利用苏云金芽胞杆菌非芽胞特异性的启动子表达cry1Ac10和cry1C基因

利用重叠延伸ＰＣＲ技术,将苏云金芽胞特异性的ｃｒｙ３Ａ基因的启动子替换ｃｒｙ１Ａｃ１０和ｃｒｙ１Ｃ基因的启动子序列,并用ｃｒｙ１Ａｃ１０基因的终止序列,替换ｃｒｙ１Ｃ基因终止密友子下淳的序列,得到改造的ｃｒｙ１Ａｃ１０和ｃｒｙ１Ｃ基因,改免与其内源杀虫晶体蛋白基因竞争转录因子（σ因子）从而提高杀虫晶体蛋白的表达量,为构建高效杀虫工程菌提供了有效的基因。     

Bt水稻"克螟稻"杂交后代中转基因的遗传表达及育种利用

利用GUS反应检测了Bt转基因粳稻(克螟稻)与籼稻、粳稻杂交的不同世代群体的叶片染色情况,结果发现粳粳交F2出现抗性株与非抗性株的3∶1的分离,籼粳交的BC1出现1∶1分离,籼粳交的BC1F2出现3∶1分离,表明转基因在杂交后代的传递属单基因显性遗传.利用Western 点杂交技术结果发现F1、F2 和BC1代的Bt蛋白表达量均超过转基因株供体,呈现出表达能力上的杂种优势.农艺性状考察结果发现,无论是籼粳交,还是粳粳交后代,两者在株高、穗长、单株分蘖数、播始历期和千粒重上无显著差异.这无疑为Bt水稻的育种利用提供了良好的证据.     

Bt水稻“克螟稻”杂光后代中转基因的遗传表达及育种利用

利用ＧＵＳ反应检测了Ｂｔ转基因粳稻（克螟稻）与籼稻、粳稻杂交的不同世代群本的叶片染色情况,结果发现粳粳交Ｆ２出现抗性株与非抗性株的３：１的分离,籼粳交的ＢＣ１出现１：１分离,籼粳交的ＢＣ１Ｆ２出现３：１分离,表明转基因在杂交后代的传递属单基因显性遗传。利用Ｗｅｓｔｅｒｎ点杂交技术结果发现Ｆ１、Ｆ２和ＢＣ１代的Ｂｔ蛋白表达量均超过转基因株供体,呈现出表达能力上的杂种优势。农艺性状考察结果发现,无论是     

苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry218的克隆和表达

从对棉铃虫高毒力的苏云金芽胞杆菌２１８菌株中克隆到杀虫晶体蛋白基因ｃｒｙ２１８，限制性内切酶图谱表明该基因属于ｃｒｙ１Ａｃ基因。改造了两个质粒载体，并以此将ｃｒｙ２１８基因克隆到Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０３和苏云金芽胞杆菌无晶体突变株Ｂｔｉ７８／１１中，重组菌均表达１３０ｋＤ蛋白质，对小菜蛾的杀虫率在稀释１０００倍和３０００倍时可分别达到９０％以上和８０％以上。     

Cry1Ab转基因水稻的杂种优势表现及抗虫性鉴定

以携带Cry1Ab基因的"克螟稻"为抗虫供体亲本,将目标基因转导到优良恢复系"R6547"、"R818"中,配制的杂交稻组合表现良好的杂种优势水平,克服了"克螟稻"在常规粳稻育种实践中常出现的农艺性状差、前期生长势弱的缺陷。可溶性蛋白含量检测结果显示目标基因在杂交稻中仍能高水平的表达,并在人工接虫和自然发生条件下对稻纵卷叶螟、二化螟等鳞翅目害虫表现优良抗性。     

苹果属(Malus)显性矮化主基因Dw的RAPD分子标记

以具兼性无融合生殖特性的优良苹果砧木平邑甜茶与主基因显性矮化资源“扎矮７６”杂交所获得的实生后代中的有性杂种群体为试材,采用集群分析法共筛选７３０个Ｏｐｅｒｏｎ随机引物或引物组合,获得２个与Ｄｗ基因连锁的ＲＡＰＤ标记,分别是Ｆ０４－８００和Ｆ０３－１１５０,且与Ｄｗ基因的连锁距离分别是１４．０ ｃＭ和２５．５ｃＭ。     

苏云金芽胞杆菌cry1A基因启动子上激区不同位点突变对BtI—la …

利用苏云金芽胞杆菌ｃｒｙ１Ａ启动子上游区的不同突变体,观测对ＢｔＩ－ｌａｃＺ融合基因表达的影响。结果发现,突变上游弯曲区,导致ＢｔＩ－ｌａｃＺ在菌标８０－２１中的酶活性大幅度下降,均比未突变的上游区降低２－２．５倍。而在菌株ＨＤ１３３－５中却出现相反的结果,即上游弯曲区的突变导致ＢｔＩ－ｌａｃＺ的表达比未突变体增高。如果同时突变弯曲区和反射重复区,则ＢｔＩ－ｌａｃＺ在菌 表达增强或下降的幅度大大减     

与黄原胶生物合成相关的"1.9" kb EcoRI DNA片段的序列测定分析

对Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ（下称Ｘｃｃ）８００４菌株染色体基因组中９．４ｋｂＨｉｎｄⅢＤＮＡ的“１．９”ｋｂＥｃｏＲＩ酶切片段的测序分析结果表明,该ＥｃｏＲＩＤＮＡ片段的实际长度为１．８８ｋｂ。在核苷酸水平上与Ｘｃｃ的ｇｕｍ基因有９８％的一致性;这一ＥｃｏＲＩ片段上有两个有意义的ＯＲＦ：ＯＲＦ１和ＯＲＦ２。ＯＲＦ１是一个不完整的ＯＲＦ;在氨基酸水平上,ＯＲＦ１和ＯＲＦ２的推断性编码产物蛋白分别与ｇｕｍＡ基因编码的ＧｕｍＡ及ｇｕｍＢ基因编码的ＧｕｍＢ蛋白有１００％的一致性。因此在１．８８ｋｂＥｃｏＲＩ片段上存在一完整的ｇｕｍＢ基因。     

用两个抗虫基因分别转化水稻及抗虫株系的获得

用水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａＬ．）的幼胚、愈伤组织作受体,采用ＰＩＧ基因枪法,成功地将苏云金杆菌毒蛋白基因〖Ｂｔ毒蛋白基因,ｃｒｙＩＡ（ｂ）〗和马铃薯蛋白酶抑制剂基因（ｐｉｎⅡ基因）连同抗除草剂Ｂａｒ基因分别转入不同的水稻中,获得大量的转基因植株。Ｓｏｕｔｈｅｎ杂交分析途中外源抗虫基因均分别整合到水稻的基因组中。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析显示它们在水稻叶片中表达的水平较高。外源基因在一代中遵循３     

水稻淀粉分支酶基因(RBE4)作为转基因水稻基体标准物质的内标准基因的研究

内标准基因(endogenous reference gene)是指具有物种专一性、不显示等位基因变化、拷贝数恒定的保守DNA序列,对基因定量分析时具有重要意义.本研究选取了5个水稻内标准基因:根部表达的水稻基因(rice root-specific,GOS9)、磷脂酶D基因(phospholipase D,PLD)、蔗糖磷酸合成酶基因(sucrose phosphate synthase,SPS)、水稻淀粉分支酶基因(rice starch branching enzyme,RBE4)、泛素蛋白基因(ubiquitin 5,UBQ5)和2个外源基因:苏云金芽孢杆菌CrylAb杀虫晶体蛋白基因CrylAb和cryl Ab/cryl Ac融合杀虫晶体蛋白基因(CrylA c/CrylAb),分别以转基因水稻(Oryza sativa L.)克螟稻2号和TT51-1为模板,比较各自的外源基因(CrylAb =KMD2和CrylA c/CrylA b=TT51-1)与5个内源基因的PCR产物量,筛选出和外源基因PCR产物量最接近的内标准基因为RBE4.在此基础上,数字PCR不依赖于已知浓度的标准曲线来定值,可以避免标准样品的标准曲线和样品目的基因的扩增曲线在扩增效率上的不一致等因素所带来的误差,定值结果更加准确、可靠,采用数字PCR分析外源基因拷贝数与内标准基因RBE4拷贝数的比值,荧光定量PCR方法分析内标准基因RBE4和外源基因的定量检测稳定性、灵敏度等.结果表明,外源基因拷贝数与内标准基因RBE4拷贝数的比值在转基因水稻克螟稻2号和TT51-1上都较接近于1∶1,分别为115.9％和105.3％.RBE4的荧光定量PCR体系重复性、定量检测稳定性和灵敏度好,符合作为转基因水稻基体标准物质定量分析的内标准基因的要求,RBE4定量体系在TT51-1和克螟稻2号的最小检出限(LOD)分别为5～11 copies/μL和3～12 copies/μL,最小定量限(LOQ)分别为11～22和12～24 copies/μL.RBE4是转基因水稻标准物质研制和产品定量检测的适宜内标准基因.研究结果为转基因作物标准物质研制和定量检测的内标准基因选取提供一定的参考.     

生态冷漠症的“诊”与“治”

当今有一部分政府官员患有生态冷漠症,其表现有3种,即面对持续恶化的生态环境麻木不仁,生态建设取得一点成绩便盲目乐观,发生了生态安全问题就怨天尤人。医治生态冷漠症应重点抓好以下3个方面的工作:紧密结合工作实际,切实加强对广大干部的科学发展观教育;完善和推行绿色GDP核算标准,加强对各级政府及其官员的考核;制定和完善有关法律法规,加大对政府行为的约束力度。     

Characterization of aroma compounds of chinese "Wuliangye" and "Jiannanchun" liquors by aroma extract dilution analysis

Aroma compounds in Chinese "Wuliangye" liquor were identified by gas chromatography-olfactometry (GC-O) after fractionation. A total of 132 odorants were detected by GC-O in Wuliangye liquor on DB-wax and DB-5 columns. Of these, 126 aromas were identified by GC-mass spectrometry (MS). Aroma extract dilution analysis (AEDA) was further employed to identify the most important aroma compounds in "Wuliangye" and "Jiannanchun" liquors. The results showed that esters could be the most important class, especially ethyl esters. Various alcohols, aldehydes, acetals, alkylpyrazines, furan derivatives, lactones, and sulfur-containing and phenolic compounds were also found to be important. On the basis of flavor dilution (FD) values, the most important aroma compounds in Wuliangye and Jiannanchun liquors could be ethyl butanoate, ethyl pentanoate, ethyl hexanoate, ethyl octanoate, butyl hexanoate, ethyl 3-methylbutanoate, hexanoic acid, and 1,1-diethoxy-3-methylbutane (FD > or = 1024). These compounds contributed to fruity, floral, and apple- and pineapple-like aromas with the exception of hexanoic acid, which imparts a sweaty note. Several pyrazines, including 2,5-dimethyl-3-ethylpyrazine, 2-ethyl-6-methylpyrazine, 2,6-dimethylpyrazine, 2,3,5-trimethylpyrazine, and 3,5-dimethyl-2-pentylpyrazine, were identified in these two liquors. Although further quantitative analysis is required, it seems that most of these pyrazine compounds had higher FD values in Wuliangye than in Jiannanchun liquor, thus imparting stronger nutty, baked, and roasted notes in Wuliangye liquor.     

The "oxygen paradox" of dinitrogen-fixing bacteria

N₂ fixation by aerobic bacteria is a very energy demanding process, requiring efficient oxidative phosphorylation, while O₂ is toxic for the nitrogenase complex. N₂-fixing bacteria have evolved a variety of strategies to cope with this apparent "O₂ paradox". This review compares strategies that azospirilla and other well-known N₂-fixing soil bacteria use to overcome this O₂ paradox. Attention will be given to the relationships between the natural habitat of these soil bacteria and their prevailing adaptations. In view of this knowledge the following questions will be addressed: are the specific adaptations observed in azospirilla sufficient to allow optimal proliferation and N₂ fixation in their natural habitat? Could improving the O₂ tolerance of the N₂-fixing process contribute to the development of more efficient strains for the inoculation of plants?     

试论将“水土保持”改称“水土生态保持”的科学性

我国“水土保持”一词的提出已有60多年的历史,而治理水土流失的历史则可以追溯到西周初期(公元前16~11世纪)。水和土是陆地生态系统重要的生态因子,而以水和土为首要立地条件的生态植被,是陆地生态系统的第一性生产者,也是水土保持生态效益的直接承担者,所以植被的保护和恢复是水土保持不可或缺的重要部分,生态保护和生态与环境的改善愈来愈成为水土保持不可分割的重要内容。从水土保持的历史和当今不断丰富的水土保持实践来看,应将传统的“水土保持”称谓改称“水土生态保持”,这样更符合水土保持学科发展的需要,能够反映当前水土保持实践,有利于提高全社会对水土保持生态建设的认知度,有利于水土保持的行业管理。     

"数字黄土高原"到"数字水土保持"

立足于黄土高原水土保持与生态环境建设及其科学研究的要求和空间信息科学技术发展的最新动态，通过：数字黄土高原”建立的时代背景及其技术背景，讨论了“数字黄土高原”研究与建设的目标，基本内容，关键技术环节（包括数据库结构，数据集成方法，数据更新，元数据体系建设和数字共享机制）和推广应用等，初步讨论了“数字水土保持”及其与国家空间数据基础设施（NSDI）建设的关系。     

"林 - 蛙 - 鱼"生态农业模式研究

对杨树 虎纹蛙 罗非鱼("林 - 蛙 - 鱼")生态农业模式进行了3年的研究.结果表明,"林 - 蛙 - 鱼"立体种养生态农业模式经济效益明显,250 m2种养池当年可产生经济效益4 800元左右."林 - 蛙 - 鱼"立体种养生态农业模式也取得了良好的生态效益和社会效益,表现在改善生态环境、维护生物多样性、带动农民发展生产、教育青少年等方面,实现了生态效益、经济效益和社会效益的同步发展.     

Sorption-desorption of "aged" sulfonylaminocarbonyltriazolinone herbicides in soil

Sorption-desorption interactions of pesticides with soil determine the availability of pesticides in soil for transport, plant uptake, and microbial degradation. These interactions are affected by the physical and chemical properties of the pesticide and soil, and for some pesticides, their residence time in the soil. The objective of this study was to characterize sorption-desorption of two sulfonylaminocarbonyltriazolinone herbicides incubated in soils at different soil moisture potentials. The chemicals were incubated in clay loam and loamy sand soils for up to 12 wks at -33 kPa and at water contents equivalent to 50 and 75% of that at -33 kPa. Chemicals were extracted sequentially with 0.01 N CaCl(2) and aqueous acetonitrile, and sorption coefficients were calculated. Sufficient sulfonylaminocarbonyltriazolinone herbicides remained (>40% of that applied) during incubation to allow calculation of sorption coefficients. Aging significantly increased sorption as indicated by increased sorption coefficients. For instance, for sulfonylaminocarbonyltriazolinone remaining after a 12-wk incubation at -33 kPa, K(d) increased by a factor of 4.5 in the clay loam soils and by 6.6 in the loamy sand as compared to freshly treated soils. There was no effect of moisture potential on sorption K(d) values. These data show the importance of characterization of sorption-desorption in aged herbicide residues in soil, particularly in the case of prediction of herbicide transport in soil. In this case, potential transport of sulfonylaminocarbonyltriazolinone herbicides would be over-predicted if freshly treated soil K(d) values were used to predict transport.     

关于加大生态龙南建设力度的思考

龙南县实施生态立县战略取得了令人瞩目的成绩,但仍存在一些问题与不足。在论述生态龙南建设的重要意义、指出建设中存在的问题与不足的基础上,认为加强生态龙南建设的途径和措施有:切实加强对生态龙南建设的领导;加大生态文化建设力度;制定生态龙南建设规划及年度实施计划;建立生态龙南建设的政策法规体系;制定生产建设项目并联审批制度;取缔有碍生态龙南建设的落后产业及工艺;整合与生态建设有关的项目资金,集中投入,发挥其乘数效应。     

关于坡耕地土壤"翻滚侵蚀"的研究

所谓“翻滚侵蚀”,就是指坡耕地土壤在受到人为外力的作用下,而产生向下翻动、滚动和下切的侵蚀现象,其主要发生在坡耕地的耕作上,当在坡耕地上耕作时,每趟一遍地,其土壤就向下翻滚一点和下切一点,当坡度越大其翻滚的程度就越大,也就是说产生的翻滚侵蚀就越大。这种“翻滚侵蚀”现象在山区、丘陵区、漫川漫岗区的坡耕地耕作中是十分突出和十分严重的,不能不引起我们对它的高度重视。     

"3414"肥料试验模型拟合的探讨

以UNDP95-98年在河北唐山进行的27个3414冬小麦试验为例,研究了三元二次施肥模型与一元施肥模型对3414肥料试验结果的拟合情况。结果表明,三元二次施肥模型进行拟合试验成功率仅为56%,而采用一元施肥模型可以对全部试验进行数据处理。在同一试验中,与一元施肥模型相比,采用三元二次施肥模型计算的推荐施肥量偏高;根据一元施肥模型拟合计算分别有15%、44%、67%的点不需要施用N、P、K肥,而采用三元二次施肥模型则无法获得这一信息。因此,在3414试验中,一元施肥模型是三元二次施肥模型拟合的一种很好补充和优化手段。