不同稀释液中添加十二烷基硫酸钠对吐鲁番黑羊精液冷冻保存的影响

为改善吐鲁番黑羊精液的冷冻保存效果,提高精液冻后的精子活率,本实验在3种精液冷冻稀释液中添加不同浓度(0、1%、2%)的十二烷基硫酸钠(SDS),TrⅠs-葡萄糖-柠檬酸钠为Ⅰ液,蔗糖-葡糖糖-柠檬酸钠为Ⅱ液,OptⅠdyl稀释液做对照为Ⅲ液。熏蒸冷冻后解冻,用精子分析系统(CASA)和流式细胞仪检测冷冻效果。结果表明:Ⅰ液1%SDS组精子活率最高(65.4%),与Ⅰ液2%SDS组精子活率没有差异,高于其他7组(P<0.05);Ⅲ液1%SDS组畸形率(9.4%)低于Ⅱ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液2%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组直线运动速率(51.4μm/s)高于Ⅰ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液0%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组和Ⅲ液1%SDS组的质膜完整率高于Ⅰ液2%SDS组和Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),且Ⅰ液1%SDS组最高;Ⅰ液1%SDS组的顶体完整活精子比率高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),各组的活精子顶体完整率无显著差异;Ⅰ液1%SDS组高线粒体膜电位比率(43.0%)高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05)。因此,采用添加1%SDS的Tris-葡萄糖-柠檬酸钠稀释液配方显著提高了吐鲁番黑羊精液冷冻保存效果。     

两种稀释液对荷斯坦奶牛和夏洛莱肉牛冷冻精液的影响

试验通过两种稀释液对荷斯坦奶牛和夏洛莱肉牛精液冷冻效果进行比较。结果表明,稀释液Ⅰ和稀释液Ⅱ在荷斯坦奶牛和夏洛莱肉牛精液的解冻后的精子活率和畸形率均差异不显著(P>0.05);荷斯坦奶牛和夏洛莱肉牛精液的解冻后顶体完整率,稀释液Ⅰ都显著好于稀释液Ⅱ(P<0.05)。     

不同稀释液配方对牛冻精品质的影响

选用3种稀释液配方分别对6头种公牛精液进行稀释、封装、冷冻,并检查种公牛冻精解冻后的精子活力、畸形率、顶体完整率、冻后废弃率、存活时间及镜检感光度.结果表明：3种不同稀释液配方对种公牛精液冻后活力影响差异均显著（P＜0.05）,Ⅰ稀释液生产冻精的畸形率极显著高于Ⅱ稀释液和Ⅲ稀释液（P＜0.01）,3种稀释液冻精精子顶体完整率之间差异均极显著（P＜0.01）,Ⅲ稀释液与Ⅰ稀释液和Ⅱ稀释液间对牛精液所生产冻精的冻后废弃率影响均差异显著（P＜0.05）,Ⅰ稀释液与Ⅱ稀释液和Ⅲ稀释液间对牛精液所生产冻精的存活时间影响差异也显著（P＜0.05）,Ⅲ稀释液生产的冻精精子感光度优于Ⅰ稀释液和Ⅱ稀释液,其余各项指标差异均不显著（P＞0.05）.因此,可用自配Ⅱ稀释液替代进口专用Ⅲ稀释液.     

生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻效果的影响

为了研究冷冻稀释液中添加不同浓度的抗氧化剂生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响,试验分别在冷冻稀释液中添加0,0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL的生物类黄酮和0,2,4,6,8 mg/mL的维生素C以及二者最佳配伍浓度的混合物,分别检测各试验组精液冷冻解冻后的活率、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活率等指标。结果表明:除了添加4,6 mg/mL维生素C顶体完整率与对照组相比差异不显著(P>0.05)外,添加0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL生物类黄酮或2,4,6,8 mg/mL维生素C精子活率、质膜完整率与对照组相比差异均显著(P<0.05),其中添加0.8 mg/mL生物类黄酮和6 mg/mL维生素C效果最好,但随着添加浓度的增加冷冻效果逐渐降低。说明在猪精液冷冻稀释液中联合添加生物类黄酮和维生素C,解冻后精液质量显著高于对照组(P<0.05)。     

不同稀释液对公猪精液常温保存效果的研究

 为提高猪精液的保存效果,设计了3种常温保存稀释液配方,并对保存后的精子进行了顶体染色,为猪精液常温保存技术及稀释液配方的研究提供参考依据。结果表明：当精子活率为50％与30％时,配方Ⅱ的精子保存时间均显著高于（P<0.05）配方Ⅰ与配方Ⅲ,且配方Ⅱ所保存精子的总存活时间也显著高于（P<0.05）配方Ⅰ与配方Ⅲ;在精液保存24h后,3种配方保存的精子顶体完整率均在95％以上,且差异不显著（P>0.05）,配方Ⅱ对精子的常温保存效果要优于配方Ⅰ与配方Ⅲ。     

山羊夏季精液品质分析及冷冻方法优化

用假阴道法采集山羊精液,进行品质分析,应用正交设计L(934),4因素为稀释液种类(A)、稀释比例(B)、平衡时间(C)和解冻液(D),每因素选择3个水平,分析解冻精液品质,构建其综合指数,优化夏季山羊精液冷冻-解冻方法。结果表明:乏情季节精液品质略有下降,但仍能满足制作冻精的需要。4因素影响解冻后精液综合指数的显著性顺序是A>C>D>B,其中稀释液种类对解冻后精液综合指数影响差异显著(P<0.05),稀释液Ⅱ优于稀释液Ⅲ和Ⅰ;精子稀释密度影响差异不显著(P>0.05),但稀释至108个/mL时综合指数高于稀释至5×108个/mL和2×108个/mL;平衡时间对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),平衡4h效果优于1h和2h;解冻液种类对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),维生素B12较TALP液和2.9%柠檬酸钠效果好。优选各因素最佳水平,确定夏季山羊精液冷冻-解冻方法为选用高卵黄稀释液Ⅱ,将精子密度稀释至108个/mL,平衡时间4h,以维生素B12作为解冻液40℃湿解冻。     

稀释液中添加维生素E对宠物犬精液冷冻效果的影响

在宠物犬冷冻精液稀释液中添加质量浓度为0,200,400,600μg/mL的维生素E,以观察对精液冷冻效果的影响。结果表明:冷冻精液稀释液中添加维生素E 400μg/mL时,解冻后精子活力显著高于对照组(P0.05);畸形率极显著低于对照组(P0.01),各浓度维生素E组精子解冻后体外存活时间均极显著高于对照组(P0.01),解冻后精子顶体完整率和冻后精子运动速率(VAP、VSL、VCLL)较对照组都有所提高,但差异不显著(P0.05)。综合各项指标后表明以质量浓度为400μg/mL维生素E组的效果最好。     

维生素C对荷斯坦公牛X精子冻后品质的影响

试验旨在研究维生素C（VC）对荷斯坦公牛性控精液冻后品质的的影响。在精液稀释液中分别添加0,2.0,4.0,6.0,8.0 mg/mL的VC进行试验。将装有X精子的细管冻精解冻（37.5 ℃,30 s）后分析0～3 h精子活率及0～4 h质膜完整率和顶体完整率的变化情况。结果表明,当添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h精子活率与对照无差异显著,解冻后1、2、3 h精子活率与对照组差异显著（P<0.05）。当VC的添加量为4.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子质膜完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但数值依然高于对照组。解冻后存放2、3、4 h与对照组相比差异显著。添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1、3 h精子顶体完整率与对照组相比差异显著（P<0.05）,2、4 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但顶体完整率高于对照组。在冷冻精液稀释液中VC的适宜添加量为4～6 mg/mL,此浓度下可有效提高荷斯坦公牛X精子解冻后活率、质膜完整率及顶体完整率。     

稀释液中添加维生素E对绒山羊冷冻精液品质的影响

在绒山羊精液冷冻稀释液中添加不同浓度的维生素E,比较其对绒山羊冷冻精液品质的影响。结果表明:维生素E添加量为0.8～1.2 mg/mL时精子解冻后活率和顶体完整率显著高于对照组和其他各添加组(P<0.05);维生素E添加量为0.8～2.0 mg/mL时,畸形率显著低于对照组和其他各添加组(P<0.05);维生素E添加量为1.2 mg/mL时,质膜完整率显著高于对照组和其他各添加组(P<0.05)。说明适量的添加维生素E可以提高绒山羊精液冷冻的效果,且稀释液中维生素E的适宜添加量为0.8～1.2 mg/mL。     

金华猪精液冷冻保存技术研究

本试验用0.5 mL细管作为冷冻载体对金华猪精液进行冷冻保存研究,比较3种冷冻稀释液及不同冷冻方法、解冻程序对金华猪精液冷冻的效果,以解冻后的精子活力、畸形率和质膜完整率为判定指标。结果表明:Ⅱ、Ⅲ号冷冻稀释液处理组解冻后精子的活力、畸形率和质膜完整性都明显地高于Ⅰ号冷冻稀释液(P0.05);Ⅱ号冷冻稀释液和Ⅲ号冷冻稀释液处理组之间没有明显差异(P0.05)。采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液冷冻保存精子,并在60℃,8 s条件下水浴解冻精子后,精子活力和质膜完整率最高分别为42.3%和50.3%,畸形率最低为17.7%。因此,采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液,在60℃,8 s条件下水浴解冻方法较为适合0.5 mL细管金华猪精液冷冻保存及解冻。     

拉布拉多犬冷冻精液宫腔内输精试验研究

比较2种不同的冷冻稀释液:Tris-果糖-柠檬酸钠(Ⅰ号)和葡萄糖-乙酸钠-柠檬酸钠(Ⅱ号)对拉布拉多犬冷冻精液宫腔内输精效果,并分析同一稀释液配方不同解冻温度效果,在此基础上,选取犬专用宫腔输精器开展人工授精。结果显示:Ⅰ号稀释液解冻后,精子活力为0.419±0.15,顶体完整率为(58.26±8.1)%,畸形率为(10.3±0.3)%;Ⅱ号稀释液解冻后,精子活力为0.368±0.04,顶体完整率为(55.4±6.3)%,畸形率为(11.1±0.2)%,前者的冷冻效果明显优于后者。同一稀释液配方解冻温度65℃(4~5 s)解冻后的精液品质明显优于40℃(10~12 s);冻精情期受胎率达90%,比自然交配受胎率高10.0%,差异显著(P0.05)。本试验已突破多年来一直困扰犬冷冻精液人工授精技术发展运用的瓶颈,开发出高效冷冻稀释保护液以及高受胎率的宫腔内输精方法。     

版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

兔精液冷冻保存的研究

本试验采用不同的稀释液对兔精液进行冷冻保存,并比较了在稀释液中添加不同防冻剂以及平衡时间对兔精液冷冻保存效果的影响.结果表明:稀释液Ⅱ稀释的精液,解冻后,精子活率明显高于稀释液Ⅰ稀释的(P＜0.01),其复苏率显著高于后者(P＜0.05).以稀释液Ⅱ为基础液,添加不同浓度(27.3%,15%,12%,9%)的DMSO对兔精液冷冻保存,结果解冻后精子活率以15%及12%两组较好,其中添加15%的优于12%的,但差异不显著(P＞0.05).选择不同种类的防冻剂(7%甘油与15%DMSO)比较时,发现7%甘油组解冻后精子活率明显低于15%DMSO组,二者差异极显著(P＜0.01),其复苏率显著低于后者(P＜0.05).以15%DMSO作为防冻剂,采用不同的平衡时间在5 ℃平衡,结果发现平衡30 min和60 min的解冻后精子活率较好,但差异不显著(P＞0.05),而90 min和120 min的冷冻效果较差.     

咖啡因对猪精液冷冻的影响及冷冻-解冻方法的优化

本试验对猪精液冷冻保护液中添加咖啡因的作用进行了研究,并优化冷冻-解冻程序,提高0.5 mL细管猪精液冷冻解冻后的质量。在预先设计稀释液配方的基础上,使咖啡因终浓度为0、0.2、0.4、0.6 mg/mL,选择最佳咖啡因浓度,选出最优组合与传统的TCG稀释液和商业用Androhep CryoGuardTM冷冻稀释液进行比较,比较3种不同的冷冻曲线对猪冷冻精液解冻后精子品质的影响,最后对38℃下30 s、50℃下13 s 2种解冻方法进行比较。结果表明,咖啡因浓度为0.2、0.4mg/mL的精子冷冻后活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于00、.6 mg/mL(P0.05),最佳添加浓度为0.2 mg/mL;预设计的稀释液配方及冷冻方案优于传统的TCG法(P0.05),但与Androhep CryoGuardTM稀释液(美国商业用)有一定差距(P0.05);A曲线在猪精液冷冻-解冻后活力、质膜完整率和顶体完整率方面均显著优于B和C冷冻曲线(P0.05);50℃水浴解冻13 s显著优于38℃解冻30 s(P0.05)。     

不同精液解冻液和解冻速率对猪颗粒冻精品质的影响

为提高猪冻精解冻后的质量,本试验选择5种解冻液配方,对猪颗粒冻精进行解冻,结果表明,Ⅴ号解冻液为最佳解冻液,解冻后精子活率为(34±2.4)%,极显著高于Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ组(P0.01);存活时间为(506.6±40.4)h,极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P0.01),显著高于Ⅳ组(P0.05)。选择9种不同的水温,采用V号解冻液对冻精颗粒进行解冻,记录解冻时间,并计算解冻速率,研究结果表明,以27.5℃/s的速率进行解冻,解冻后精子的活率、弯尾率及顶体完整率均达最优水平。     

猪精液冷冻技术的研究

从稀释液、解冻液、解冻速率方面研究了猪精液冷冻保存的效果。结果表明：在八种稀释液中,用Ⅰ号稀释液制作的冷冻精液解冻后精子活率（33&#177;1．2）％优于其它组（P〈0．05）;Ⅴ号解冻液解冻后精子活率（34&#177;2．4）％极显著高于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ号解冻液（P〈0．01）,Ⅴ号解冻液解冻后精子存活时间506．6&#177;40．4h,极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号解冻液（P〈0．01）;以27．5℃／s的速率解冻,解冻后精子各项指标均为最高值。     

绒山羊精液冷冻保存技术的研究

为了使绒山羊精液得到长期保存,充分发挥和提高优良种公羊的利用率,本实验对绒山羊精液冷冻保存技术进行了研究,比较了4种自行研制的保存稀释液的冷冻效果。结果表明:采用Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-柠檬酸钠)冷冻保存绒山羊精液,解冻后精子活率(0.508±0.010)极显著高于Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)(0.275±0.008)、Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)(0.354±0.012)和IV液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-乳糖-柠檬酸钠)(0.319±0.006)(P<0.01);Ⅲ液极显著高于Ⅱ液(P<0.01)和显著高于Ⅳ液(P<0.05)。解冻后Ⅰ液的精子顶体完整率(59.4%±0.5%)极显著高于Ⅱ液(47.1%±0.8%)、Ⅲ液(52.4%±0.6%)和IV液(51.3%±0.5%)(P<0.01)。精液解冻后在室温(23±2)℃下避光培养,Ⅰ液中精子活率在5h内能够保持0.30以上,Ⅱ、Ⅲ液和Ⅳ液精子活率维持在0.3不到2h。     

不同药物配方对公猪精液常温保存效果研究

为提高猪精液的保存效果,为猪精液常温保存技术及稀释液配方的研究提供参考依据,设计了3种常温保存希释液配方,并对保存后的精子进行了顶体染色。结果表明：当精子活率为50%与30%时,配方Ⅱ的精子保存时间均显著高于配方Ⅰ与配方Ⅲ（P〈0.05）,且配方Ⅱ所保存精子的总存活时间也显著高于配方Ⅰ与配方Ⅲ（P〈0.05）。上述结果表明,配方Ⅱ对猪精液的常温保存效果要优于配方Ⅰ与配方Ⅲ。     

不同药物配方对公猪精液常温保存效果研究

为提高猪精液的保存效果,为猪精液常温保存技术及稀释液配方的研究提供参考依据,设计了3种常温保存希释液配方,并对保存后的精子进行了顶体染色.结果表明:当精子活率为50%与30%时,配方Ⅱ的精子保存时间均显著高于配方Ⅰ与配方Ⅲ(P＜0.05),且配方Ⅱ所保存精子的总存活时间也显著高于配方Ⅰ与配方Ⅲ(P＜0.05).上述结果...     

维生素B12、E和C在家畜精液保存中的应用

家畜精液保存时,向稀释液中添加一定量的维生素B12、E或C,在提高精液品质方面具有重要的作用。精液稀释液中添加维生素B12,具有维持精子顶体完整率,延长精子体外存活时间和提高解冻后的精子活力的作用。维生素E是重要的抗氧化剂,能通过抑制自由基的形成,阻止诱发的膜脂质发生过氧化,从而维持精子顶体膜的完整,提高精子顶体完整率和降低精子畸形率;维生素E还能防止精子发生冷休克,提高冻精解冻后的精子活力,从而提高受精率。维生素C作为抗氧化物质,能有效地防止冷冻精子磷脂发生过氧化,提高解冻后的精子活力,延长精子在体外存活的时间;维生素C的抗氧化作用还表现在能够保护精子细胞中的遗传基因DNA免受氧化破坏。