IBV H52疫苗株主要结构蛋白基因信息解析

鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis，IB)对我国养禽业危害巨大。IB的病原为鸡传染性支气管炎病毒(IBV)，该病毒基因组为单股正链RNA，可编码纤突蛋白(S，可裂解为S1和S2)、膜蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)等3种主要结构蛋白；     

利用IBV重组N蛋白建立ELISA抗体检测试剂盒的研究

利用表达鸡传染性支气管炎病毒Gray株N蛋白的基因工程重组菌，表达IBV—N蛋白，并利用表达载体上带有组氨酸标记的特点，应用金属螯合填料将其纯化。用纯化的IBV—N蛋白作为包被抗原，成功地建立了一种检测血清中IBV抗体的间接ELISA方法。确定抗原最佳包被浓度为0．58μg／ml；被检血清的最佳稀释度为1：100；酶标二抗的工作浓度为1：1000。确定了血清样品阴、阳性临界0D值为0．14。与IDEXX公司IBV抗体检测试剂盒比较，结果表明自建ELISA试剂盒具有较高的敏感性和特异性。     

传染性支气管炎病毒结构蛋白研究进展

传染性支气管炎是禽类最重要疾病的之一,给家禽业造成了重大的经济损失。基因突变、重组和免疫压力等因素都可能引起鸡传染性支气管炎病毒发生遗传变异,给该病的预防和控制带来了很大的困难。近年来国内外学者在分子生物学方面的研究不断深入,在病毒基因组的结构与功能,以及结构蛋白的研究方面取得了重要进展。论文就分子生物学领域对IBV结构蛋白的结构特性及生物学功能等方面的研究概况做一综述,以揭示IBV的致病机理和分子变异机制,为有效防控IB提供科学依据。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒（IBV）免疫学特性的研究

为了揭示鸡肾型传染性支气管炎病毒（IBV）免疫学特性，为生产上防治该病服务，应用SDS－PAGE分析了IBV的结构蛋白，发现肾型IBV－X株与M41和H52的蛋白电泳图谱存在一定的的相似性，均具有分子量为90000、84000和43000的蛋白带，但X株病毒还具有一条分子量为61000的条带，而且它的相对含量很高。肾型传支上海野毒S株与X株相似，也具有这条61000的条带，应用抗IBV－X血清进行免疫转印，显示分子量61000的结构蛋白具有较强的免疫反应性。为了进一步揭示肾型IBV诱导免疫保护的特性，应用IBV－X毒株接种10日龄鸡胚尿囊腔，收集尿囊液，灭活后，制成油乳剂灭活苗免疫鸡，30d后，对IBV－S毒株攻击的保护率达100％，并呈现良好的体液免疫应答；疫苗在4℃保存7个月后用来免疫鸡，其保护率达95％。该疫苗安全、可靠，稳定性好。     

鸡传染性支气管炎病毒S蛋白的研究进展

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性、病毒性传染病,主要侵害鸡的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等系统。鸡传染性支气管炎病毒为冠状病毒科冠状病毒属的代表种,含有完整的27~32kb的单股正链RNA。病毒粒子略呈球形,直径约为80~120nm,有时呈多形性。IBV有三个主要结     

鸡传染性支气管炎病毒感染的免疫致病机制

本对鸡传染性支气炎病毒（infectious bronchitis virus，IBV）的免疫致病机帛作一综述。传染性支气管炎是鸡的种主要的呼吸系统疾病，不同的IBV毒株可以表现不同的组织亲嗜性，且都可以感染肾脏和卵巢而引起严惩后果。有些毒株可以在肠道内繁殖但不出现病变。目前的变异株可以引起胸部肌肉的病变。影响IBV感染的几个因素包括：年龄、饲养管理、鸡的营养、环境和其它病原的混合感染。病毒的免疫原成分包括S蛋白和N蛋白。本还鸡对传染性支气管炎的体液免疫、局部免疫、细胞免疫感及遗传抵抗性作了综述。IBV感染持续时间比较长时，盲肠扁桃体和肾脏被认为是病毒差别与SI蛋白的氨基酸序列的徽小差别有关。单纯的抗原研究不能充分解释毒株间的免疫学关系，人们通过交叉反应按照“保护型”对IBV分类。将来，可能会出现新的IBV毒株，它会引起与标准IBV毒株感染不同的器官与系统出现病变。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)ZZ2004株核衣壳蛋白基因的克隆及原核表达

本研究旨在克隆并表达鸡传染性支气管炎病毒（IBV）的核衣壳蛋白（N）。根据IBV ZZ2004株的N基因设计1对引物,提取IBV ZZ2004株的RNA,利用RT-PCR技术扩增大小约1.23 kb的片段,将其插入克隆载体pGEM-T构建pGEM-T-N。将pGEM-T-N用EcoRⅠ和XhoⅠ进行双酶切,将酶切后的N基因片段克隆到表达载体pGEX-6P-1,转入大肠杆菌BL21（DE3）菌中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳,结果显示外源基因获得了表达且为可溶性蛋白;Western blotting检测结果显示N蛋白可与相应的IBV ZZ2004阳性血清发生特异性反应,结果表明N蛋白有一定的生物活性。本研究为IBV诊断试剂盒及新型IBV重组亚单位疫苗研制奠定基础。     

传染性支气管炎病毒北京毒株与标准毒株结构蛋白的比较

利用鸡传染性支气管炎Ｇｒａｙ，Ｈｏｌｔｅ、Ｍ４１、Ｃｏｎｎ、Ｈ５２、Ｈ１２０标准毒株和北京Ｂ株的特异性多克隆血清，通过Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ技术，对Ｂ株和上述各标准株的结构蛋白进行了分析，并进行了不同血清与毒株结构蛋白间的交叉反应。结果表明，各株病毒都含有四种结构蛋白，从分子量看，Ｈ１２０、Ｈ６２、Ｍ４１的Ｍ蛋白比上述其他株的都小；Ｂ株和Ｇａｒｙ株的Ｓ２蛋白大于其它毒株的。在交叉实验中，Ｂ株和Ｇ     

鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)免疫学特性的研究

为了揭示鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)免疫学特性,为生产上防治该病服务,应用SDS-PAGE分析了IBV的结构蛋白,发现肾型IBV-X株与M41和H52的蛋白电泳图谱存在一定的相似性,均具有分子量为90 000、84 000、67 000和43 000的蛋白带,但X株病毒还具有一条分子量为61 000的条带,而且它的相对含量很高.肾型传支上海野毒S株与X株相似,也具有这条61 000的条带,应用抗IBV-X血清进行免疫转印,显示分子量61 000的结构蛋白具有较强的免疫反应性.为了进一步揭示肾型IBV诱导免疫保护的特性,应用IBV-X毒株接种10日龄鸡胚尿囊腔,收集尿囊液,灭活后,制成油乳剂灭活苗免疫鸡,30 d后,对IBV-S毒株攻击的保护率达100%,并呈现良好的体液免疫应答;疫苗在4℃保存7个月后用来免疫鸡,其保护率达95%.该疫苗安全、可靠,稳定性好.     

IBV青岛腺胃分离株S1纤突蛋白质基因的克隆与鉴定

参考Genebank发表的传染性支气管炎病毒（IBV）S1纤突蛋白基因序列,自行设计合成了1对引物,对IBV青岛腺胃分离株（SD/97/02）RNA进行RT-PCR扩增。产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现1条1657bp的条带,将其克隆入pMD18-T载体中,并进行序列测定,证实为S1基因。将此重组质粒命名为pMDQXS1。     

鸡传染性支气管炎病毒基因工程疫苗研究进展

鸡传染性支气管炎（IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（IBV）引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病,是严重危害养禽业的重要传染病之一.IBV为冠状病毒科（Coronavirdae）,冠状病毒属（Coronavirus）的代表成员,病毒粒子有囊膜和纤突,基因组为一条单股正链RNA,具有27kb,分为10个开放阅读框架（ORF）;基因组主要编码3种结构蛋白：纤突（S）蛋白、膜（M）蛋白和核衣壳（N）蛋白,其中S蛋白由S1和S2两种糖蛋白组成,血凝抑制和大多数中和抗体由S1蛋白引起.     

国产IBV疫苗株膜蛋白基因的亲缘关系研究

利用自行设计的引物Wx和Ws，通过RT－PCR方法分别扩增出IBVD41株、H120GD株、H120SH株、H520GD株4个国产疫苗株和标准强素M41－E4株完整的M基因cDNA，然后将其分别克隆到pGMET－Easy或pMD18－T载体中。测序结果发现：这5个IBV毒株的M基因均为678bp，分别编码由225个氨基酸残基组成的多肽。序列分析表明：D41株、H120GD株和H120SH株M基因之间的核苷酸序列及推导氨基酸序列同源性均为100％，它们在系统发生进化树中处同一分支；而H52GD株和国内的M41－E4株和国外的M41株M基因之间的核苷酸及推导氨基酸序列同源性分别为99．9％和99．6％，它们之间的亲缘关系最近，在系统发生进化树上处另一个分支。     

鸡传染性支气管炎病毒的免疫研究进展

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,简写为IB)是鸡的一种急性、具有高度接触性的呼吸道传染病。由冠状病毒属(Coronavirus)传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis virus,简写为IBV)的感染而引起。主要引起呼吸、生殖和消化各系统病变,此外,引起雏鸡肾炎—肾变病的报道也甚多,尤其是在澳大     

IBV小囊膜蛋白基因的原核表达载体构建及序列分析

本研究以IBV M41毒株为材料,克隆该毒株的E蛋白基因,并将其连接到表达载体pGEX-6P—1中,为E蛋白的进一步研究提供条件。分析和比对了多个IBV毒株和各群冠状病毒E蛋白的同源性,发现各株IBV的E蛋白相对比较保守,但与其它的冠状病毒的E蛋白同源性较低,差别较大,和SARS病毒E蛋白一样,独立分型。     

传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株(ZJ971毒株)结构蛋白和S1基因的结构分析

对来自浙江地区的传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株（ＺＪ９７１株）的结构蛋白进行了ＳＤＳ电泳分析，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增其Ｓ１基因ｃＤＮＡ，并作了测序分析。结果显示，ＺＪ９７１株结构蛋白由２１２０００、１４６０００、９７４００等８条蛋白带组 其他传染性支气管炎病毒株相比缺损１１６０００蛋白条带；Ｓ１基因全长为１７２０ｎｔ，编码１条５５１个氨基酸组成的多肽，其核心苷酸与其他传染性支气管炎病毒株的同源性为９９．     

国产IBV疫苗株核衣壳蛋白基因的亲缘关系

利用自行设计的引物Cx和Cs，通过RT－PCR方法分别扩增出鸡传染性支气管炎病毒（IBV）D41株，H120GD株、H120SH株、H52GD株等4个国产疫苗株和标准强毒M41－E4株完整的N基因cDNA,然后将其分别克隆到pGEM T-Easy或pMD 18-T载体中并测序。测序结果表明，这5个IBV毒株可分2组，其中D41株，H120GD株和H120SH株为一组，它们的核苷酸和推导氨基酸序列同源性为99．7％－99．8％和99．0％－99．5％，而H52GD株与M41－E4株构成另一组，其核苷酸和推导氨基酸序列同源性为99．7％和99．5％；而2组之间的最大同源性仅为91．0％和93．2％。在系统发生进化树上，这2组分别位于不同的分支簇上。值得注意的是，国内的H52GD株与国外报道的H52株不在同一分支簇上，相反却与国内强毒M41－E4株以及国外报道的M41株在同一分支簇上。这一结果表明，国内的H52GD疫苗株与国外报道的H52疫苗株不同，它们在亲缘关系上更靠近M41－E4株和M41株。     

鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展

鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)主要侵害鸡的呼吸系统和泌尿生殖系统,可以引起鸡的呼吸道症状、肾脏损害、产蛋量和蛋的品质下降。该病毒血清型较多,容易产生变异,给疫病防控带来很大困难。主要对近年来在IBV的基因组结构、IBV的复制过程、IBV的结构蛋白及生物学功能、IBV的变异机制、IBV的进化以及IBV的鉴定和检测等方面的研究进展进行综述,以期为更加深入地认识和研究该病毒提供参考。     

马立克氏病与IBV免疫

<正> 20世纪90年代中后期,传染性支气管炎(IB)是几个养鸡业发达地区的主要呼吸道疾病,且会造成鸡的免疫抑制。马立克氏病毒(MDV)是鸡的常见免疫抑制病毒。MDV免疫可防制肿瘤形成,但不能抵御野毒感染。IB产生的免疫抑制可能是因为继发MDV病毒血症,但相关的研究尚未完成。