禽流感重组禽痘病毒疫苗不同途径及剂量接种的免疫效力

将表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒(rFPV—HA—NA)以不同剂量分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴鼻途径接种于4周龄SPF鸡。结果，该疫苗经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种的SPF鸡，能够诱导其产生血凝抑制(HI)抗体；用100LD50的HPAIVA／Goose／Guangalong／1／96(H5N1)毒株攻击后，免疫鸡无一发病和死亡，免疫保护率为100％。以点眼和滴鼻途径免疫的SPF鸡，大剂量接种能够诱导产生一定水平的抗体，攻毒后的保护率分别为83．3％、66．7％；而小剂量接种则不产生免疫反应，保护率为0。表明rFPV—HA—NA疫苗只有经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种，才能够诱导机体产生高水平的免疫力。     

不同途径感染4型禽腺病毒对SPF鸡的致病性研究

为了探讨不同途径感染4型禽腺病毒(FAdV-4)对SPF鸡的致病性,试验将60只21日龄SPF鸡随机分为A～F组,10只/组,A～E组分别经静脉注射、胸肌注射、滴鼻、皮下注射、口服(肠溶性胶囊)等不同途径感染含5×10~4 TCID_(50)的FAdV-4;F组为对照组,不接种FAdV-4。攻毒24 h和48 h后检测泄殖腔排毒情况,每天统计发病率和死亡率,并监测鸡只体温和体重。结果表明:解剖各攻毒组死亡鸡只均可见肝脏肿大且有明显出血点,颜色褪至淡褐色或黄色;心包膜增厚,内有大量黄色澄亮液体。泄殖腔排毒检测显示A组在注射病毒48小时时最先开始排毒。攻毒后168小时时A～E组发病率分别为100%、100%、50%、80%、20%。攻毒后A～E组死亡率分别为90%、80%、50%、80%、20%。攻毒后24小时时,各攻毒组SPF鸡体温和体重差异均不显著(P0.05);攻毒后48小时时,A组、B组体温升高,与F组比较差异显著(P0.05);攻毒后72小时时,A组、B组SPF鸡体重与F组比较显著下降(P0.05),体温与F组比较显著升高(P0.05);攻毒后96小时时,B组、D组、E组SPF鸡体重与F组比较差异显著(P0.05);攻毒后120小时时,C组、D组、E组SPF鸡体重与F组比较差异显著(P0.05);攻毒后168小时时,E组SPF鸡体重与F组比较差异显著(P0.05);攻毒后264小时时,C组SPF鸡体重与E组比较差异显著(P0.05)。说明静脉注射途径对鸡只的致病性最大,其次为肌肉注射。     

牛传染性鼻气管炎病毒攻毒方式的对比研究

本试验旨在建立牛传染性鼻气管炎病毒的攻毒模型,明确病毒在牛体内的分布及确定最佳攻毒方式,建立牛传染性鼻气管炎的发病标准,用来评价IBRV LNM弱毒疫苗的保护效力。试验共使用健康断乳牛9头,设鼻内喷雾组、滴鼻组和对照共3组,每组3头牛。将实验室分离保存的IBRV LN01/08强毒株采用鼻内喷雾和滴鼻两种方式接种试验组动物后,连续14 d,每日观察临床症状,监测体温及采集鼻拭子,对收集的试验数据进行对比分析。选取临床发病不同时期剖杀动物,采取主要脏器进行病毒分离。结果显示,所有动物攻毒后有不同程度的临床表现,以鼻内喷雾组临床表现最为严重,剖检可见肺部病变明显。病毒主要分布在呼吸道和眼结膜组织中。研究结果显示,采用IBRV自然感染方式攻击动物,喷雾方法攻毒临床效果明显强于滴鼻方式,保证了临床发病模型的建立,可以用来IBRV疫苗免疫效果评价,为研制IBR疫苗提供前提基础。     

猪口蹄疫O型灭活疫苗PD50效检攻毒方式探索

用10 000 TCID50的OR/80株F13细胞毒或用10 000 LD50的OR/80株乳鼠组织毒(ORMF8),通过肌肉注射途径、蹄踵球部或趾间皮内注射途径接种O型口蹄疫抗体阴性架子猪进行攻毒试验,三种途径均不能使试验猪产生规律性发病.     

畜禽免疫接种的途径与方法

畜禽免疫接种的常用方法有点眼、滴鼻、翼下刺种、皮下注射、肌肉注射、饮水、口服和气雾等。通常每一种疫苗均有其最佳的接种途径,应当根据疫苗的性质、种类、疫病特点、免疫程序和畜禽年龄及数量等具体情况选择适宜的接种途径。总的原则是使用活苗(弱毒苗)应尽量模仿自然感染途径进行接种,例如新城疫IV系弱毒苗以滴鼻、点眼为最佳途径,饮水次之,I系苗则以刺种或肌注为最佳途径。灭活苗无论是否加佐剂均应注射(皮下或肌肉)接种,若采用滴鼻、点眼方法则无效。     

鸭疫里氏杆菌的分离鉴定

2009年4月从扬州某鸭场分离到一株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性和玻片凝集试验确定其为ⅩⅤ型鸭疫里氏杆菌。动物致病性试验表明,鸭疫里氏杆菌分离菌株可以通过肌肉注射、皮下注射和滴鼻三种途径感染试验鸭,使攻毒鸭发生100%死亡,说明该鸭疫里氏杆菌分离株具有很强的致病性。     

禽脑脊髓炎病毒VR株的致病性研究

为探索禽脑脊髓炎病毒强毒VR株对SPF鸡的致病性,开展了不同接种途径和不同日龄SPF鸡的致病力试验。不同接种途径致病力试验结果表明,AEV VR株口服后不能引起发病;刺种、肌肉注射途径接种随着日龄增大,发病率降低;脑内注射途径接种可引起试验鸡全部发病。最小致病量试验结果显示,VR株脑内注射攻毒的最小致病量为10~(2.0) EID_(50)。不同日龄SPF鸡的致病力试验结果表明,随着试验鸡日龄的增大,其致病力略有差异,日龄越小,发病率越高。结果表明,AEV VR株脑内攻毒70日龄内SPF鸡的发病率为80%及以上,攻毒剂量为10~(4.0)EID_(50)。     

不同接种途径对新城疫活疫苗免疫效果的影响

为筛选新城疫活疫苗的最佳接种途径,本研究进行新城疫活疫苗不同接种途径对新城疫HI抗体效价影响的对比与分析。结果显示,在一免后7d、14d,滴鼻组、点眼组的HI抗体效价均显著高于饮水组、喷雾组、皮下注射组、肌肉注射组(P0.05);在二免后14d,滴鼻组、点眼组的HI抗体效价均显著高于皮下注射组、肌内注射组(P0.05),皮下注射组、肌内注射组的HI抗体效价均显著高于饮水组、喷雾组(P0.05)。表明滴鼻和点眼接种途径产生的抗体效价高于肌肉和皮下注射,肌肉和皮下注射接种途径产生的抗体效价高于饮水和喷雾。     

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La?Sota株+TJ株+HY株)经皮下和肌肉接种鸡的效力试验

以实验室试制的3批鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)经皮下和肌肉注射14和21日龄SPF鸡.免疫后21日,分别接种鸡新城疫、H9亚型禽流感和I群4型禽腺病毒强毒.结果表明,经肌肉和颈部皮下注射疫苗的14和21日龄鸡的攻毒保护率均为100%,攻毒对照组鸡100%死亡、发病或感染,健康对照组均100%健活或未感染.试验证明,鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)经皮下及肌肉途径注射鸡均能起到良好的预防效果,因此,确定疫苗的注射途径为肌肉或颈部皮下.     

鸡传染性喉气管炎人工感染试验

为建立人工模拟自然感染途径诱发鸡传染性喉气管炎病理模型,本试验采用80日龄京粉鸡随机分成健康对照组和试验组,试验组又设10-4、10-5、10-6 3个不同稀释度的剂量组,每组20只,将鸡传染性喉气管炎病毒经口腔滴注到鸡喉气管内进行攻毒,观察攻毒结果并统计发病和死亡情况。结果表明,10-4攻毒剂量组发病时间为1～8 d,发病率100％,死亡率10％;10-5攻毒剂量组发病时间为2～8 d,发病率100％,死亡率５％;10-6攻毒剂量组发病时间为4～9 d,发病率90％,死亡率0％。各组鸡均表现张口呼吸,咳出带血黏液的临床症状,剖检后均可见气管粘膜肿胀、出血,其中10-5组比较典型。10-5组经喉气管内滴注可以引起鸡100％发病,潜伏期、临床症状和病理变化典型,并且与自然感染基本一致,可用作鸡传染性喉气管炎病理模型。     

江西省宜春地区鸡新城疫流行情况调查

为了解江西省宜春地区鸡新城疫（ND）流行情况,在2016年3月—2017年3月对宜春地区樟树、丰城、高安、宜春、万载5个重点养鸡县（市）的31个鸡场的疑似患有ND的鸡群进行现场问询、跟踪调查。结果发现,鸡新城疫在宜春地区一年四季均有流行,其中冬季发生该病的频率相对高些,其次为春季,夏、秋季发生该病的频率相对低些;发病鸡只的日龄无差异性,各阶段的鸡只均可发生;整体发病率为20.1%-30.8%,死亡率为9.0%-25.4%,产蛋下降率为15.3%-38.8%。同时,利用SPF鸡胚对来自宜春地区5个县（市）的31个鸡场的214份病料进行新城疫病毒（NDV）分离,共分离到27株具有血凝性的病毒,经过血凝试验（HA）、血凝抑制试验（HI）及血清中和试验,最终确定23株为NDV。其中,除了2株毒力不能确定之外,其余21株均为NDV强毒株。将21株病毒用30日龄非免疫鸡进行攻毒试验,发病率为80%~100%,死亡率为60%~100%,发病鸡只均出现鸡新城疫感染的典型症状及病变。     

湖南鸡隐孢子虫感染情况调查及雏鸡人工感染试验

作者对湖南省５县（市）８个鸡场的３４８只鸡进行了隐孢子虫感染的调查，并用２５只雏鸡作了隐孢子虫的人工感染试验。调查表明：４个县（市）有鸡隐孢子虫感染，感染率为２．８～２５．０％，总感染率为１２．１％，其中２～４周龄鸡为３．６％，８～４０周龄鸡为１５．１％，伊莎鸡、ＡＡ鸡、罗曼鸡、艾维茵鸡、泰国肉鸡分别为２１．９％、１３．６％、９．１％、５．４％和０；１０只阳性鸡器官粘膜涂片检查盲肠、法氏囊、直肠的染虫率分别为１００％、６０％和４０％，气管、十二指肠和小肠中段未查到虫体。雏鸡人工感染试验表明：经鼻腔和眼结膜感染潜隐期均为５天；经口感染潜隐期为４天，第８～１９天排出卵囊数较多，第１２天排卵囊达到最高峰，显露期为２１天。     

鹌鹑对新城疫病毒的易感性试验

用从新城疫病死鹌鹑中分离的新城疫病毒(NDV)株(QNDV-1)和鸡新城疫毒株(F_(48)E_8),对5日龄、10日龄、25日龄、35日龄和70日龄等不同日龄鹌鹑进行了感染试验,并用15日龄鹌鹑做了呼吸道、肌肉注射、皮下注射、脑内注射、静脉注射和消化道等不同途径的感染试验。结果表明:供试不同日龄鹌鹑均可被感染发病,并出现和自然病例同样的症状或死亡,随着日龄增长,死亡率有降低趋势,70日龄鹌鹑(成年产卵)出现同自然病例同样的产卵量下降和产出异常卵现象;不同途径均可使鹌鹑感染发病或死亡,其中以脑内注射和静脉注射所表现的发病或死亡最为急剧;从病死鹌鹑中可重新收回到新城疫病毒,发病耐过鹌鹑可产生特异性抗体。     

Effect of the Immunity Efficacy of IBD Immune Complex Vaccine on ND La Sota Vaccine

1-day-old SPF chickens and commercial Jingfen chickens were vaccinated with IBD immune complex(IC) vaccine, NDV La Sota vaccine were inoculated simultaneously every one week and every two weeks.NDV La Sota immunization alone was as the control group.At the 2nd, 3rd, 4th and 5th week post inoculation, blood samples were taken and the ND HI antibody were tested.Experimental chickens were challenged with high virulent NDV at the 5th week post inoculation, the protective rate of each group was calculated.The results showed the ND HI antibody were not significant different in the combined immunization of IBD IC vaccine priming and NDV La Sota vaccine boost and NDV La Sota vaccine alone immunization (P>0.05).The results indicated that IBD IC vaccine has no immunosuppression on NDV La Sota vaccine in SPF chickens and commercial Jingfen chickens.     

雏鸡接种新城疫霍乱毒素B亚单位佐剂苗抗体效价的检测

选取1日龄商品蛋用雏母鸡100只,随机分为对照组(接种ND疫苗)和试验组(接种NDV4．CTB苗),每组50只,免疫后1周、2周采取两组的血清和泪液,检测ND的抗体效价(HI抗体滴度)。结果显示：接种NDV4-CTB的雏鸡,血清ND抗体效价持续升高,并且泪液的ND抗体效价升高的快而持续。表明接种NDV4-CTB的雏鸡体液免疫和局部(哈氏腺)免疫都得到增强,有利于抵抗ND病毒的感染。CT-B对雏鸡具有抗免疫抑制的作用。     

鸡新城疫免疫鸡群强毒感染与HI抗体水平关系的研究

应用RT-PCR方法对鸡新城疫4种不同免疫程序鸡群NDV强毒的感染进行监测。结果显示,鸡新城疫弱毒疫苗和油乳剂灭活疫苗同时接种的免疫鸡群NDV强毒的感染率最低。同时应用HA-HI试验对这4群鸡进行平行抽样检测其抗体效价,发现鸡群免疫水平整齐且平均HI效价在11 log2以上时,免疫鸡群基本不感染鸡NDV强毒。     

Co-administration of toll-like receptor (TLR)-3 and 4 ligands augments immune response to Newcastle disease virus (NDV) vaccine in chicken

Toll-like receptors (TLRs) are pattern recognition receptors (PRRs) that mediate first line of host defence to pathogens. TLR agonists are potent immunostimulatory agents that help to prime a robust adaptive immune response. In the present study, adjuvant potential of Poly I:C and lipopolysaccharide (LPS) were evaluated with live Newcastle disease virus (NDV) vaccine. Cornish chickens were immunized with live Newcastle disease virus (NDV) vaccine (R2B-mesogenic strain) adjuvanted either with Poly I:C (TLR3 agonist) or LPS-TLR4 agonist and both. Humoral Immune response to ND vaccine was evaluated through haemagglutination inhibition (HI) test and ELISA, while the cellular immune response (CMI) was quantified by lymphocyte transformation test (LTT). IL-1β cytokine mRNA levels in spleen tissue were also quantified by real time PCR. The results suggest that TLR3 and TLR4 agonists are an efficient immune-stimulators separately, as LPS co-administered group has shown significantly higher serum titre on second week post-immunization and Poly I:C group on third week post-immunization both by HI and ELISA (P?<?0.01), however, the combined administration of both LPS and Poly I:C did not give any complementary effect on serum titre. There were no significant differences in stimulation indices (SI) and IL-1β cytokine levels between groups at different intervals post-immunization. Hence, TLR agonists LPS followed by Poly I:C could be used as adjuvant to enhance the immune response to NDV vaccine in chicken.

     

七彩山鸡传染性法氏囊病及其并发感染

1998年,贵阳地区两个珍禽养殖场（A场和B场）的七彩山鸡暴发一种以急性死亡、法氏囊肿大为特征的传染病。病料对试验鸡能引起临床症状和死亡,复制出在自然病例中观察到的典型病理变化。A场无并发感染,死亡率为11．4％,死亡高峰出现在第5天;B超由于致病性链球菌的混合感染,死亡率上升到50％,死亡高峰提前到第3天,剖解病变更加复杂化,该场的致病性链球菌是加剧本病高死亡率和严惩的出血性素质的真正原因。该病毒能引起实验鸡出现临床症状和死亡,复制出在自然病例中观察到的曲型病理变化。另对两场的鸡新城疫（ND）和鸡减蛋综合症（EDS）的血清效价测定结果表明,部分鸡群的ND免疫不合格,鸡群曾被EDS病毒感染过。     

非典型鸡新城疫的病因研究初报（一）

应用血清学、生物学方法、从我省产蛋量下降、HI抗体在1：128以上的疑似非典型鸡新城疫（CND）病鸡群中分离到1株病毒，经鉴定和致病力测定，明确是1株ND强毒，毒力与F48E9相近，然后采用该株野毒感染不同抗体水平的3批蛋鸡及肉鸡，结果3批蛋鸡均是低抗体滴度组（1：10－1：40）发生了CND症状，感染后6－7天开始产蛋停止，经15－17天后才恢复产蛋，高抗体滴定组（1：80以上）无明显变化，无抗体对照组出现典型鸡新城疫变化，全部死亡；病毒感染后第6、10天监测HI抗体，结果低滴度组第6天达1：80－1：160，第10天达1：160－1：1280。试验结果表明，我们分离到的NDV，既可引起典型的ND，也可引起非典型的ND；高HI抗体蛋鸡产生非典型鸡新城疫的病因之一，是由于存在低抗体鸡群而发生了CND，其高HI抗体有竞争是由于强毒感染后产生的抗体。     

A preliminary study of the role of ducks in the transmission of Newcastle disease virus to in-contact rural free-range chickens

The role of ducks in the transmission of Newcastle disease virus (NDV) to free-range village chicken was investigated experimentally. Newcastle disease (ND) seronegative ducklings reared in a pen were infected oronasally with velogenic NDV of intracerebral pathogenicity index (ICPI) 1.8 isolated from outbreaks in village chickens in Uganda. A first group of 3-week-old ND seronegative chicks was mixed with the ducks and they were kept together for 7 days. Both ducks and chicks were observed for ND clinical signs and any mortality, and they were bled and their sera were tested for ND antibodies by haemagglutination inhibition (HI) test. The chicks were removed, euthanized and examined for any ND lesions, while the ducks were transferred to a fresh pen and a second group of chicks was introduced and observed and treated as above. The ducks and the chicks tested positive for ND antibodies 7 days post infection and contact, respectively, but showed no clinical signs, post-mortem lesions or mortality. The mean ND antibody titre of the second group of chicks was lower than for the first group. This study has shown that although ducks can be infected with velogenic NDV, they do not show clinical signs but are able to transmit NDV to in-contact chicks. Further investigations are needed of the lack of clinical signs in the in-contact chicks and how long the ducks remain infective.