白肋烟烟碱转化率与TSNA含量及烟叶评吸质量的关系

为进一步明确白肋烟烟碱转化对烟草特有亚硝胺(TSNA)及烟叶感官评吸质量的影响,以不同烟碱转化率类型的白肋烟品系为材料,进行了生物碱、TSNA含量检测和原烟感官质量评吸。结果表明:低转化(LC)品系生物碱以烟碱为主,高转化(HC)品系则以降烟碱为主,LC品系比HC品系烟碱含量高107.78%,降烟碱含量则减少93.74%,烟碱转化率下降93.28%。HC品系以亚硝基降烟碱(NNN)含量为主,LC品系以亚硝基新烟草碱(NAT)为主,LC品系的NNN和TNSA总量分别比HC品系下降86.43%和66.61%,但NAT和4-(甲基亚硝胺)-1-(3-毗啶)-1-丙酮(NNK)、亚硝基假木贼碱(NAB)含量及其占TSNA总量的比例高于HC。LC品系的原烟感官评吸质量在香型风格、杂气等方面均优于HC品系,HC品系怪味突出。TSNA总量、NNN与降烟碱及烟碱转化率呈正向直线相关,与烟碱存在负向对数相关;NNK与烟碱的存在正向相关、与降烟碱及烟碱转化率存在负向对数相关;与降烟碱的相关系数均大于转化率和烟碱。为此认为,积极选育和推广种植烟碱转化率低的LC品系,是降低白肋烟TSNA含量和提高烟叶品质的有效措施,同时兼顾对NNK、NAB及NAT的选择与控制亦很有必要。     

UPLC-MS/MS法测定电子烟烟油中TSNAs的含量

为快速准确测定电子烟烟油中的烟草特有亚硝胺(TSNAs),对前处理条件进行优化,建立了烟油中TSNAs的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,结果表明:使用HLB固相萃取小柱进行净化,可以很好地去除杂质干扰;NNK、NNN、NAT、NAB的检出限为0.005~0.020 ng/g,定量限为0.015~0.067 ng/g,3个加标水平的回收率为85.16%~105.79%;通过对6个不同品牌电子烟烟油中TSNAs的测定,NNN的检出率和含量是最低的,因此,该方法稳定、准确,适用于测定电子烟烟油中TSNAs的含量。     

不同栽培条件下烟草的N—亚硝基降烟碱含量

作者对各种烟草的烟碱、降烟碱和N—亚硝基降烟碱(NNN)的含量进行了测定,通过三种不同的N肥水平种植普通烤烟(NC2326)和转化烟(NIC117H—1)来评价N肥对NNN产生的影响。烟草品种NC2326的NNN随施N量的增加而显著,而加,而NIC117H—1系的NNN含量则随施N量的增加而下降。把刚采收的烟叶用维生素C或α—维生素E溶液喷洒,NNN的含量减少20—80％。     

UPLC-MS/MS法测定电子烟烟油中TSNAs的含量

为快速准确测定电子烟烟油中的烟草特有亚硝胺(TSNAs),对前处理条件进行优化,建立了烟油中TSNAs的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,结果表明:使用HLB固相萃取小柱进行净化,可以很好地去除杂质干扰;NNK、NNN、NAT、NAB的检出限为0.005⁰.020 ng/g,定量限为0.0150.020 ng/g,定量限为0.015⁰.067 ng/g,3个加标水平的回收率为85.16%0.067 ng/g,3个加标水平的回收率为85.16%¹05.79%;通过对6个不同品牌电子烟烟油中TSNAs的测定,NNN的检出率和含量是最低的,因此,该方法稳定、准确,适用于测定电子烟烟油中TSNAs的含量。     

亚硝酸盐清除剂阻断烟草特有亚硝胺形成的研究

[目的]研究清除剂对烟草特有亚硝胺（TSNAs）形成的阻断作用。[方法]在pH为5.5的等物质的量比亚硝酸钠-降烟碱溶液中,分别添加6种不同的亚硝酸盐清除剂,考察各添加剂对溶液中亚硝化产物N-亚硝基降烟碱（NNN）形成的抑制效率。[结果]抗坏血酸、咖啡酸和阿魏酸能有效阻断NNN的形成,当添加剂-亚硝酸盐物质的量比为3.0∶1.0时,抑制率超过90%;二氢咖啡酸、儿茶素、绿原酸的抑制率均超过50%。将6种添加剂应用于混合型卷烟烟丝中进行烟草基质试验,结果表明,咖啡酸、阿魏酸、二氢咖啡酸和儿茶素等是TSNAs形成的有效抑制剂,当添加剂-亚硝酸盐物质的量比为3.0∶1.0时,抑制率均超过50%。[结论]咖啡酸、儿茶素和阿魏酸既能抑制pH=5.5溶液中NNN的形成,也可阻断烟草基质系统中TSNAs的形成。     

不同类型烟草种质的烟碱含量变化与相关基因表达水平

为研究不同类型烟草种质的烟碱含量变化规律与相关基因的表达情况,以烤烟K326、香料烟巴斯玛、白肋烟TN90、晾烟马里兰为材料,采用荧光定量PCR技术,测定了烟草不同生育时期上部叶、中部叶、下部叶的烟碱含量与烟碱代谢过程中相关基因CYP82E5V2、PMT、A622、QPT的表达水平。结果表明,随着生育期的推进,烟碱含量缓慢上升,打顶后急剧增加,除巴斯玛打顶后还继续上升外,K326、TN90和马里兰烟均表现为:打顶后烟碱含量急剧增加,后缓慢下降,再渐趋平稳。不同类型烟草种质的PMT在不同生育期均有表达,苗期PMT表达量较高,其变化趋势与烟碱含量的基本一致;QPT在烟草发育前期表达量较高,而后下降,至打顶前1周表达量出现一个峰值,打顶后表达量持续增加,与烟碱含量变化呈正相关;K326和马里兰烟的A622表达量呈波浪型上升,至成熟时仍维持较高水平,而TN90和巴斯玛在打顶前后1周表达量较高,后表达下降再上升,成熟时表达量较低,与烟碱含量变化无明显一致性;CYP82E5V2表达量在不同生育时期均维持在较高水平,呈波浪型,生长旺期时表达上升,打顶前后均出现峰值,但巴斯玛成熟期时其表达量下降,打顶前CYP82E5V2表达量与烟碱含量变化呈正相关,打顶后期至成熟期两者呈一定程度的负相关。     

施肥及生长调节剂对烟草烟碱和钾含量的影响

本文研究了烟草品种、不同形态的氮肥以及生长调节剂 (IAA ,丙二酸 )对烟草烟碱和钾含量的影响。研究结果表明 ,品种间烟碱和钾含量存在明显差异 ,其中烟碱含量以中烟 90和中烟 98较低 ,钾含量以中烟 90和RG11较高 ;不同形态的氮肥对烟碱和钾含量的影响不同 ,施用硝酸钾烟碱积累最低 ,施用硝铵有利于烟叶钾的吸收 ;IAA和丙二酸都可以降低烟碱的含量 ,尤其IAA效果最明显。IAA明显提高烟叶的含钾量 ,而丙二酸则有降低烟叶含钾量的趋势     

不同类型烟草种质的烟碱含量变化与相关基因表达水平

为研究不同类型烟草种质的烟碱含量变化规律与相关基因的表达情况,以烤烟K326、香料烟巴斯玛、白肋烟TN90、晾烟马里兰为材料,采用荧光定量PCR技术,测定了烟草不同生育时期上部叶、中部叶、下部叶的烟碱含量与烟碱代谢过程中相关基因PMT、QPT、CYP82E5V2、A622的表达水平。结果表明,随着生育期的推进,烟碱含量缓慢上升,打顶后急剧增加,除巴斯玛打顶后还继续上升外,K326、TN90和马里兰烟均表现为:打顶后烟碱含量急剧增加,后缓慢下降,再渐趋平稳。不同类型烟草种质的PMT在不同生育期均有表达,苗期PMT表达量较高,其变化趋势与烟碱含量的基本一致;QPT在烟草发育前期表达量较高,而后下降,至打顶前1周表达量出现一个峰值,打顶后表达量持续增加,与烟碱含量变化呈正相关;CYP82E5V2表达量在不同生育时期均维持在较高水平,呈波浪型,生长旺期时表达量上升,打顶前后均出现峰值,但巴斯玛成熟期时其表达量下降,打顶前CYP82E5V2表达量与烟碱含量变化呈正相关,打顶后期至成熟期两者呈一定程度的负相关;K326和马里兰烟的A622表达量呈波浪型上升,至成熟时仍维持较高水平,而TN90和巴斯玛在打顶前后1周表达量较高,后表达下降再上升,成熟时表达量较低,与烟碱含量变化无明显一致性。     

茶质滤嘴降低卷烟烟气中亚硝胺的效果

为研究茶质滤嘴降低卷烟烟气中亚硝胺,利用气相色谱仪-热能检测器(TEA)分离检测卷烟烟气中NNN、NAT、NAB、NNK四种烟草特有亚硝胺(TSNAs)的含量。实验方法包括:卷烟烟气的捕集、二氯甲烷超声萃取剑桥滤片中TSNAs、萃取液经碱性氧化铝层析纯化,洗脱液的浓缩、纯化。检测结果表明:与普通滤嘴卷烟相比,烤烟型茶质滤嘴卷烟烟气中NNN、NAT、NAB、NNK、亚硝胺总量分别降低了16.88%、15.12%、26.04%、11.39%、14.61%;混合型茶质滤嘴卷烟烟气中NNN、NAT、NAB、NNK分别降低了23.04%、11.62%、17.41%、17.38%、17.41%。     

烟草内生芽孢杆菌降低烟叶亚硝胺类物质含量的研究

从白肋烟TN90品种的主脉组织中分离到1株内生菌株WT。根据形态和生理生化特征进行鉴定。该菌株在TSA培养基上菌落形态为白色,环状突起。对利福平和萘啶酮酸敏感。革兰氏阳性(G ),催化酶活性,产生芽孢,可运动,杆状,具一定的碱性磷酸酶活性和一定的脲酶活性,鉴定为芽孢杆菌(Bacillussp.)。在温室移栽时将该内生细菌接种于白肋烟TN90,并在收获后喷施细菌悬液于烟叶表面,进行亚硝胺类物质的检测,结果表明:接种WT可减少白肋烟TN90的亚硝胺组分,TSNA总量比对照减少,叶片组织减少21.7%~44.6%,主脉组织减少16.7%~80%。整个根系接种可有效降低叶片和主脉组织内烟草特有亚硝胺(TSNA)总量(P≤0.05),分别降低了38.0%和80%。叶面喷施可使叶片组织内烟草特有亚硝胺(TSNA)总量降低44.6%,也明显影响叶片和主脉组织中N-亚硝基去甲基烟碱(NNN)含量,差异显著(P≤0.05)。对N-亚硝基新烟草烟碱(NAT)和N-亚硝基假木贼碱(NAB)含量的影响不显著。     

口含烟中烟草特有亚硝胺的测定

建立了一种超高效液相色谱-串联质谱联用法测定口含烟中烟草特有亚硝胺的测定方法,结果表明:4种烟草特有亚硝胺NAB、NAT、NNK和NNN的检出限分别为0.31、0.17、0.10和0.37 ng/g,精密度在1.33%~5.99%之间,回收率的在94.2%~99.9%之间。该方法准确可靠、前处理简单,适用于口含烟中TSNAs的常规检测。     

烟草烟碱含量性状的杂种优势及配合力分析

为拓宽烤烟烟碱性状改良的种质资源范围,以4种烟草类型13个品种为亲本材料,采用NCII遗传交配设计,组配40个杂交组合,田间种植并测定亲本及杂种F1的烟叶烟碱含量,对烟叶烟碱含量差异、杂种优势表现、烟碱的配合力进行分析。结果显示:不同类型及品种间的烟叶烟碱含量差异极显著,其中白肋烟品种TN90的烟碱含量最高、为5.21%,晒晾烟品种青梗的烟碱含量最低、为0.94%。烟碱含量性状的杂种优势表现多样,40个杂交组合中,表现为正向超亲优势的组合有15个、占37.5%,其中优势最强的组合是G70×湄潭大蛮烟,优势率为54.35%;表现为负向超亲优势的组合有10个、占25%,其中优势最强的组合是红花大金元×湄潭大蛮烟,优势率为-26.71%;表现为中亲优势的组合有15个、占37.5%。亲本材料间烟碱含量的一般配合力差异显著,其中一般配合力效应值最高的是巴斯玛、为21.35,最低的是青梗、为-15.77;组合间烟碱含量的特殊配合力差异极显著,其中特殊配合力效应值最高的是G70×湄潭大蛮烟、为29.80,最低的是红花大金元×湄潭大蛮烟、为-40.05。表明烟草烟碱含量性状改良的遗传资源丰富,在烤烟育种中引入其他烟草类型的优良性状,同时筛选烟叶烟碱含量符合生产需求的烤烟新品种是可行的。     

白肋烟不同品种生物碱含量株间分布与变异性分析

对我国白肋烟主栽品种单株调制后烟叶样品的生物碱含量进行分析，结果表明，各品种均表现为烟碱含量变异性较小，其次为新烟草碱和假木贼碱，降烟碱含量株间变异性最大。达白一号和TN90的烟碱和总生物碱含量株间分布集中，烟碱含量变异系数分别为14．51％和19．33％，其次为鄂烟一号。达所24和宣汉-5株间变异性较大，变异系数分别为34．80％和36．57％。达白一号和TN90降烟碱含量正常，株问变异小，烟碱转化率低，分别为3．53％和2．54％；宣汉-5、达所24和鄂烟一号的降烟碱含量异常增高，平均烟碱转化率分别为34．80％；26．46％；11．20％，烟碱转化问题严重。达白一号和TN90生物碱含量和组成较为合理。稳定性好。     

打叶复烤白肋烟叶TSNAs含量变化分析

为了研究在打叶复烤过程中白肋烟叶TSNAs含量的变化趋势,对白肋烟5个模块烟叶原烟、一润、二润、打叶及复烤处理环节进行了取样,并利用SPSS和MINITAB软件对样品的常规化学和TSNAs含量进行了分析。结果表明,在打叶复烤的过程中TSNAs含量在打叶处理环节显著上升,在复烤处理环节下降,其中NNN、NAT及NAB含量经过打叶复烤整个过程显著上升,NNK含量略有上升但和原烟相比差异不显著。白肋烟TSNAs含量与常规化学成分的相关性不显著。因此调控TSNAs的关键点在打叶处理环节。     

不同耕作方式对植烟土壤及烤烟质量的影响

为增加植烟土壤孔隙度、降低土壤容重,进而改善土壤物理结构,从而达到提高植烟土壤质量、提升烤烟品质的目的。本试验以云烟87为试验材料,采用随机区组试验设计,设置了T1旋耕、T2松地和T3翻地三种耕作方式。结果表明,在烟草整个生育期内,T1处理对植烟土壤速效钾含量有较好的影响;T2处理对植烟土壤碱解氮含量、速效磷含量以及烟草大田前期(移栽后30-60d)的土壤有机质、可溶性有机氮含量影响较好;T3处理对烟草大田后期(移栽后90-120d)的有机质以及可溶性有机碳含量有较好的影响;此外,相较于T1处理,T2、T3处理都能够提高烤烟烟叶的总糖和还原糖含量、降低烟碱含量。总的来说,相较于旋耕,松地和翻地对植烟土壤和烤烟质量的影响更好。     

盐碱胁迫下烟草出芽率和脯氨酸·丙二醛活性变化

[目的]探讨不同品种烟草抗盐碱胁迫能力。[方法]检测不同浓度的盐碱混合溶液（6．25～500mmol／L）胁迫下5种常见烟草品种（白肋烟TN90、烤烟NC89、晒烟延晒5号、香料烟河南香料,黄花烟）种子出芽率和幼苗叶片丙二醛和脯氨酸含量的变化。[结果]黄花烟抗盐碱胁迫能力最强,河南香料、延晒5号、NC89次之,TN90最弱。[结论]为因地制宜选择适合本地栽培的烟草品种提作参考。     

口含烟中烟草特有亚硝胺的测定

建立了一种超高效液相色谱-串联质谱联用法测定口含烟中烟草特有亚硝胺的测定方法,结果表明:4种烟草特有亚硝胺NAB、NAT、NNK和NNN的检出限分别为0.31、0.17、0.10和0.37 ng/g,精密度在1.33%⁵.99%之间,回收率的在94.2%5.99%之间,回收率的在94.2%⁹9.9%之间。该方法准确可靠、前处理简单,适用于口含烟中TSNAs的常规检测。     

施氮量与留叶数对晒红烟化学成分和TSNAs的影响

采用裂区设计,研究施纯氮量(195 kg/hm~2(低氮)、225 kg/hm~2(中氮)、255 kg/hm~2(高氮))与留叶数(14、16、18、20片/株)及其互作对万源晒红烟‘万毛3号’化学成分和TSNAs的影响。结果表明:中、高氮处理烟叶总氮含量较低氮处理分别提高6.1%、15.6%,烟碱含量分别提高13.3%、39.0%,钾含量分别提高6.2%、12.9%,硝酸盐含量分别提高9.3%、19.7%,总糖含量分别降低16.1%、29.9%;留叶16、18、20片/株处理烟叶总糖含量,较14片/株处理分别提高9.4%、28.4%、31.6%;钾含量分别提高10.2%、12.8%、20.6%,总氮含量分别降低4.5%、9.5%、12.4%,烟碱含量分别降低7.1%、18.2%、21.9%;施氮量的增加与留叶数的减少,都使TSNAs含量显著上升;施氮量和留叶数互作对‘万毛3号’的化学成分和TSNAs含量均有极显著影响。综合分析,施氮量对烟碱、钾和TSNAs及前体物含量的影响较大;留叶数对糖分、氮碱比的影响较大;对‘万毛3号’施氮225 kg/hm~2、留叶16片/株处理,烟叶化学成分较为协调。     

原味型斗烟原料作用分析

【目的】明确原味型斗烟原料烤烟、白肋烟、百里科、东方烟草、拉塔基亚、黑板烟的特性及其在配方中的作用,为原味型斗烟的配方设计提供参考。【方法】对6种斗烟原料常规化学成分、中性致香物质含量进行测定,并对6种斗烟原料及其按1∶1组成的7种配方斗烟(烤烟(对照)、烤烟/白肋烟、烤烟/东方烟草、烤烟/拉塔基亚、烤烟/百里科、烤烟/黑板烟、烤烟/东方烟草/拉塔基亚)进行感官特性分析,研究原料内在化学成分与感官评价之间的相关性。【结果】6种斗烟原料中烤烟的叶绿素降解产物含量高、氮碱比低;白肋烟总糖、还原糖含量低,烟碱含量高;拉塔基亚总氮和类胡萝卜素降解产物含量高;东方烟草(土耳其AG级)总糖、还原糖含量及糖碱比高;黑板烟烟碱含量低、中性致香物质总量低。感官评价结果表明,白肋烟具有坚果香味,可使配方劲道力量、层次变化和室韵嗅香得分升高;东方烟草香气芳香,可使配方层次变化得分升高;百里科刺激性稍大,可使配方劲道力量、层次变化和室韵嗅香得分升高;黑板烟具有焦糖风味,可使配方层次变化得分升高;拉塔基亚具有焚香风味,可使配方室韵嗅香得分升高,但会降低层次变化得分。相关性分析结果表明,烟碱含量与劲道力量呈极显著正相关,氮碱比与劲道力量呈显著负相关;钾含量与层次变化呈显著正相关,类胡萝卜素降解产物含量与层次变化呈显著负相关;总糖含量、还原糖含量、棕色化反应产物含量与室韵嗅香呈显著负相关。【结论】白肋烟、百里科的烟碱含量高、氮碱比低,可使配方劲道力量变强;黑板烟、白肋烟的加入可丰富配方的层次变化;烤烟、东方烟草的总糖、还原糖、棕色化反应产物含量相对较高,要设计室韵嗅香较浓的配方应减少这2种原料的使用量。     

有机种植方式对烟叶产量和内在品质的影响

对K326、KRK26、红花大金元3个烤烟品种开展有机和常规种植,研究有机种植方式对烤后烟叶内在品质及工业可用性的影响。结果表明:与常规种植相比,烤烟有机种植产量显著下降(P<0.01),平均减产17.7%,均价平均提高25.6%,上等烟比例平均提高19.2%,中上等烟比例平均提高9.8%,产值变化规律不明显;烟叶总糖(TS)、还原糖(RS)含量极显著增加(P<0.01),烟碱(NIC)、总氮(TN)、钾(K)含量及主要中性致香物质、总致香产物含量显著降低(P<0.05)。评吸结果表明,有机烟叶烟气醇和度、燃烧性稍差,香气量略显不足,但烟气舒适性较好,香气质细腻,烟碱含量适中,刺激性较小,其工业可用性整体优于常规烟叶。