南瓜状晚棱脐橙芽变的研究

现获得晚熟脐橙品种‘晚棱脐橙’一芽变材料，果皮从果蒂到果顶方向有突起棱条。流式细胞仪检测发现南瓜状晚棱脐橙芽变与‘晚棱脐橙’同为二倍体。不同时期果实常规品质分析发现南瓜状晚棱脐橙芽变果实略呈扁圆形，维生素C含量较高，酸甜适中，成熟期晚于‘晚棱脐橙’。石蜡切片分析发现南瓜状晚棱脐橙芽变与‘晚棱脐橙’果皮显微结构发现二者存在细胞水平上的差异。应用ISSR分子标记技术对南瓜状晚棱脐橙芽变与‘晚棱脐橙’进行遗传鉴定，通过正交试验设计，建立反应优化体系。从100条ISSR引物中筛选出17条能扩增出清晰度高、多态性好的引物，对南瓜状晚棱脐橙芽变与‘晚棱脐橙’的基因组DNA进行ISSR-PCR扩增，结果表明有9条引物可使南瓜状晚棱脐橙芽变与‘晚棱脐橙’在某些扩增位点上出现多态性，说明南瓜状晚棱脐橙芽变与‘晚棱脐橙’在DNA分子水平上存在明显差异。     

利用形态性状以及SSR标记鉴定4个川西北老芒麦品种（系）

基于23个形态性状和SSR分子标记,对在川西北推广应用的老芒麦(Elymus sibiricus)3个国审品种(‘川草2号’、‘阿坝’和‘康巴’)及1个新品系(‘雅江’)进行了鉴定研究。各品种表型性状与遗传背景差异较明显。新品系‘雅江’表现出优良的农艺性状,株高、叶长、叶宽、茎粗等形态性状均值显著优于3个对照品种(P0.05)。13对多态性好、特异性强、条带清晰的SSR引物在4个品种(系)中共扩增出90条条带,其中具有多态性的条带共68条,引物多态性条带比例(PPB)、多态性信息含量(PIC)及Shannon多样性指数(H)的平均值分别为76.32%、0.309及0.451,在供试品种(系)中均表现出较高的多态性。基于形态数据的欧氏距离和基于SSR数据的遗传距离矩阵之间具有较强的相关性(r=0.696,P=0.08),表明联合形态学标记和遗传标记能很好地用于品种鉴定,并且基于形态数据以及SSR分子标记的UPGMA聚类结果基本一致。筛选出4对引物可用于供试品种鉴定,并绘制了DNA指纹图谱。新品系‘雅江’具有明显区别于其它3个主推品种的形态特征和遗传背景,这为川西北高原老芒麦主要品种的遗传关系分析及品种的知识产权保护提供了数据支撑。     

‘红绵蜜柚’在四川蒲江的生长结果表现

‘红绵蜜柚’是琯溪蜜柚芽变单株选育而成的蜜柚新品种。于2011年3月引种到四川蒲江县后，分别进行了高接和幼苗嫁接，观察其在该引种地的生长结果表现。结果表明：‘红绵蜜柚’在蒲江能表现出其优良的经济性状，其物候期、结果习性、成熟期与当地主栽品种‘琯溪蜜柚’一致。其套袋果实外观优美、肉质细嫩、风味甜酸，海绵层颜色正常显色（淡红色），但相比原产地福建，颜色稍淡，果实成熟期相比原产地显著延迟。 ‘红绵蜜柚’嫁接香橙和酸柚砧木，生长结果表现良好，而嫁接在枳砧上当年出现黄化现象，不宜做其砧木。综上，选择合适砧木，‘红绵蜜柚’适宜在蒲江以及四川其他柚子栽培区域推广发展。     

柱花草花粉不育基因连锁的SCAR标记研究

本研究以圭亚那柱花草‘1979’（Stylosanthes guianensis ‘1979’,母本,花粉不育）和‘热研2号’柱花草（轮回父本）的BC₁F₁代群体为材料,利用简单序列重复区间扩增多态性（Inter-simple Sequence Repeat,ISSR）技术,结合集群分组分析法（Bulked Segregate Analysis,BSA）构建花粉育性基因池。结果表明：利用100条ISSR引物筛选出在不育基因池中有特异条带的引物共11条;经BC₁F₁群体单株验证,有8个标记仅在花粉不育个体中出现,表明其与花粉不育基因连锁;将这8个特异性片段回收、克隆、测序,并分别设计8对特异序列特异扩增区域（Sequenced Charaeterized Amplified Region,SCAR）引物,对BC₁F₁单株进行验证,发现这8条片段仅在不育个体中扩增出目标条带,表明8 ISSR特异片段成功转化为8个SCAR标记。本研究结果为建立柱花草稳定的雄性不育系提供新的理论基础,为柱花草杂交育种奠定基础。     

基于SRAP技术的甜橄榄种质资源遗传多样性分析

为了对甜橄榄进行品种分类鉴定，我们对闽清的甜橄榄种质资源进行了遗传多样性分析。从100条SRAP引物中筛选出12条具有多态性谱带的引物，对17份甜橄榄种质资源进行SRAP分析。结果显示：12条引物共扩增得153个位点，有43个多态性位点，多态性百分率为28.1％，数据分析甜橄榄种质资源的相似系数在0.796~0.987之间；其中，‘羊屎’与‘小个子’相似系数最高，为0.987。相似系数在0.846处，17份种质资源可分为两大类，‘胜利1号’、‘羊屎’、‘黄田’、‘小箬’、‘自来圆’、‘山源1号’和‘小个子’为第一大类，其他为第二大类包；进一步区分，在相似系数0.870处又可分为四类，第一类包括‘胜利1号’、‘羊屎’、‘黄田’、‘小箬’、‘山源1号’和‘小个子’，第二类包括只有‘自来圆’，第三类包括‘红脸’、‘竹岐1号’、‘长营’、‘徳士’，其他为第四类。     

南方地区甜樱桃促早栽培关键技术研究

通过覆膜、加温等措施对7个甜樱桃品种物候期和品质特征等方面进行调查研究，为浙江等南方地区甜樱桃促早栽培提供依据。以‘红蜜’‘瑞德’‘早罗宾’‘拉宾斯’‘燕子’‘布鲁克斯’‘早大果’为试验材料，研究不同促早方式对甜樱桃物候期的影响，并对其进行单果重、可溶性固形物含量、风味、品质等方面的鉴定。研究发现简易覆膜促早栽培比普通避雨遮荫栽培果实成熟提早7-12天，在4月中下旬果实成熟；加温覆膜促早栽培比普通避雨遮荫栽培果实成熟提早36-41天，在3月中下旬果实成熟，其经济效益更加显著。通过综合评价发现‘早大果’‘布鲁克斯’‘瑞德’‘红蜜’等品种在综合表现较好，适宜在浙江等南方地区进行相关促早栽培推广种植，其他品种可以有选择性的发展避雨遮荫栽培，以满足市场需求。     

沙田柚芽变品种真龙柚的分子标记鉴定

真龙柚是沙田柚的优变芽系选育而成。为了进一步确定芽变系性状的可遗传性，对沙田柚和真龙柚及其无性系子代6个样品进行了RAPD和SSR分析。结果显示：8个RAPD引物共扩增出43条稳定清晰条带，其中5条具有多态性，多态性比率为11.63%,平均每个引物扩增5.37条带；26对SSR引物共扩增出34条带，只有5条带具有多态性，多态性比率为14.71%。结果表明：真龙柚与沙田柚的遗传距离为0.063，它们之间在DNA水平上存在遗传差异，说明真龙柚是由遗传物质改变引起的，非环境因素控制，具有可遗传性，通过RAPD和SSR技术可以有效鉴定，RAPD引物A07、A05和SSR引物SS15、TAA27均能将真龙柚和沙田柚鉴别出来。     

凤尾桑及其芽变品系间遗传变异的ISSR分析

利用ISSR引物,从分子水平分析了凤尾桑及其芽变株系的遗传变异。从8个ISSR引物扩增结果来看,3个引物的扩增产物在株系间无差异,从变异株系扩增条带来看,凤尾芽变变异最大。本结果从分子水平证明了芽变株系的遗传结构差异。     

GnRHR基因部分序列多态性及其与会理黑山羊产羔数相关性研究

设计3对引物,应用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测GnRHR基因外显子1和外显子3在会理黑山羊和波尔山羊中的单核苷酸多态性(SNP),同时研究该基因与会理黑山羊产羔性状的相关性。结果表明:引物P1扩增片段具有多态性,其余2对引物的扩增片段都不存在多态性;对于引物P1扩增片段,在会理黑山羊和波尔山羊中均检测到AA和AC基因型;测序分析发现AC型与AA型相比在外显子1有2处突变(A74G、G101A),但未引起氨基酸改变;会理黑山羊AA和AC基因型频率分别为0.72和0.28,AC型平均产羔数比AA型显著多0.48只(P0.05)。因此,GnRHR基因可以作为会理黑山羊多胎性状的一个有效分子标记。