油菜与诸葛菜属间远缘杂交的初步研究

为了克服甘蓝型油菜与诸葛菜远缘杂交双受精前雌雄不亲和性,本实验采用60ppm的赤霉素、100ppm的甘氨酸涂抹油菜柱头、10ppm的H_3BO_3 5％的蔗糖涂抹去掉柱头的油菜花柱和蒙导法。赤霉素效果最好,获10粒种子,甘氨酸有一定效果得到3粒种子。而截去柱头和蒙导法均未见效果。在获得的13粒发育不全种子中,7粒种子萌发成苗。幼苗形态介于油菜与诸葛菜之间。     

白菜型油菜和诸葛菜远缘杂交的子房培养及杂种鉴定

对白菜型油菜和诸葛菜正反属间杂交及杂交子房培养进行了研究,结果表明,以授粉后7 d 取子房进行离体培养其子房存活率和结籽率均较高。对于所使用的4种培养基,培养基A（MS+2.0mgL-1 6-BA+0.2 mgL-1 NAA+500 mgL-1水解酪蛋白+0.5%活性炭）显示了较好的效果,在杂交组合澧临白菜×诸葛菜中,其最高结籽率达2.56%。适宜的母本结合授粉后恰当的子房离体时间和合适的培养基成分有利于提高杂种的获得频率。通过子房培养,从杂交组合澧临白菜×诸葛菜获得的1株杂种植株,形态上显示出双亲的中间型。细胞学研究显示,该杂种小孢子和花粉发育呈现异常现象,花粉育性低。形态学和SSR分子鉴定表明,该杂种植株为真杂种。因此,通过有性杂交结合子房培养能够将诸葛菜的有益性状转入白菜型油菜中。     

甘蓝型油菜与诸葛菜杂交时花粉与柱头的识别反应

用扫描电镜观察了甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂交过程中花粉粒与柱头间的认识反应，结果表明，正反交的花粉与柱头间认识反应是完全不同的．油菜柱头接受诸葛菜花粉后，个别提前萌发的花粉管能进入柱头，但当花粉大量萌发后，花粉管则不能进入柱头，在柱头表面出现爬行、扭曲、肿胀、产生分枝等不亲和现象．诸葛菜柱头接受油菜花粉后，多数花粉不能萌发，少数花粉管一旦萌发，即能顺利进入柱头。     

甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂交F12群体的品质及遗传分析

以甘蓝型油菜（AACC,2n=38）品种Oro与诸葛菜（OO,2n=24）属间杂交F4世代中出现的五倍体单株（AACCO,2n=50）为起始材料连续自交选育、鉴定,直至获得F12群体。各F12株系间表现一定的形态差异, 但株系内植株形态特征一致。细胞学观察表明85.3%的F12单株具有与甘蓝型油菜相同的染色体数目,花粉母细胞(PMCs) 减数分裂中正常配对和分离;其余植株的染色体数目分别为37、39和40;红紫色植株在减数分裂中有落后染色体,四分体时期会出现微核。基因组原位杂交(Genomic in situ hybridization,GISH)分析未检测出整条的诸葛菜染色体;但AFLP分析表明存在渗入的诸葛菜DNA片段。F12植株的脂肪酸组成及硫苷含量表现较大的变异, 有的植株油酸含量高于Oro而硫苷降低。     

甘蓝型油菜与芥菜型油菜种间杂交研究

从甘蓝型油菜与芥菜型油菜种间杂交可交配性及克服不亲和性的方法，种间杂种后代的遗传特性以及在遗传育种上的应用等方面，综述某蓝型油菜与芥莱型油菜种间杂交研究进展，提出今后的发展建议和展望。     

γ射线和X射线对甘蓝型油菜小孢子胚状体再生的影响

采用60Co-γ射线辐照甘蓝型油菜初花期植株和X射线辐射甘蓝型油菜小孢子发育到单核晚期至二核早期的花蕾后,分离小孢子进行培养诱导胚状体和植株,探讨了适宜油菜小孢子诱变的剂量和诱变方法.结果表明,γ射线对油菜离体小孢子胚状体的发生和发育均有很大的抑制作用,15Gy和40Gy处理平均每花蕾小孢子的产胚量分别是0.574和0.268个,40Gy可作为小孢子诱变的参照剂量.X射线对4个基因型离体小孢子胚状体再生也有影响,40Gy处理平均每蕾小孢子产胚4.086个,80Gy处理为0.834个,120～200Gy处理下降到0.021～0.019个,120Gy以上的处理剂量严重阻碍了小孢子胚的发生.采用X射线80～120Gy较适宜油菜小孢子诱变.     

对甘蓝与大白菜种间杂交合成的甘蓝型油菜的研究

通过甘蓝与大白菜种间杂交获得了５０个甘蓝型油菜杂交组合。田间抗性鉴定结果：１７个组合抗寒、３８个组合耐热、４个组合抗病毒病、４２个组合抗霜霉病、３９个组合避开了菌核病。合成组合中正常可育的组合２４个,这些品系的自交不亲和性、生物学特性及抗逆性都与的它们的双亲尤其是母本甘蓝相似。正常可育的品系中１９个自交不亲和,与胞质不育则度的３个合成品系中没有找到恢复基因,但它们是理想保持系,其后代不育性彻底而稳     

油菜远缘杂交的遗传育种研究：Ⅲ.甘蓝型油菜与芸薹属植物远缘杂交亲和性

为了转育芸薹属植物核、质基因组编码的有利性状到甘蓝型油菜中，用６个甘蓝型油菜品种作父本，与Ａ、ＡＢ、Ｂｃ和Ｃ细胞群１４个品种及４份新疆野生油菜杂交，研究远缘杂交亲和性。结果表明杂交亲和性以甘蓝型油菜作父本与ＡＢ细胞群杂交最强，亲利指数平均达３．２７，与Ｃ细胞群和新疆野油菜最弱，亲和指数分别为０和０．０１杂交亲本尤其是母本品种对杂交亲和性有明显影响。杂交不亲和的原因有三：不结角、不受精和胚败育。还对克服油菜远缘杂交不亲和的方法进行了讨论。     

影响甘蓝型油菜每角粒数因素分析

为培育高角粒数的油菜品种,研究每角粒数种子（或胚珠）败育对每角果粒数的影响,选取36份双单倍体（DH）材料,采用自然开放和强制自交、杂交、辅助人工授粉等4种处理方式,分别调查各处理中初花时胚珠数和成熟风干角果中正常成熟籽粒和败育种子的数量与形态变化,探寻种子（或胚珠）败育发生原因。结果发现：材料的初始胚珠数为23.05~36.15个,差异极显著。种子成熟后,每角粒数为平均16.80;胚珠数与每角粒数间的相关系数为0.77**;各材料每角粒数占初始胚珠数的百分比为平均56.19%,近44.00%的胚珠在种子发育过程中会发生败育;胚珠数与每角粒数呈正相关;败育是导致每角粒数减少的主要原因。不同材料胚珠数不同,胚珠数与材料基因型有关,败育比率也与材料基因型有关。根据胚珠的直径可将败育类型划分为3种：a类型（直径小于0.1mm）、b类型（直径0.1~1.0mm）、c类型(胚败育)。3种败育类型在36个参试材料和4种试验处理中均有发生,前两种类型败育是胚珠（或种子）败育的主要类型,平均发生概率分别为19.34%和7.91%,胚败育发生概率较低,仅为1.54%。胚珠（或种子）败育现象普遍存在于甘蓝型油菜种子发育过程中,原因可能与花粉和柱头发育、花粉与柱头识别、受精以及胚初期发育异常相关;胚败育可能与胚发育停滞有关。      

甘蓝型油菜胚胎离体培养体系的建立及其在油脂合成积累研究中的应用

为便于体外研究甘蓝型油菜的胚胎发育和种子油脂积累规律,以春油菜862的胚胎为材料,构建胚胎离体培养体系,通过综合比对基础培养基类型、蔗糖浓度、琼脂浓度,确定含蔗糖8％和琼脂0.6％的B5培养基作为胚胎离体培养和胚胎胚性生长的最佳体外培养体系,并用于研究种子油脂的积累和变化.在体系中分别加入甘蓝型油菜的角果皮和叶片提取物...     

油菜远缘杂交的遗传育种研究Ⅱ．甘蓝型油菜与芥菜型油菜杂交的亲和性及其杂种一代

甘蓝型油菜与芥菜型油菜杂交亲和性的研究结果表明，影响杂交亲和性的因素有杂交亲本、杂交组合方式和生态环境，芥菜型油菜作母本杂交亲和性高于甘蓝型油菜作母本的组合，昆明夏繁配组的甘芥杂交亲和性比长沙春季配组显著提高。芥甘杂种一代形态发育特性和种子油中主要脂肪酸含量多介于双亲之间，株高、分枝数、花期、棕榈酸和花生烯酸含量有超亲优势。芥甘杂种一代自交结荚结实差，作母本与甘蓝型油菜回交结荚率约２５％，与自由授粉相当，但平均每荚粒数比自由授粉增加约５０％；与芥菜型油菜回交和白菜型油菜杂交的结实性不如与甘蓝型油菜回交。     

甘蓝型油菜杂交组合的杂种优势和配合力研究

油菜杂种优势利用目前所面临的问题是如何在提高产量的同时,提高杂交油菜菜籽的商品价值。在这一点上最现实的问题是要克服已有“三系”的高芥酸和高硫甙等品质性状,即将低芥酸和低流甙基因结合到三系材料的遗传背景中去。这是近期一个重要的育种目标。由于油菜品质性状和产量性状之间的负相关性,而有必要去评价这些等位基因在合成的亲本品种及其杂交组合中在产量和其他性状的配合力和变异。为此,进行了本次甘蓝型油菜非完全双列杂交试验。     

甘蓝型双低杂交油菜的酯酶同工酶分析

应用电泳技术分析了２个甘蓝型高产双低杂交油菜Ｆ１及三系亲本的酯酶同工酶，结果表明，杂种与不育系，恢复系的酶谱类型既有相似性又有特异性。Ｆ１的酶谱不仅兼有父母的互补酶带，还具有各自的杂种酶带，为双低杂交油菜早期快速筛选优势组合和鉴定杂种真伪提供了理论依据。     

甘蓝型杂交油菜新品种丰油701的选育

细胞质雄性不育甘蓝型杂交油菜新品种丰油701,其组合为湘5A×048R,湘5A属Pol CMS系统.长江中游区油菜区试结果,丰油701平均产量2 506.2kg/hm2,比对照增产16.1%.芥酸含量0.25%,硫甙含量 33.66μmol/g,含油量43.12%.     

甘蓝型油菜下胚轴培养和高频率芽再生技术的研究

以１１个甘蓝型油菜品种（系）的下胚轴为外植体,研究影响下胚轴细胞再生的若干因素。结果表明,用附加２,４－Ｄ的培养基对下胚轴切段进行短时间的预培养可显著提高细胞的生长和分化能力,使芽再生率达９０％以上;ＡｇＮＯ３对细胞的生长有很大的促进作用;丝氨酸和谷氨酰胺的有益效应不明显;下胚轴的上端比下端产芽早,但两者产芽率差异不显著;不同的基因型对同一培养条件反应不同,芽分化频率差异很大。     

甘蓝型油菜与新疆野生油菜属间杂种的获得与分子鉴定

通过剥蕾重复授粉克服了甘蓝型油菜与新疆野生油菜属间杂交障碍,中双4号×野890812组合的199朵重复授粉花共产生32粒种子,其中8粒种子能发育成植株,5株植株形态与母本甘蓝型油菜相近,2株植株形态与白菜型油菜相近,1株植株形态介于母本甘蓝型油菜和父本野芥之间,叶面上具有新疆野生油菜特有的刺毛。RAPD分析显示8株F1代植株都同时具有母本中双4号和父本野890812的特征随机扩增DNA片段,还具有母父本均缺乏的新扩增DNA片段,表明8株F1代植株均为属间杂种。试验结果表明,决定甘蓝型油菜与新疆野生油菜或野芥远缘杂交中生殖隔离的主要因素是受精前障碍。属间杂种在形态和分子水平上的丰富变异预示通过甘蓝型油菜与新疆野生油菜间的属间杂交可望有效地拓展甘蓝型油菜遗传背景。     

芥菜型油菜与诸葛菜属间杂种的获得及鉴定

为探索属间杂交的亲和性以及改良芥菜型油菜油分品质,进行了芥菜型油菜和诸葛菜的属间杂交,杂交 亲本为芥菜型油菜四川黄籽、红叶芥和诸葛菜。将授粉后７ｄ的子房切下消毒后,培养于添加适当植物激素的ＭＳ 和Ｂ５培养基。从３５７４个离体培养的授粉子房中,获得了１８６粒成熟种子,其结籽率为５．２％ 。将种子取出,转接 于ＭＳ培养基（添加２．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ）,获得了单芽和丛生芽。将丛生芽分割为许多单芽,转接到 新鲜培养基中,获得了９６株小苗。杂种一代植株呈中间型,许多性状介于两个亲本之间,花粉育性低,植株结实性 差。ＳＳＲ分子鉴定表明,Ｆ１杂种植株具有双亲的２００、２３０ｂｐ两条特异带,但没有扩增出父母本均没有的新带。获 得的杂种后代植株有可能用于油菜的品质育种。     

甘蓝型油菜亲本基因型对其与埃塞俄比亚芥的可交配性影响

以10个甘蓝型油菜品种与埃塞俄比亚芥进行了正反杂交。结果表明,甘蓝型油莱与埃塞俄比亚芥的种间可交配性很低,但在反映可交配性强弱的各个性状上,基因型间的差异显著。甘蓝型油菜作母本时,受精频率和结角率都较反交为低,在获得杂种种子和杂种植株上明显优于反交。约2/3的甘蓝型油菜×埃塞俄比亚芥低生活力杂种种子在组织培养条件下能萌发形成植株,反交的萌发率几乎为零。甘蓝型油菜×埃塞俄比亚芥的F_1植株能与甘蓝型油菜回交,与埃塞俄比亚芥回交不亲和。由于种间杂种F_1植株群体中常出现大量的母型植株,且获得的真杂种种子出苗率又很低,因此提出以F_1杂种植株数为基准的可交配指数来衡量种间可交配性高低。     

甘蓝型两系杂交油菜两优586的选育

两系法杂交油菜两优５８６是利用甘蓝型光温敏雄性不育两用系５０１－８Ｓ与恢复系Ｃ６－１杂交筛选出的最佳新组合。该组合具有产量高、品质优、生育期适中、抗性强等优点。３年品比试验、２年的区域试验和生产试验,均比对照油８２１增产９．９％以上,综合评比居参材料首位。     

油菜与诸葛菜的几种分子标记比较研究

利用分子标记（随机引物，简单重复序列，微卫星DNA重复序列，rDNA-ITS)比较研究了白菜型油菜与诸葛菜的亲缘关系。RAPD分析表明，诸葛菜与白菜型油菜PCR产物相似性只有10％左右；简单重复序列（SSRs)标记中引物B.n.12A的PCR产的表明诸葛菜与白菜型油菜有明显差异，诸葛菜没有扩增产物，白菜型油菜具有明显的扩增产物；引物ITS4－IT5的PCR产物也有明显的差异。这些结果说明白菜型油菜与诸葛菜的亲缘关系不是很近。结合其他学者的工作，讨论了甘蓝型油菜，芥菜型油菜与诸葛菜的亲缘关系。