表面活性剂对转枯草芽孢杆菌纤溶酶基因烟草根系BSFE分泌表达的调节

0.05%~8%(w/v)浓度的常用表面活性剂Triton×100、SDS、DMSO和Tween20可使转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillus subtilis fibrinolytic enzyme,BSFE)基因烟草增加BSFE在根系中的分泌或增加其在水培液中的稳定性,从而促进转BSFE基因烟草水培液BSFE活性的增加。其单位根体积下水培液BSFE活性与培养天数呈抛物线型变化趋势,可模拟为二次回归模型。这种促进作用与表面活性剂的浓度有关。一定浓度的Triton×100、SDS、DMSO和Tween20可作为转BSFE基因烟草根系分泌表达的有效化学调节剂。     

转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillus subtilis fibrinolytic enzyme,BSFE)基因对烟草氧自由基和保护酶系统的影响

除个别时期外，转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillus subtilis fibrinolytic enzyme,BSFE)基因及其信号肽和前肽序列烟草叶、茎、根氧自由基含量、超氧化物歧化酶活性均显著高于野生型烟草植株，抗坏血酸过氧化物酶活性也较野生型烟草植株高，但二者差异不显著。推测氧自由基含量的变化与BSFE的蛋白水解活性有关；超氧化物歧化酶和抗坏血酸过氧化物酶活性变化可能与该转基因烟草植株对外源BSFE基因表达和产物累积产生的逆境适应有关。     

转枯草芽孢杆菌纤溶酶基因对烟草氧自由基和保护酶系统的影响

除个别时期外,转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillus subtilis fibrinolytic enzyme,BSFE)基因及其信号肽和前肽序列烟草叶、茎、根氧自由基含量、超氧化物歧化酶活性均显著高于野生型烟草植株,抗坏血酸过氧化物酶活性也较野生型烟草植株高,但二者差异不显著。推测氧自由基含量的变化与BSFE的蛋白水解活性有关;超氧化物歧化酶和抗坏血酸过氧化物酶活性变化可能与该转基因烟草植株对外源BSFE基因表达和产物累积产生的逆境适应有关。     

表面活性剂LAS在棉花高通量DNA提取中的应用

本研究以棉花种子和叶片为材料,探索一种适用于棉花DNA高通量提取的方法。通过在裂解液中加入APG、LAS、CPB、DTAB、Tween80、SDS和CTAB 7种不同表面活性剂,比较其在棉花种子和叶片中的DNA提取效果,并与磁珠法和氯仿抽提法两种高通量纯化方法结合,对比传统SDS和CTAB提取液提取效果。结果表明,加入LAS表面活性剂的裂解液提取的DNA效果较好,提取棉花种子和叶片的浓度可达2 127.61和572.70 ng/μL,OD260/280分别为1.97和1.98,上清液清澈透明。LAS与两种纯化方式结合的DNA提取效果都明显优于传统CTAB和SDS提取液的提取效果,其中LAS与氯仿抽提的纯化方法结合提取效果最好,且DNA提取通量可达到600个样品/2 h。LAS表面活性剂能在棉花种子和叶片DNA提取中都能起到促进作用,与氯仿抽抽提纯化方法相结合可兼顾DNA提取通量与质量,能满足后续大部分分子实验要求。     

腐殖酸对烤烟生长的影响研究

通过营养液水培试验,研究了0、20、40、60、80、100 mg/kg腐殖酸对烤烟根生物量、茎叶生物量及根系活力的影响。试验研究表明：10d、20d、30d测定,腐殖酸浓度在20~60 mg/kg内随着腐殖酸浓度的增加,水培烤烟根鲜重、干重及根系活力,茎叶的鲜重、干重随之增加,60 mg /kg时各项指标达到最高,能促进烟株早发快长。当腐殖酸浓度大于60 mg/kg时,水培烤烟根鲜重、干重及根系活力,茎叶的鲜重、干重随着腐殖酸浓度的增加而降低,烟株生长受到抑制     

表面活性剂SDS对草鱼急性毒性效应的研究

为了研究阴离子表面活性剂对鱼类的急性毒性效应，设计了不同浓度的十二烷基硫酸钠（SDS）溶液对草鱼进行暴露实验并测定其体内各组织SOD活性。急性毒性测试表明，SDS对草鱼的48h、96h LC50分别为11.8 mg/L和5.2 mg/L。低浓度的SDS(小于0.2 mg/L)暴露对草鱼的超氧化物歧化酶（SOD）活性有极显著诱导作用，但随着SDS浓度升高和暴露时间延长,草鱼各组织SOD活性均呈明显的下降趋势,提示SDS暴露所引起的酶活性变化与暴露浓度和暴露时间有一定的相关性。这些结果显示，阴离子表面活性剂SD     

镍对小麦幼苗POD活性和同工酶的影响

采用营养液水培,研究了不同浓度(5、10、20、50、100、130 mg/L)镍处理对小麦幼苗植株POD活性和同工酶谱的影响。结果表明,镍处理诱导小麦幼苗叶片POD 1～5、POD 10谱带增强,引起POD 6～9谱带减弱,抑制根系所有POD同工酶谱带活性;小麦幼苗叶片POD活性随着镍处理浓度呈现先上升后下降的变化趋势,根系POD活性随着镍处理浓度的升高持续下降。     

超表达OsPup1基因可提高烟草低磷胁迫及减轻铝毒性

磷是植物生长的必需元素之一,对植物生长发育、生理代谢、产量与品质形成起着十分重要作用。研究耐低磷植物,有助于提高作物产量,降低化肥用量,提高化肥利用率。本研究通过在不同供磷条件下对转OsPup1基因植株的形态进行研究,阐明该基因在不同供磷水平对植株生长特性的影响。通过农杆菌介导法将OsPup1基因遗传转化烟草,经抗性筛选和PCR鉴定获得转基因植株。对不同转基因烟草株系,设置4个磷水平处理进行耐磷性及铝毒性分析。结果显示,转OsPup1基因烟草以0.25 mmol/L KH2PO4作为低磷处理较适合,与野生型植株相比,转基因株系植株根系数量增多,主侧根增加。在低磷胁迫及三氯化铝(Al Cl3)处理条件下转OsPup1基因烟草的生长情况明显优于野生型植株。说明转OsPup1基因对环境中的低磷胁迫逆境能产生明显应答,初步推断OsPup1基因的表达,具有增加植株根系,改善植株生长状态和延缓铝毒的生物学功能。本研究表明,OsPup1基因在介导植株不同供磷水平下的根叶形态建成发挥着重要作用。     

铝胁迫对烟草叶片光能利用、光保护系统及活性氧代谢的影响

为了揭示烟草叶片光能利用和光保护系统在铝诱导的活性氧代谢中的作用机理,以2个不同耐铝性的烟草品种云烟100(耐铝)和云烟105(敏感)为材料,采用水培法研究了不同铝浓度(0,50,100,200μmol/L)对烟草植株生长、叶片活性氧含量、光合特性、叶绿素荧光参数、光呼吸、超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的影响。结果表明,铝浓度的升高显著降低了烟草叶片叶绿素含量、净光合速率(Pn)、最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ光合电子传递量子效率(ΦPSⅡ)和光化学猝灭系数(q P),提高了反应中心PSⅡ过剩激发能,从而导致叶片O_2-·和H2O_2含量升高,植株生物量下降,其中对云烟105影响大于云烟100。随铝处理浓度的升高,烟草叶片非光化学猝灭系数(NPQ)、光呼吸速率、SOD和APX活性呈先升后降的趋势。与敏感品种云烟105相比,耐铝品种云烟100在不同铝浓度胁迫下表现出更高的ΦPSⅡ、q P、NPQ、光呼吸速率以及SOD和APX活性,说明低浓度铝胁迫下烟草叶片可通过提高光化学反应能力、热耗散、光呼吸以及抗氧化酶活性等途径来降低反应中心PSⅡ过剩激发能,防止或清除活性氧的积累,从而增强其对铝的耐性。     

转LEA基因烟草的NaHCO3抗性分析

本研究以转LEA基因烟草7个株系及非转基因对照烟草组培苗为材料,用不同浓度的NaHCO3处理,通过调查转基因烟草和对照烟草的相对电导率、POD活性、SOD活性、碱害指数、生根率等指标的变化,对LEA基因功能在NaHCO3的抗性方面进行初步探索性的研究。结果表明,在非碱胁迫条件下,各转基因株系与对照烟草的相对电导率差异不明显,各株系的相对电导率随着NaHCO3浓度的增加均呈上升趋势,但各转基因株系均小于对照烟草,当NaHCO3浓度在30mmol/L和40mmol/L时,转基因株系之间及转基因株系与对照间的差异达到了显著水平;在给予NaHCO3胁迫后,将各转基因株系各个处理POD活性、SOD活性取平均值后与对照烟草做比较,可以看出,对照烟草的POD活性、SOD活性变化较小,而转基因株系活性上升较为明显,且均在NaHCO3浓度为30mmol/L处达到活性最大值;在不同浓度NaHCO3胁迫下转基因烟草的受害程度明显小于对照;在相同浓度的NaHCO3胁迫下,转基因烟草生根较对照烟草早2￣3d,当NaHCO3浓度为30mmol/L时,转基因烟草碱害指数达到50%左右,且保持有10%￣30%左右生根率,而对照烟草受害程度较大,已经不能生根。综合以上分析结果表明,转基因烟草NaHCO3的耐受临界浓度为30mmol/L。在NaHCO3胁迫下,转基因烟草的碱害程度、膜损伤较对照烟草小,POD、SOD活性及生根率均高于对照烟草,说明LEA基因的导入提高了烟草的NaHCO3抗性。     

NaCl胁迫对转CHB101基因玉米幼苗生长的影响

以转CHB101基因及非转基因玉米自交系为试验材料,采用Hoagland营养液水培方法,研究在不同浓度的NaCl胁迫下,转CHB101基因玉米及非转基因玉米幼苗生长状况及生理指标差异。结果表明:转基因玉米自交系幼苗的生长状况优于对照。随着NaCl胁迫浓度的增加,转基因玉米自交系幼苗的根长、地上及地下部分含水量、根系脱氢酶活力、叶绿素含量都高于非转基因系幼苗,并且变化幅度较小;高盐胁迫下,转基因玉米幼苗的丙二醛含量变化幅度小于非转基因,脯氨酸含量、可溶性糖含量高于非转基因。以上结果说明导入的CHB101基因增强了玉米的耐盐性。     

仙客来水培研究

通过仙客来水培试验,对营养液的不同氮、磷、钾浓度配方效果进行了比较研究。结果表明：不同氮、磷、钾配比对水培仙客来的植株生长状况、叶绿素含量、根系活力、超氧化歧化酶（SOD）活性和可溶性糖含量都有不同程度的影响,初步筛选出了最佳的氮、磷、钾浓度配方为20mmol/L、3.4mmol/L、7mmol/L,并探讨了仙客来对水培条件的适应性。     

胺唑草酮的光解动力学研究

为了研究胺唑草酮的光解规律及其对环境的影响,笔者采用液液分配-高效液相色谱法,通过室内模拟试验研究胺唑草酮在不同自然水体、不同pH缓冲溶液、不同表面活性剂、不同浓度腐殖酸中的光解动态。研究结果表明：胺唑草酮在碱性条件下光解最快,中性条件次之,半衰期分别为2.9h和6.4h。在酸性条件下最缓慢,半衰期为7.6h。胺唑草酮在4种不同类型水体中的光解速率顺序为：河水＞稻田水＞湖水＞蒸馏水。胺唑草酮在不同浓度腐殖酸中的光解半衰期分别为1.3、3.5和5.8h。在不同表面活性剂试验中,胺唑草酮在Span60中的光解最快,十二烷基苯磺酸钠次之,在Tween80存在的条件下降解最慢,其半衰期分别为2.1、2.5、10.2h。可得出结论,胺唑草酮在碱性和中性环境中不稳定;在河水中能较快光解;低浓度腐殖酸对胺唑草酮的光解有促进作用;在Span60存在的条件下最不稳定。     

杂草稻幼苗对Na2CO3+NaHCO3胁迫响应及其生理基础

采用人工气候箱水培试验,研究了不同浓度Na2CO3+NaHCO3处理对杂草稻幼苗生长、根系特性和渗透调节物质的影响.结果表明,随Na2CO3+NaHCO3胁迫浓度的增加,3个试验材料苗高、生物量积累、主根长、根系总长度、根系表面积和根系体积均降低,根系总吸收面积和活性吸收面积减小,且降幅均为越光＞长白9号＞ WR03-...     

转Bt基因抗虫棉室内鉴定技术研究

转Bt基因抗虫棉在沙培试验中对卡那霉素不同浓度的反应进行了检测。结果表明,浓度为4000mg/L的卡那霉素液对非抗虫棉最为敏感,反应率为100%,而转Bt基因抗虫棉均无反应。说明棉花室内抗卡那霉素反应能够准确检测转Bt基因抗虫棉纯度,可以作为一种快速、准确、简便的室内检测转Bt基因抗虫棉的方法。同时,不同浓度的卡那霉素液对棉苗胚轴、鲜重均有一定的影响。     

镉胁迫对矮生四季豆种子萌发和幼苗生长发育的影响

以水培法研究了不同浓度的Cd2＋溶液对四季豆种子萌发和幼苗生长发育的影响。结果表明：当Cd2＋浓度较低时,Cd2＋对种子萌发及幼苗生长发育毒害作用较小,一定浓度范围内（0.05～0.5mg/L）还有促生作用,高浓度Cd2＋(5～100mg/L)能严重抑制四季豆幼苗根及下胚轴的生长;Cd2＋胁迫对四季豆幼苗体内过氧化物酶 (POD),超氧化物歧化酶（SOD）,过氧化氢酶（CAT）活性存在低浓度激活和高浓度抑制的效应,且同一浓度的Cd2＋对四季豆幼苗POD、CAT活性的抑制作用表现为根系大于下胚轴,Cd2＋浓度＞0.5mg/L时,根系SOD活性大于下胚轴中的活性;Cd2＋胁迫下,四季豆下胚轴和根的丙二醛（MDA）含量增加,且根部含量大于下胚轴的量。     

不同有机酸对烤烟生长发育和生理生化特性的影响

采用水培的方法,研究了不同有机酸对烟草生长发育和生理生化特性以及养分含量和积累的影响。结果表明,有机酸能够促进烟草的生长发育,增加叶绿素含量,提高硝酸还原酶、转化酶、淀粉酶活性和根系活力,降低烟草体内的丙二醛含量,提高N、P、K在烟叶中的积累量。但是不同种类的有机酸作用的程度不一样,苹果酸、乳酸、柠檬酸的效果相对较好,苯甲酸和腐殖酸次之。     

水培对金荞麦生理生化特性及根系形态指标的影响

研究金荞麦对水培的适应性,为金荞麦的水培繁殖提供理论基础。利用不同浓度(0.27、0.54、1.08mmol/L)萘乙酸(NAA)处理诱导金荞麦插穗生根,分别于10和20d测定不同处理的总根长、根表面积、根体积,筛选出生根效果最好的NAA溶液浓度。用筛选出的NAA溶液继续对金荞麦插穗进行处理,然后放入清水中诱导出不定根,分别进行水培和土培,40d后测定根系形态及其他生理指标。结果表明,0.27mmol/L NAA显著促进金荞麦插穗生根;水培金荞麦根系呈现白色到淡绿色,有二级根但缺乏根毛,而土培金荞麦根系呈现较短的褐色多毛根系。水培金荞麦根系鲜重、根冠比、总根长、根表面积、根体积、根系活力均显著大于土培金荞麦根系的;除叶片叶绿素a/b值、含水量显著大于土培金荞麦之外,水培金荞麦叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量、类胡萝卜素含量均显著小于土培金荞麦的;水培条件下金荞麦根系和叶片中的过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性均显著高于土培的,而过氧化氢酶活性和丙二醛含量与土培的差异不显著。在水培条件下,金荞麦的根系结构、色素含量以及部分抗氧化能力会受到影响,但其可以通过改变部分形态及生理生化特性来适应水环境。     

OsMYB调控化感水稻酚酸类物质合成及其抑草作用

基因表达调控是水稻化感作用形成的重要基础。本研究对化感水稻PI312777(Oryza sativa L.)的Os MYB(CT829537)基因分别进行过表达(overexpression,OE)和RNA干扰(RNAi),再与稗草(Echinochloa crusgalli,BYG)共培养,以野生型PI312777为对照。结果发现,与稗草共培养下CT829537-OEPI312777的酚类代谢关键酶基因表达上调,根系及其水培液中的总酚酸浓度增加,抑草能力增强;相同处理下CT829537-RNAi PI312777则相反,其酚类代谢关键酶基因较野生型植株表达下调,总酚酸浓度降低,抑草能力下降。这表明Os MYB(CT829537)通过调节化感水稻的酚酸类物质合成进而影响其抑草能力。     

新几内亚凤仙水培与土培根系特性的比较

为了研究新几内亚凤仙根系对水培的适应性,以新几内亚凤仙‘爪哇岛’品种为试验材料,通过采用MS营养液水培、园土+蛭石+珍珠岩土培2种处理,观察根系外观形态、分析根系活力、解剖根系组织。研究结果表明：新几内亚凤仙在水培时,根系生长迅速,长势健壮,比土壤培养根重量增加60%;部分薄壁组织分解,通气空隙大大增加;根系活力比土培时提高41%。表明新几内亚凤仙是一种易于进行水培的花卉;利用水培可以显著加快其形成商品植株,同时提高商品植株的质量。