南方红豆杉组织培养育苗试验

以南方红豆杉(Taxes chinensisvar.mairei Cheng et L.K.Fu)的幼叶、幼嫩茎段、花蕾为外植体进行组织培养育苗试验,结果表明:①外植体诱导愈伤组织的容易程度为幼嫩茎段>幼叶>花蕾;②诱导南方红豆杉产生愈伤组织的最佳培养基配方是:MS+6-BA 0.5 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1;③BA、ZT和KT均能诱导愈伤组织分化不定芽,其中以0.1 mg.L-1ZT效果最佳,诱导率达58%;④生根培养阶段,以附加NAA1.0 mg.L-1+0.1%活性碳的1/2 MS培养基效果最好,生根率达96%;⑤试管苗移栽在河沙+泥炭的基质上,成活率可达95%。     

喜马拉雅红豆杉愈伤组织的诱导

采用喜马拉雅红豆杉的幼叶、幼嫩茎段、幼根为材料,比较不同外植体、基本培养基、植物生长调节剂的配比、抗氧化剂以及培养条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明,幼叶做为外植体时,其诱导率高于幼嫩茎段和幼根,愈伤组织量大;MS、1/2MS、B5和WPM基本培养基上均能诱导出愈伤组织,其中MS基本培养基上诱导效果最好,显著高于其他的基本培养基;MS培养基上添加1 mg/L 6-BA和0.5 mg/L 2,4-D配合使用时,诱导率达到93.6%,愈伤组织生长也最旺盛;基本培养基MS中添加1 mg/L Vc时褐变现象得到极大抑制,愈伤组织生长较好;暗培养有利于愈伤组织的诱导,且诱导出的愈伤组织质量好。     

丝棉木松散型胚性愈伤组织的诱导与增殖

通过建立丝棉木松散型胚性愈伤组织培养体系,为丝棉木组培快繁、体细胞离体诱变育种及遗传转化等研究奠定基础。本试验以丝棉木幼嫩茎段为外植体,研究植物生长调节剂不同种类和浓度对丝棉木松散型胚性愈伤组织诱导与增殖的影响。结果显示,丝棉木茎段在MS+1.0 mg/L 2,4-D培养基上可诱导出松散型愈伤组织,愈伤组织诱导率达100%;将松散型愈伤组织转接到MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上可获得胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转接到MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上,每15 d继代培养一次,继代时选择结构松散、质地硬脆的愈伤组织,继代培养2～3次后可获得均质的丝棉木松散型胚性愈伤组织。本研究表明,丝棉木茎段理想的松散型愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D;最适松散型愈伤组织诱导培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D;最适胚性愈伤组织增殖培养基为MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D。     

红檵木高效再生体系的建立

红檵木是极具观赏价值的常绿灌木。以红檵木的叶片和茎段为材料,通过优化愈伤组织诱导与增殖,不定芽诱导、增殖与生根的培养基与激素配比,进行红檵木高效再生体系研究。结果表明,红檵木外植体最佳消毒方案为两次升汞消毒法:0.1%Hg Cl2两次消毒,各3 min;最佳愈伤组织诱导与增殖的培养基配方分别为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.7 mg/L、MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.06 mg/L;首次使用Ag NO3,获得最佳不定芽诱导培养基配方:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+Ag NO3 1 mg/L;不定芽增殖最佳培养基配方为:MS+6-BA1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L+V c 5.0 mg/L;最佳不定芽生根方案为:选择2.1~3.0 cm的不定芽,保留2~4叶片,接种至1/2 MS+IBA 4.5 mg/L培养基。从而建立了效果稳定的完整红檵木高效再生体系,为红檵木工厂化育苗及转基因体系建立奠定基础。     

朱樱花组培快繁技术研究

研究对朱樱花籽苗、幼苗茎段和叶片,成年植株茎段和嫩叶等不同外植体和不同生长调节剂对朱樱花愈伤组织诱导的影响,结果表明:不同外植体诱导愈伤组织的能力是:籽苗茎段带节茎段叶片,籽苗茎段和带节茎段是愈伤组织诱导的最佳外植体。用种子播种一个月后的籽苗作为外植体,愈伤组织诱导率高且不会褐化,其诱导最佳培养基配方为BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L,诱导率为100%;多年生嫩茎产生的愈伤组织丛生芽诱导率为0%,以幼苗产生的愈伤组织进行丛生芽诱导,最佳培养基配方为BA2.0mg/L+NAA1.5mg/L,诱导率为100%。通过对1%升汞对外植体消毒时间的不同实验,得出1%升汞消毒外植体6min褐化率、污染率明显减少。     

红花檵木离体快繁技术的研究

为探讨红花檵木带节茎段的离体快繁技术,以当年生红花檵木幼嫩枝条茎段为外植体,研究外源激素及培养基类型对其丛芽诱导、丛芽增殖、生根培养的影响和不同基质对组培苗驯化移栽的影响。结果表明:红花檵木的丛芽诱导率最佳培养基配方为MS+6-BA 1.4mg/L+NAA 0.1mg/L,其出芽数和诱导率分别为90个和90%;丛芽增殖培养基最佳为MS+6-BA1.3mg/L+NAA0.2mg/L,丛芽数和增殖系数分别为170株和3.4,MS+6-BA2.0mg/L+NAA 0.2mg/L处理下丛芽数和增殖系数虽然最高,但丛芽玻璃化数及玻璃化率也最高,分别到达18个和36%;红花檵木的组培苗生根诱导最佳培养基配方为1/2MS+NAA 0.4mg/L+IAA 3mg/L,其生根数和生根率最高,分别为45条和90%,且此时生根量多、根长且健壮;驯化移栽最适宜的基质配比为珍珠岩︰蛭石︰泥炭=1︰1︰4,成活株数为42株,成活率达到84%,幼苗叶片舒展,生长健壮,新根萌发数量多。试验结果表明,红花檵木幼嫩带节茎段作外植体能够实现其离体快繁。     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

红豆杉愈伤组织诱导试验初探

以1年生红豆杉的茎段、芽尖及种子作为外植体,以MS和B5培养基添加2,4-D、NAA、KT进行愈伤组织诱导试验。结果表明:最适宜红豆杉愈伤组织诱导的条件为以茎段为外植体,消毒时间6 min;B5 NAA1.0 mg/L KT0.2 mg/L GA0.75 mg/L培养基;25℃左右培养;接种后外植体暗处理1～2周效果更佳,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。     

珍稀濒危植物异形玉叶金花组织培养初步研究

以异形玉叶金花幼嫩茎段为外植体,研究不同组合的激素组合及外源物对异形玉叶金花愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+5 g/L椰乳,诱导生根的最佳培养基组合为1/4 MS+0.5mg/L NAA+0.2 mg/L IBA。     

红国王愈伤组织的诱导与植株再生

以"红国王"1年生盆栽的幼嫩叶片、叶柄为外植体,对其进行愈伤组织诱导及植株再生进行了研究,建立了"红国王"高效再生体系。结果表明:以茎段和叶片为外植体时最适宜诱导愈伤组织的培养基均为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.4mg/L;叶片较茎段更易获得愈伤组织;最适宜芽分化的培养基为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0 mg/L+6-KT1.5mg/L+CH100mg/L;继代增殖培养基和生根培养基分别以MS+6-BA0.2⁰.8mg/L和1/2MS+NAA0.5mg/L为最佳;以泥炭与珍珠岩4∶1配比,pH值调制5.8左右,移栽成活率达95%以上。     

“红国王”红掌愈伤组织的诱导与植株再生

以"红国王"红掌1年生盆栽的幼嫩叶片、叶柄为外植体,对其进行愈伤组织诱导及植株再生进行了研究,建立了"红国王"高效再生体系。结果表明:以茎段和叶片为外植体时最适宜诱导愈伤组织的培养基均为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.4mg/L;叶片较茎段更易获得愈伤组织;最适宜芽分化的培养基为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0mg/L+6-KT1.5mg/L+CH100mg/L;继代增殖培养基和生根培养基分别以MS+6-BA0.2~0.8mg/L和1/2MS+NAA0.5mg/L为最佳;以泥炭与珍珠岩4:1配比,pH值调制5.8左右,移栽成活率达95%以上。     

兴安杜鹃愈伤组织诱导的研究

经预备试验可知,兴安杜鹃的根、茎、叶为外植体,根段更易产生愈伤组织。结果表明,采用根段诱导愈伤组织和丛生芽最适培养基配方为1/4MS+ZT 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.02 mg/L培养基,其诱导率为73.33%。     

高杆女贞愈伤组织诱导研究

选取高杆女贞的幼嫩叶片作为外植体,进行愈伤组织的诱导。结果表明:愈伤组织诱导最适培养基为:MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+6.5g/L琼脂粉+30g/L蔗糖,p H调为5.8~6.0,诱导率可达86.7%,且愈伤组织生长状况良好。     

菊花脱除花叶病毒组培技术研究

以患花叶病菊花0.5~0.8 mm幼嫩茎尖为外植体,愈伤组织的诱导在MS+BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L培养基上效果最好,诱导率达96.0%;愈伤组织分化出芽以MS+BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L效果最佳,分化率达60.0%,每块愈伤组织平均分化出4个芽;幼苗在1/2MS+NAA0.1 mg/L培养基中生根率达92.0%,株平均生根5.1条。组培苗经症状观察和汁液传染实验试验检测,以后种方法结果为依据,获得菊花脱毒苗19株,脱毒率为63.3%。     

通过愈伤组织培养诱导的五味子的药用成分分析

为了选择能够适用于悬浮培养生产愈伤组织五味子活性成分的最佳外植体,以北五味子实生苗的幼嫩茎段为外植体,在MS、B5和N6培养基上进行愈伤组织诱导试验,同时采用HPLC法对愈伤组织中的五味子甲素、五味子乙素进行了检测,并对其根、茎段、叶片、愈伤组织和种子等不同组织中五味子甲素和五味子乙素的含量进行了比较分析。结果表明:B5培养基比较适用于愈伤组织的诱导,最适宜的培养基组合为B5+NAA0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L。切片分析发现,五味子愈伤组织的细胞来源于韧皮纤维以内和木质部以外的这部分细胞,这里即为愈伤组织的起源部位;愈伤组织外形似一朵蘑菇;随着愈伤组织的不断发育,其体积逐渐增大。五味子愈伤组织的形成过程可以划分为诱导起动期、分裂期及形成期这3个时期。高效液相色谱法检测结果表明:五味子甲素和五味子乙素含量最高的是种子。     

黑果枸杞无菌苗愈伤组织诱导体系的建立

以黑果枸杞为主要研究对象,利用组织培养技术,研究不同浓度的植物生长激素对黑果枸杞愈伤组织形成的影响,及不同外植体器官对愈伤组织诱导分化的影响,同时对其野生资源保护和利用提供技术支持。研究结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4D 0.4 mg/L+6-BA 0.2 mg/L;黑果枸杞根、茎、叶诱导愈伤组织率均高于98%,但茎和叶的诱导时间较短为15天。     

红檵木腋芽高效快繁研究

为给红檵木组织培养与工厂化育苗提供技术参考,分别以红檵木2年生茎段和当年生茎段为外植体,通过优化红檵木腋芽的丛生芽诱导与增殖、生根与移栽方案,最终建立了以腋芽为基础的红檵木高效快繁体系。结果表明:红檵木茎段腋芽丛生芽诱导与增殖的最佳培养基配方分别为MS+6-BA 1.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L和MS+6-BA 1.2 mg/L+IBA 0.07 mg/L+Vc 5.0 mg/L;丛生芽生根的最佳培养方案为:选取高度在1.0~3.0 cm之间的植株,将其接种到3/4MS+IBA 4 mg/L的培养基当中;生根组培苗的最佳移栽方案为:炼苗1周后,将其移栽到珍珠岩∶蛭石∶腐殖土=1∶1∶3的基质中。     

构树胚性愈伤组织及体胚诱导研究

以野生构树组织培养无菌苗茎段为外植体,探讨不同种类、质量浓度的植物生长调节剂对胚性愈伤组织诱导及体胚发生的影响,初步建立愈伤组织诱导及体胚发生技术途径。结果表明,TDZ是影响构树茎段胚性愈伤组织诱导的主要因素,NAA和2,4-D是次要因素,构树胚性愈伤组织最佳培养基为MS+0. 05 mg/LTDZ+1. 0 mg/L NAA+0. 1 mg/L 2,4-D。最佳体胚诱导培养基为MS+0. 1 mg/L NAA+1. 0 mg/L 6-BA,体胚诱导率达到41. 33%。     

紫苏组织培养的研究

以紫苏为材料,通过对其子叶、下胚轴、幼嫩叶片最佳外植体的筛选、愈伤组织诱导、不定芽分化及生根培养,建立紫苏的离体培养再生体系,为紫苏种质资源保存及快速繁殖提供理论依据和技术支撑。结果表明:紫苏种子萌发最佳培养基MS培养基;最佳消毒方法为0.1%升汞消毒8 min。此时种子萌发率最高达96%。离体培养最佳外植体为叶片。紫苏叶片和子叶诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.3mg/L,诱导率分别为97.5%和91.7%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,叶片优于子叶。最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1 mg/L,生根率为100%。