大输液无菌检查法取样量与结果判定的探讨

中国药典2000年版规定：无菌检查法应用于无菌或灭菌制品、辅料、缝线、无菌器具及其应作无菌检查的品种。按无菌检查结果为无菌时，由于它即受抽验样本数量的限制，更受生产和灭菌工艺的限制，所以在一定意义上讲，它表示的是最终灭菌品种达到了10^-6微生物存活概率的相对意义。     

茶饮料加工中的灭菌技术

茶饮料的贮藏保质期一般为6～12个月，而茶饮料富含蛋白质、糖、氨基酸、维生素等营养物质，容易滋生微生物而使茶汤变质，因此必须对茶饮料进行灭菌处理。茶饮料的灭菌要求达到“商业无菌”的标准，即在所规定的贮藏期内微生物总量达到茶饮料标准（QB2499-2000）要求，不允许有致病菌、产毒菌和腐败菌等病原微生物的存在。由于传统的热灭菌工艺对茶饮料的品质影响较大，因此了解茶饮料微生物灭菌工艺的基本原理及其主要灭菌技术参数，对选择适合各类茶饮料的灭菌方法及茶饮料的品质保持具有重要的意义。     

福建平潭月见草组织培养与快繁技术

以白天开花的平潭月见草种子为外植体，进行月见草的组织培养与快繁技术研究。结果表明，选择成熟度较高的种荚，在无菌条件下取出种子，用75％酒精处理30s，然后用0．1％升汞灭菌15min，最后用无菌水荡洗5遍，能达到较好的灭菌效果；用滴管滴植后，再用镊子栽植的接种方式较佳；最适宜的试管苗增殖培养基为Ms＋2．0mg·L^-16-BA＋0．1mg·L^-1NAA固体培养基；壮苗生根培养基以固体培养基1／2MS＋0．1mg·L^-1NAA为最佳培养基；蛭石：泥炭土：河沙=1：2：1的混合基质为最佳移栽基质，成活率可达93．33％。     

羽裂报春苣苔的组织培养研究

以羽裂报春苣苔的叶片为外植体,通过研究不同灭菌方法、不同植物生长调节剂种类和浓度对组织培养的影响,建立了羽裂报春苣苔的组织培养体系。结果表明:羽裂报春苣苔适宜的外植体灭菌方法为采用75%酒精灭菌20 s,无菌水冲洗3次;然后用0.1%升汞灭菌6 min,无菌水冲洗3次;再用0.1%升汞灭菌6 min,无菌水冲洗3次,成活率为55.40%。不定芽的诱导培养基为MS+6-BA 1.0~2.0 mg/L+NAA 0.01~0.10 mg/L,诱导率达100.00%。在适宜的增殖培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+活性炭0.1 g/L上,增殖系数高达8.61;在生根培养基MS+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.1 g/L上,生根率达100.00%,生根时间为19.10 d。移栽基质为泥炭∶珍珠岩∶河沙=4∶1∶1(V∶V∶V),移栽成活率为99.60%。     

油棕高效胚培养技术研究

分析不同灭菌时间和外植体的处理方式对油棕种子无菌苗获得效率的影响,为其高效的组织培养奠定基础。结果表明：以75%酒精处理1 min,再用0.1%升汞处理30～40 min对油棕种子的灭菌效果最好。灭菌后的种子去除胚乳后将胚接种于MS 培养基上,其出苗率最高,可达100%;接种后15 d即可获得无菌苗,成苗率最高达88.9%。胚在光照及黑暗条件下均可萌发,但苗的生长需要光照条件。该方法适合油棕无菌苗的获得,也可为其它科属中种壳坚硬种子无菌苗的获得提供参考。     

三重处理法获得大麻种子无菌苗研究

研究不同灭菌方式对大麻种子无菌苗的影响.结果表明:大麻种子灭菌以三重处理法为佳,即硫酸处理20min,75%酒精处理2min,3%次氯酸钠处理20min最好.灭菌后的种子剥去种皮接种于MS培养基上效果明显好于不剥种皮.不同大麻品种污染率和发芽率有一定差异.     

变质豆浆中腐败微生物的分离及其灭杀条件研究

对5种变质豆浆中的腐败微生物进行了分离，并对所分离的腐败微生物进行了感官实验，发现变质豆浆中的主要腐败微生物是三株细菌，而酵母、霉菌未检出。以二次灭菌的豆浆为培养基，通过正交实验确定了三株细菌中的最难杀灭细菌的有效灭菌方法：121℃下灭菌30min，同时添加300mg／kgNisin，该灭菌条件可使豆浆在37℃下贮存30天时细菌菌落未检出，但继续贮存至45天时，细菌菌落数超过100cfu／mL。     

种子表面有害微生物检测及拌种试验比较

2006年11月28日,新疆石河子庄稼汉农业科技发展有限公司储存半年的新陆早19号种子在进行发芽试验时,出现大量烂苗的现象,经取样镜检从病斑和死苗上检出大量的有害微生物,随即取干种子进行不同处理后,用察培克培养基对所处理的种子进行培养,以进一步确定种子带菌的种类和比例,为种子拌种处理提出依据。1镜检试验方法试验采用5种处理:A.用无菌水对种子进行表面清洗后培养。B.用乙醇对种子进行表面火焰消毒后培养。C.对照(干种子直接摆放培养)。D.将种子播入灭菌沙中加无菌水先发芽,然后取芽培养。E.将种子放入无菌水中先发芽,然后取芽培养。…     

二氧化氯对剑麻外植体材料消毒的应用研究

为建立高效、环保的剑麻无菌繁殖技术,以H.11648剑麻的珠芽为外植体,以1 000 mg/L HgCl2溶液对外植体材料浸泡消毒灭菌20 min作对照,以不同浓度的ClO2溶液对外植体材料进行不同时间的浸泡消毒灭菌试验。结果表明,500~3 000 mg/L ClO2溶液对剑麻珠芽外植体浸泡消毒20~50 min,可显著降低培养材料的污染率,外植体生长好,腋芽萌动快,腋芽萌发率在14.175%~47.335%,显著高于对照的4.340%,最初3次继代的增殖率为5.685~11.325倍,显著高于对照的3.040倍。剑麻珠芽外植体材料消毒灭菌的最适宜方法是1 000 mg/LClO2溶液浸泡消毒30 min。     

离体小麦植株的快速再生

小麦是一个典型的愈伤组织生长缓慢(数周至数月)以及植株再生困难和不稳定的种。加拿大萨斯喀彻温大学的A.McHughen参考有关报道,设计出一个由原始愈伤组织快速可靠地再生植株的草案,并于1982年实施。他用小麦栽培品种‘Marquis’的种子在25％次氯酸钠溶液中进行表面灭菌25分钟,然后在无菌水中吸胀一晚     

确定和保证中药材及中成药辐射灭菌剂量的研究

Ｃｏ－６０γ射线应用于中药材、中成药的辐射灭菌,是近年来发展的一种新型的、有效的灭菌技术。这种灭菌技术与传统的热力灭菌和化学灭菌相比有许多独特的优点。ａ．射线穿透能力强,中成药或中药材可整箱整袋进行辐照处理,无需打开包装,灭菌彻底,避免了灭菌后的再污染。ｂ．技术先进,工艺简单,节约能源,可大批量处理,经济上合理。ｃ．辐射灭菌的整个过程是在常温压下进行的,适用于对含有挥发性或热敏性成分的中成药和中药     

茶树害虫的三种主要病原微生物(续)

2．苏云金杆菌 苏云金杆菌也可以用培养基进行大量繁殖。半固体发酵（三级培养）方法与真菌（白僵菌）差不多。第一步是用通常的牛肉膏蛋白陈斜面培养基培养出较多的一级种子。第二步是配制5％的黄豆粉水（或10％麸皮浸出液加0．5％蔗糖，或豆腐废水加0．5％蔗糖），倒入500ml的三角烧瓶中，每瓶120-200ml，灭菌。再在一级斜面种子管中加入无菌水3～5ml，用接种环刮下菌苔，摇匀，倒入三角瓶中，每瓶1ml，     

陆地棉和海岛棉的茎尖组织再生转化

用流水冲洗硫酸脱绒的20个品种的棉花种子15分钟,经常规灭菌后放于培养皿里制备无菌苗。在解剖镜下取萌发3日龄和5日龄的0.3～1.0毫米长的茎尖接种于含有不同植物激素的MS固化培养基中培养。     

钻喙兰不同成熟度的胚培养研究

以钻喙兰不同成熟程度的胚为材料，通过种子直接过滤灭菌进行无菌播种。结果显示钻喙兰种子在培养基：花宝一号3 g+肌醇100 mg+胰蛋白胨1 g+维生素B1：0.5 mg+维生素B6：0.5 mg+香蕉 100 g+椰子汁100 ml+蔗糖30 g+琼脂粉(强度1 200 g/cm2)5.0 g+活性炭3 g+水1 000 ml上发芽率及生长效果最好，钻喙兰蒴果的采摘以果实浅黄色为最佳采摘方式。     

无病毒马铃薯种薯的贮存

本文研究了在试管中用无菌小块茎保存无病毒马铃薯样本的方法,所用无菌小块茎来源于人工培养基的试管植株。以品种“村童”的健壮植株作试材,此品种是经温热法和顶端分生组织培养法育成的。用改良的 MS 培养基栽培切条,该培养基分别含有2％(处理1)、3％(处理2)和3.5％(处理     

香茅类植物育种与生物技术的最新进展(续二)

一般组织培养程序香茅类的组织培养取材可以是种子 ,也可以是成熟的枝条。选用种子或组织培养苗分离块比选用成熟的分蘖苗相对容易一些。大体而言 ,成熟的材料可以先在 Hg Cl2 ( 0 .1%W/V)的水溶液中先浸泡 5分钟灭菌 ,然后用无菌水冲洗 3～ 4次 ,再接种在营养培养基上或水培养基上进行发芽。萌发的苗或者在不同的培养基上培养 ,或者随意切成碎片 ,然后同根、枝条的碎片分开培养。如选用根状茎的话 ,可以选用大田生长的植株或温室盆栽的植株 ,去根、去掉植株的上部分 ,彻底洗尽泥土 ,然后在 0 .1%( W/V)的 Hg Cl2 溶液中灭菌 10～ 15分…     

不同品种马铃薯试管苗诱导形成微型小薯试验研究

运用正交设计，对叶底红叶片外植物体进行不同消毒方法的灭菌效果比较和愈伤组织的诱导研究。结果表明，其最佳灭菌措施为：自来水冲洗60 min、0.1%升汞浸泡25 min、次氯酸钠20 min。     

水稻农杆菌转化体系中共培养方法的优化

[目的]对水稻农杆菌转化体系中共培养过程进行优化。【方法】以水稻品种日本睛作为材料，对2种不同的共培养方法，即将1层无菌滤纸铺于固体共培养基表面和用0．5mLAAM培养液浸湿的无菌滤纸的方法进行比较。【结果】无菌滤纸用0．5mLAAM培养液浸湿后铺于培养皿，后直接将浸染后的愈伤组织在其上进行共培养，效果好且染菌少。【结论】利用0．5mLAAM浸湿的滤纸培养既简化操作又有利于愈伤组织生长。     

文心兰花梗诱导及继代增殖培养

以文心兰的花梗腋芽为试验材料。选择适宜的灭菌方式,研究不同切割方式和激素浓度对继代增殖的影响。结果表明：适合文心兰花梗腋芽的灭菌方式是：将70％酒精倒入小烧杯浸泡30s,无茵水冲洗3次,倒入0．1％升汞浸泡约10min,再用无菌水冲洗5次,然后剥去外层包叶,切成1—2cm花梗腋芽接入培养基中。在继代培养中,只切去叶片2／3的情况下,培养基MS＋6-BA2mg／LI＋NAA1mg／L为佳。从生长点纵切的方式培养基宜用MS＋6-BA2mg／L。从生长点纵切的方法比只切去叶片2／3的方式增殖倍数较高。     

水稻种子高温灭菌试验效果初报

高温灭菌是一种物理灭菌方法，选用一定恒温的流动水对水稻种子进行时进处理。此法可替代种子的药剂灭菌，对生态环境无任何毒副作用，将为“绿色食品”的生产开辟新途径。１９９９年２９１农场科技中心进行了本项试验，并取得良好效果。１试验处理与方法 试验设５个处理：①水温５２℃处理种子时间３０分钟；②水温５３℃处理种子时间２０分钟；③水温５３℃处理种子时间３０分钟；④水温５４℃处理种子时间２０分钟；⑤常规药剂浸种为ＣＫ。 供试土壤为草甸黑土，ｐＨ值８．１５。供试品种垦９４－２０２。４月１５日播种，５月２２日人工…