gacS基因在荧光假单胞菌FD6防治番茄灰霉病中的功能分析

 荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）FD6可产生多种抗菌物质,对多种植物病原真菌生长都有抑制作用。将FD6菌株感应激酶gacS基因部分保守区片段克隆到自杀载体中得到质粒pBS-S,将该质粒电击转化到FD6菌株中,利用同源重组构建了gacS基因插入突变体。经测定该突变体不产生抗生素硝吡咯菌素、2,4–二乙酰基间苯三酚、藤黄绿脓菌素、蛋白酶和氢氰酸,与野生型菌株相比形成生物膜和嗜铁素能力显著降低,并且丧失了对番茄灰霉病防病能力。gacS基因互补试验结果表明,gacS基因表达可恢复产生次生抗菌物质的能力,且对番茄灰霉病的防治效果与野生型菌株接近。由此证明,gacS基因是影响拮抗细菌FD6抗生素产生和对病害抑制能力的重要调控因子。     

25%啶菌恶唑对桃褐腐病的抑菌率与田间防效

通过试验,明确25%啶菌恶唑乳油对桃褐腐病菌的离体抑菌及田间防治效果。抑制菌丝生长试验结果表明,25%啶菌恶唑乳油对桃褐腐病菌EC 50值为0.0105 mg/L,低于对照药剂腈苯唑(EC 50值=0.077 6 mg/L)、丙森锌(EC 50值=0.338 5 mg/L)、多菌灵(EC 50值=0.865 3 mg/L)、甲基硫菌灵(EC 50值=0.459 1 mg/L);田间试验结果表明,25%啶菌恶唑乳油100 g a.i./hm~2的防效与腈苯唑悬浮剂100 ga.i./hm~2相当,高于对照药剂丙森锌、多菌灵、甲基硫菌灵对桃褐腐病的防效。     

中草药提取物对果蔬病原真菌的抑制作用

采用菌丝生长速率法测定了19种中草药乙醇提取物对5种果蔬病原真菌的抑制活性.结果表明:在提取物浓度为0.1 mg/mL时,豨莶草对草莓软腐病菌、葛根和鸦胆子对苹果褐腐病菌有抑制作用,抑制率均在20%左右.射干对苹果轮纹病菌和苹果褐腐病菌的抑制率分别为21.47%和21.9%,EC50(有效中浓度)值分别为0.7928、0.9107 mg/mL.马兜铃对番茄灰霉病菌和苹果褐腐病菌的抑制率分别为28.39%和49.64%,EC50值仅为0.3732和0.1256 mg/mL.综合分析认为,马兜铃值得进一步研究开发.     

果树内生拮抗细菌的筛选鉴定及其生防作用研究

通过组织分离法,在不同健康果树的木质部中分离到235株内生细菌。通过平板对峙法对所得菌株进行了初筛和复筛,得到6株拮抗作用较强的菌株。用过滤和高温灭菌得到的菌株发酵液进行抑菌谱试验,最终获得拮抗作用较强的内生细菌X8。对X8菌株在植物体内定殖、分类鉴定和防治作用的深入研究。结果表明：X8菌株可以在杏、辣椒等植物中定殖。X8菌株发酵液对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）抑制作用最强,达80.3%,对3种链格孢菌（Alternaria）病原菌的抑制作用达到75%以上,对番茄灰霉病和辣椒疫病的防效达到75.4%和79.3%,显著高于50%腐霉利和25%甲霜灵的防效。经16S rDNA序列分析,X8菌株与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的16S rDNA序列的同源性达99%。综合形态特征、生理生化特性,最终将X8鉴定为B. subtilis,在GenBank中序列登录号为HQ647257。     

草莓根腐病菌拮抗细菌的分离与鉴定

 采用平板对峙法,从分离自土壤的436株细菌菌株中筛选对草莓根腐病菌——尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）具有拮抗作用的细菌,得到了3株稳定性好,具有较高拮抗活性的菌株w-25、w-79和w-181。拮抗菌w-25对尖孢镰刀菌的抑菌带达到11.0 mm,w-79和w-181的抑菌带分别达到5.4和6.4 mm。此外,3株拮抗菌对草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）、草莓红中柱致病菌（Fragria ananassa）和草莓胶孢炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）等具有很强的拮抗作用。经过对3株菌株形态观察、理化分析和分子鉴定,认为w-25可能为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）,w-181和w-79可能为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。研究表明3株拮抗菌对致病菌生长有较好的抑制作用,显微观察发现拮抗菌代谢产物会破坏致病菌菌丝形态,电镜观察发现致病菌细胞器溶解,细胞内液泡变大。     

拮抗菌A02代谢产物对几种果树病害的活性

以北京市农林科学院植物保护保环境保护研究所自主分离筛选的利迪链霉菌A02为供试菌株,采用离体生物测定法评价了其对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、桃褐腐病菌(Monilinia ructicola)和枣青霉病菌(Penicillium sp.)3种果树病原真菌的室内毒力,通过小区试验测定了其对葡萄霜霉病的田间防效.结果表明:A02活性产物对葡萄灰霉病菌、桃褐腐病菌和枣青霉病菌均具有强毒力,对其菌丝生长的抑制中浓度分别为1.3696、8.1115和7.4989mg/L,最低抑菌浓度均在30 ng/L以下;对葡萄霜霉病的田间小区防效达95.7％,显著高于对照生物农药10％宝丽安可湿性粉剂和1％多抗霉素水剂.     

拮抗细菌BMY-1菌株对几种水果储藏病原真菌的抑制作用

采用平板对峙培养法测定从土壤中分离获得的拮抗细菌BMY-1菌株对柑桔绿霉病菌（Penicillium digatatum）、柑桔青霉病菌（Penicillium italicum）、苹果炭疽病菌（Glomerella cingulata）、苹果轮纹病菌（Physalospora piricola）、梨扩展青霉病菌（Penicillium expansum）、葡萄白腐病菌（Coniothyrium dlodiella）等6种水果产后病原真菌的抑制作用。结果表明，BMY-1菌株对苹果炭疽病菌（G.cingulata）和梨扩展青霉菌（P．expansum）的生长有较好的作用，抑菌率分别达48．43％和50．37％。采用液体共培养法观察到BMY-1菌株对病原真菌的菌丝有破坏作用，使苹果炭疽病菌菌丝扭曲和断裂，葡萄白腐病菌菌丝膨大畸形。对几种水果同时接种拮抗细菌BMY-1和病原真菌，BMY-1菌株对苹果炭疽病病斑和梨扩青病病斑扩展有较强的抑制作用，并能有效延迟葡萄白腐病发病时间。     

卵孢小奥德蘑覆土中有益细菌筛选与鉴定

采用稀释涂布平板法分离培养卵孢小奥德蘑（Oudemansiella raphanipes）覆土中的细菌，通过对峙培养法筛选能够促进卵孢小奥德蘑菌丝生长的细菌，并检测其溶磷、固氮、解钾及产生纤维素酶、生长激素和嗜铁素等生物活性，综合利用形态特征、生理生化特性及分子系统学方法鉴定有益细菌。结果表明：从覆土中分离获得256株细菌，其中8个属的54株细菌能够促进菌丝生长；芽孢杆菌（Bacillus）和假单胞菌（Pseudomonas）为优势属，占比分别为42.59%和25.93%；在54株细菌中，有14、8、6株细菌分别具有溶磷、固氮、解钾活性；有10、9、7株细菌分别能够产生纤维素酶、生长激素、嗜铁素。有益细菌54-14、41-60、57-71和27-17分别鉴定为荧光假单胞菌（P. fluorescens）、恶臭假单胞菌（P.putida）、粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）和枯草芽孢杆菌（B. subtilis）。     

山东桃褐腐病病原菌种群鉴定及致病性分析

【目的】明确山东省桃褐腐病病原菌种群结构及其致病力差异，为山东桃褐腐病病原菌的多样性研究及有效防控提供理论依据。【方法】采集烟台、威海、临沂等地桃褐腐病样本，利用形态学鉴定、rDNA-ITS序列分析、欧氏距离非加权组平均法(UPGMA)等技术手段，对桃褐腐病病原菌种类、致病力等进行分析。【结果】采集桃树叶片、果实、枝条褐腐病样品，通过组织分离获得41株桃褐腐病病原菌，这些菌株在菌落形态上存在较大差异，结合rDNA-ITS序列分析，分别鉴定为Monilinia fructicola、Monilia yunnanensis及Monilia polystroma，三者占比分别为80.48%、9.76%、9.76%。桃褐腐病病原菌菌丝生长速率为0.47～1.09 cm·d^-1,UPGMA聚类分析证实，其生长速率可被划分为慢、中、快三大类。采用桃叶片有伤接种菌饼方法，确定桃褐腐病病原菌引起的病斑大小范围为0～2.32 cm,UPGMA聚类分析证实，其致病力可被划分为强、中、弱三类。桃褐腐病病原菌菌丝生长速率及产孢量与致病力相关性分析发现，相关系数r分别为0.297 5、0....     

花椒提取物对桃褐腐病菌的抑制作用及酶活性的影响

以花椒提取物为试材,采用生长速率法测定了不同浓度的花椒提取物对桃褐腐病菌的抑制效果;并对处理后桃果实的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性进行检测。结果表明:不同浓度的花椒提取物对褐腐病菌菌丝的生长表现出较强的抑制效果,浓度为5.00mg/mL时抑制效果最好,抑制生长率达到96.71%,其EC50为0.504mg/mL;桃果实经提取物处理后,能显著诱导果实中抗病相关酶PAL、POD、PPO活性升高,并在整个试验过程中保持较高的水平。花椒提取物对桃褐腐病菌具有一定的抑制作用和诱导桃果实产生抗性的作用。     

地衣芽孢杆菌W10及其抗菌蛋白对桃褐腐病的抑制作用

地衣芽孢杆菌菌株W10菌液及其产生的抗菌蛋白对贮藏期桃褐腐病都有较好的抑制作用,高浓度（1 × 1010 cfu · mL-1菌液,3.0 mg · mL-1抗菌蛋白）效果更好。在较低温度（4 ℃）和湿度（RH70% ~ 75%）条件下,高浓度菌液和抗菌蛋白在病菌定殖前处理桃果能收到较好的防病效果。钙离子[0.1% Ca(NO3)2]能提高W10菌液及抗菌蛋白对桃果实褐腐病的防治效果,能明显推迟始病时间。W10菌液和抗菌蛋白浸果处理能显著降低贮藏期的自然腐烂率,与多菌灵效果类似;通过对果肉色差L*值、果实硬度、可溶性固形物含量、失重率等品质指标参数的测定,发现菌液和抗菌蛋白处理均不会影响果实品质。     

The effect of preharvest calcium sprays on quality attributes,physicochemical aspects of cell wall components and susceptibility to brown rot of peach fruits (Prunus persica L. cv. Andross)

This study was planned to evaluate the effect of preharvest calcium sprays on physicochemical aspects of cell wall components, activity patterns of pectin-modifying enzymes and susceptibility to brown rot (Monilinia fructicola) of peach fruits (Prunus persica L. cv. ‘Andross’). Six or 10 preharvest calcium sprays were applied with two different formulas (calcium chloride and an ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) chelated calcium form) in equimolar calcium concentration (0.12% Ca, w/v). After harvest, peach fruits were cold stored (0 °C, 95% R.H.) up to 4 weeks. Calcium content increased significantly in the calcium-sprayed peaches both in the peel (25–42%) and in the flesh (11–17%), 1 d after harvest. Calcium chloride sprays were more effective than those of chelated calcium, whereas the increase of calcium content in the fruits seems to be unaffected by the 6 or 10 calcium sprays. The increase of cell wall calcium corresponded to increase of calcium in the insoluble pectin fraction, whereas no differences were detected in the calcium of water-soluble pectin fraction. Ethylene production, respiration rate, uronic acid content and activity of pectin-modifying enzymes did not indicate substantial differentiations by preharvest calcium sprays as ripening progressed after harvest or cold storage. Calcium sprays resulted in significant decrease of brown rot development, although no effect on disease incidence was recorded.     

Eradicant action of fungicides applied to dormant peach trees for control of brown rot (Monilinia fructicola)

There is evidence to suggest that the eradication of Monilinia fructicola in infected peach peduncles in winter may reduce brown rot during the subsequent season. In a series of experiments, in which treatments were applied in the field and the results assessed in the laboratory, benomyl and arsenic or mercury compounds were more effective in suppressing sporulation from overwintering infections than any of the other materials tested. Benomyl effectively suppressed sporulation from infected peach peduncles and mummified peach fruits and was not phytotoxic. Sodium arsenite was an effective eradicant of M. fructicola in peach peduncles and mummified peach fruit at 0·1% and 0·3%, but it was phytotoxic to both peach and apricot trees at rates as low as 0·01% whether applied in mid-winter or at early bud-swell. Phenylmercury chloride (PMC), mercury acetimide at 0·06% Hg and phenylmercury dimethyldithiocarbamate at 0·015% Hg were effective eradicants. At lower rates the mercurials were unsatisfactory. No phytotoxicity was observed following dormant applications of the mercury compounds.

Lime-sulphur plus oil was the best of the remaining materials. DNOC performed about as well as lime-sulphur on peduncles but failed to suppress sporulation on mummified fruits and was occasionally phytotoxic.

Sodium pentachlorophenate was superior to pentachlorophenyl acetate at the same rate, and, in contrast with some overseas experience with peaches and apricots, was not phytotoxic in these tests.

Bordeaux mixture, fentin acetate, N.C.I584, captan, captafol and dichlone, although not phytotoxic, did not show significant eradicant or antisporulant action.

There was some evidence that PMC acted both as an eradicant and an antisporulant.     

甜瓜细菌性软腐病病原鉴定

近年来,浙江义乌等地的甜瓜(CucumismeloL.)果实上普遍发生一种外观褐色小斑,果肉水渍状腐烂现象,局部田块发病率高,损失严重。为确定病原,从病果上分离到4个细菌菌株,分别定名为M1、M2、M3和M4。烟草过敏性反应和致病性测定表明M2和M4不具致病性,而M1和M3在烟草上能引起典型的过敏性坏死反应,接种甜瓜24h内即导致果实的明显腐烂,所引起的腐烂症状与田间发病果实一致。对M1和M3进行培养性状、革兰氏染色、形态学和鞭毛观察、马铃薯薯块腐烂试验,以及16SrRNA基因测序和比较,结果证明该病害是由软腐欧氏杆菌软腐亚种Erwiniacarotovorasubsp.carotovora引起。     

龙泉山脉桃主要病害发生现状及综合防治技术

采用定期观察、实地调查和座谈访问的方式,对龙泉山脉桃产区主要病害进行调查。结果表明:近年来龙泉山脉桃危害严重的病害有细菌性穿孔病、缩叶病、流胶病、褐腐病、根癌病、缺铁性黄化等。可根据其为害症状,采取综合防治技术措施。     

双孢蘑菇褐腐病病原菌的分离及分子鉴定

对引起双孢蘑菇(Agaricus bisporus)褐腐病的病原菌进行分离和分子鉴定.分离培养褐腐病病原菌,采用CTAB法抽提其基因组总DNA,利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增菌株rDNA ITS区序列,扩增产物纯化后克隆转化至大肠杆菌,挑选克隆成功的菌株进行测序.测序结果在GenBank中进行同源性搜索,并下载部分具有代表性种的ITS序列,利用软件MEGA4 构建分子系统发育树,通过序列分析,鉴定出引起双孢蘑菇褐腐病的病原菌为Mycogone perniciosa.     

番茄类筋腐病病因探讨

采用石蜡切片显微照相技术鉴定了番茄类筋腐病的发病原因。结果表明：番茄类筋腐病系低温冷害造成后的一种生理性病害。低温下番茄果实表皮细胞脱落，角质层变薄，内部细胞扁平化造成果实表面褐化、粗糙、不同成熟期果实抗冷性不同，发病程度亦不同。     

设施栽培中桃树14C同化物分配特性的研究

 利用放射性同位素¹⁴C - 示踪方法研究了设施桃树果实不同发育时期¹⁴ C同化物的运转分配特性。结果表明: 在果实膨大期和果实成熟期, 分配到果实中的¹⁴C同化物最多, 随着果实生长, 分配到果实中的¹⁴C同化物比例增加。叶片的自留量小于果实获得的¹⁴C同化物量, 且随着果实的生长, 叶片的自留量逐渐减少。在各器官中果实的放射比活性最强, 其次为叶片与根系。说明果实膨大期和果实成熟期是设施桃树对碳素同化物需求和竞争最大的时期。