几种食用菌子实体总DNA提取方法的比较研究

[目的]比较选择适宜的不同食用菌子实体总DNA的提取方法。[方法]采用CTAB法、SDS法和CTAB-SDS结合法,对5种食用菌子实体[平菇（Pleurotus ostreatus）、香菇（Lentinula edodes）、金针菇（Flammlina velutiper）、羊肚菌（Morehella esallenta）和北虫草（Cordyceps sinensis）]总DNA进行提取,并用琼脂糖凝胶电脉进行检测。[结果]在几种提取方法中,平菇与金针菇宜采用SDS常温离心提取法,香菇宜采用SDS低温离心提取法,北虫草宜采用SDS-CTAB低温离心提取法,羊肚菌宜采用CTAB常温离心提取法和SDS常温离心提取法。[结论]该研究可为几种食用菌子实体的分子水平和基因工程研究奠定基础。     

一步法提取大豆孢囊线虫DNA

本文详细介绍了一种快速提取大豆孢囊线虫DNA的方法，包括提取液的配制过程，提取DNA的步骤、PCR扩增的反应体系以及循环参数。     

酚/氯仿抽提法提取绵羊凝血块中基因组DNA

［目的］对组织DNA提取方法进行改进,建立一种从绵羊凝血块中提取基因组DNA的方法。［方法］将绵羊凝血块用眼科剪剪碎,用组织DNA抽提液裂解细胞,用蛋白酶K消化后,经过酚/氯仿抽提,无水乙醇沉淀获得基因组DNA。［结果］提取的DNA浓度为（159.90±0.70）ng/μl,A260/A280比值为1.80±0.01,分子完整,结果理想。以从凝血块中提取的DNA为模板,对绵羊BM203微卫星位点进行了PCR扩增,扩增效果良好。［结论］该方法简单、实用,提取的DNA可满足后续相关研究对DNA质量的要求,值得推广借鉴。     

酚／氯仿抽提法提取绵羊凝血块中基因组DNA

[目的]对组织DNA提取方法进行改进,建立一种从绵羊凝血块中提取基因组DNA的方法。[方法]将绵羊凝血块用眼科剪剪碎,用组织DNA抽提液裂解细胞,用蛋白酶K消化后,经过酚／氯仿抽提,无水乙醇沉淀获得基因组DNA。用NanoDropND-1000微型分光光度计检测DNA浓度和纯度。用0．8％琼脂糖凝胶电泳检验基因组DNA的完整性。以绵羊微卫星位点BM203为扩增位点,分别以F：5’-GG（汀G11：AcAmGTTCCC-3’,R：5’-CTGCTCCCCACTACTCCTTC-3’为上下游引物,进行PCR扩增试验。PCR产物用1．5％琼脂糖凝胶电泳检测．[结果]提取的DNA浓度为（159．90±0．70）ng／μl,A260／A280比值为1．80±0．01,分子完整,结果理想。以从凝血块中提取的DNA为模板,对绵羊BM203微卫星位点进行了PCR扩增,扩增产物条带整齐、明亮、特导性强,扩增效果好。[结论]该方法简单、实用,提取的DNA可满足后续相关研究对DNA质量的要求,值得推广借鉴。     

不同提取条件对DNA质量的影响

以大豆、玉米的茎、叶片为材料,采用酚-氯仿法提取DNA。通过不同提取条件获得DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测,发现适当的水浴时间为90m in到120m in;改变离心转速对DNA质量的影响不明显。     

甘薯薯块DNA提取方法研究

甘薯薯块富含淀粉、酚类等物质,不利于DNA提取。为了研究甘薯薯块DNA提取的最佳方法,采用经典CTAB法、改良CTAB法一、改良CTAB法二和SDS提取法,对甘薯薯块总DNA提取效果进行比较,以试剂盒法提取结果作对照。结果表明:采用经典CTAB提取法和SDS提取法获得的薯块DNA含有较多杂质,且降解严重,样品质量低;CTAB改良法一能降低DNA样品中多糖等物质的含量,但DNA存在一定程度降解,且耗时较长;CTAB改良法二提取效果最佳,杂质含量低且DNA降解少,与试剂盒提取效果最接近,是一种较为理想的甘薯薯块DNA提取方法。     

几种木本果树DNA的有效提取

提取高质量的ＤＮＡ是有效开展分子生物学研究的前提。多糖污染是木本植物ＤＮＡ提取中最常遇到的问题。多糖污染的ＤＮＡ呈粘稠的胶状 ,不但给实验操作带来不便 ,更重要的是多糖对反应体系中的酶活性产生抑制作用 ,严重影响分子生物学研究的下游工作[1～3] 。很多多年生木本果树 ,即使其幼嫩组织多糖的含量也明显高于大田作物 ,所以 ,常规的ＤＮＡ提取方法因不能有效除去多糖而在木本果树应用中受到限制。经典的ＣｓＣｌ梯度离心能有效除去柑桔等木本果树的多糖而得到高纯度的ＤＮＡ ,但由于梯度离心设备昂贵 ,涉及ＥＢ ,操作不便 ,且ＤＮ…     

采用CTAB法快速提取植物DNA

<正> 植物 DNA 的提取是植物 DNA 分子生物学常用的技术手段,其提取效率和质量直接关系到分子测定的结果。本人在北京农业大学进修期间,参照 CTAB 法多次提取植物DNA,其快速简便值得从事植物分子生物学研究者借鉴。现介绍如下:     

提取蕨类植物DNA方法比较

[目的]研究蕨类植物DNA提取的方法,为进一步的遗传多样性以及分类学的研究提供基础。[方法]通过改变试剂的用量以及操作方法对CTAB法提取DNA方法进行了改进。[结果]改良的CTAB提取法能够提取出高质量的蕨类植物的DNA。[结论]改良了蕨类植物DNA提取的方法。     

水蒸汽蒸馏法提取丹皮酚工艺的研究

通过L16(45)正交试验设计,研究了丹皮粉粒径(A)、浸润时间(B)、氯化钠用量(C)和馏出物量(D)对丹皮酚提取量的影响。结果表明,影响丹皮酚提取量的主次因素为A>D>B>C;最佳工艺条件为丹皮粉粒径0.45mm,氯化钠用量60g/kg,浸润时间3h,收集馏出物量300mL。按筛选的最优工艺重复提取2次,结果表明,第1次蒸馏丹皮酚的平均提取量达23.72g/kg,第2次蒸馏丹皮酚的平均提取量为1.69g/kg,说明第1次蒸馏基本代表了样品内丹皮酚量。     

白玉菇等4种食用真菌多糖含量的比较研究

[目的]测定并比较口蘑、杏鲍菇、白玉菇、蟹味菇中多糖的含量。[方法]采用水提醇沉法提取4种食用真菌多糖,通过苯酚-硫酸比色法,以葡萄糖为对照品,测定这4种食用真菌的多糖含量。[结果]葡萄糖标准曲线方程为:y=7.723 5x+0.026 3,相关系数r=0.997 8,线性关系良好,口蘑、杏鲍菇、白玉菇、蟹味菇中多糖含量分别为15.63%、52.38%、33.57%、31.79%。[结论]该法操作简单、准确,具有较好的稳定性。这4种食用真菌都含有丰富的多糖成分,其中杏鲍菇的多糖含量最高,口蘑的多糖含量最低,白玉菇与蟹味菇的多糖含量相当。     

四川食用菌废弃物利用方式研究

为解决食用菌生产后废弃物造成的环境污染问题,选取了成都、德阳、雅安等食用菌产地进行调查,研究了四川省食用菌废弃物利用方式的现状。将废弃物利用方式划分为菌渣利用和菌袋利用2种方式,归纳出菌渣利用方式有直接利用、再生产利用和制造新能源、新材料3种方式,分析了以上方式产生的原因和存在的问题,并针对问题从技术、制度、资金等方面提出了相应的对策与建议。     

食用菌常见病虫害及防治对策

在介绍食用茵主要病害包括制种和发茵期主要病害、代料栽培病害及子实体病害等的基础上,阐述了食用茵病虫害为害特点,分析了食用茵发生病虫害的原因。并从树立预防意识、保持环境清洁卫生及培育优良菌种等方面提出了食用茵病虫害综合防治对策。     

食用菌菌种的技术处理

结合实践，论述了菌种场的合理布局及制种所需设备，强调了食用菌制备过程中每一环节可能出现的问题，并给出了解决问题的办法。     

食用菌发酵的应用研究进展

综述了近年来有关食用菌发酵的应用研究概况,展望了我国食用菌发酵的应用前景。     

农业类院校食用菌专业创新培养模式探索

我国随着社会经济的发展,对农业人才提出了更高的要求。为适应新形势下现代农业发展需要,笔者从食用菌行业现状、食用菌专业特点、创新培养模式等方面,以青岛农业大学食用菌专业为例,对新形势下现代农业食用菌人才培养进行了有益探索,以期对农业院校创新人才培养提供参考。     

食用菌深层发酵及其多糖活性研究进展

综述了食用菌深层发酵及其多糖活性的研究概况,包括食用菌深层发酵的工艺和特点,深层发酵产物的应用,真菌多糖分离测定方法及生物活性。     

3种食用菌菌糠纤维素酶和木聚糖酶部分酶学性质

[目的]研究食用菌菌糠中纤维素酶和木聚糖酶pH和温度条件,为其应用提供参考。[方法]以猴头菌糠、平菇菌糠和滑子蘑菌糠为原料制备粗酶液,在不同pH和温度条件下测定纤维素酶和木聚糖酶活力。[结果]猴头菌糠、平菇菌糠木聚糖酶最适pH为4.8,最适温度为60℃;滑子蘑菌糠木聚糖酶最适pH为4.4,最适温度为70℃。猴头菌糠、平菇菌糠和滑子蘑菌糠滤纸酶活最适pH分别为4.4、6.0、5.6,最适温度分别为50、60、60℃。[结论]在pH值6.0左右和温度60℃左右,平菇菌糠纤维素酶和木聚糖酶、滑子蘑菌糠纤维素酶、猴头菌糠木聚糖酶具有较高的酶活。     

食用菌出口技术性贸易壁垒的博弈分析

目前,技术性贸易壁垒严重阻碍我国食用菌出口.该研究在分析我国食用菌食用菌产品出口企遭遇的技术性贸易壁垒现状的基础上,构建应对技术性贸易壁垒的博弈分析框架,并结合博弈模型,提出相应的对策与建议.