鸭瘟灭活疫苗种毒筛选及生产用种毒种子批的建立

本研究通过鸭胚(DE)传代,建立了鸭瘟病毒(DPV)AV1221株的鸭胚适应毒.通过与其他2株DPV(AV1222株鸡胚毒和AV18株鸭胚毒)免疫原性、毒力等特性的比较,选择AV1221株DE2代鸭胚毒作为制苗用种毒,NJ株D5代鸭肝组织毒作为检验用强毒.使用鸭胚对AV1221株DE2毒进行了连续6次传代.对DE2代～DE7代冻干种毒的鉴定结果表明:未发现细菌、霉菌、支原体和外源病毒污染;病毒含量为每0.2 mL含104.38～105.25ELD50;能够被DPV抗血清中和;制成灭活疫苗,免疫成鸭后均能够产生完全保护.依据试验结果建立了能够满足疫苗生产所需的生产用种毒的种子批.     

鸭瘟的综合防治

鸭瘟是由鸭瘟病毒引起的鸭的一种急性、热性、败血性传染病。临床特征为高热,两腿发软无力,下痢,口渴,流泪和部分病鸭头颈部肿大,俗称大头瘟。本病传播迅速,发病率和死亡率都高。本文就鸭瘟病毒的研究历史、病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断、治疗预防等研究进行了一次综合整理,希望为鸭瘟的研究提供一些理论上的帮助。     

鸭瘟病毒DNA的快速诊断研究

根据文献报道的鸭瘟病毒基因序列，设计合成了一对引物，其扩增跨幅为498bp。用这对引物，以采用纯水直接研磨临床病料组织再按常规酚一氟仿抽提DNA的方法制备模板，对2株鸭瘟病毒进行扩增，均获得了与设计大小相符的明亮条带，为阳性；而对其他7株非鸭瘟病毒病料的基因扩增不出任何条带，为阴性；以该PCR方法检测14份DPV临床病料，均为阳性，与病毒分离和血清中和试验的结果一致。敏感性试验表明可检测到10fg的鸭瘟病毒DNA模板。研究建立的直接从临床样品微量检测DPV的PCR方法，能达到鸭瘟病毒基因的快速诊断要求。     

鸭瘟鸭霍乱免疫概况的回顾性探讨

<正> 1984年至87年6月,我场鸭群曾用口服禽霍乱弱毒菌苗(下称口服苗)预防免疫,终未能控制本病流行,一度时间,种鸭生产遭到严重威胁;87年7月至今,重新选用和制订807禽霍乱弱毒冻干菌苗(下称807)与鸭瘟疫苗联合免疫程度,预防鸭瘟和鸭霍乱(下称两病),经3年多实践和观察,凡经免疫的鸭群,基本控制两病的流行。鉴于目前各种禽霍乱菌苗的免疫原性较差,免疫程序又不是一个固定的模式,因此,本     

PCR检测鸭瘟病毒的研究

根据鸭瘟病毒DNA聚合酶基因序列，设计、合成了1对引物，以1株鸭瘟病毒疫苗株DNA为模板，进行：PCR扩增，扩增出预期563bp的目的DNA片段。将扩增出的DNA片段克隆到pMDl8—T载体，经Amp／IPTG／X-gal平板筛选，HindⅢ、XbaⅠ双酶切鉴定，获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定，与参考序列比较，二者同源性为99．3％。小鹩瘟病毒、鸭肝炎病毒、鹅副黏病毒：PCR扩增均为阴性。用此方法检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织(脑、肝、脾)，均能检测到鸭瘟病毒DNA。PCR检测鸭瘟病毒具有高度的特异性、敏感性，能够用于鸭瘟急性及亚临床感染的检测与诊断。     

鸭瘟病毒基因组核酸的制备

用鸭瘟病毒国内标准株DPV34F2接种10—l2日龄的非免疫鸭胚，37℃培养5d后，收获清亮尿囊液，采用高速离心结合切向超滤的方法浓缩纯化含毒尿囊液。然后通过改进的酚：氯仿抽提法提取其中的病毒基因组核酸，用4对特异引物对抽提物进行PCR鉴定。结果表明，应用上述方法可以获得较完整的鸭瘟病毒基因组核酸。     

鸭瘟病毒的PCR鉴定及相关序列分析

设计、合成了2对鸭瘟病毒引物，对云南省发现的1例鸭瘟可疑病例(YN-DPV01)进行PCR鉴定，并对其扩增产物进行测序。结果显示，引物对被检测病料的扩增正确；所扩增的片段经序列测定与参考毒株p481的同源性为99．5％。     

鸭瘟强毒与疫苗毒的囊膜糖蛋白序列比较

2011年,2个免疫过鸭瘟疫苗的樱桃谷北京鸭种鸭群发生鸭瘟。为了解该病发生是否与鸭瘟病毒(Anatid herpes-virus 1,AnHV1)变异有关,从发病场采集4份病死鸭的肝脏样品,用PCR检测和病毒分离进行了鉴定,并经UL2测序和序列分析确定1株AnHV1分离株(W1)具有强毒株的分子特征。在此基础上,测定并比较了W1株和3株AnHV1弱毒疫苗的囊膜糖蛋白序列。结果显示,分离株W1株与3株弱毒疫苗株之间gB、gC、gD、gG、gH、gM、gN和gL蛋白的氨基酸序列完全相同,gE、gI和gK蛋白的氨基酸序列同源性为99%。结果表明,相对于我国养鸭生产中常用的弱毒疫苗株,分离株W1株的囊膜糖蛋白序列未发生明显的变异。     

鹅的鸭瘟

鹅／的／鸭／瘟黄庚明辛朝安（华南农业大学动物医学系，广州５１０６４２）鹅的鸭瘟是由鸭瘟病毒（ＤＰＶ）引起的鹅的一种急性败血性传染病，主要特征是流行广泛，传播迅速，发病率和死亡率较高，且以雏鹅较常见，常呈地方性流行，给生产带来严重损失。近年来，该病的流...     

鸭瘟,鸭霍乱紧急防治措施研究

对鸭瘟，鸭霍乱紧急防治措施作了系列研究，结果表明：鸭瘟，鸭霍乱多价卵黄抗体对１００个ＬＤ５０鸭瘟强毒和８．３个Ｃ４８－１强毒菌的攻击具有１００％中和能力，对鸭瘟强毒和Ｃ４８－１攻毒扣５－６小时注射４倍稀释卵抗体２．０ｍｌ／只，具有１００％保护；分别以正常量和５倍量的鸭瘟弱毒苗免疫２月龄鸭，５－６小时后攻鸭瘟强毒，结果无一存活，鸭瘟轩和鸭瘟－禽霍乱二联活苗免疫后３天，对１００个ＬＤ５０鸭瘟强毒攻击获     

应用ELISA检测鸭瘟抗体

应用ＥＬＩＳＡ间接法测定鸭瘟抗体,具有简单,快捷,特异的优点,小鸭免疫鸭瘟弱毒疫苗２周后抗体水平明显上升,４周达最高峰,用１０００个致死量鸭瘟强毒攻击,抗体效价与免疫保护无明显的相关性。     

Dot—ELISA检测鸭瘟病毒的研究

用斑点酶联免疫吸附试验检测15头份鸭中毒人工发病毒雏鸭的粪便，检出率达87％，三次重复检测，符合率达100％，该法简便、快速、准确、经济、易于在基层推广应用。     

鸭瘟病例诊断及防制

1997年1月中旬至下旬，我市君山区广兴洲镇3个村的鸭群相继发生急性传染病．至21日，有7群共2000多羽鸭发病，死亡1000多羽．该病发生、死亡快，抗菌药物治疗无效．经临床诊断、剖检及实验室检查，诊断为鸭瘟病．1临床症状病鸭体温升高，个别达43．5℃；食欲减退或废绝，精神萎顿；双翅下垂，行动缓慢，严重者卧地不起；病鸭下痢，粪便呈绿色或灰白色；多数病鸭流泪，结膜发生炎症；鼻腔流出稀薄分泌物，口中流涎；部分病鸭头颈部显著浮肿．2剖检情况病死鸭食道粘膜表面覆盖着灰黄色或黄绿色假膜，假膜下有出血和溃疡；腺胃粘膜出血，肌胃用…     

用反向被动血凝试验检测鸭瘟病毒

鸭瘟病毒(DPV)引起一种鸭的急性、致死性、接触性疫病,对全世界产鸭地区具有经济上的重要性。诊断急性 DPV 感染的方法通常是观察特征性的组织损伤和分离DPV。分离毒力较弱的毒系的方法是接种乳鸭。作病毒的体外检测一直很困难,因为有的毒系的 DPV 在细胞培养物中不产生蚀斑。已用 IF 法作诊断,但有时对荧光的判读较困难。Rycaj 首先报道了 RPHA 试验。在该试验中,抗体致敏红细胞在相应抗原存在时发生凝集。这一方法已用于检测和鉴定其它病毒。本研究旨在确定可否将 RPHA 发展成作 DPV 检测的方法。     

鸭瘟病毒在雏鸭体内的动态定量分布及其潜伏部位研究

为研究鸭瘟病毒的组织细胞嗜性及其潜伏部位,采用real-timePCR技术对人工感染后病毒的组织器官分布进行了动态定量分析。结果表明,鸭瘟病毒在肝、脾、外周血淋巴细胞、法氏囊、三叉神经节、肾、肺和心脏等均能增殖;动态定量分析发现,随疾病发展各器官病毒荷载量不断上升,至死亡时达到顶峰;肝、脾中病毒载量高,出现时间早,持续时间长;耐过鸭多数组织器官中病毒逐渐消失,但三叉神经节及外周血淋巴细胞在感染后38d仍能检测到低拷贝病毒DNA,表明除三叉神经节外,外周血淋巴细胞也很可能是潜伏部位。     

鸭瘟的发病及其防治措施

本文就鸭瘟的传播特点、临床症状、病理变化等方面作了简单阐述,并提出有效的防治措施,以期对养鸭业起到一定的指导作用。