结缕草属植物耐盐性SRAP分子标记研究

本研究应用混合集群分析法,通过建立结缕草属植物耐盐性两极端类型材料DNA池对400对SRAP引物组合进行筛选,得到111对多态性引物组合,再以日本结缕草耐盐两极端材料DNA对111对具有特异带的引物组合进行进一步筛选,从中获得22对多态性引物组合,最后用群体各单株对具有耐盐特异带的引物组合进行验证,获得了7个与结缕草属植物耐盐性紧密相关的SRAP分子标记,依据扩增条带的大小分别命名为:Me9-Em4₂₆₀、Me9-Em18₇₂₀、Me13-Em18₅₀₀、Me5-Em20₁₈₀、Me14-Em7₂₂₀、Me6-Em17₆₀₀、Me2-Em18₂₆₀,以上筛选得到的SRAP分子标记将为深入开展结缕草属植物分子标记辅助育种及耐盐基因克隆奠定基础。     

喷施微量营养元素对沟叶结缕草草坪质量的影响

研究了亚热带赤红壤区沟叶结缕草草坪对微量元素的反应。结果表明，施B、Mo、Zn能显著提高草坪质量；施Fe、Cu的作用不明显，其临界值可能更低；Mn含量丰富，施Mn有毒害作用。     

沟叶结缕草草坪蒸散量研究简报

研究了沟叶结缕草Zoysia matrella草坪的蒸散量和作物系数,实测的1998年全年蒸散量为1 098.9 mm,作物系数为0.79.作物系数可以作为定值,计算沟叶结缕草需水量.平常年份沟叶结缕草缺水232.2 mm.     

沟叶结缕草草坪杂草化学防治研究

采用苯达松、2,4-D丁酯、高效盖草能(10％乳油)3种除草剂对沟叶结缕草草坪进行了杂草化学防治研究。结果表明,苯达松(25％水剂)每15 kg水可加至80 ml左右,2,4-D丁酯(72％乳油)每15 kg水可加至25 ml,高效盖草能(10％乳油)每15 kg水可加至10-15 ml,每667m2控制用水25-30 kg可取得较好效果。但高温季节除草剂容易对草坪产生药害,施用时应在杂草幼苗期进行,并降低药剂浓度,以提高对草坪的安全性。     

沟叶结缕草草坪杂草化学防治研究

采用苯达松、2,4-D丁酯、高效盖草能(10%乳油)3种除草剂对沟叶结缕草草坪进行了杂草化学防治研究.结果表明,苯达松(25%水剂)每15 kg水可加至80 ml左右,2,4-D丁酯(72%乳油)每15kg水可加至25 ml,高效盖草能(10%乳油)每15kg水可加至10～15 ml,每667m2控制用水25～30kg可取得较好效果.但高温季节除草剂容易对草坪产生药害,施用时应在杂草幼苗期进行,并降低药剂浓度,以提高对草坪的安全性.     

受损沟叶结缕草草坪修复技术研究

通过利用打孔、切根、梳草和施肥措施对践踏沟叶结缕草草坪进行夏初修复和秋季修复的研究.结果表明,打孔、切根和梳草3种措施对夏初修复的草坪草层高度和叶片长度有明显的促进作用(P<0.05),草层高度依次比未修复 未施肥处理(CK)增加34.64%、27.71%和39.26%;叶片长度依次增加24.03%、17.05%和31.78%,增长效果在草坪没有继续践踏的情况下可持续50 d.打孔、切根和梳草对夏初修复的草坪密度和地上生物量有明显的促进作用(P<0.05),修复处理50 d,草坪密度分别比CK提高15.2%、10%和14.4%;地上生物量分别提高22.37%、11.84%和22.16%.打孔和梳草处理可以降低草坪芜枝层的厚度.施肥与打孔、切根和梳草处理之间在草坪密度和地上生物量上存在显著的互作效应(P<0.05).夏初修复的效果优于秋季修复;打孔的效果优于切根的效果,打孔的密度以100～120孔/m2为宜.     

封闭时间对模拟践踏的沟叶结缕草草坪质量的影响

在春季、梅雨季和盛夏季对践踏胁迫的沟叶结缕草草坪进行封闭15和30 d处理,研究封闭对践踏胁迫下沟叶结缕草草坪坪用性状的影响,结果表明,春季封闭显著提高了结缕草垂直高度和叶片长度(P<0.05),而梅雨和盛夏季封闭仅分别显著提高了草坪的垂直高度和叶片长度(P<0.05);春季封闭明显提高了草坪的密度和地上活生物量(P<0.05),封闭30和15 d的草坪密度分别比对照提高136.4%和40.3%,地上活生物量分别提高173.9%和42.0%;与盛夏季封闭相比,梅雨季节封闭更有助于减缓草坪密度下降的趋势,且地上活生物量在整个生长季几乎都大于盛夏季节封闭;垂直高度、叶片长度、草坪密度和地上活生物量,封闭30 d的效果均比15 d好;综合各项指标,阶段封闭措施对改善践踏胁迫下沟叶结缕草草坪的坪用质量效果显著,其中春季封闭的效果比梅雨季好,梅雨季比盛夏季好,封闭30 d的效果比15 d好.     

沟叶结缕草应答高温和低温胁迫的蛋白质表达差异分析

为阐明沟叶结缕草(Zoysia matrella (L.) Merr.)相对耐高温而不耐低温的分子机理,于2008年5月应用差异蛋白质组学方法分析了沟叶结缕草在低温(5℃)和高温(40℃)胁迫下的叶片蛋白质组差异表达,共检测到35个差异蛋白质点,其中26个得到鉴定。分析表明:沟叶结缕草在低温胁迫下,一方面加强了胞内信号转导、活性氧的清除、蛋白质防御以提高其低温适应性;另一方面,由于一些蛋白质的下调表达,使得其低温下植物体呼吸作用表现为先增强后减弱、光合作用下降、蛋白降解、细胞的转运能力减弱,因而抗低温性能下降。在高温胁迫下,则通过一些蛋白质的上调表达,加强了体内信号识别和转导、光合作用、呼吸作用、次生代谢作用、活性氧的清除、蛋白质防御及合成等功能,沟叶结缕草表现出相对较强的高温抗逆性。     

50%氟胺草唑WG防除沟叶结缕草草坪杂草技术研究

为研究沟叶结缕草(Zoysia matrella)草坪杂草控制技术,采用田间试验,于沟叶结缕草休眠期喷施50%氟胺草唑WG,调查其对沟叶结缕草草坪杂草的防效以及对沟叶结缕草生长的影响。2011、2012年试验结果表明:于沟叶结缕草休眠期使用750~2 000 g·hm~(-2)50%氟胺草唑WG,沟叶结缕草生长安全,且能有效控制看麦娘(Alopecurus aequalis)、小飞蓬(Conyza Canadensis)、牛繁缕(Malachium aquaticum)、紫苑(Veronica persica)、波斯婆婆纳(Aster tataricus)和龙葵(Solanum nigrum)的危害,株数防效和鲜重防效均大于90%,持效期可达90 d以上。750~2 000 g·hm~(-2)50%氟胺草唑WG对看麦娘、小飞蓬、牛繁缕和紫苑的防效与56.25 g·hm~(-2)25%啶嘧磺隆WG之间无显著差异,而对波斯婆婆纳和龙葵的防效显著优于25%啶嘧磺隆WG。从高效、经济、环保等角度综合考虑,50%氟胺草唑WG防除沟叶结缕草草坪中杂草的适宜剂量为750~1 000 g·hm~(-2)。     

草坪抗逆增绿剂对细叶结缕草抗寒性的影响

以细叶结缕草（Zoysia tenuifolia）为材料,研究自然降温过程中施用草坪抗逆增绿剂对草坪草生长和叶绿素含量、CAT、SOD、POD和PAL活性的影响。结果表明,自然降温过程中施用草坪抗逆增绿剂后,在恢复生长期草坪草叶绿素含量,CAT和POD 酶活性升高,而SOD、PAL酶活性无变化。 降温前、降温后施用草坪抗逆增绿剂可使叶片CAT、POD酶活性升高,与对照之间差异显著（P<0.05）,尤其是降温前施用效果更佳。因此,在自然降温前施用草坪抗逆增绿剂可有效增强CAT、POD酶活性及其对生物体活性氧的清除能力、增加叶绿素含量、提高草坪草抗寒性和观赏性。     

鸭茅EST-SSR标记在4种禾草上的可转移性

为了检验鸭茅EST-SSR标记在几种禾本科植物上的可转移性并筛选出可应用于后续研究的引物,本研究用40对可在鸭茅(Dactylis glomerata)上扩增产物的鸭茅EST-SSR引物,分析了6份多花黑麦草(Lolium multiflorum)、6份高羊茅(Festuca arundinacea)、3份扁穗牛鞭草(Hemarthria compressa)和3份牛鞭草(H.altissima)共18份材料的转移率、遗传多样性和亲缘关系。结果表明,多年生黑麦草和高羊茅可转移率为60%,扁穗牛鞭草和牛鞭草转移率最低,均为50%,26对引物共获得条带128条,多态性条带121条,多态性比(PPB)为94.53%,平均扩增出多态性条带4.92条,平均多态性信息量0.952。18份材料遗传相似系数范围为0.208~0.974,在遗传系数为0.68时,4个物种分别独自聚为一大类。本研究证实利用鸭茅EST序列开发的EST-SSR在有一定亲缘关系的物种间转移是可行的,可转移的引物对未来禾本科遗传育种研究有一定的参考价值。     

近缘物种微卫星标记对暗腹雪鸡种群的通用性研究

雪鸡属鸡形目,雉科,是我国二级保护动物.主要分布于新疆、西藏等地,是一种很有育种价值和市场前景的野生稀有鸟类.据资料介绍,雪鸡共有阿勒泰雪鸡、天山暗腹雪鸡、藏雪鸡、高加索雪鸡和里海雪鸡5种[1].近半个世纪以来,由于人类活动的加剧,狩猎、过度放牧、矿业开采等多种因为导致其栖息地不断恶化,分布区域日益缩小,雪鸡正面临着较大的生存压力.急需对雪鸡的种群结构、地理分化及遗传多样性等进行深入研究,以便对雪鸡的生存状况进行有效评估,为雪鸡的有效保护和合理开发提供科学数据.     

Development and Application of EST-SSR Markers of Black Quail

The purpose of this study was to accelerate the application of molecular markers in genetic breeding and other aspects of Black quail to develop EST-SSR markers for Black quail.100 Black quail were randomly chosen and blood samples were collected to develop EST-SSR new markers and determined the genetic polymorphism using bioinformatics.The results showed that there were 6 EST-SSR markers in the Black quail, the number of observed alleles in EST-SSR was 2 to 6.The average PIC of 6 EST-SSR markers in the Back quail was 0.4962 and the average He was 0.5759.Markers P1 and P2 were highly polymorphic markers among 6 EST-SSR and the rest EST-SSR markers were moderately polymorphic markers.These developed markers could be used for genetic diversity analysis of Black quail and the EST-SSR markers had some relationship with the carbohydrate metabolism, synthesis of melanin in Black quail, but the mechanism needed the further analysis.     

黑羽鹌鹑的EST-SSR标记开发与应用

本研究旨在加速分子标记在黑羽鹌鹑遗传育种等方面的应用,开发黑羽鹌鹑的EST-SSR标记。随机选取100只黑羽鹌鹑,心脏采血2mL,采用生物信息学方法开发黑羽鹌鹑的EST-SSR新标记,并检测EST-SSR标记在黑羽鹌鹑群体中的多态性。结果显示,在黑羽鹌鹑中成功的开发出了6个EST-SSR标记,EST-SSR标记检测到的观测等位基因数为2~6个,6个EST-SSR标记在黑羽鹌鹑的平均多态信息含量(PIC)为0.4962,平均期望杂合度(He)为0.5759。6个EST-SSR标记中P1和P2个为高度多态标记,其他4个EST-SSR为中度多态标记。新开发的6个EST-SSR标记可用于黑羽鹌鹑的遗传多样性分析,6个EST-SSR标记与鹌鹑的糖类代谢、黑色素的合成等有关系,但具体的机理还有待进一步分析。     

EST-SSR标记的开发及在动物研究中的应用

近年来大量ESTs数据的出现已成为开发SSR标记的重要来源。EST-SSR作为一种新型的分子标记, 不仅具备传统基因组SSR标记的特点, 而且以其开发经济和通用性高等优势已在植物和动物中得到开发和应用。作者就EST-SSR标记特点,开发步骤及在动物中的应用和发展前景进行了综述。     

菊苣EST-SSR分子标记开发及通用性分析

为了开发菊苣(Cichorium intybus)简单重复序列(Simple sequence repeat,SSR)分子标记,采用菊苣表达序列标签(Expressed sequence tags,EST)序列设计EST-SSR引物,并验证引物的有效性和通用性.结果表明:菊苣EST序列中共搜索到648个SSR位点,14...     

基于EST-SSR标记的柞蚕遗传多样性分析

利用4个EST-SSR分子标记分析11个柞蚕品系的遗传多样性。结果显示,4个位点共检测到28个等位基因,平均有效等位基因数(effective number of allele,Ne)为2416个,基因观测杂合度(observed heterozygosity,Ho)为0182～0400,期望杂合度(expected heterozygosity,He)为0524～0658,Shannon信息指数(Shannons information index,I)为0909～1363,群体分化系数(population differentiation coefficient,FST)均值为0337。群体的平均多态性信息含量(polymorphic information content,PIC)为0239～0477,遗传距离为0085～1305。对11个柞蚕品系的遗传多样性分析进一步确认了柞蚕中等程度的遗传多样性,且近60%的遗传变异存在于品系内个体间。研究结果表明EST-SSR标记可用于柞蚕的分子系统学研究。     

苇状羊茅EST-SSR标记在草甸羊茅和多年生黑麦草的通用分析

草甸羊茅(Festuca pratensis Huds)和多年生黑麦草(Lolium perenne Lam)均是禾本科、多年生草本植物,是优良的牧草和草坪草.本研究采用40对苇状羊茅(Festuca arundinacea Schred)的表达序列标签-简单序列重复(Expressed sequence tags-s...     

栽培金鸡菊EST-SSR分子标记开发与亲缘关系分析

为了开发适用于栽培金鸡菊的EST-SSR分子标记,采用二代高通量测序技术对剑叶金鸡菊‘斯丹泰勒’(Coreopsis lanceolata‘Sterntaler’)的叶片进行转录组测序。结果表明：通过转录组测序共得到42 958条Unigene,利用MISA软件共检测出个6 546个SSR位点,平均分布距离6.36 kb。除单核苷酸外,重复类型以二核苷酸和三核苷酸为主,分别占总数的19.28%和30.13%,二者优势重复单元和占比分别为AG/CT(57.30%)和AAT/ATT(27.94%)。通过Primer3软件设计得到4 499条引物,在随机筛选的50对引物中成功开发出22对多态性较好的引物,扩增出的166个条带全部具有多态性。通过UPGMA聚类分析,在遗传距离为0.460时可将100个栽培金鸡菊种质划分为7类,其遗传相似系数介于0.542 2～1之间,平均为0.747 6。金鸡菊组、两色组、歧序组和轮叶组相关的种质可作为金鸡菊远缘杂交育种的材料。本研究为栽培金鸡菊的分类鉴定、杂交育种和绘制指纹图谱提供了理论依据。     

基于转录组数据的柞蚕简单重复序列特征分析与EST-SSR分子标记开发

通过高通量测序获得柞蚕幼虫的转录组数据,利用MISA软件从该转录组数据中检索到分布于12 846条UniGene的15 568个符合筛选条件的SSR位点,SSR位点的出现频率为14.72%。这些SSR位点的优势重复基元为单、二碱基,分别占SSR位点总数的77.64%和14.92%。在全部SSR位点共搜索到41种重复基元,其中单碱基重复基元以A/T为主,占该类型的98.71%;而二、三碱基重复基元以AT/AT和AAT/ATT为主,占比分别为73.47%和39.75%。序列长度≥20 bp的SSR位点共有511个,占总SSR位点的3.28%,也以单碱基和二碱基重复基元为主,占比分别为33.66%和37.57%。在其中选取69对引物进行PCR验证,筛选到31对有效扩增引物。利用10个柞蚕品种的幼虫总DNA,对随机选择的14对引物进行多态性验证,筛选到12对稳定、可重复的多态性SSR引物。研究结果将有助于建立柞蚕分子标记技术体系和开展柞蚕分子标记辅助育种研究。