木霉菌对苹果腐烂病菌的抑制作用

通过木霉菌对苹果腐烂病菌的拮抗试验、树体接种试验及在ＰＤＡ 培养基上玻璃纸平板对峙培养试验,初步证明木霉菌对苹果腐烂病菌具有很强的拮抗作用     

木霉菌培养液对苹果腐烂病菌的拮抗作用

通过木霉菌培养液对苹果腐烂病菌的拮抗试验 ,证明了木霉菌培养液对苹果腐烂病菌有明显的拮抗作用 ,而且木霉菌培养液内含的拮抗物质对高温敏感 ,易分解失效 ,这为生产新型木霉菌制剂提供了理论基础     

苹果轮纹病枝条侵染时期研究

通过不同时期人工接种苹果轮纹病菌菌丝,观察其对苹果当年生新梢和多年生枝条的侵染。结果表明5-8月份是苹果轮纹病菌侵染当年新梢的时期,其中5-7月份是侵染的高峰期,8月处于低谷,9月以后病菌不再侵染。同时看出5月病菌对各种枝龄枝条均能侵染,并且枝龄越小越易侵染;7月病菌对1～2年生枝条能够侵染,但对3年生以及多于3年生枝条难以侵染;9月病菌对各种枝龄枝条均不能侵染。     

木霉菌对香蕉枯萎病菌的抑制作用

实验室分离到1株对香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubens)有明显抑制作用的菌种,经18SrDNA鉴定为木霉属,命名为Trichoderma sp.G2。采用固体和液体培养法对菌株G2抑制香蕉枯萎病菌的生长进行了初步研究。结果表明,在对峙试验的平板上,7d香蕉枯萎病菌完全被G2的短绒状菌丝及分生孢子梗丛覆盖;在拮抗平板上,G2发酵液的平均抑制率约为90.4%,挥发性物质平均抑制率达68.3%,可见挥发性物质对抑制病原菌的生长起了重要的作用。在浓度为1.0×107cfu·mL-1香蕉枯萎病菌液体培养中,按体积比为20%接种G2,10d后镜检发现病原菌的菌丝及孢子大部分出现融解,表明菌株G2对香蕉枯萎病菌有明显的拮抗作用。     

木霉蓖产果腐烂病菌的抑制作用

通过木霉菌对苹果腐烂病菌的拮抗试验,树体接种试验及在ＰＤＡ培养基上玻璃纸平板对峙培养试验,初步证明木霉菌对苹果腐烂病菌具有很强的拮抗作用。     

苹果响应轮纹病菌侵染的分子机制研究进展

苹果轮纹病是子囊真菌Botryosphaeria dothidea引起的病害之一,每年造成重大经济损失,全面而深刻理解苹果响应该菌侵染的分子机制有助于采用有效防治措施。综述了苹果轮纹病的病原、侵染循环、抗病机制及防治措施等方面的新进展,侧重阐述与抗(感)病密切相关的基因及蛋白质,为全面理解该病害的抗(感)病机理奠定基础。此外,还讨论了苹果轮纹病菌的生防菌种,为预防性药剂的开发和应用提供依据。     

苹果轮纹病菌侵染机制的研究(英文)

苹果轮纹病菌(Botryosphaeriaberengrianaf.sppiricola)能在培养基及活体内产生一系列果胶酶:多聚半乳糖醛酸酶(PG)、聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)。其中PG和PMG是降解果实胞壁的主要酶类,在整个致病过程中起重要作用。从结果可看出PG活性随着侵染的进展而升高,PMG的作用在侵染前期更大一些,2种果胶酶可能是引起被接种苹果果皮上还原糖变化的重要因素。接种与未接种果实果皮的pH值差异随侵染进程而降低,接种40d后,接种处pH值开始低于健康组织的pH值,这一变化可能造成细胞壁软化而有利于PG和PMG活动。接种后10～20d,PG活性及组织中还原糖的增长速度比其他阶段要快。对侵染点的病原组织学研究进一步表明,病菌产生的各种果胶酶不论是在侵染初期还是后期都是重要的致病物质。     

解淀粉芽孢杆菌ZJ01对苹果轮纹病菌抑制作用

以解淀粉芽孢杆菌ZJ01和苹果轮纹病菌ZZ26,MX1,LW048,LS1为试材,采用平板对峙、牛津杯、混合培养基等方法研究了解淀粉芽孢杆菌ZJ01对苹果轮纹病菌的抑制作用。结果表明,解淀粉芽孢杆菌ZJ01对苹果轮纹病菌菌丝生长有着很强烈的抑制作用。平板对峙试验中ZZ26的被抑制率最大(61.3%),MX1的被抑制率最小(50%);牛津杯试验中苹果轮纹病菌ZZ26的被抑制率最大(67.5%),MX1的被抑制率最小(46.0%);菌液与PDA混合培养基试验中ZZ26的抑制率最大为97.0%,LW048最小为71.3%;另外,解淀粉芽孢杆菌ZJ01对苹果苹果轮纹病防治试验发现,LS1的被抑制率最大,为55.6%,LW048最小,为10.3%。     

苹果砧木和野生资源对苹果轮纹病菌的抗性鉴定

2007—2008年我们对辽宁省果树科学研究所资源圃内的55份野生苹果资源及18份砧木进行了苹果轮纹病菌的抗性鉴定。根据抗性评价标准鉴定出高抗苹果轮纹病砧木3份(134-10、MM106、LS3),高抗苹果轮纹病野生资源7份(海棠花、扎矮、锅金海棠、楸子、小叶子、兴山湖北海棠、塞威氏苹果)。     

5种细菌对苹果轮纹病菌菌丝的拮抗作用

作者在前期试验的基础上筛选出5种(茎1、茎2、茎4、花2、姜4)对苹果轮纹病菌菌丝有明显抑制作用的内生细菌,并通过与苹果轮纹病的对峙培养试验,对其进一步的筛选。结果表明,对苹果轮纹病菌菌丝生长抑制效果最好的为从黄顶菊内分离出的花2,其次为从姜内分离的姜4和从黄顶菊内分离的茎2,抑制效果最差的则为从黄顶菊内分离的茎1。     

5种杀菌剂对苹果轮纹病菌的室内毒力测定

采用菌丝生长速率法在室内测定了5种杀菌剂对苹果轮纹病病原菌的毒力。结果表明,5种杀菌剂对苹果轮纹病病原菌菌丝生长均有较好的抑制作用,其中10%苯醚甲环唑微乳剂对苹果轮纹病病原菌的抑菌效果最佳,EC50(抑制中浓度)为0.0971mg/kg,其次为43%戊唑醇悬浮剂,EC50为0.2567mg/kg。     

苹果轮纹病菌对多菌灵的敏感性测定

2007年8-10月从山东主要苹果产区轮纹病果上分离获得83个苹果轮纹病菌(Botryosphaeria berengriana f.sp.piricola)菌株,采用菌丝生长速率法分别测定了各菌株对多菌灵的敏感性。结果表明,多菌灵对83个菌株的EC50值呈单峰频次分布,分布在0.0196～0.4867mg·L-1,均值为0.1080±0.0152mg·L-1;在83个菌株中选择对多菌灵最敏感的泰山海棠菌系进行重复测定,将其EC50平均值0.0428mg·L-1确定为苹果轮纹病菌对多菌灵的敏感基线;通过Duncan氏新复极差法和系统聚类分析结果表明,不同地理来源的苹果轮纹病菌对多菌灵的敏感性都处在较高水平,总体上不存在明显差异,没有出现敏感性下降的抗药性亚群体。     

41种杀菌剂对苹果轮纹病菌的抑制活性测定

室内测定了41种常用杀菌剂对苹果轮纹病菌的抑菌率,明确了各药剂的抑菌效果。认为氟硅唑、戊唑醇、己唑醇、烯唑醇、咪鲜胺、苯醚甲环唑、十三吗啉、菌核净、乙烯菌核利、异菌脲、联苯宁、多菌灵.乙霉威12种杀菌剂抑菌效果较好;其次为多菌灵、苯菌灵、甲基硫菌灵、丙硫咪唑、吡唑醚菌酯、福美双、福美锌、福美胂、增效锡、敌菌丹、百菌清、丙硫咪唑.甲基硫菌灵等12种;氯溴异氰脲酸、甲霜灵、烯酰吗啉、醚菌酯、硫酸铜钙盐等5种抑菌效果不明显,但其中醚菌酯、硫酸铜钙盐田间具有较好防效的原因有待进一步研究。     

木霉菌对苹果主要真菌病害的抑制及其在土壤中的定殖作用

以胶东半岛老的果园中土壤为试材,采用逐步稀释法,涂平板于孟加拉红培养基中,根据形态和分子方法鉴定分离木霉菌。分离出的木霉菌与苹果主要病害对峙培养在不同pH的培养基上,观察不同pH条件下,对真菌病害的抑制效果。土壤有机质和pH是目前胶东果园的主要问题,采用正交法设计,研究了不同的土壤条件对木霉菌生长的影响。结果表明:在不同pH条件下,木霉菌抑制苹果病原真菌的效果不同,木霉菌在不同的pH条件下对腐烂病(Valsa mali)和炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)均可以抑制,但对轮纹病(Physalospora piricola Nose)只有在pH 6.0时没有效果外,其它pH时都对轮纹病有抑制作用。在土壤pH 6.5和土壤有机质含量为75 g·kg^-1时,最有利于木霉菌定殖。同时还发现木霉菌对土壤的pH具有调节作用,无论在碱性条件下,还是酸性条件下,均可以使土壤pH趋于中性,另外木霉菌可以增加土壤有机质含量,特别是在高土壤有机质含量的情况下,增加更加显著。总之,分离出的木霉菌对苹果腐烂病、炭疽病和轮纹病抑制效果好。土壤pH和有机质含量对木霉菌的生长有影响,高土壤有机质含量和中性土壤有利于木霉菌定殖。另外,木霉菌能有效地改良土壤有机质含量和土壤pH。     

苹果轮纹病菌拮抗细菌筛选及田间应用初步研究

在辽宁省果树科学研究所的育种园、优质果园及树木园采集土壤,用稀释法分离纯化并用平板对峙法筛选出了对苹果轮纹病菌(B.berengerianaf.sp.piricola)有较强抑制作用的菌株。离体果菌株控果试验表明:先喷菌液后刺伤接种轮纹病菌的防治效果为73.5%,相对较好;田间试验表明:菌剂100倍与1∶3∶240波尔多液交替使用采收期与贮藏期防治果实轮纹病效果均较好;套袋果实轮纹病防效达100%。     

10种杀菌剂对苹果轮纹病菌的室内毒力测定

苹果轮纹病为苹果三大病害之一,严重影响苹果的产量和品质,目前主要采用化学药剂防治。为筛选出对苹果轮纹病防治效果较好的化学药剂,作者选用10种低毒杀菌剂开展了室内毒力测定。试验结果表明,50%多菌灵可湿性粉剂、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂和10%世高水分散粒剂对苹果轮纹病菌的毒力较强,其EC50值分别为194.76 mg/L、200.72 mg/L和246.38 mg/L。因本试验在室内测定,缺少田间实践证明,建议进一步开展田间试验。     

不同抗性苹果果实受轮纹病菌侵染后亚显微结构的变化

 用苹果轮纹病菌菌株Ls1的菌丝接种苹果抗病品种‘红玉’和感病品种‘金冠’及其杂种后代高抗单株02-24-036和高感单株02-38-071的果实,采用扫描和透射电镜技术观察其表面及皮下组织亚显微结构的变化情况。结果发现,病菌侵染后,红玉、金冠和02-24-036果面均产生特殊的分泌物,其中红玉和02-24-036产生的分泌物抑制菌丝繁殖,金冠果面产生的分泌物不能抑制菌丝繁殖。说明病菌侵染后果面产生的分泌物与抑菌和抗侵入有关。菌丝由果面皮孔或伤口侵入组织后,抗病的红玉和02-24-036皮下细胞内嗜锇颗粒簇积累,而感病的金冠和02-38-071未见嗜锇颗粒簇的积累。说明红玉和02-24-036果实对苹果轮纹病的抗性属于诱导抗性,既表现为抗侵入,也表现为抗扩展。     

抗病与感病苹果叶片应答轮纹病菌侵染的蛋白质表达差异分析

从‘鸡冠’与‘富士’苹果的杂交后代中选择对轮纹病抗病的材料1-1-24和感病材料1-2-34的叶片为试材,在叶片正面主脉两侧各针刺一处,分别接种长有轮纹病菌（Botryosphaeria berengeriana f. sp. piricola）菌丝和蘸有无菌蒸馏水的PDA培养基饼。通过对接菌前和接菌后24 h的叶片总蛋白进行2-DE分离筛选和质谱检测鉴定,共获得27个差异蛋白,其中9个为胁迫应答蛋白,1个与防御反应相关,17个参与叶绿体光合作用、细胞代谢、核糖体、羧酸等相关合成或未知反应。对β–1,3–葡聚糖酶、酸性内切几丁质酶和AP15基因进行实时定量PCR分析,结果表明：β–1,3–葡聚糖酶和酸性内切几丁质酶是苹果叶片应答轮纹病胁迫的关键蛋白,抗病和感病的苹果叶片在接菌前关键蛋白含量的显著差异可能是导致抗病性不同的原因之一。