生物技术在谷子育种上的应用

介绍了组织培养，原生质体培养及原生质体融合，外源ＤＮＡ是入及ＤＮＡ指纹分析等生物技术在谷子育种上的应用进展情况。     

Ti质粒介导的B、t、k-δ内毒素蛋白基因转化大豆的初步研究

以Ｔｉ质粒为介导，将ｐＫＴ５４Ｂ７Ｃ５质粒上的Ｂ、ｔ、ｋ－δ内毒素蛋白基因导入东北大豆“黑农３７”、“黑农３９”等品种。采用多种外植体和感染方法，从胚轴和子叶节诱导出丛生芽与再生植株。经卡那霉素筛选和冠瘿碱检测，初步证明外源基因导入大豆基因组中。共获得８１株再生植株，其中成活３０株，仅３株结７个荚，得到７粒种子。ＰＣＲ检测和ＤＮＡ分子杂交，鉴定这７株再生植株呈阳性反应，证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组中。７粒种子均已萌发，植株生长发育正常     

生物技术在花生品种改良中的应用

生物技术的飞速发展，为改良农作物新品种提供了一条广阔途径，本文从生物技术在花生野生种利用、基因工程导入外源ＤＮＡ、原生质体培养，高频快繁等方面总结了近几年来生物技术在花生品种改良方面所取得的成就。     

海南岛橡胶园土壤粘土矿物组成与土壤电荷量

对海南岛14个胶园土壤中粘土矿物组成及土壤表面电荷量进行了研究.结果表明:①供试胶园土壤粘土矿物以高岭石为主,部分土壤中还含有水云母、1.4 nm矿物及三水铝石.各粘土矿物组分含量因气候生态区、发育母质及地形而异;②胶园土壤表面以负电荷为主,负电荷量随土壤pH值的升高而增加,表明其为可变负电荷:③橡胶园土壤正电荷量少,且随pH值升高而减少;④低pH值时,不同母质发育的土壤正电荷量大小顺序为:玄武岩>浅海沉积物>花岗岩和砂页岩.     

PEG介导BT基因转化大豆原生质体获转基因植株

通过ＰＥＧ法净Ｂ．Ｔ（Ｂａｃｉｌｌａｓ ｔｈａｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ＣｒｙＩＡｃ）毒蛋白基因导入到大豆主栽品种黑农３５,黑农３７,合丰２５和合丰３５的原生质体中,经３０ｍｌ／Ｌ潮霉素筛选,选择有抗性的愈伤组织进行分化,获得了三棵再生植株,移栽后全部成活,对移栽后植株的总ＤＮＡ进行ＰＣＲ分析,均显阳性。对ＰＣＲ阳性植株进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析,证明Ｂ．Ｔ毒蛋白基因已整合到大豆细菌基因组中。     

向大豆导入深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因的初步研究

通过农杆菌介导法，将深黄被孢霉△^6-脂肪酸脱氢酶基因导入到栽培大豆吉育43，黑农36，黑农37等品种。采用多种外植体和感染方法，从子叶节和胚轴诱导出丛生芽与再生植株，经过在含50mg/L卡那霉素的筛选培养基中连续筛选，获得一批转基因植株。经PCR检测和DNA分子杂交分子，初步证明外源基因已导入并整合到大豆基因组中。     

人工诱变与外源DNA直接导入相结合创造遗传变异的探讨

根据人工诱发突变的原理和实践，结合外源ＤＮＡ导人的方法，提出诱发突变与外源ＤＮＡ导入相结合创造遗传变异的百种新途径。并从理论上分析了这种结合的特点和可行性。实践上以水稻为受体导入玉米、高粱、大豆、稗于等植物的ＤＮＡ，进行了具体研究。结果表明，诱发突变与外源ＤＮＡ导入的农业分子育种相结合，是一种效果更佳的育种新途径     

水稻分子育种法—穗茎注射法

本文主要介绍了“穗茎注射法”导入外源ＤＮＡ的经典实验及作者等用在水稻上的基本情况，并对外源ＤＮＡ注射的有效时期与部位及其在分子育种时的特点，包括与化学诱变的关系等问题的分析与探讨，以达到促进水稻及其他作物分子育种研究的目的     

茶叶各种酶蛋白等电点的快速测定

酶蛋白的等电点是酶的生化特性之一,测定不同酶的等电点可以用来区别不同的酶类。酶蛋白的等电点就是当溶液达到一定氢离子浓度时,酶蛋白中酸性氨基酸和碱性氨基酸解离过程中正电荷与负电荷相等,即以     

水稻分子育种的研究现状

本文综述了水稻分子育种的兴起、发展与研究现状。较全面地介绍了分子育种的由来，外源ＤＮＡ导入的方法，导入后代性状的变异与遗传，外源ＤＮＡ导入的分子验证，ＤＮＡ的提取与纯化，育种效果与育种程序等。作者根据多年从事该项研究的实践，对外源ＤＮＡ导入技术迅速发展的原因及有关机理进行了讨论。     

农杆菌介导不同基因型大豆品种子叶节遗传转化条件的研究

以黑农46、黑农53和黑农56的子叶节为转化受体,对农杆菌介导大豆子叶节遗传转化中的6-BA浓度、草丁膦浓度、侵染时间、共培养时间以及伸长培养基进行筛选,确定适合不同基因型的最佳转化条件。结果表明:黑农46、黑农53和黑农56的最佳6-BA诱导浓度分别为1.7、1.6和1.7 mg.L-1;最佳草丁膦筛选浓度分别为2.0、3.0和2.0 mg.L-1;同时确定了侵染时间、共培养时间和伸长培养基类型的最佳组合是侵染时间25 min、共培养时间3 d和Ⅲ型伸长培养基。     

利用农杆菌介导法将BrCS基因导入大豆的研究

以大豆子叶节作为外植体,通过农杆菌介导法将含有BrCS基因的pCAMBIA3300的双子叶植物表达载体,导入到大豆品种黑农59和黑农53中,并对黑农59遗传转化的影响因素进行了优化,最终获得了抗性植株.经PCR检测和PCR-Southern杂交分析,初步证明了目的基因已整合到大豆的基因组中.     

PCR-ELISA法对大豆品种的转基因定性检测研究

以共价交联在PCR管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行PCR扩增,对PCR扩增的固相和液相产物分别进行杂交和凝胶电泳检测的PCR-ELISA法,对黑龙江省常规选育品种合丰35和黑农37、外源DNA直接导入大豆的分子育种所获品种黑生101、及大连进口的美国2号等大豆,进行转基因定性检测.结果表明:该方法高效可靠,可作为一种快速定性检测转基因产品的方法;检测结果:美国2号为转基因大豆,黑生101、合丰35和黑农37为非转基因大豆.上述结果对分子育种、生态保护、安全监测及对建立黑龙江省非转基因大豆生产保护区等具有重要意义.     

大豆对SMV1株系抗性基因的分子标记研究

大豆花叶病毒病是世界大豆产区危害较重的主要病害,本实验高抗SMV1株系黑农39为母本,高感SMV1株系品种合丰25为父本配置杂交组合,对F1、F2代接种SMV1进行田间抗性鉴定和抗病性遗传学分析,通过接种鉴定亲本F1、F2并代的抗性表现,证明,对SMV1号株系的抗性是由一对显性基因决定的.利用RAPD技术在抗感池间寻找多态性标记,通过筛选引物,获得重复性最好的随机引物OPN11.并采用BSA法在黑农39和抗病池扩增出OPN1400片段,在合丰25和感病池扩增出OPN1300片段,在F1同时扩增出OPN11400和OPN1300.用该引物分析黑农39×合丰25的F2扩增个体,共显性的RAPD标记OPN1400/1300与黑农39抗病基因的遗传距离为8.2cM.     

利用农杆菌介导法转化大豆子叶节的影响因素研究

以3个大豆品种为材料,采用GUS瞬时表达的方法,对适合于大豆子叶节和胚尖转化的基因型进行筛选,结果表明:适合大豆子叶节转化的品种为东农50,适合胚尖转化的品种为黑农41。在子叶节转化系统中,摸索了农杆菌侵染浓度与侵染时间的最佳配比组合、乙酰丁香酮浓度和超声波辅助处理对大豆转化效率的影响。优化后的条件为:农杆菌侵染的浓度OD600=0.6,侵染时间30～40 min,乙酰丁香酮浓度200μmol.L-1,超声波辅助转化时间5 s。在上述条件下,成功获得了转基因植株,转化效率为2.3%。     

橡胶树多主棒孢病菌原生质体转化体系的建立

由多主棒孢病菌侵染引起的棒孢霉落叶病是严重危害橡胶生产的一种世界性病害,近年来在中国也有发ⅱ生.在菌龄、细胞壁酶种类、酶作用浓度、作用时间、酶解温度、渗透压稳定剂等因素对橡胶树多主棒孢原生质体制备和再生影响分析的基础上,笔者首次建立了PEG介导的多主棒孢病菌遗传转化体系,并获得了多主棒孢病菌绿色荧光转化子.该体系中,多主棒孢病菌的原生质体再生率为19.12%,转化率为10.34个/μgDNA.     

利用抗感品种混种防治大豆胞囊线虫效果的研究

在温室条件下以抗大豆胞囊线虫品种抗线4号和非抗大豆胞囊线虫品种黑农35为试材,探讨了品种混种对感病大豆生长发育的作用和抗线4号根系浸出物对黑农35生长发育的影响。结果表明,接种SCN后,大豆植株生长受抑制,其中抗线4株高减少幅度最高达到21.4%,主根长减少最高达到24.9%,侧根数减少幅度为7.8%～55.1%;黑农35清种时受大豆胞囊线虫危害,株高减少15.5%～30.8%,主根长减少17.2%～32.3%,侧根数减少最高达到71.9%。抗线和非抗线品种混种有利于大豆抵御大豆胞囊线虫的危害,促进植株的生长发育,与黑农35清种相比,品种混种作物群体的株高、植株鲜重、根鲜重和根长增加幅度分别高达16.9%、11.4%、17.9%和22.2%,与抗线4清种相比,品种混种主根长度增加最显著,达到9.3%。抗线4根系浸出物浇灌黑农35不接种SCN处理各测定指标的增幅达0.1%～8.4%,浇灌接种SCN的黑农35,各处理测定指标的增幅达9.7%～39.4%,说明抗性与非抗性品种混种后根系间相互作用可以促进非抗性品种生长发育,抵御大豆胞囊线虫的危害。     

高油、高产、广适应国审大豆品种黑农70的选育

黑农70是黑龙江省农业科学院大豆研究所选育的高油、高产、广适应国审品种,该品种以垦农18为母本,以黑农45为父本有性杂交选育而成,经各级产量试验,多年品质鉴定和抗病性鉴定,表现高产、高油、适应性广、抗性好。2014年由国家品种审定委员会审定推广。适宜北方春大豆中早熟区域黑龙江省第一、二积温带,吉林省、内蒙、新疆的部分地区种植。     

大豆加工品质的资源筛选和遗传改良的研究Ⅱ.豆腐、酱油、毛豆大豆加工原料的筛选

以不同生态区的主栽品种和改良创新的品种为试材,分别对其糖份和球蛋白含量进行研究,结果表明:1.7S含量大于30%的品种有合丰25、合丰43、哈交20-5022、哈交20-5489、哈交20-5651-3、哈交99-5657、哈交99-5138、黑农45、黑农44、哈交20-5214,其中黑农45的7S球蛋白含量最高.2.11S含量大于70%的品种有黑农37和哈交20-51004.3.哈96-3是一个理想的菜用大豆新种质,黑农37是制作酱油加工原料的好品种.4.大豆品种中糖份与脂肪含量间的关系为正相关,与蛋白质之间成不显著的负相关.