveries ranged from 97 to 118% with coefficients of variation of 6-22%. In an actual residue study, the results obtained by CL-ELISA correlated well with those obtained by gas chromatography with microcell electron capture detector. The residue levels of CAP in treated chicken decreased with time and dropped rapidly after the first 6 h from around 50 to 10 microg/kg. After 3 days, CAP was not detected in chicken muscle. The developed method is therefore suitable for screening of CAP in chicken muscle samples.  相似文献   

19.
A liquid chromatographic method is described for the quantitative measurement of nicarbazin in chicken liver, fat, muscle, and skin tissues. The 4,4'-dinitrocarbanilide (DNC) portion of nicarbazin is extracted from tissues with ethyl acetate. After filtration and evaporation, the extract is purified by liquid-liquid partitioning with acetonitrile-hexane and alumina cartridge chromatography. DNC is separated and measured by reverse-phase liquid chromatography (RP-LC) with an octadecylsilyl (ODS) column and a UV detector set at 340 nm. The overall average recovery of DNC added to tissues was 83.4 +/- 3.1%. The lowest level validated in tissues by this procedure was 0.10 ppm. The limit of detection was estimated to be 0.020 ppm. This method provides a sensitive, selective, rapid, and reproducible alternative to existing purification, separation, and detection techniques, such as differential pulse polarography and colorimetry, for determination of nicarbazin in chicken tissues. Identity of DNC is confirmed by subjecting the purified extracts to thermospray-LC/mass spectrometric analysis using negative-ion detection and selected ion monitoring. Three structural-indicating ions at m/z 302, 272, and 164 are monitored in the thermospray-mass spectrum which are characteristic of the DNC molecule.  相似文献   

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