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将哺乳类动物的胚胎冷冻保存在液氮中的试验已经在一些动物成功,如小鼠(Whit-tingham等,1972),牛(Wilmut和Rowson,1973)、绵羊(Willadsen等,1976)、山羊(Bilton和Moor,1976)和马(Yamamoto等,1982)。牛的冷冻胚胎已经商业化生产。然而,猪胚胎的冷冻和解冻还未获得成功。据报道,猪的胚胎对于低温,即使是+10℃(Wil-mut,1972;Niemann,1985)都极敏感。本研究是检验由桑葚胚到孵出期囊胚各胚龄猪胚胎冷冻-解冻后能否存活。采用有性周期的8~24个月龄、体重120~ 相似文献
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家畜卵母细胞冷冻保存研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
自Whittingham(1977)首次成功的报道冷冻-解冻的小鼠卵母细胞活仔以来,国内外诸多学者对家畜及人的卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前,已有小鼠、家兔、牛等动物以及人的卵母细胞冷冻成功,并得到了后代。在国内,山羊、绵羊、猪等家畜的卵母细胞冷冻保存也已有报道。随着胚胎工程技术的不断发展,卵母细胞的冷冻保存越来越受到重视,这将推动卵母细胞的冷冻保存取得更大进展。 相似文献
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家畜卵母细胞冷冻保存研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
自Whittingham(1977)首次成功的报道冷冻-解冻的小鼠卵母细胞活仔以来,国内外诸多学者对家畜及人的卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前,已有小鼠、家兔、牛等动物以及人的卵母细胞冷冻成功,并得到了后代。在国内,山羊、绵羊、猪等家畜的卵母细胞冷冻保存也已有报道。随着胚胎工程技术的不断发展,卵母细胞的冷冻保存越来越受到重视,这将推动卵母细胞的冷冻保存取得更大进展。1抗冻保护剂在卵母细胞和胚胎的冷冻保存时,需使用抗冻保护剂,它可以改变细胞在冷冻过程中的物理化学环境,减轻或避免冷冻、解冻过程中的冷冻损伤。抗冻保护剂主要为一… 相似文献
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胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植、动物克隆以及动物资源保护.此技术的应用需保证胚胎在冷冻-解冻后具有较高的成活率.自从1972年小鼠胚胎冷冻保存获得成功以来,许多学者在简化冷冻程序,缩短冷冻时间,方面进行了深入的研究.本文就胚胎冷冻的原理、保护剂、冷冻方法以及解冻方法等方面进行了综述. 相似文献
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胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植、动物克隆以及动物资源保护。此技术的应用需保证胚胎在冷冻—解冻后具有较高的成活率。自从1972年小鼠胚胎冷冻保存获得成功以来,许多学者在简化冷冻程序、缩短冷冻时间等方面进行了深入的研究。文章就胚胎冷冻的原理、保护剂、冷冻方法以及解冻方法等方面进行了综述。 相似文献
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三、胚胎冷冻保存技术1.常规胚胎冷冻技术70年代,由于胚胎冷冻技术的缺乏,采集的胚胎必须在数小时内移植给受体,否则只有弃掉。对于特定的供体而言,能够获得的可用胚胎数是不可预测的,因此,难于准备同等数量的同期受体牛使胚胎不至浪费。尽管胚胎在室温和0℃以下能够培养保存,但也只能最长保存24小时。因此,在当时情况下,许多研究小组都在研究能够长期保存胚胎的方法。1972年,Whittingham等发现了在-196℃下保存2~8细胞期小鼠胚胎的冷冻技术,并将胚胎移植后产仔。该论文发表在当年的《科学》杂志上,他们冷冻的1000枚小鼠胚… 相似文献
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自从 Polgy、Wmith 和 Porkes 首次发现冷冻保存精子的方法后,就引起了繁殖工作者冷冻保存哺乳动物卵子和胚胎的兴趣。1972年 Whittmghan 首次报道鼠胚胎冷冻成功,在-196℃保存小鼠胚胎移入受体有29%产仔。不久,Wilmut 也报道了鼠胚胎冷冻成功。1973年 Wilnnut 和 Rosuson 第一次报道冷冻牛胚胎得到一头犊牛。从此,冷冻保存哺乳动物胚胎的研究才不断开展。开始,对实验室动物研究较多,后来转到了家畜方面,迄今已用冷冻保 相似文献
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哺乳动物胚胎的超低温保存技术对于动物种质资源的保存和良种家畜的国际交流具有重要意义,是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等胚胎生物技术不可分割的组成部分。1972年,英国学者Whittingham等人首次利用慢速冷冻法保存小鼠胚胎获得成功。此后许多学者对冷冻方法进行了广泛的研究。然而,在胚胎冷冻和解冻过程中都存在许多会使胚胎受到损伤的因素,如:抗冻保护剂的毒性,冷冻损伤,细胞内冰晶的形成,破裂损伤,渗透压引起的膨胀。因此,使用不同的冷冻和解冻法应避免或减少胚胎受到损伤,以提高胚胎解冻后的存活率。1抗冻保护剂和冷冻溶液在哺乳… 相似文献
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哺乳动物胚胎冷冻保存的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
哺乳动物胚胎的超低温保存技术不仅为动物种质资源的保存和良种家畜的国际交流提供了简单的手段,而且还是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等胚胎生物技术不可分割的组成部分。1972年,英国学者Whittingham等人首次利用慢速冷冻法保存小鼠胚胎获得成功,此后许多学者对冷冻方法进行了广泛的研究。至今,牛、绵羊、山羊、马、兔子、猫、羚羊、狒狒、狨猴、猴和人等的胚胎冷冻保存也获成功。然而,在 相似文献
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用6~7日龄奶牛胚胎进行超低温冷冻保存试验。有10个胚胎在1.5MDMSO中以1℃/分从室温降到-7℃,诱发结晶后,以0.3℃/分降温到-60℃,然后放入液氮内保存373~375天。解冻时从液氮取出,以4℃/分的速率(-50℃到-10℃)升温到-10℃,直接放入20℃水中。除去DMSO后,有5个形态正常。把8个(其中3个异常)移给4头受体后,有2头妊娠,1头生下1对双胎(1母1公),另1头产1母犊。试验比较了不同冷冻保护剂和不同方法冷冻保存奶牛胚胎后的结果。40个胚胎在1.5M DMSO中用缓慢冷冻—解冻方法冷冻保存2-375天后,有17个形态正常(42.50%)。把20个胚胎移给13头受体,有2头妊娠(15.38%),63个胚胎在1.0M甘油中用快速冷冻—解冻方法冷冻保存1-297天后,找回的57个中有30个形态正常(52.63%)。把29个胚胎移给22头受体没有1头受孕。试验表明,奶牛胚胎在1.5M DMSO中用缓慢冷冻—解冻方法冷冻保存1年后仍然存活。解冻后正常胚胎的百分率和在1.0M甘油中用快速冷冻—解冻方法冷冻保存的胚胎解冻后的正常胚胎百分率没有显著差异。但后一种冷冻方法冷冻的胚胎移植后没有成功。应再进一步试验研究。 相似文献
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一、细胞低温生物学的基本问题哺乳动物的精子冷冻保存试验于1950年首次成功,它标志着现代低温生物学的开始。同时也激发了对胚胎冷冻保存的尝试,但直到1972年才有成功报道(小鼠胚胎)。其后,家 相似文献
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哺乳动物胚胎超低温冷冻保存的研究进展 总被引:3,自引:1,他引:2
哺乳动物胚胎超低温保存最早在小鼠获得成功。继之 ,牛、兔、绵羊、大鼠、山羊、猪、人等的胚胎冷冻保存成功并取得了很大进展[1~ 4 ] 。194 9年Polge冷冻哺乳动物精子获得成功 ,发现了甘油在精子冷冻过程中能起到保护作用[5] 。 1972年 ,英国学者Whittingham首先成功地冷冻保存了小鼠胚胎 ,发明了胚胎的慢速冷冻保存方法 ,这项技术一直被广泛应用[6] 。 1973年Wilmut和Rouso以甘油为防冻剂保存牛胚胎成功[5] 。 1985年Rall和Fahy又发明了胚胎的玻璃化冷冻保存技术 ,该技术的开发 ,简化了操作程序 ,大… 相似文献
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自 2 0世纪 70年代小鼠的胚胎成功冷冻以来 ,在动物胚胎冷冻保存方面进行了广泛的研究。目前 ,胚胎的冷冻保存已成为胚胎移植的常规技术环节之一。本文就动物的胚胎冷冻保存的原理、冷冻保护剂的选择和主要的冷冻方法及影响冷冻效果的因素等方面进行了详细的综述。并就各冷冻方法的优缺点进行了探讨 ,旨在使胚胎冷冻保存技术在畜牧业生产中得到更为广泛的应用和推广。 相似文献
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胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植,动物克隆以及动物资源保护.此技术的应用需保证胚胎在冷冻-解冻后具有较高的成活率.自1972年小鼠胚胎冷冻获得成功以来,许多学者在简化冷冻程序,缩短冷冻时间等方面进行了深入研究,试图寻找一种可用于生产的冷冻方法.本文全面地比较了不同的冷冻方法及其结果,籍此为该领域工作者提供一定帮助. 相似文献
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《中国畜牧杂志》2016,(3)
本实验旨在研究猪孤雌激活4-细胞胚胎的冷冻保存效果。胚胎采用Cryotop法进行玻璃化冷冻保存,解冻后分析其存活率、胞内活性氧(ROS)和谷胱甘肽(GSH)水平、囊胚发育率及囊胚质量。结果表明:冷冻胚胎体外恢复2 h的存活率与新鲜胚胎无明显差异(100%vs.96.8%,P0.05),但当其培养时间达到24 h时,存活率显著下降至88.3%(P0.05)。另外,玻璃化冷冻导致胚胎内ROS水平显著升高(P0.05),GSH水平显著下降(P0.05)。与新鲜胚胎相比,冷冻胚胎获得的囊胚发育率明显降低(59.8%vs.26.4%,P0.05),但囊胚的凋亡细胞率、内细胞团数、滋养层细胞数及总细胞数均无明显差异(P0.05)。结果显示,玻璃化冷冻猪孤雌激活4-细胞胚胎导致其存活、氧化还原能力和囊胚发育下降,但仍能获得较高质量的囊胚。 相似文献
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自1985年胚胎玻璃化冷冻(v itrification)保存技术发明以来,玻璃化法先后在小鼠、兔、绵羊、牛、猪、山羊等动物胚胎上获得成功,近年来有关哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的研究主要集中在冷冻和解冻方法上,相继发明了一些新的玻璃化冷冻方法:冷环玻璃化法(cryo loop)和开放式细管法(open pu lled straw,OPS),并且对解冻后细管内直接脱除防冻剂进行了广泛深入的研究,使得冷冻胚胎移植更易于在生产上推广应用。现将胚胎玻璃化冷冻的原理、冷冻保护剂、冷冻方法、解冻后保护剂脱除方法的最新研究进展作一综述。 相似文献
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哺乳动物胚胎冷冻技术研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植,动物克隆以及动物资源保护。此技术的应用需保证胚胎在冷冻一解冻后具有较高的成活率。自1972年小鼠胚胎冷冻获得成功以来,许多学者在简化冷冻程序,缩短冷冻时间等方面进行了深入研究,试图寻找一种可用于生产的冷冻方法。本文全面地比较了不同的冷冻方法及其结果,籍此为该领域工作者提供一定帮助。 相似文献