金钻蔓绿绒的离体培养研究

本研究以金钻蔓绿绒根茎、叶片、叶基、叶柄为试验材料,研究外植体类型与取材时间、消毒处理方法,植物激素种类与浓度筛选出适宜诱导愈伤组织、不定芽与继代培养基。结果表明:叶片和叶基最佳灭菌时间:75%酒精30 s+0.1%升汞10 min,叶柄:75%酒精30 s+0.1%升汞16 min,根茎:75%酒精30 s+0.1%升汞20 min;最佳取材时间为夏季,愈伤诱导率高,且诱导时间短;叶片、叶基、叶柄最佳诱导愈伤培养基:MS+2.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L 2,4-D,增殖培养基:MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;根茎诱导不定芽及继代增殖最佳培养基分别为:MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+1 mg/L GA3与MS+0.8 mg/L 6-BA+0.2 mg/LIBA。     

狭叶红景天种子萌发和愈伤组织诱导最佳培养条件筛选

[目的]以狭叶红景天种子为实验材料,探索其种子萌发和愈伤组织诱导的最佳培养条件.[方法]通过对狭叶红景天种子不同浸泡时间和消毒时间的筛选,获得种子萌发最佳培养条件;并进一步选取狭叶红景天的无菌苗的幼叶为外植体,采用不同植物激素的配比进行愈伤组织诱导培养,最终筛选出狭叶红景天愈伤组织诱导培养的最佳条件.[结果]狭叶红景天种子萌发的最佳培养方式为将未经浸泡的种子,先采用酒精消毒20 s后再经升汞消毒20 min,其种子的染菌率为0％,萌发率为(61.8±0.21)％;狭叶红景天幼叶诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 3 mg/L+KT 0.1 mg/L,在培养30 d后愈伤组织诱导率可达98％以上.     

穿心莲无菌外植体快繁体系初探

为了提高穿心莲组织培养效率,初步建立穿心莲无菌外植体体系,本研究以穿心莲为材料,采用4因素3水平的正交设计方法,研究不同外植体、不同消毒时间和不同培养基对穿心莲愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,最佳外植体为带腋芽茎段,HgCl_2消毒最佳时间为6min,愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA。本研究结果将为穿心莲的遗传转化和分子遗传研究奠定基础。     

吐烟花的组织培养

以吐烟花茎段为试验材料,研究其表面消毒方法和不同激素配比的培养基对吐烟花愈伤组织诱导、丛生芽扩繁以及幼苗生根的影响。研究结果表明,外植体表面消毒以70%酒精消毒15 s,无菌水漂洗1次,0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗1次后,再用0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗4次的效果最佳;同时筛选出吐烟花植株再生的较好激素浓度配比的培养基：MS+3.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA适合愈伤组织诱导,MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA对丛生芽诱导与扩繁效果较好,MS+0.3 mg/L NAA有利于生根,移栽成活率达91%,且植株生长良好。     

总状绿绒蒿组织培养再生体系的建立

本研究以总状绿绒蒿(Meconopsis racemosa)的种子、无菌苗的根及生长点为材料,以2,4-D、NAA、6-BA设置不同的激素配比,以建立其组织培养快繁体系。结果显示,用0.1%升汞溶液为消毒剂,5.5 min为最佳的消毒时间,此时的种子发芽率为56.7%;愈伤组织诱导培养：以种子为外植体诱导愈伤,MS+0.6 mg/L 2,4-D为最佳的培养基。以无菌苗的根为外植体诱导愈伤,进行暗培养,MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基。以无菌苗的生长点为外植体诱导愈伤,并进行光培养,MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基;愈伤增殖培养：由种子诱导愈伤的最佳增殖培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D。MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA是无菌苗的根诱导愈伤的最佳增殖培养基。MS和MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为生长点诱导愈伤的最佳增殖培养基;生根培养：由种子、生长点诱导并增殖愈伤的最佳生根培养基为MS。本研究为总状绿绒蒿的快速繁殖和分子育种提供了基...     

马铃薯晋薯16号愈伤组织再生体系的建立

为建立马铃薯品种晋薯16号组织再生体系,以晋薯16号无菌苗为材料,对外植体类型、外植体表面消毒试剂浓度和根的诱导条件进行筛选,同时优化了愈伤组织诱导和分化的最佳植物激素组合及浓度。结果表明:愈伤组织诱导的最佳外植体为茎段;2%的次氯酸钠消毒效果较好;根的诱导使用含50g/L蔗糖的MS培养基较好;愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.5mg/L为佳;愈伤组织分化培养基以MS+6-BA 1.5mg/L+GA3 2.0mg/L+ZT 1.0mg/L为佳。     

宽筋藤组织培养的初步研究

为了研究宽筋藤快繁技术,以宽筋藤健壮无病虫害的嫩茎和嫩叶作为试验材料,研究其表面消毒方法和在添加不同浓度激素的培养基上培养,对宽筋藤进行组织培养研究。结果表明：茎段表面采用75%酒精消毒30 s,用0.1%升汞浸泡5 min,无菌水漂洗2次后,再用0.1%升汞浸泡5 min,无菌水漂洗4次的效果最佳,存活率为66.7%;而叶片直接用升汞处理12 min的消毒效果较好,存活率为53.3%;适宜侧芽诱导和增殖的培养基为MS+6-BA 0.05 mg/L+GA3 0.04 mg/L+NAA 0.02 mg/L,30天的增殖系数为3;诱导愈伤组织以培养基MS+2,4-D 1.5 mg/L+BA 0.5 mg/L的效果较好,对嫩茎的诱导率可达83.3%,对嫩叶的诱导率可达76.7%,但所诱导的愈伤组织分化能力低,均不能分化不定芽;适宜生根的培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率可达到100%,且移栽成活率96%。     

凉都红香椿外植体快繁体系的研究

以贵州凉都红香椿成熟叶片和无菌苗叶片为材料,筛选可用于诱导叶片再生形成植株的愈伤组织诱导和分化的培养基分别为:MS+0.15 mg/L TDZ+0.3 mg/L NAA+1.0mg/L KT+3%蔗糖+7g/L琼脂和MS+0.1mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA+3%蔗糖+7g/L琼脂;同时筛选到以成熟香椿枝条为材料诱导腋芽生长的最适培养基为:MS+0.2mg/L GA3+0.02mg/L+3%蔗糖+7g/L琼脂。另外,研究还确定了香椿成熟叶片和枝条外植体的最佳消毒条件为:75%酒精处理45s,0.1%升汞灭菌6～8min后,用无菌水冲洗4～6次可降低外植体的污染率。     

蚊净香草组织培养技术研究

以蚊净香草的叶片和茎段作为外植体,用0.1%的升汞作为消毒剂,通过试验拟找出最佳的消毒时间及适于外植体的诱导、增殖和生根的培养基。结果表明：0.1%的升汞对两种外植体的最佳消毒时间是5~7min,最适于诱导外植体产生愈伤组织和不定芽,以及不定芽的增殖和生根的培养基分别为：MS+6-BA0.5mg/L(单位下同)+IAA0.1+NAA0.3、MS+6-BA0.25 +IAA0.5、 MS+6-BA0.05+NAA0.5 +IBA0.5。     

麻黄茎段的愈伤组织诱导和增殖培养

以一二年生麻黄草质茎为外植体,采用不同的灭菌组合、添加不同浓度的激素,最佳外植体处理方法及愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基组合。结果表明,外植体灭菌的最佳处理组合是75%酒精灭菌20 s后0.1%HgCl_2灭菌4 min,此灭菌组合的成活率高达100%,并无污染发生;麻黄草质茎愈伤组织诱导的培养基以MS+6-BA 0.25 mg/L+NAA 0.05 mg/L为最佳;麻黄愈伤组织增殖的培养基以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L为最佳;一年生麻黄草质茎明显优于二年生麻黄草质茎。本研究可以为麻黄的工厂化育苗、次生代谢物生产等提供理论和技术依据。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。     

果桑侧芽生长点组织快繁初探

果桑（Morus spp）具有很高的经济价值,是目前中国农业产业结构调整的优选树种。桑苗可通过组织培养快速繁殖。笔者以果桑侧芽生长点为材料,研究各种消毒条件、不同浓度的培养基和不同褐化抑制剂对其组织快繁的影响。实验结果得到了生长茁壮的愈伤组织,并诱导生根。主要结果如下：果桑生长点先用75%酒精消毒30秒,再用加入少量吐温-80的0.1%HgCl2消毒8分钟,在MS+6-BA 2mg/L + IAA 0.5mg/L的培养基上诱导愈伤率可达80%。在生根培养基MS+IAA0.1mg/L + 6–BA 0.5mg/L上,生根率可达70%。如果直接进行不定芽诱导,在MS +IAA 0.2mg/L + 6–BA 3.0mg/L的培养基上,每个茎段平均可以产生3个不定芽。抗坏血酸可以在一定程度上抑制愈伤组织的褐化现象。但是在整个果桑组织培养过程中仍然存在很多问题,需要进一步研究。     

不同外源激素对油棕愈伤组织诱导的影响

以油棕幼胚为外植体,以N6培养基上添加不同浓度的生长素与细胞分裂素进行愈伤组织诱导研究。结果表明,无激素的培养基上不能诱导出愈伤组织,单独加入2,4-D、IAAIBA、6-BA中N6+2,4-D110mg/L的浓度愈伤组织形成率最高,为83.75%,诱导过程中褐化现象少。N6+2,4-D110mg/L+PVP5g/L+蔗糖6%+AC0.3%培养基促进愈伤组织的诱导和生长,适合进一步继代培养。     

雪莲组培过程对潮霉素敏感性的研究

以雪莲叶片为外植体,研究了不同浓度的潮霉素对雪莲愈伤组织诱导、生长及分化的影响,结果表明:8.0 mg/L浓度的潮霉素为雪莲叶盘转化筛选的最佳质量浓度,不同浓度(5 ～50 mg/L)潮霉素对MS+ NAA 2.00 mg/L+ 6-BA 1.00mg/L培养基下雪莲愈伤组织的诱导与生长均有明显的抑制作用,随着潮霉素浓度的升高,毒害程度加深,当潮霉素浓度为20 mg/L时表现为生长的愈伤组织块较小、褐化、甚至死亡.同时,低浓度(0.5 ～2.0 mg/L)的潮霉素可以提高雪莲愈伤组织的分化率,其中0.5 mg/L潮霉素的质量浓度的诱导培养基内,雪莲愈伤组织的出芽率平均可达98.33％.     

野生软枣猕猴桃组织培养及褐变处理

以野生软枣猕猴桃嫩芽、幼嫩叶片以及茎段作为外植体,研究野生软枣猕猴桃组织培养整个过程,以建立快速高效的野生软枣猕猴桃再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片、茎段愈伤组织的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;诱导出愈伤组织在MS+0.6 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA培养基上能很好地分化不定芽苗;诱导幼芽产生丛生芽的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;较适宜的生根培养基为1/2MS。愈伤组织继代中发现细胞生长素NAA可以防止愈伤褐化。在愈伤组织分化中,发现将分化出的芽苗再次愈伤化,可以提高分化率。     

铁线莲‘Polish Spirit’组培快繁体系的建立

本研究以铁线莲波兰精神(Clematis viticella‘Polish Spirit’)为实验材料,以带芽茎段为外植体,利用正交试验,完成‘Polish Spirit’初代培养消毒方式筛选并对其叶片、叶柄和无芽茎段进行愈伤组织诱导研究。通过研究不同外植体、不同消毒方式、不同激素种类和浓度配比对腋芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,建立了铁线莲波兰精神的组培快繁体系。实验结果表明最佳的外植体为带芽茎段,最好的消毒方法是2%洗衣粉溶液浸泡10 min流水冲洗1 h,75%的酒精消毒20 s,0.1%HgCl2消毒6 min。诱导腋芽的最佳培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.05 mg/L NAA+1.5%蔗糖,pH值为5.8,增殖培养基添加椰汁150 m L/L可有效提高丛生芽诱导率,添加20 mL/L香蕉泥可有效壮苗,生根最适诱导培养基为1/2MS+0.02 mg/L NAA,生根率为85%,组培苗移栽成活率达90%以上。本研究结果为铁线莲优良品种‘Polish Spirit’快速扩繁提供了理论基础。     

板栗短雄花序芽变的离体培养研究

本文以板栗短雄花序芽变为材料,研究了以MS为基本培养基,采取不同外植体、不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响,结果表明,其最适宜的诱导培养基为MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA。茎段、嫩叶两种外植体中,以其茎段培养的诱导率较高,成愈率为65.0%。继代培养的适宜培养基为MS + 0.5～1.0mg/L 6-BA + 0.2mg/L NAA。     

3个铁线莲品种组培快繁体系的建立

本试验以铁线莲‘卡西斯’(Clematis Cassis)、‘大河’(Clematis Taiga)、‘倾盆大雨’(Clematis Cloudburst)为外植体,研究在3、4月外植体的消毒最佳时长时间,结果表明,3、4月中,‘卡西斯’的最佳消毒时长分别是3 min和4 min,‘大河’的最佳消毒时间均为4 min,‘倾盆大雨’的最佳消毒时长分别为3 min和4 min;以‘卡西斯’、‘大河’、‘倾盆大雨’带芽茎段为外植体,以3种激素不同浓度配比实验,筛选出3个铁线莲品种增殖继代培养的最佳配方分别为:‘卡西斯’:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉;‘大河’为:1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/LVC+20 g香蕉;‘倾盆大雨’为:1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L KT+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉。2 mg/L的NAA可以显著提高生根率,但即使不进行生根诱导,培养时间超过30 d后各品种也会相继出现生根现象。