冷冻保存20年的湖羊胚胎移植复苏与利用

2018年3月,对1998年制作的保存在国家家畜基因库的24枚湖羊冷冻胚胎解冻,其中19枚达C级以上,22枚胚胎优次搭配,分别植入9只湖羊母体,最终6只受孕,产仔9只成活8只,平均初生重3.85 kg; 2019年6月对3公4母共7只胚胎羊根据不同家系交叉配种原则进行配种,4只母羊均成功怀孕,产仔9只成活8只,平均初生重2.35 kg,繁殖性能正常,体型外貌鉴定多数符合纯种湖羊特征。研究结果表明冷冻20年的湖羊胚胎移植复苏、繁殖成功,是畜禽遗传资源保护技术方法的重要突破。     

30年冷冻湖羊“复苏”记—“湖羊冷冻精液和冷冻胚胎保存效果验证试验”项目通过验收

正2018年,全国畜牧总站在浙江省湖州市、杭州市等地组织实施了"国家家畜基因库湖羊冷冻精液和冷冻胚胎保存效果验证试验"项目,本项目由国家家畜基因库和浙江省畜牧技术推广总站共同承担,杭州华丽牧业有限公司和长兴永盛牧业有限公司两个湖羊种羊场参与实施。为科学客观评估试验效果,进一步做好家畜地方品种保种工作,10月22～24日,全国畜牧总站组织由浙江省农业科学院、扬州大学、内蒙古自治区农牧业科学     

南非美利奴肉羊进口冷冻胚移植试验

以无角南非美利奴肉羊进口冷冻胚胎进行移植试验。对60只本地湖羊杂交羊受体进行海绵栓法同期发情处理,发情表现50只,同期发情率96%,受体可用率83.3%,移植冷冻胚胎50枚,B超检查怀孕26只,受胎率54%,产羔26只,产羔率100%,成活26只,成活率100%。胚胎移植技术是一个复杂的系统工程,在生产实践中不要忽视任...     

山羊细管冷冻精液的生产

冷冻精液主要是利用液态氮(-196℃)作为冷源,将经过特殊处理后的精液进行冷冻,保存在超低温下以达到长期贮存的目的.山羊的精子由于不耐冷冻,冷冻精液配种受胎率较低,一般生产上情期受胎率只有40%～50%,部分试验受胎率可达70%～80%.山羊精液冷冻保存技术的研究,国外从上世纪六十年代起已试用山羊冷冻精液输精,据各国报道,到八十年代平均受胎率达60%左右,山羊冻精受胎率比绵羊高.由于山羊冷冻精液的特异性,我国山羊精液冷冻保存技术的研究从上世纪八十年代才开始,进展不如牛的快,但现在已有许多地区在使用山羊冷冻精液输精.为此,作者总结本站的经验,对山羊冻精的生产和应用作一论述,供同行参考.     

冷冻精液和冷冻胚胎保存湖羊种质资源的应用研究

为保存湖羊种群的优良特性与特有的基因频率，试验采用冷冻精液和冷冻胚胎保种方法，结果巳完成制作10对种羊的每对10枚冻胚的计划任务；制作细管冻精1393支，解冻后检验活力平均为0.35-0.40。顶体完整率达80%。     

抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

目前,猪的人工授精以鲜精和常温保存的液态精液为主,冷冻精液在人工授精中所占的比例不足1%,由于解冻后精子复苏率较低、异常精子多、受胎率低等原因,在生产上猪的精液冷冻与牛的精液冷冻相比尚未得到普遍推广、应用。精子的冷冻处理在畜牧业上是一个重要且具有特殊优势的操作过程。提高精子冷冻技术水平,需要对配子的生理学知识和精子收集、处理过程的生化改变有更深入的了解,这些     

作好牛胚胎移植各环节工作,提高移植受胎率

家畜胚胎移植是继人工授精之后发展起来的一项家畜繁殖领域的高新技术.目前,该技术已成为家畜引种、扩大种群、保存遗传资源的有效方法.然而,由于受许多条件限制,我国牛胚胎移植至今尚未大步迈向商业化应用阶段.分析原因有很多,其中除胚胎生产的成本较高外,另一个主要原因是胚胎移植受胎率较低.长时间以来,冷冻胚胎移植受胎率始终在40%～50%上下徘徊,平均至少使用两枚胚胎才能怀1头牛犊,造价较高,这是胚胎移植不能象人工授精一样很快被基层养牛户接受并被大面积推广应用于养牛业生产的根本原因.如何提高胚胎移植受胎率,这是胚移工作者共同面对的课题.这里,就牛胚胎生产至移植各环节工作作以阐述,以期对提高移植受胎率有所帮助.     

利用体外受精-胚胎移植技术进行ALK3基因敲除小鼠的保种鉴定

建立用于ALK3基因敲除小鼠品种保存的体外受精一胚胎移植(IVF-ET)模型.采用杂合子雌性ALK3小鼠卵子与杂合子雄性ALK3小鼠精子进行体外受精,收集2-cell,进行胚胎冷冻,1周后进行胚胎复苏移植,通过PCR方法进行子代鉴定.结果表明,冻存胚胎320枚,复苏获得存活胚胎96枚,移植80枚,产子23只,获得杂合子11只,通过体外受精一胚胎移植可对ALK3基因敲除小鼠进行保种鉴定.     

BMY牛冷冻精液质量控制及影响因素研究

[目的]为了加大BMY牛的推广应用力度和提高人工授精受胎率,开展了BMY牛冷冻精液质量控制研究,优选出冷冻稀释液及得出冷冻精液质量控制技术程序。[方法]采用不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法对BMY牛精液冷冻及解冻效果进行试验。[结果]不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法,BMY牛精液冷冻解冻效果各异。初始冷冻温度为-121--140℃时,TRIS液为基础稀释液添加糖类和氨基酸一步法稀释BMY牛精液冷冻6-10 min BMY牛冷冻精液解冻效果较好,用程控冷冻仪冷冻BMY牛精液,同样获得良好的解冻效果,解冻活力达到0.372±0.026。BMY牛冷冻精液平均解冻活力可达0.357±0.029以上,精子解冻复苏率达50%以上。精子畸形率平均为16.8%±4.26%,BMY牛采精成功率为75.3%。[结论]全放牧条件下BMY牛电刺激采精法获得很好效果,精液质量好,更有利于种质资源的保存和利用。     

以西杂母牛为受体采取胚胎移植技术繁育良种奶牛的应用研究

【目的】为寻求高产奶牛的繁殖模式,促进胚胎移植技术在奶业生产上的应用。【方法】我们在全区27个乡镇,在农户条件下应用性控胚胎以西杂母牛为受体,共移植高产奶牛冷冻胚胎1796头。【结果】妊娠971头,平均妊娠率54.06%,繁活犊牛952头,生母率96.42%。春、秋季的受胎率较高,最高达到55.09%,高于夏季7、8月份最低的52.69%,但差异不显著(P0.05)。西杂牛不同黄体级别的A、B级的移植结果A级受胎率为0.558%;B级受胎率为52%。A级黄体与B级移植的受胎率差异不显著(P0.05)。【结论】说明采取这一模式进行两种奶牛繁殖是切实可行的,具有推广应用价值。     

复合添加剂对解冻后奶牛性控冻精质量及受胎率的影响

【目的】试验旨在研究以褪黑素和地诺前列腺素组成的复合添加剂对奶牛性控冻精解冻后精子质量及奶牛人工授精后受胎率的影响。【方法】30份奶牛性控冻精样均分为2组：试验组和对照组,试验组添加由24 ng/mL褪黑素、1.5 mg/mL地诺前列腺素及精液稀释液组成的250 μL复合添加剂,对照组添加250 μL精液稀释液,试验组和对照组均与解冻后的奶牛性控冻精按照1∶1（V/V）进行混合,室温孵育0、2及4 h,通过免疫荧光染色分析精子活率、顶体完整率、高能线粒体活性精子比率;对216头青年奶牛和82头头胎奶牛输精后通过28 d早孕检测来确定受胎率情况。【结果】与对照组相比,经复合添加剂处理0 h的性控冻精活率、顶体完整率及高能线粒体活性精子比率均无显著变化（P＞0.05）;经复合添加剂处理2 h的性控冻精活率、顶体完整率、高能线粒体活性精子比率均显著升高（P＜0.05）;经复合添加剂处理4 h的性控冻精活率和顶体完整率均无显著变化（P＞0.05）,高能线粒体活性精子比率显著升高（P＜0.05）。在输精试验中,试验组青年奶牛和头胎奶牛中的受胎率分别为65.22%和48.21%,均显著高于对照组（P＜0.05）。【结论】以褪黑素和地诺前列腺素组成的复合添加剂可以促进解冻后奶牛性控冻精精液品质以及青年奶牛和头胎奶牛输精后的受胎率。     

地中海水牛人工授精效果研究

[目的]为了解意大利地中海水牛冻精的授精效果及其在我国生长适应情况。[方法]利用国内首次引进意大利地中海水牛冻精与我国现有的摩拉、尼里——拉菲和本地水牛进行人工授精,试验选取自然发情的摩拉水牛20头,尼里水牛16头,本地水牛32头,年龄在2.5~9岁之间,采用直肠把握子宫角深部输精法,配种后40 d应用B超进行早期妊娠诊断怀孕情况。[结果]：摩拉、尼里——拉菲和本地水牛受胎率分别为50.00%、75.00%、56.25%,平均人工授精配种受胎率为58.82%,品种间人工授精受胎率差异不显著（P〉0.1）。[结论]表明引进地中海水牛冻精开展杂交组合,改良我国现有的水牛品种,提高其生产性能是切实可行的。     

南德温肉牛冻精应用效果调查

[目的]为了了解南德温牛冻精的受胎效果.[方法]选择607头母牛进行人工授精,并与西门塔尔牛受精效果(727头)进行对比.[结果]表明:南德温牛细管冻配受胎率达到92.3%,产子成活率达到95.6%,而西门塔尔牛细管冻配受胎率达到89.2%,产子成活率为90%.[结论]说明南德温牛的冻配在促进肉牛发展上具有较高的受胎率...     

BMY牛细管冷冻精液生产工艺及稀释液的筛选

[目的]为了增加精液数量,提高种公牛的利用率,降低精液能量消耗,补充适当营养和保护物质的活动延长精子的寿命,有利于精子的冷冻和保存。[方法]冷冻精液稀释液的筛选采用正交设计方法并使用L9（3^4）正交表安排试验,优选出冷冻保存效果最佳的稀释液配方,再用较好的稀释液进行比较试验,得出最理想的冷冻稀释液。对要进行试验的稀释液,试验时先将同一头BMY牛精液分成九等分,依次标记为1-9号,然后在精液中分别加入等量的对应编号的冷冻稀释液,进行稀释冷冻效果的比较。[结果]B糖不同水平之间的差异极显著（P〈0.01）,B1与B3的差异极显著,与B2的差异不显著,B2与B3的差异不明显;最佳的组合是A2B1C1。添加不同种氨基酸和水平的稀释液BMY牛精液冻精解冻效果均无明显差异（P〉0.05）,添加不同氨基酸和水平的稀释液稀释BMY牛原精的效果亦无明显差异。     

冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂对梅花鹿冻融精子质量的影响

【目的】 探究在冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂代替10%卵黄对梅花鹿精液冷冻保存效果的影响,为梅花鹿人工授精体系的完善提供参考。【方法】 采用电刺激法采集梅花鹿精液,以精液冷冻稀释液中分别添加1%、2%、3%、4%和5%大豆卵磷脂代替10%卵黄作为试验组,添加20%卵黄作为对照组,分别进行各组精液冷冻保存。5 d后,进行精液解冻,检测解冻后各组精子的活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性、存活时间,筛选合适浓度的大豆卵磷脂。选取4~5岁健康雌性梅花鹿,肌肉注射300 IU孕马血清促性腺激素（PMSG）和0.4 mg氯前列醇钠进行同期发情处理,发情后第20 h用20%卵黄组与筛选出的大豆卵磷脂组冻精进行人工输精,输精后30 d使用B超检测仪检测妊娠情况,统计妊娠率。【结果】 与对照组相比,1%大豆卵磷脂组冻融后的精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率及线粒体活性均显著提高（P<0.05）;随着稀释液中大豆卵磷脂浓度的增加,其冻融后精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率以及线粒体活性呈下降趋势,精子存活时间也随浓度的增加而减少。1%大豆卵磷脂组冻融精子人工授精梅花鹿的妊娠率为61.11%,高于对照组、2%和3%大豆卵磷脂组,但差异均不显著（P>0.05）。【结论】 在梅花鹿精子冷冻稀释液中添加1%大豆卵磷脂替代10%卵黄,能有效提高梅花鹿冻融精子的质量,为进一步筛选新型梅花鹿精液冷冻稀释液提供理论基础。     

湖羊初生重性状影响因素分析及遗传力估计

【目的】研究旨在分析场、出生季节、出生月份、出生类型和性别对湖羊初生重性状的影响,并估计该性状的遗传力。【方法】运用SAS 9.2软件对2021年新疆地区3个规模化湖羊养殖企业共计4 570只母羊所产的8 352只羔羊初生重作非遗传因素分析,使用DMU软件对湖羊初生重性状进行方差组分估计,并使用两种单性状动物模型估计该性状的遗传力,根据赤池信息准则(Akaike’s information criterion,AIC)确定最佳固定效应组合和动物模型。【结果】场、出生季节、出生月份、出生类型和性别对湖羊的初生重均有极显著影响(P＜0.01)。场1和场2羔羊初生重无显著差异(P＞0.05),且均极显著大于场3羔羊的初生重(P＜0.01);冬季出生的羔羊的初生重整体较大,其中以1月出生的羔羊初生重最大;出生类型越丰富,其羔羊初生重越小,各出生类型间羔羊初生重均呈现出极显著差异(P＜0.01);根据单性状动物模型(考虑母体效应)的计算得出,湖羊初生重性状的直接、母体、总体遗传力分别为0.251、0.668、0.211,属于中等遗传力。【结论】在对羊场首年的生产数据分析时,选用出生月份作为时令因素相比出生季节更为合适,不仅可以剖析各月份养殖单位湖羊的生产情况以做出相应的繁殖计划调整,而且选用月份固效组可增加性状遗传参数估计值的准确性;对于湖羊初生重性状在不考虑母体效应的情况下,会导致该性状的遗传力估计值偏大,故在受母体效应影响较大的早期阶段理应优先考虑母体效应。     

绵羊精液冷冻保存研究进展

绵羊精液保存技术目前虽然已进入生产应用阶段,但冷冻精液人工授精受胎率低仍是限制绵羊冷冻精液进行生产推广的重要因素。目前,对于绵羊精液冷冻的研究主要集中在冷冻稀释液组分和冷冻程序等方面。文章针对国内外有关绵羊精液冷冻保存稀释液、冷冻程序、解冻方法和冷冻损伤等研究进展作一综述,旨在对今后精液冷冻保存研究提供一定的参考。     

凉州区肉牛繁殖技术试验示范与推广研究

[目的]为筛选出适合凉州区肉牛繁殖的新模式。[方法]选择夏洛莱（XL）、利木辛（LM）、安格斯（AG）成年种公牛生产冻精,在西门塔尔和本地黄牛杂交一代（西本F1）成年母牛上实施人工授精,对杂交犊牛分月龄进行外貌体尺测定。[结果]XL冻精与西本F1代的后代体重、体高、体斜长、胸围、管围等生长指标均高于LM和AG后代指标。试验2方法是选择XL、LM、AG成年母牛生产冻胚,在成年母牛上实施胚胎移植,犊牛出生后进行外貌体尺测定。结果是：夏洛莱胚胎移植后代牛初生重、6月龄、12月龄体重、体高、体斜长、胸围、管围均高于利木辛与安格斯牛杂交后代（P〈0.01）。试验3方法是选择西杂F1和F2代母牛,用引进的XM（西门塔尔）牛X性控冻精实施人工授精,犊牛出生后统计相关数据。结果是：三组共授配母牛138头,情期妊娠75头,情期平均受胎率为54.1%,平均母犊率为90.3%。[结论]夏洛莱品种改良西杂一代牛后代生长发育比其余品种好;实施胚胎移植后,夏洛莱品种胚胎移植后代牛比其余品种在凉州区生长适应性强,适宜在该环境条件下生长;西门塔尔牛性控冻精的配种试验是成功的,是生产母犊的较好方法。     

内蒙古鄂尔多斯市澳美型细毛羊冷冻胚胎移植技术应用效果

通过冷冻胚胎移植技术,2007年和2008年前后分2批在鄂尔多斯细毛羊种羊场实施纯种澳美型细毛羊冷冻胚胎移植,共有371只（2007年266只,2008年105只）受体羊做了冷冻胚胎移植,共生产澳美型细毛羊羔羊106只（2007年70只,2008年36只）。其中公羔60只,母羔46只;受胎率分别为26.32%和37.14%;羔羊初生重为公羔（4.73±0.41）kg/只、母羔（4.54±0.43）kg/只和公羔（4.60±0.68）kg/只、母羔（4.45±0.55）kg/只。经过调查鉴定,用冷冻胚移植技术获得羔羊106只,经培养共获得纯种澳美型细毛羊106只,补充了优质澳美型细毛羊种羊的数量,大大增加了纯种澳美型细毛羊的种源数量、节省了引种费用、缩短了鄂尔多斯细毛羊改良世代间隔和选育提高周期,起到了加速优良种畜繁殖速度、迅速扩大种源的科技效应。     

母牛同期发情试验及受胎产犊效果观察

[目的]为了解决牛群分散,交通不变问题.[方法]本文利用同期发情处理方法,并为了观察牛同期发情及受胎产犊效果.在红塔、新平和元江分三批对102头母牛进行同期发情处理(放置阴道栓+注射氯前列烯醇),撤栓后根据发情情况用冷冻精液对97头母牛进行人工授精,[结果]表明同期发情率95.1%.150～160 d后对输精母牛进行妊...