拮抗镰刀菌香蕉枯萎病木霉菌株PZ6的分离鉴定及生物学特性研究

PZ6 菌株是一株分离于香蕉根际土壤的具有生防潜力的木霉菌株,通过rDNA-ITS鉴定为棘孢木霉（Trichoderma asperellum）。采用室内菌丝生长、产孢测定方法研究了PZ6 菌株生物学特性,为进一步研究菌株的发酵培养及田间应用技术提供理论依据。结果表明: PZ6 菌株在PDA、PSA、OMA和Czapek上均能生长,但在PDA和OMA培养基上菌丝生长和产孢最佳,培养3 d菌落直径均达到76.67 mm,产孢量对数值达到7.63。温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,在15～37 ℃之间均能生长,在25～30 ℃之间菌丝生长较好,以30 ℃时菌丝生长最快,培养3 d 后菌落直径达到89.00 mm,并且产孢量也显著高于其他培养温度;光照处理对菌丝生长影响明显,持续光照可显著促进产孢。葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖和蔗糖都能够较好促进菌丝生长,葡萄糖和果糖是PZ6菌株产孢的最佳碳源;硫酸盐与硝酸盐是PZ6菌丝生长和产孢的最佳氮源;菌株在pH值2～12的范围均可以生长产孢,但最适宜的生长产孢条件为pH 值5～9。     

俄罗斯木霉菌株GAU 1-X-2的生物学特性

从碳氮源、酸碱度及生长温度等方面对俄罗斯木霉(Trichoderma rossicum)菌株GAU 1-X-2的生物学特性进行了研究。结果表明,俄罗斯木霉菌株GAU 1-X-2的生长温度范围为10~35℃,最适温度为20℃;菌落在pH值为5.0~12.0的培养基上能够生长,pH为7.0时,生长最快,pH值为8.0时产孢量最大;营养生长最好的碳源为甘露醇,产孢量最好的碳源为葡萄糖;营养生长最适氮源为蛋白胨,在供试的7种氮源中,培养6d未观测到该菌株产孢;完全黑暗条件有利于菌丝生长和产孢;孢子致死温度为68℃,10min。     

深绿木霉T2发酵液蛋白分离物诱导抗病作用研究

采用生长速率法和产孢量测定法,研究了不同培养基和温度、pH、接菌量、培养基量对深绿木霉T2生长和产孢量的影响。结果表明,PDA培养基有利于深绿木霉T2的生长;深绿木霉T2发酵产孢最优条件为温度25℃、pH 7、接菌量为0.05mL/L、培养基量为100mL/250mL,此条件下发酵72h时产孢量最大,为1.5×109个/mL;76h时产孢量下降;发酵液通过盐析及凝胶层析获得具有3个洗脱峰的蛋白质液,分别为Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ;采用生长速率法和诱导活体接种法分别测定不同浓度的3个洗脱液对百合灰霉菌的抑菌率及其诱导抗病效果,结果表明洗脱峰Ⅰ蛋白质的100倍液对百合灰霉菌的抑菌率最小,仅为1.16%,而其诱导抗病效果最好,为84.77%。     

不同培养基对禾草内生真菌Epichlo(e)生长与产孢的影响

本研究以分离自西藏早熟禾(Poa tibetica)、甘肃臭草(Melica przewalskvi)和麦宾草(Elymus tangutorum)的6个内生真菌菌株(分别为西藏早熟禾内生真菌Ep-003和Ep-004,甘肃臭草内生真菌Em-014和Em-016,麦宾草内生真菌Ee-001和Ee-003)为研究对象,分别在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、麦秆煎液琼脂(WSA)、玉米粉琼脂(CMA)和水琼脂(WA)4种培养基上培养4周后,观测菌落生长速率、菌落形态特征、产孢量和孢子特性.结果表明,同一菌株在不同培养基上的生长速率一般为PDA和CMA上的最大,WSA和WA上最小;不同菌株在同一培养基上,西藏早熟禾的Ep-003菌株生长最快,在PDA上直径最大,为46.42 mm,麦宾草内生真菌次之,甘肃臭草的Em-014菌株生长最慢,在WA上直径最小,为7.07 mm;在4种培养基上,菌株的产孢量有显著差异(P＜0.05),分别为Ep-003只在WA上产孢,其他5种菌株在WA和WSA培养基上产孢较多,在PDA和CMA上产孢较少;Em-016和Ep-004在4种培养基上的孢子长度无显著差异(P＞0.05),Em-014在WSA上的孢子长最小,为3.77 μm,其他菌株无显著差异(P＞0.05),Ee-003在PDA上孢子长最长,为8.43 μm,在其他3种培养基上无显著差异(P＞0.05);Ep-004、Em-016和Ee-003在4种培养基上孢子梗长度均无显著差异(P＞0.05),Em-014在WA上孢子梗最长,为16.74 μm,在WSA上最短,为14.09 μm,Ee-001在CMA上孢子梗最长,为18.59 μm,在WSA上最短,为13.40 μm.     

柑橘粉虱寄生性真菌渐狭蜡蚧菌TN002菌株培养条件的探究

渐狭蜡蚧菌（Lecanicillium attenuatum）是一种地理分布和寄主范围广泛的重要昆虫病原真菌，具有潜在的生物防治应用前景。本研究以产孢量和菌落直径，菌丝干重为测定指标设计单因素实验，对从重庆地区柑桔粉虱上分离得到的渐狭蜡蚧菌TN002菌株的基本生物学特性和摇瓶培养条件进行了探究，以期为TN002菌株商业化生产提供理论依据。结果表明，渐狭蜡蚧菌TN002菌株在PDA培养基上10℃~35℃范围内均可生长，25℃条件下产孢量和菌落直径最大。不同pH对其生长产孢影响差异不大；pH=5.5时产孢量最大达到（6.52+-0.45）x10^8 个孢子/皿。有机氮更利于TN002菌株固体生长和产孢，其中酵母浸粉为氮源时菌落直径最大达（41.91+-0.46）mm，蛋白胨为氮源时产孢量最多，为（8.56+-0.4）x10^8 个孢子/皿。蔗糖和葡萄糖较利于TN002菌株固体生长和产孢。在葡萄糖酵母浸粉液体培养基培养下，产孢量能达到最大值为（8.08+-0.16）x10^8 个孢子/mL。摇瓶培养24 h~93 h的结果表明在60 h时TN002菌株产孢量和菌丝干重均达到最大值。对装量、转速和接种量进行正交设计实验，结果表明最优的处理组合为500 mL锥形瓶中装量100 mL，接种量为4%（孢子悬液浓度为：1x10^7 个孢子/mL），转速为190 r/min或220 r/min。该研究明确了渐狭蜡蚧菌TN002菌株生物学特性，筛选得到了摇瓶培养最佳条件，为进一步扩大培养提供了理论基础。     

紫花苜蓿根腐病原菌--拟枝孢镰刀菌的鉴定及其生物学特性研究

本文对从内蒙古赤峰巴雅尔草业基地紫花苜蓿根部分离到的菌株 BYE27-2-5进行了致病性测定、形态学和rDNA-ITS 序列分析鉴定及生物学特性测定。结果表明,该菌菌丝生长、产孢和孢子萌发的最适温度分别为25,30和28℃;pH 值5．0～11．0均宜于菌丝生长,产孢最适 pH 8．0,孢子萌发最适 pH 7．0;光暗交替利于菌丝生长,光照利于产孢和孢子的萌发;孢子在相对湿度低于75％不萌发,高于95％萌发较快;葡萄糖蛋白胨培养基利于菌丝生长和孢子萌发,马铃薯蔗糖琼脂培养基利于产孢;碳源中葡萄糖利于菌丝生长和孢子萌发,蔗糖利于产孢;氮源中蛋白胨利于菌丝生长,酵母膏利于产孢和孢子萌发;菌丝致死温度为54℃（10 min）,分生孢子的致死温度为48℃（10 min）;根据其形态特征和 rDNA-ITS 序列分析结果,鉴定其为拟枝孢镰刀菌（Fusarium sporotrichioide ）。     

匍匐翦股颖叶斑病病原菌鉴定及生物学特性研究

对匍匐翦股颖Agrostis stoloni fera叶斑病的病原菌进行组织分离、培养,确定其病原菌为新月弯孢霉Curvularia lunata(半知菌亚门丝孢纲丝孢菌目暗色菌科弯孢霉属).对其进行生物学特性研究,发现温度、pH值对病原菌菌丝生长和孢子萌发存在着显著影响,光照对病原菌菌丝生长存在显著影响,对孢子萌发无显著影响.其中最适于病原菌菌丝生长的温度为28～31 ℃,pH值为5～6.最适于孢子萌发的温度为31～34 ℃,pH值为5～6.12 h光照交替有利于菌丝的生长.     

盐生草根际耐盐性木霉菌分离鉴定及其耐盐性评价

为获得耐盐性较强的木霉菌株,本试验采用平板分离法从采集的盐生草(Halogeton arachnoideus)根际土壤中分离鉴定了耐盐性较好的木霉菌株,并设置了不同浓度NaCl溶液模拟盐胁迫条件以评价其耐盐性。结果表明:经分离纯化共获得4株木霉菌株,其中获得1株耐盐性较好的木霉T-B菌株。结合形态学和分子生物学方法将分离获得的木霉T-B菌株鉴定为长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)。同时,利用不同浓度NaCl溶液模拟盐胁迫条件,发现当NaCl溶液浓度为100 mmol·L~(-1)时,在培养时间段(3～7 d)内长枝木霉菌株的生长速率与对照相比无显著差异(P0.05),而其产孢量显著高于对照(P 0.05),较对照增加了9.17%,表现出较强的耐盐性。该研究结果为利用木霉菌治理土壤盐碱化提供了一定的理论依据。     

龙眼叶枯病菌疏毛拟盘多毛孢生物学特性研究

龙眼叶枯病菌疏毛拟盘多毛孢生长温度10～30℃，最适生长温度20～25℃；在14～26℃下培养时，RH100%和 pH 6.3～7.2产孢量最大；分生孢子萌发率则以在25℃和RH+水滴及在24～26℃和pH 6～7时较高。黑暗处理促进菌丝生长，日光灯照射有利于分生孢子形成。分生孢子致死温度57℃10min。该菌能利用多种单糖、双糖和醇类作碳源，葡萄糖和蔗糖增进菌丝生长和孢子形成；能很好利用供试氮源L-白氨酸、L-胱氨酸和L-天冬氨酸等。L-组氨酸作为氮源时病菌产孢量最大，而氯化氨作为氮源时病菌不产孢。     

相对湿度和培养时间对食线虫真菌Duddingtonia?flagrans产孢量的影响

本研究旨在评估食线虫真菌Duddingtonia flagrans当地分离株(SDH035)在生长发育的过程中培养时间和环境中的相对湿度对其产孢量的影响。利用实验室已保存的当地分离的SDH035分离株,用液固双相法分别在35%和85%的相对湿度下分别培养7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d、49 d、56 d和62 d,用0.05%(w)的灭菌Twain-80将生长在谷粒表面的菌物洗脱下来,用双层纱布过滤,获得含有厚垣孢子的菌悬液,用血细胞计数版对其孢子进行计数,最后推算出每克谷粒产生的厚垣孢子数量。结果表明,随着培养时间的延长,该菌株的产孢量逐渐升高,当培养时间为7～14 d时,产孢量缓慢上升,此后产孢量急速增加,在培养28 d后该菌株的产孢量趋于平缓,培养至49 d时其产孢量达到高峰。分离株在两种相对湿度、不同培养时间段的产孢量。在相同的培养时间下,85%的相对湿度所获得的产孢量显著高于35%的相对湿度。培养时间和湿度条件均影响厚垣孢子的产量。     

燕麦孢囊线虫生防真菌TL16发酵条件优化

为探明燕麦孢囊线虫生防真菌长枝木霉菌株 TL16 固体发酵最佳产孢条件，采用正交设计对其发酵基质、碳源、氮源及无机盐最优配比及最佳培养条件进行优化。结果表明：菌株 TL16 最佳培养基质为麦麸∶玉米粉∶玉米秸秆粉=3∶1∶2(重量比)，添加 2% 乳糖、4% 蛋白胨和 4% 硫酸锰作为碳源、氮源和无机盐，初始固料∶水为 1∶1(重量比)，发酵温度 28 ℃，接种量为 15%，黑暗条件下发酵 8 d 时，产孢量最大，为 2. 48×10¹⁰ cfu/g。     

贡柑黑腐病病原菌生物学特性研究

摘要：在贡柑黑腐病病原菌分离鉴定的基础上，对其病原菌的生物学特性进行研究。结果表明，该病原菌（Alternaria citri Ellis & Everhart）在PDA培养基上生长最佳。菌丝生长和分生孢子萌发的适宜温度分别为21~30 ℃和18~30 ℃，适宜pH值分别为5~12和4~7。供试的6种碳源中，葡萄糖和可溶性淀粉较利于菌丝生长，蔗糖较利于孢子萌发；供试的6种氮源中，牛肉膏较利于菌丝生长，酵母膏较利于孢子萌发。光照条件对病原菌产孢影响不大，完全光照与光暗交替12 h较利于菌丝生长和孢子萌发。分生孢子致死温度为51 ℃水浴10 min。     

盐生草根际耐盐性木霉菌分离鉴定及其耐盐性评价

为获得耐盐性较强的木霉菌株,本试验采用平板分离法从采集的盐生草(Halogeton arachnoideus)根际土壤中分离鉴定了耐盐性较好的木霉菌株,并设置了不同浓度NaCl溶液模拟盐胁迫条件以评价其耐盐性.结果表明:经分离纯化共获得4株木霉菌株,其中获得1株耐盐性较好的木霉T-B菌株.结合形态学和分子生物学方法将分离获得的木霉T-B菌株鉴定为长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum).同时,利用不同浓度NaCl溶液模拟盐胁迫条件,发现当NaCl溶液浓度为100?mmol·L?1时,在培养时间段(3～7?d)内长枝木霉菌株的生长速率与对照相比无显著差异(P?>0.05),而其产孢量显著高于对照(P?相似文献   

微波和紫外诱变对木霉T-YS菌株生长的影响

测定了微波诱变(700 W)和紫外诱变(10 W)处理对木霉T-YS菌株菌落直径,菌丝干重及产孢量的影响。结果表明:2种诱变方式和诱变时间对木霉T-YS菌株生长具有明显的影响,并且其影响作用随着诱变方式和时间的不同而不同,尤其当微波诱变和紫外诱变时间分别为60 s和1 min时,培养后第2和3 d诱变的木霉T-YS菌株菌落直径、菌丝干重及产孢量显著高于对照。因此,微波和紫外诱变对木霉T-YS菌株生长具有显著的影响,且其最佳诱变时间分别为60 s和1 min。     

不同培养基对禾草内生真菌Epichloё生长与产孢的影响

本研究以分离自西藏早熟禾(Poa tibetica)、甘肃臭草(Melica przewalskvi)和麦宾草(Elymus tangutorum)的6个内生真菌菌株(分别为西藏早熟禾内生真菌Ep-003和Ep-004,甘肃臭草内生真菌Em-014和Em-016,麦宾草内生真菌Ee-001和Ee-003)为研究对象,分别在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、麦秆煎液琼脂(WSA)、玉米粉琼脂(CMA)和水琼脂(WA)4种培养基上培养4周后,观测菌落生长速率、菌落形态特征、产孢量和孢子特性。结果表明,同一菌株在不同培养基上的生长速率一般为PDA和CMA上的最大,WSA和WA上最小;不同菌株在同一培养基上,西藏早熟禾的Ep-003菌株生长最快,在PDA上直径最大,为46.42 mm,麦宾草内生真菌次之,甘肃臭草的Em-014菌株生长最慢,在WA上直径最小,为7.07 mm;在4种培养基上,菌株的产孢量有显著差异(P0.05),分别为Ep-003只在WA上产孢,其他5种菌株在WA和WSA培养基上产孢较多,在PDA和CMA上产孢较少;Em-016和Ep-004在4种培养基上的孢子长度无显著差异(P0.05),Em-014在WSA上的孢子长最小,为3.77μm,其他菌株无显著差异(P0.05),Ee-003在PDA上孢子长最长,为8.43μm,在其他3种培养基上无显著差异(P0.05);Ep-004、Em-016和Ee-003在4种培养基上孢子梗长度均无显著差异(P0.05),Em-014在WA上孢子梗最长,为16.74μm,在WSA上最短,为14.09μm,Ee-001在CMA上孢子梗最长,为18.59μm,在WSA上最短,为13.40μm。     

葡萄炭疽病菌生物学特性及药剂 的毒力测定

采用生长速率法和测定产孢量，研究了葡萄炭疽病菌的生物学特性，并测定了8种杀菌剂的毒力。结果表明：PDA培养基最适宜菌落生长，葡萄糖蛋白胨琼脂培养基产孢量最多。菌丝生长的适宜温度范围为5～40 ℃，最适温度25 ℃；菌落产孢能适应较广的pH值，以pH 3产孢量最多；菌丝的致死温度为56 ℃。菌落生长对光照的要求不严格，但以全暗条件最适宜产孢。在测试的碳源中，麦芽糖和蔗糖较适宜菌丝生长，乳糖最适宜产孢；氮源中以蛋白胨、酵母膏和牛肉膏较适宜菌丝生长，牛肉膏最适宜产孢。采用生长速率法测定了8种杀菌剂对病菌的抑制作用，其中氟啶胺、多菌灵、咪鲜胺锰盐和吡唑醚菌酯的毒力较高。     

棘孢木霉152-42诱导多年生黑麦草抗褐斑病的机理初探

为探究棘孢木霉(Trichoderma asperellum)诱导多年生黑麦草(Lolium perenne L.)抗褐斑病的机理，本研究以多年生黑麦草为材料，通过棘孢木霉和玉蜀黍丝核菌(Rhizoctonia zeae)平板对抗、盆栽多年生黑麦草木霉灌根诱导后接种玉蜀黍丝核菌，检测棘孢木霉菌株152-42对玉蜀黍丝核菌引起的褐斑病的防治效果，分析其防病机理。结果表明：共培养7 d时棘孢木霉152-42对玉蜀黍丝核菌的抑制率达到100%;棘孢木霉152-42显著降低了盆栽多年生黑麦草褐斑病的发病率；相较于未经木霉诱导的染病叶片，木霉诱导处理的染病叶片超氧化物歧化酶活性显著升高，丙二醛含量显著降低，抗病相关基因PR-1和PR-5的表达量显著提高。因此，棘孢木霉152-42不仅能显著抑制玉蜀黍丝核菌生长，而且可以诱导多年生黑麦草通过提高抗病相关酶活性，调控抗病相关基因的表达等提高抗病性，是一种极具开发潜力的草坪病害生防真菌。     

鸭茅内生木霉菌株TD-MM鉴定及其特性研究

本研究利用组织分离法和对峙培养法,从鸭茅(Dactylis glomerata L.)叶片中分离筛选到1株具有较强抑菌活性的内生菌株TD-MM。基于形态学特征和基因序列分析,将菌株TD-MM鉴定为哈茨木霉(Trichoderma harzianum),初步探究其抑菌机理和防治效果,并测定菌株TD-MM营养生长和产孢的条件。结果表明：鸭茅内生木霉菌株TD-MM对6株植物病原菌均具有较强的抑菌作用;该菌株推测为通过生长空间竞争和重寄生作用抑制植物病原真菌,其对姜花、蚕豆和辣椒根腐病的防治效果较好,且对植株的生长有显著的促进作用;适宜该菌株生长和产孢的培养基为虎红琼脂培养基和马铃薯葡萄糖琼脂培养基,最适温度为30℃,最适pH值为5,在12 h光暗交替条件下菌丝生长最快且有利于产孢;孢子致死温度为60℃,10 min。本研究结果可为植物根腐病害生物菌剂的研制和开发提供菌株资源和数据参考。     

禾草云斑病病原菌形态及生物学特性的初步研究

对禾草云斑病病原菌形态及生物学特性的研究表明,其病原菌菌落铺展,菌丝白色, 产孢细胞直接从菌丝生出,分生孢子梗缺,圆筒形,双孢10～20×2.5～5μm,孢子顶细胞具有锐角或直角向的喙状突起.菌丝生长温度范围6～39℃,最适温度24℃,孢子萌发温度范围6～36℃,最适温度24℃;菌丝和孢子在温度达70%以上均可萌发,并随湿度升高菌落铺展扩大,孢子萌发率升高,在水滴处理中孢子萌发率最大;不同光照处理均可促进菌丝生长,但差异不显著,光暗处理有利于孢子萌发,连续光照、黑暗均不利于菌丝生长和孢子萌发;菌丝生长pH值范围为2.5～7.5,最适pH值3.5～4,孢子萌发pH值为2.5～7.5,最适pH值为4.     

耐药性木霉T2菌株的筛选、紫外诱变与药剂驯化

为获得对杀菌剂有抗药性的菌株,首先测定了深绿木霉T2菌株对6种常用杀菌剂的抗性,选择出了最敏感的杀菌剂－速克灵。同时通过紫外光照射挑选出突变菌株,并在不同浓度的速可灵(50～800 μg/mL)培养基上驯化,最后得到了4株对速克灵抗药性较强的菌株:T2-1,T2-2,T2-5和T2-6。10次转化、菌落生长速度测定、产孢数量的测定和对灰葡萄孢菌的拮抗作用测定结果表明,此4个菌株生物学特性稳定,其中T2-6菌株显著优于其他3株。