不同抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

在LEY冷冻稀释液基础上分别添加不同浓度维生素C(0、5、10、20、40、60 mmol/mL)、维生素E(0、0.2、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/mL)、SOD(0、100、200、400、600 IU/mL)、CAT(0、50、100、200、300 IU/mL)、GSH(0、1、5、10 mmol/mL)等抗氧化剂,检测冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率、平衡后和解冻后精子MDA含量,以观察5种抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明:在冷冻稀释液中联合添加100 IU/mLSOD和200 IU/mL CAT明显提高冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率(P<0.01)。     

不同稀释液对重庆黑山羊精液冷冻保存效果的影响

试验研究了两种稀释液对重庆黑山羊精液冷冻保存的效果,两种配方的冻后活率都大于0.5,但2号配方的弯尾率和顶体完整率都显著高于1号配方的弯尾率和顶体完整率(P0.05)。结果表明,2号配方的冷冻保存效果优于1号配方。     

不同平衡时间对獭兔精液冷冻保存效果的影响

为探讨獭兔精液冷冻保存适宜的平衡时间,将精液稀释后分别平衡30 min、60 min、90 min、120 min后装管,并进行冷冻保存,解冻后分析精子活率、畸形率、质膜完整率和顶体完整率四个指标.结果表明,平衡60min时冻后精子活率（0.30）显著高于30 min（0.15）、90 min（0.21）和120 min（0.15） （P＜0.05）;畸形率显著低于30min（16.16％ vs26.23％）（P＜0.05）,但与其他各组差异不显著（P＞0.05）;平衡30 min、60 min时精子质膜完整率显著高于120min（83.05％、81.79％ vs74.79％） （P＜0.05）,与90 min差异不显著（83.05％、81.79％ vs78.63％）（P＞0.05）;不同平衡时间组精子顶体完整率差异均不显著（P＞0.05）.综合分析表明,獭兔精液在冷冻时适宜的平衡时间为60 min.     

不同浓度海藻糖对奶山羊睾丸组织冷冻保存效果的影响

为了研究含有不同浓度海藻糖的冷冻保护液对关中奶山羊睾丸组织冷冻保存的效果,将关中奶山羊的睾丸组织切碎后,冷冻保存在含有不同浓度海藻糖的冷冻保护液中,保存1个月后解冻,分别检测冷冻保存前后睾丸组织总细胞活力、总抗氧化酶(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。结果:各试验组总细胞活力、T-AOC、SOD、CAT活性以及GSH含量均高于对照组,各试验组MDA含量低于对照组。另外,经含有15%海藻糖的冷冻保护液保存后,总细胞活力显著高于其他试验组(P0.05),T-AOC、SOD、CAT活性和GSH含量均显著高于其他试验组(P0.05),MDA含量显著低于其他试验组(P0.05)。研究结果表明,在冷冻保护液中添加海藻糖能够通过保护组织中抗氧化酶活性,提高奶山羊睾丸组织冷冻保存的效果;添加海藻糖的最佳浓度为15%。     

不同浓度的胎牛血清对猪精液冷冻保存效果的影响

胎牛血清（Fetal Bovine Serum,FBS）中含有的蛋白质及缓冲物质等会减少细胞冷冻保存过程中膜结构的物理损伤。为研究FBS对猪精液冷冻保存效果的影响,本试验在冷冻稀释液中添加0（对照组）、5%、10%、15%和20%浓度的FBS,常规方法制作细管冻精,冷冻-解冻后检测精子活力、活率、运动参数、顶体完整率、质膜完整率、抗氧化能力、精子凋亡率等指标。结果表明：10%FBS组的精子活力、活率、直线性、前向性较对照组提高（P<0.05）;冻融后精子形态学研究发现,与对照组相比,10%FBS组的顶体完整率和质膜完整率均提高（P<0.05）;抗氧化指标检测结果显示,与对照组相比,10%FBS组和15%FBS组MDA含量降低（P<0.05）;与其他试验组相比,20%FBS组的T-AOC含量最高（P<0.05）,15%FBS组CAT含量最高（P<0.05）;精子凋亡率结果表明,与对照组相比,其他所有试验组的精子凋亡率均有所降低（P<0.05）,其中以10%FBS组的精子凋亡率最低。综上所述,在冷冻稀释液中添加FBS可改善猪精子冻融后的质量,其中添加10%浓度的FBS效果最佳。     

微囊化与非微囊化胆囊收缩素卵黄抗体对小鼠促生长免疫效果的比较研究

试验选用70只健康小鼠随机分为7组,每组10只。试验1~7组分别为口服0 mg/kg胆囊收缩素（cholecystokinin,CCK）对照组、口服0 mg/kg空囊组、口服1 mg/kg CCK-卵黄抗体（yolk immunoglobulin,IgY）-低剂量微囊组、口服5 mg/kg CCK-IgY-高剂量微囊组、注射0 mg/kg CCK对照组、注射1 mg/kg CCK-IgY-低剂量非微囊组、注射3 mg/kg CCK-IgY-高剂量非微囊组。单笼饲养,试验期40 d。以小鼠体重、日采食量及血液中CCK抗体D值为评价指标,对CCK-IgY及其微胶囊进行促生长及免疫效果比较研究。结果表明,从试验全期来看,试验3组平均体重和平均日采食量均极显著高于试验4组（P<0.01）,但与试验1组相比差异不显著（P>0.05）;随着注射CCK-IgY剂量的增加,D值也随之升高,试验7组D值极显著高于试验5组（P<0.01）,而CCK-IgY微囊组均未达到与注射一致的效果。口服微囊化CCK-IgY和腹腔注射非微囊化CCK-IgY均可刺激机体产生相应的免疫应答反应,腹腔注射非微囊化CCK-IgY具有较明显的促生长效果,但CCK-IgY微囊饲喂效果不够明显,需进一步研究。     

不同抗生素对水牛精液中细菌的抑菌效果的比较

试验的目的是比较不同抗生素组合对水牛精液抗菌效果的影响。试验首先为了了解水牛精液中细菌对各抗生素的敏感程度,对青霉素、链霉素、庆大霉素、泰乐菌素、林肯霉素、新霉素和大观霉素等七种抗生素进行药敏试验。试验结果表明：（1）在选用的七种抗生素中,新霉素、链霉素和庆大霉素全部有抗茵圈,而其它四种抗生素都有不同程度的耐药现象。而在所有的抗生素中,庆大霉素的抑菌直径最长;（2）庆-泰-林-大组的抑菌圈直径与青-链组有显著差异（P〈0．05）,与青-新组差异极显著（P〈0．01）。青-链组的抑菌圈直径与青-新组有显著差异（P〈0．05）。     

不同抗氧化剂对鸡胚盘细胞冷冻效果的影响

为探究不同抗氧化剂对鸡胚盘细胞(blastodermal cells,BCs)冷冻保存效果,试验在冷冻液中分别添加不同浓度的N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和番茄红素(lycopene,LP)3种抗氧化剂,用胚胎程序冷冻仪冻存BCs,解冻后测定细胞活率(简称活率),并于培养24h后测定细胞贴壁率(简称贴壁率)。结果表明:在活率上,除了0.05mol/L NAC组(76.7%)与800U/mL CAT组(77.3%)极显著低于对照组外(P0.01),其余各组与对照组差异均不显著(P0.05);在贴壁率上,除了800U/mL CAT组(34.2%)极显著低于对照组(P0.01)外,其余试验组均极显著高于对照组(P0.01),其中NAC、CAT与LP的最佳浓度,分别为0.01mol/L(48.3%)、200U/mL(45.4%)与0.05g/L(39.8%)。因此,在冷冻液中添加适量的NAC、CAT或LP,可以提高BCs冷冻保存活率(差异不显著),极显著提高解冻BCs培养24h后的贴壁率。     

腺病毒载体转染水牛不同原代体细胞的效果比较

试验旨在比较腺病毒载体转染水牛乳腺上皮细胞、卵丘细胞、成纤维细胞的效率。将腺病毒质粒pBHGloxdelE13cre、pDC316-eGFP脂质体转染293细胞,收集病毒并测定病毒滴度。用腺病毒载体按不同的感染复数（MOI）感染水牛乳腺上皮细胞、卵丘细胞、成纤维细胞,72 h后倒置荧光显微镜下观察,统计感染效率。MOI为25、50、100、200、400时,成纤维细胞感染效率分别为0.7%、7.0%、9.0%、12.5%、34.0%,卵丘细胞感染效率分别为42.5%、55.3%、57.4%、76.0%、80.0%,乳腺上皮细胞感染效率分别为88.7%、100%、100%、100%、100%。结果表明,腺病毒转染乳腺上皮效率最佳,卵丘细胞次之,成纤维细胞效果较差。     

PRL和O2对HC11细胞氧化应激状态下乳蛋白合成的影响

为探明催乳素（PRL）和氧气（O2）对大鼠乳腺上皮（HC11）细胞氧化应激的影响及作用机制,试验以大鼠HC11细胞为载体,研究了在有氧和缺氧条件下催乳素对由过氧化氢（H2O2）诱发的HC11细胞氧化应激的影响。结果表明：催乳素有利于改善氧化应激对乳腺乳蛋白基因表达的影响,其作用是通过增加抗氧化基因的表达、激活炎症因子的表达和维持葡萄糖转运因子的正常运转而实现的。[关键词] 催乳素|乳腺上皮细胞|基因表达|氧化应激|H2O2     

不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响

通过比较不同冷冻保存方法和冷冻保护剂对小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻-解冻复苏后细胞存活率、48h贴壁率和细胞生长曲线的影响,筛选适宜的小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存方法和冷冻保护剂。结果表明,以100mL/L二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻保护剂进行小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存时,方法3处理组解冻复苏后细胞存活率和培养48h细胞贴壁率均高于方法2处理组(P>0.05),并分别极显著高于方法1和方法4。采用方法3进行冷冻保存时,以100mL/L DMSO作为冷冻剂的细胞贴壁率显著高于100mL/L甘油(GL)组(P<0.05),且冷冻解冻后的细胞呈现正常的分裂增殖生长模式。因此,宜选择100mL/L胎牛血清(FBS)+100mL/L DMSO+DMEM作为冷冻保护液,采用方法3进行小鼠耳皮肤成纤维细胞的冷冻保存。     

胰高血糖素样肽-2促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的分子机制

胰高血糖素样肽-2(GLP-2)是近年发现的一种由肠道L细胞分泌的功能性小肽,对胃肠道具有特异性的调节功能,能通过刺激肠细胞的增殖,抑制肠细胞凋亡和水解而增加肠绒毛高度、黏膜厚度及肠道重量等,进而影响肠道正常的结构和功能.GLP-2对肠细胞增殖、凋亡的调节涉及多种细胞信号传导途径,主要有G蛋白偶联的环化一磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)或磷脂酰肌醇-3激酶/Akt(PI-3K/Akt)途径、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)参与的Wingless(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)途径、酪氨酸蛋白激酶介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)等信号通路,其中以G蛋白偶联的信号途径为主要途径.这些途径相互协调,共同调控肠上皮细胞的稳态发育和肠道适应.本文将对GLP-2影响细胞增殖、凋亡的分子机制作一综述,为深入认识GLP-2的作用机理提供参考.     

不同饲养方式对羔羊育肥效果的比较

在贵州省贵阳市花溪区麦坪乡国家牧草种子基地进行了3种饲养方式下,试验羊增重情况的比较试验。试验1组:放牧+补饲以玉米为主的精料;试验2组:放牧+补饲玉米青贮料为主的精料;试验3组:放牧。结果表明,试验1组总增重为(8.30±0.26)kg;试验2组总增重为(11.60±0.29)kg;对照组试验3组总增重为(4.35±0.28)kg,3组之间差异显著(P<0.05)。     

共轭亚油酸和α-亚麻酸对HepG2细胞核转录因子NF-E2相关因子及谷胱甘肽硫转移酶A1表达的影响

本试验旨在研究共轭亚油酸(CLA)和α-亚麻酸(ALA)对于HepG2细胞核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)及其调控的谷胱甘肽硫转移酶A1(GSTA1)mRNA和蛋白质表达的影响。试验组采用浓度为0.2、0.5和1.0mmol/L的CLA和ALA作用HepG2细胞24h,采用荧光定量PCR法测定mRNA的表达量,蛋白质印迹法测定蛋白质的表达量。结果表明,CLA浓度分别为0.2和0.5mmol/L时,Nrf2和GSTA1mRNA和蛋白质表达量与对照组相比极显著增加(P0.01),并随CLA浓度增加呈下降趋势;采用ALA作用的细胞,Nrf2和GSTA1mRNA和蛋白质表达量与对照组相比,随ALA浓度的增加呈现极显著上升(P0.01)。由此可见,CLA在较低浓度时,诱导Nrf2和GSTA1mRNA和蛋白质表达量作用较强,而随ALA浓度增加Nrf2和GSTA1mRNA和蛋白质的表达量逐渐增多。     

烟草BY2细胞培养及盐胁迫研究

对比了2种不同配方的培养基对烟草BY2细胞生长的影响,试验表明,2种培养基对于继代培养BY2细胞并无过多差异.将烟草BY2细胞进行盐胁迫处理,并检测细胞增重等生理生化指标,结果显示,当盐浓度达到0.5%时,BY2细胞已经受到严重损伤.     

中药合剂对雏鸡淋巴细胞培养的免疫抑制效果研究

60只健康雏鸡随机分为A、B、C、D四组,每组15只。9日龄时,C、D两组人工感染传染性法氏囊炎病毒（IBDV）,复制动物免疫抑制模型;B、D组同时饲喂中药;A组设为对照组。结果表明：免疫抑制的D组和A组在给药3d后淋巴细胞转化率显著高于C组（P〈0．01）;喂药7d后,B组转化率显著高于A组（P〈0．05）;中药合剂直接刺激A、C组的淋巴细胞,中药浓度为1：1000细胞转化率最高,显著高于0、1：100、1：500（P〈0．01）,略高于1：2000（P〈0．05）;ELISA检测中,D组IL-2水平显著高于C组（P〈0．01）,但与A组差异不显著（P〉0．05）。实验提示该中药合剂可有效缓解免疫抑制病,增强机体免疫力。     

猪链球菌2型溶血素B细胞表位预测

目的预测猪链球菌2型(SS2)溶血素(SLY)B细胞表位。方法以DNAstar分析为主,综合分析二级结构、亲水性、表面可及性及抗原性指数,辅以吴玉章氨基酸抗原指数计算方法进行SS2溶血素B细胞表位预测。结果推测最有可能的B细胞表位位于溶血素N端第74～85、231～244区域位。结论应用多参数预测SS2溶血素的特征,为表位疫苗的研制奠定了基础。     

干细胞中两个关键细胞因子Oct4和Sox2

胚胎干细胞(ESC)在谱系特异性标志被激活前,Oct4和Sox2蛋白水平是细胞向谱系选择发展过程中的连续临时性标志.Oct4和Sox2转录因子在启动细胞重编程、维持ESC多能性和决定其是否走向分化方面具有关键作用.它通过与靶基因调控区结合,选择性地抑制分化基因或者激活多能性基因的表达而达到调控目的.干细胞共激活复合物(SCC)是Oct4和Sox2在Nanog基因协同激活时所需要的,它直接与Oct4和Sox2相互作用并集中在Nanog和Oct4启动子部位以及大部分被Oct4和Sox2占据的基因组区域,在维持ES细胞多能性和保持基因组完整性方面发挥着重要功能.因此,对Oct4、Sox2这两个关键性细胞因子作用机制深入了解,有助于细胞重编程分子机制的进一步阐明,为干细胞的相关研究奠定基础.     

嗜水气单胞菌体外粘附Caco-2细胞对细胞膜生物学特性的影响

采用Caco-2细胞培养模型，研究了嗜水气单胞菌粘附Caco-2肠上皮细胞后时其活力、细胞膜磷脂酶A2（PLA2）、胞浆游离钙浓度、膜通透性和膜流动性的影响。结果显示，细菌粘附后1h，肠上皮细胞活力显著下降，PLA2活性和胞浆游离钙浓度显著增加，细胞外LDH含量和细胞损伤率显著升高（膜通透性异常增加），肠上皮细胞膜荧光，偏振度、膜脂微粘度显著增加（膜流动性降低），且上述指标均随着粘附时间的延长而持续升高或降低。