平贝母鳞茎腐烂病病原菌鉴定和药剂筛选

为明确平贝母Fritillaria ussuriensis鳞茎腐烂病的病原菌及其防治, 对病原菌进行分离?致病性测定, 通过形态学特征?ITS rDNA?β-tubulin及EF-1α基因序列分析确定其病原为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum和芳香镰刀菌F.redolens?通过菌丝生长速率法, 对病原菌进行了室内药剂筛选, 表明8种药剂中25%多菌灵可湿性粉剂和43%戊唑醇悬浮剂对病原菌有更好的抑制作用, 处理第6天, EC50均不超过0.7 mg/L?对两种病原菌防效最好的药剂是戊唑醇, EC50分别为0.107?0.169 mg/L?这两种药剂可以选择应用于平贝母生产来防治茎腐病?     

基于DNA条形码技术对镰刀菌属的检测鉴定

为筛选合适的基因序列对镰刀菌属Fusarium真菌进行检测鉴定,以从不同寄主分离获得的11种57株镰刀菌为材料,选择nr DNA-ITS、EF-1α、mt SSU和β-tubulin作为候选基因,将序列获得的难易程度和种内与种间遗传距离频率分布作为评价指标,对测序获得的有效序列进行研究,筛选出该属的DNA条形码。结果表明:EF-1α基因具有较高的PCR扩增与测序成功率,为98.2%,较mt SSU和β-tubulin基因更容易获得序列片段;且种内与种间遗传距离重叠部分较少,除木贼镰刀菌F.equiseti种内遗传距离为0.029,大于黄色镰刀菌F.culmorum和禾谷镰刀菌F.graminearum种间遗传距离0.021外,种间差异明显大于种内差异,优于其它基因,能更好地区分镰刀菌;利用EF-1α基因序列构建的系统发育树显示,相同种聚集在同一分支,不同种划分在不同分支,鉴别能力较好;EF-1α基因不能扩增出其它6株非镰刀菌属的主要植物病原真菌,而对镰刀菌的PCR扩增效果很好,电泳检测结果条带单一、明亮。表明EF-1α基因可作为镰刀菌属鉴定的DNA条形码。     

云南省蓝莓茎基腐病病原菌鉴定及其生物学特性分析

为明确云南省蓝莓茎基腐病的病原菌种类及其生物学特性,从玉溪市江川区蓝莓种苗种植基地采集具有茎基腐病典型症状的蓝莓病株进行病原菌分离、纯化和致病性测定,对病原菌形态学特征进行观察并基于Act、H3、EF-1α和β-tub基因序列分析进行分子生物学鉴定,同时对病原菌的生物学特性进行室内测定。结果表明,分离到的病原菌纯化菌落为深棕色,菌丝白色至红褐色;大型分生孢子梗无色透明,长150～400μm,分枝末端产生2～4个瓶梗;囊泡球形或近球形,大小为15～23μm×6～15μm;大型分生孢子无色透明,直圆柱形,一端稍窄,大小为45～80μm×4～8μm。基于Act、H3、EF-1α和β-tub基因构建系统发育树,菌株BC-1、BC-2与冬青丽赤壳Calonectria ilicicola均聚在同一分支,结合形态学特征与系统发育分析结果,将云南省蓝莓茎基腐病病原菌鉴定为冬青丽赤壳C. ilicicola。病原菌对可溶性淀粉的利用效果最好,菌丝生长的最适氮源为蛋白胨,最适生长温度为25℃,最适pH范围为4～7。     

香榧果实褐斑病病原菌鉴定及防治药剂筛选

为明确近年来在香榧Torreya grandis果实上出现的一种新病害——褐斑病的病原菌,通过分离物致病性测定、形态学观察、rDNA-ITS序列分析及病原菌生物学特性进行鉴定,并对苯醚甲环唑、嘧菌酯、甲基硫菌灵、咪鲜胺、肟菌酯及吡唑醚菌酯6种防治药剂进行了初步筛选。结果表明,从病样中分离到的菌株XF01在回接试验出现的症状与田间自然感病症状一致,证明菌株XF01为香榧果实褐斑病的致病菌。该病原菌菌丝初为灰白色,后为深灰色或青褐色;分生孢子梗单生或簇生,无分枝,淡褐色;分生孢子多倒梨形或卵形,大小平均为19.258μm×9.048μm,横、纵隔膜分别为1~7个和0~3个,无喙或具柱状短喙,形态特征与链格孢菌Alternaria alternata一致。该菌ITS序列(Gen Bank登录号为KU525533)与链格孢菌株ITS序列(Gen Bank登录号为KR864893.1)同源性为100%,并聚为一簇,分子鉴定结果与形态学鉴定结果一致,确定引起该病害的病原菌为链格孢菌。该病菌菌丝生长、产孢和孢子萌发的最佳温度均为28℃,最适生长pH均为7。室内毒力测定结果显示,咪鲜胺对该菌菌丝生长的抑制效果最好,EC50为0.065μg/mL;吡唑醚菌酯对其孢子萌发的抑制效果最好,EC50为0.002μg/mL,表明这2种药剂可用于香榧果实褐斑病的田间防治。     

德国鸢尾茎基腐病病原菌鉴定及生物学特性分析

为明确德国鸢尾Iris germanica茎基腐病病原菌及其生物学特性,利用组织分离法对采自云南省的感茎基腐病德国鸢尾样品进行分离和纯化,通过形态学特征和ITS、TUB2、EF-1α多基因序列分析对其进行鉴定,采用室内离体和活体接种法测定其致病性,并研究其生物学特性。结果表明,从25份发病德国鸢尾植株样本中分离得到15株菌株,依据形态学特征和显微观察,发现其中6株菌株形态特征一致,另外9株菌株形态特征一致,从中各选1株代表菌株YWMZ1、YWJB3进行接种后出现叶片萎蔫,茎基部腐烂,发病症状与田间一致。经形态学特征观察、多基因序列分析、致病性测定最终将代表菌株YWMZ1鉴定为木贼镰刀菌Fusarium equiseti,菌株YWJB3鉴定为尖孢镰刀菌F. oxysporum。2株菌株菌丝最适培养温度均为25℃;菌株YWMZ1和YWJB3最适pH分别为5和7;2株菌株在5种碳源和氮源上均可生长,其中菌株YWMZ1最适碳源为可溶性淀粉,YWJB3最适碳源为蔗糖,2株菌株均以硝酸钾为最适氮源;菌株YWMZ1和YWJB3最适光照条件分别为连续光照和12 h明暗交替。     

陕西省小麦茎基腐病病原菌鉴定及其致病力分析

为明确陕西省小麦茎基腐病病原菌的组成及其致病力,于2019年小麦灌浆期在陕西省宝鸡市、咸阳市、西安市和渭南市共63个采样点采集具有茎基腐病典型症状的病株,对其进行组织分离,结合培养性状和形态学特征,以及利用ITS和EF-1α序列分析鉴定分离菌株所属类群,并对不同病原菌进行致病力分析。结果表明：共分离到224株菌株,基于形态学特征和分子生物学鉴定结果,其中201株菌株鉴定为假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum,3株菌株鉴定为禾谷镰刀菌F. graminearum,14株菌株鉴定为三线镰刀菌F. tricinctum,6株菌株鉴定为层出镰刀菌F. proliferatum,其中假禾谷镰刀菌占总分离菌株的89.73%,是陕西省小麦茎基腐病的优势病原菌。不同种的镰刀菌对小麦植株均有一定的致病性,但假禾谷镰刀菌的致病力最强,而且分离自不同地区或者同一地区的假禾谷镰刀菌株间的致病力也存在一定分化。     

黑龙江省高粱靶斑病病原菌的鉴定及其生物学特性

为明确黑龙江省高粱靶斑病病原菌种类及其生物学特性，采用组织分离法对采集自黑龙江省8个地区的75份高粱病叶进行病原菌分离，利用形态学特征观察及分子生物学技术对选取的代表菌株进行鉴定，并分析其生物学特性。结果表明，共分离得到42株病原菌菌株，按采集地选择的8株代表菌株的菌丝生长速率不同，但形态学特征较一致，分生孢子为棕黄色，呈圆柱形，中部较宽，稍弯曲，大小为29~96 μm×9~15 μm，具3~9个隔膜，脐点明显，基部平脐；8 株代表菌株的ITS序列与高梁生双极蠕孢菌Bipolaris sorghicola（GenBank登录号为AF071332.1）的同源性为99%~100%；结合形态学特征和ITS序列分析确定黑龙江省高粱靶斑病病原菌为高梁生双极蠕孢菌B. sorghicola。8株代表菌株在燕麦片琼脂培养基上生长最好，但不同菌株的菌丝生长速率存在差异；在10~35℃范围内均能生长，但不同菌株的最适生长温度不同；光照对菌丝生长有促进作用；最适生长的pH为8；不同菌株对碳、氮源的利用差异较大，表明高粱生双极蠕孢菌菌株间存在生物学特性差异。     

贵州八角叶枯病病原菌鉴定及生物学特性研究

为明确引起贵州八角叶枯病的病原种类及其生物学特性, 本研究采用单孢分离法获得3个菌株, 经形态学特征鉴定结合ITS?tef1和TUB多基因序列分析, 3个菌株均被鉴定为庐山拟盘多毛孢Pestalotiopsis lushanensis, 这是该菌在八角上引起叶枯病的首次报道?生物学特性研究表明, 该菌菌丝生长和孢子萌发最佳温度为25℃, 最适pH为6~7, 菌丝致死温度为50℃处理10 min, 分生孢子致死温度为55℃处理10 min?     

澳洲坚果褐腐病的病原菌鉴定及生物学特性

对云南景洪发生的澳洲坚果果实褐斑病进行了病原菌分离鉴定和生物学特性研究。经致病性测定、形态学和分子生物学鉴定,病原菌为Calonectria pentaseptata。生物学特性研究表明,该菌菌丝生长的适温为25~30℃,孢子萌发的适温为20~25℃,光照对菌丝生长影响不明显,紫外光对分生孢子的萌发有显著影响,不同的糖溶液可促进分生孢子的萌发。     

辽宁梨树枝枯病病原菌Diplodia seriata的分离与鉴定

在辽宁兴城秋子梨栽培园出现一种新型枝干病害,主要症状为枝枯及木质部坏死。为明确梨树枝枯病病原菌的分类地位,本研究从辽宁兴城地区采样,经过菌株分离培养和致病性测定,以及形态学鉴定结合病原菌的ITS、EF-1α和β-tubulin多基因联合构建系统发育树,确定引起秋子梨枝枯病的病原菌为色二孢Diplodia seriata。研究结果为明确色二孢引起的辽宁梨树枝枯病发生规律和防治措施的制定提供了理论基础。     

Relationships of <Emphasis Type="Italic">Barley yellow dwarf virus</Emphasis>-PAV and <Emphasis Type="Italic">Cereal yellow dwarf virus</Emphasis>-RPV from Iran with viruses of the family <Emphasis Type="Italic">Luteoviridae</Emphasis>

Barley yellow dwarf disease is one of the most important problems confronting cereal production in Iran. Barley yellow dwarf virus-PAV (BYDV-PAV) and Cereal yellow dwarf virus-RPV (CYDV-RPV) are the predominant viruses associated with the disease. One isolate of BYDV-PAV from wheat (PAV-IR) and one isolate of CYDV-RPV from barley (RPV-IR) were selected for molecular characterisations. A genome segment of each isolate was amplified by PCR. The PAV-IR fragment (1264 nt) covered a region containing partial genes for coat protein (CP), read through protein (RTP) and movement protein (MP). PAV-IR showed a high sequence identity to PAV isolates from USA, France and Japan (96–97%). In a phylogenetic analysis it was placed into PAV group I together with PAV isolates from barley and oats. The fragment of RPV-IR (719 nt) contained partial genes for CP, RTP and MP. The sequence information confirmed its identity as CYDV. However, RPV-IR showed 90–91% identity with both RPV and Cereal yellow dwarf virus-RPS (CYDV-RPS). Phylogenetic analyses suggested that it was more closely related to RPS. These data comprise the first attempt to characterise BYD-causing viruses in Iran and southwest Asia. The nucleotide sequence data reported appear in the EMBL, GenBank and DDBJ Nucleotide Sequence Databases under the accession numbers AY450425 and AY450454     

浅黄恩蚜小蜂和丽蚜小蜂对温室白粉虱的寄生潜能分析

浅黄恩蚜小蜂Encarsia sophia GiraultDodd和丽蚜小蜂Encarsia formosa Gahan是防治粉虱类害虫的优势寄生蜂,通过生命表技术方法分析了2种寄生蜂对温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum(Westwood)的防治潜能。结果表明,丽蚜小蜂在羽化第3天和第10天出现2次寄生高峰,占其总寄生量的13.7%和8.0%,在2次高峰之间逐日寄生粉虱数量比较平稳,单雌逐日平均产雌数保持在10.6~13.4头,10 d后寄生量呈明显的下降趋势;而浅黄恩蚜小蜂羽化10 d内逐日寄生粉虱量变化不大,单雌逐日产雌数稳定在4.2~5.4头,羽化14 d后寄生量呈明显下降趋势。丽蚜小蜂和浅黄恩蚜小蜂的R0、T、rm、λ值分别为171.5、18.0、0.2854、1.3303和61.6、16.2、0.2544、1.2897;粉虱若虫充足时,丽蚜小蜂平均单雌寄生若虫数是浅黄恩蚜小蜂的2.7倍,而后者平均单雌取食若虫数为60.6头,明显高于前者42.7头,总的来看,丽蚜小蜂通过寄生和取食杀死粉虱总量220.8头,明显高于浅黄恩蚜小蜂的127.9头。表明在应用寄生蜂防治温室白粉虱时,单独释放丽蚜小蜂比浅黄恩蚜小蜂显示出更好的防治潜能。     

桃蚜体内次生共生菌沙雷氏菌对宿主抵御寄生蜂和高温胁迫的影响

为明确桃蚜Myzus persicae体内次生共生菌沙雷氏菌Serratia symbiotica对宿主抵抗不良环境的影响,利用叶碟法测定短翅蚜小蜂Aphelinus asychi对自然感染沙雷氏菌桃蚜、自然未感染沙雷氏菌桃蚜和人工感染沙雷氏菌桃蚜的寄生特性和取食特性,并测定烟蚜茧蜂Aphidius gifuensis对这3种处理桃蚜的寄生特性及这3种处理桃蚜经高温胁迫后的生长繁殖特性。结果显示,短翅蚜小蜂在人工感染沙雷氏菌桃蚜上的产卵率比在自然未感染沙雷氏菌桃蚜上的下降近1/2,羽化率下降1/3左右,致死率、取食率、僵蚜率均无显著差异;烟蚜茧蜂对这3种处理桃蚜的致死率、过寄生率、僵蚜率及其产卵率和羽化率等均无显著差异;这3种处理桃蚜的2龄若蚜经高温胁迫后,发育时间和寿命均显著延长,开始产蚜时间明显推迟,繁殖力和日繁殖率显著降低,繁殖历期无明显变化;高温胁迫后,人工感染沙雷氏菌桃蚜比自然未感染沙雷氏菌桃蚜开始产蚜时间提前3.9 d,繁殖力增加7.0头。表明人工感染沙雷氏菌可以提高桃蚜对短翅蚜小蜂和高温胁迫的防御作用,对烟蚜茧蜂的寄生无明显效果。     

Nematicidal Activity of Chrysanthemum coronarium

Organic amendments and green manure are potential alternatives to the harmful chemical control means currently used against plant-parasitic nematodes. In this work, Chrysanthemum coronarium was applied to the soil as a green manure to control the root-knot nematodes Meloidogyne incognita and M. javanica. Chrysanthemum coronarium significantly reduced nematode infection of tomato roots and improved plant-top fresh weight, both in the greenhouse and in microplots. Other green manures, derived from Anthemis pseudocotula, wild chickpea (Cicer pinnatifidum), Geranium spp. and wheat, were not as effective as C. coronarium. Chrysanthemum coronarium, retained its nematicidal activity even when applied as a dried material. Only mature C. coronarium plants, in their flowering stage, exhibited nematode control activity, but the green plant parts were more effective than the flowers. An aqueous extract of C. coronarium exhibited in vitro, nematostatic activity towards M. incognita and M. javanica second-stage juveniles and inhibited their hatching from eggs and egg-masses; its nematostatic activity was expressed also against other phytonematode species such as Heterodera avenae and Pratylenchus mediterraneus, but did not affect the beneficial entomopathogenic nematode Steinernema feltiae.     

两种蚜小蜂对烟粉虱MED隐种的田间笼罩控效评价

为明确烟粉虱Bemisia tabaci MED隐种优势寄生蜂海氏桨角蚜小蜂Eretmocerus hayati ZolnerowichRose与浅黄恩蚜小蜂Encarsia sophia GiraultDodd对其控制效果的影响,在棉田尼龙纱网笼罩中释放烟粉虱之后,再分别单独释放海氏桨角蚜小蜂、浅黄恩蚜小蜂以及二者以不同比例组合(1∶1、1∶3、3∶1)释放,定期调查统计2种蚜小蜂对烟粉虱的寄生量和烟粉虱的种群动态。结果表明,相对于不放蜂对照,自首次放蜂后40 d开始,所有放蜂处理均能显著降低烟粉虱若虫种群密度,每100 cm~2叶片上均少于1.00头,但各处理间的烟粉虱种群密度无显著差异;海氏桨角蚜小蜂和浅黄恩蚜小蜂以3∶1比例组合释放的处理中对烟粉虱的寄生量最高,每100 cm~2棉花叶片上能达到4.25头。表明在棉田中对烟粉虱进行生物防治时,以初级寄生蜂海氏桨角蚜小蜂与复寄生蜂浅黄恩蚜小蜂为3∶1的比例释放,可以到达较好的控制效果。     

湖南桔园主要天敌对柑桔全爪螨的捕食作用及其综合评定

1984-1988年调查了湖南桔园主要天敌——尼氏钝绥螨、深点食螨瓢虫、塔六点蓟马、中华草蛉、龟纹瓢虫的田间消长动态,测定了它们对柑桔全爪螨的捕食功能反应,均属于Holling Ⅱ型。5种主要天敌中,尼氏钝绥螨发生量最多,与柑桔全爪螨数量相关极为显著:中华草蛉的日捕食量最大,对柑桔全爪螨处置时间最短;深点食螨瓢虫食性较专一,对柑桔全爪螨瞬时攻击率最高。根据每种天敌的发生量、发生期、捕食能力及抗药性等4个因素,应用模糊分级方法综合评定对柑桔全爪螨控制作用大小依次为:尼氏钝绥螨、深点食螨瓢虫、塔六点蓟马、中华草蛉、龟纹瓢虫。这些天敌的综合作用可以控制正常年份柑桔全爪螨的为害。     

Detection of the phytotoxin coronatine by ELISA and localization in infected plant tissue

Several pathovars of Pseudomonas syringae produce the phytotoxin coronatine (COR)in vitro, and the availability of purified toxin has facilitated development of immunological detection methods. A modified, indirect competitive ELISA using the COR-specific monoclonal antibody 11B8 was developed to detect COR in various host plants infected by P. syringae. The estimated detection limit for COR was 50 pg per well, and COR could be reliably quantified from 5 to 40 ng ml⁻¹. The subcellular localization of COR within infected tomato tissue was investigated using the COR-specific antibody MAb 8H3G2. Immunofluorescence microscopy and immunogold labelling showed that COR was present inside tomato cells and was associated with chloroplasts and particles of proteinase inhibitor I. Localization studies indicated that COR is mobile in infected plant tissue and can be detected in healthy tissue adjacent to the bacterial lesions.     

玫烟色虫草和球孢白僵菌对朱砂叶螨和二斑叶螨的致病力评价

为探寻具有杀螨潜力的生防真菌,采用喷雾法测定分析玫烟色虫草Cordyceps fumosorosea IF-1106菌株和球孢白僵菌Beauveria bassiana BB-1339菌株对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus和二斑叶螨Tetranychus urticae卵、幼螨及雌成螨的致病力。结果表明,感染玫烟色虫草IF-1106菌株和球孢白僵菌BB-1339菌株后螨类的形态特征不一致,感染IF-1106菌株后形成棉絮状菌丝,而感染BB-1339菌株后则形成羊毛状菌丝。IF-1106菌株和BB-1339菌株对朱砂叶螨和二斑叶螨卵的LC₅₀分别为2.38×10⁷、8.26×10⁷CFU/mL和4.48×10⁷、1.21×10⁸CFU/mL,对朱砂叶螨和二斑叶螨幼螨的LC₅₀分别1.97×10⁷、8.26×10⁷CFU/mL和7.65×10⁶、8.99×10^5...     

对大黑鳃金龟甲幼虫高效的苏云金芽胞杆菌筛选及cry基因鉴定

为获得对大黑鳃金龟甲幼虫具有较高杀虫活性的菌株,利用拌土法测定了本实验室分离的500株苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对大黑鳃金龟甲的杀虫活性,建立Bt菌株比较鉴别技术来进行多样性分析,并对菌株的晶体形态及幼虫感染Bt后的中肠组织切片进行观察。结果显示,从500株Bt菌株中筛选到42株对大黑鳃金龟甲幼虫具有不同程度活性的菌株,分属于14个菌株类型;其中有10株校正死亡率大于60%,261-1菌株杀虫活性最高,7 d校正死亡率达100%。从14个菌株类型中各选取1个代表菌株进行基因鉴定,仅P65-1、1126-1、FCD114和78-2菌株分别含有cry8Ma、cry8Ca、cry8Ab、cry8Ga、cry8Ea共5个cry8类新基因,其它10个菌株均不含cry3、cry8、cry18、cry23、cry37、cry43等对鞘翅目害虫有效的杀虫基因。14个菌株中,78-3、127-2和1198-1菌株能产生双锥体型晶体,261-1、FCD114、P65-1、FTL84、78-2和1126-1菌株能产生球形晶体。幼虫感染261-1、1198-1、FCD114、1126-1、QDL40-2菌株后,中肠组织发生明显的病理变化:2 d时肠壁细胞明显出现空洞化,排列疏松,4 d时受到严重破坏并脱离底膜。表明筛选到的Bt菌株具有防治大黑鳃金龟甲幼虫的潜力。