高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素含量的比较研究

高效液相色谱法、酶联免疫法是常见的呕吐毒素检测方法,以小麦为样品,依次利用高效液相色谱法、酶联免疫法等对小麦呕吐毒素进行了分析。对两者呕吐毒素检测结果进行了对比分析,最终结果表明:高效液相色谱法、酶联免疫法在小麦呕吐毒素检测环节,在250~1 450μg/kg之间存在相关性,且高效液相色谱法测定的小麦呕吐毒素含量小于酶联免疫法测定的结果。     

胶体金法对糙米中AFB1的快速检测

采用乙酸乙酯提取法对样品进行前处理,用胶体金快速检测卡测定糙米中AFB1的含量。该方法在20min内完成测定,与HPLC进行比较,操作简单,检测准确、方便、快速。胶体金快速检测卡可适用于对稻谷储藏的质量监控。     

酶联免疫快速检测奶酪中AFM1检测方法的建立

建立奶酪中AFM1的酶联免疫快速检测方法。3种奶酪样品用80%的甲醇水于90℃加热回流15 min后用三氯甲烷萃取净化,挥干三氯甲烷后用10%甲醇水复溶凝结物,最后用酶联免疫试剂盒检测AFM1的含量。结果表明,3种不同样品重复测定值相对标准偏差均少于5%,对样品分别添加AFM1标准溶液0.25,0.50,1.0μg/kg,回收率为85.1%~88.5%。所建立的酶联免疫快速检测奶酪中的AFM1的检测方法,具有重复性良好、结果相对偏差小和加标回收率高等特点。     

酶联免疫快速检测奶酪中AFM_1检测方法的建立

建立奶酪中AFM1的酶联免疫快速检测方法。3种奶酪样品用80%的甲醇水于90℃加热回流15 min后用三氯甲烷萃取净化,挥干三氯甲烷后用10%甲醇水复溶凝结物,最后用酶联免疫试剂盒检测AFM1的含量。结果表明,3种不同样品重复测定值相对标准偏差均少于5%,对样品分别添加AFM1标准溶液0.25,0.50,1.0μg/kg,回收率为85.1%~88.5%。所建立的酶联免疫快速检测奶酪中的AFM1的检测方法,具有重复性良好、结果相对偏差小和加标回收率高等特点。     

酶联免疫法(ELISA)测定月饼中黄曲霉毒素B_1

采用酶联免疫法对月饼中黄曲霉毒素B_1含量进行测定,并对该方法的线性、灵敏度、回收率和重现性进行验证;黄曲霉毒素B_1标准品在1.00~50.00 g/kg范围内线性良好,Y=-40.291C+88.365,R~2=0.998 4,该方法对黄曲霉毒素B_1的最低检出含量为1.00 g/kg,不同含量添加所得回收率为96.7%~105.0%,重复性好,精密度为1.96%。通过对9个不同产品特性月饼中黄曲霉毒素B_1的测定,发现所有样品均有检出,但黄曲霉毒素B_1的含量均小于5.00 g/kg。结果表明,酶联免疫检测方法测定快速、定量准确、重现性好,可高效率地定量检测大量市售月饼中黄曲霉毒素B_1的含量。     

胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A的研究

应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测食品和饲料中赭曲霉毒素A的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗赭曲霉毒素A单克隆抗体,将标记的胶体金抗体喷涂于玻璃纤维上,赭曲霉毒素A偶联抗原OTA-OVA和二抗兔抗鼠IgG分别喷涂于硝酸纤维膜上,作为检测线和质控线,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装成试纸条并装卡。测试结果表明,赭曲霉毒素A快速检测试纸条的灵敏度为5ng/mL,检测时间为10min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。该法使用简单方便,非常适合现场快速检测赭曲霉毒素A。     

谷物中黄曲霉毒素4种常见检测方法的探讨

通过对2种常用快筛方法——酶联免疫吸附测定法(ELISA)和胶体金免疫层析法(GICA)进行比较分析,认为胶体金免疫层析法(GICA)优于酶联免疫吸附测定法(ELISA),反相高效液相色谱法检测黄曲霉毒素中,样品的2种净化处理(免疫亲和层析柱净化和多功能净化柱净化)皆能满足要求,免疫亲和层析柱的选择性高,色谱图杂峰少,专一选择性方面优于多功能净化柱。     

新型瘦肉精班布特罗胶体金快速检测卡的制备

应用胶体金免疫层析技术,通过对标记抗体的pH值、抗体浓度和重悬液的条件优化进行斑布特罗胶体金快速检测卡的研制。结果表明,其灵敏度达到0.1 ppb。该检测卡简单、快速、灵敏度、特异性、稳定性、重复性好,与盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺等常见的瘦肉精均无交叉反应。检测70份猪组织样品与ELISA结果符合率为91%。结果表明,研制的班布特罗胶体金快速检测卡可应用于基层养殖、屠宰、市场环节动物及动物产品的现场快速检测。     

免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素

建立了免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2总量。样品用甲醇—水提取,经免疫亲和色谱柱纯化,应用液相色谱法检测。试验结果表明:空白样品分别按照5.2,26,52μg/kg添加黄曲霉毒素,回收率为81.3%～96.0%,精密度<10%,黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2的检测灵敏度分别为0.10,0.05,0.10,0.15μg/kg。免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2总量,是一种简单、快速和准确的方法。     

免疫亲和柱净化高效液相色谱荧光法测定调味品中赭曲霉毒素A

建立了免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定调味品中赭曲霉毒素A。样品用甲醇与NaHCO3体积比为60:40的溶液提取,经免疫亲和色谱柱纯化,应用液相色谱法检测。结果表明,空白样品按照质量分数为1.0,20,50μg/kg添加赭曲霉毒素A,回收率为75.0%～102.0%,精密度小于15%,方法检测灵敏度为0.5μg/kg。免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定调料中赭曲霉毒素A是一种简单、快速、准确的方法。     

牛病毒性腹泻病毒检测方法的研究进展

为了快速准确地诊断出牛病毒性腹泻病毒,减少养牛业的经济损失。文章综述了近年来检测牛病毒性腹泻病毒的方法,总结出这些方法的优缺点。结果表明：根据养殖户对该病毒快速准确诊断的实际需要,展望了一种新的检测牛病毒性腹泻病毒的方法--免疫胶体金试纸条法。表明免疫胶体金试纸条法完善了牛病毒性腹泻病毒的检测方法,有助于在现场快速诊断该病毒。     

双重检测马铃薯X和Y病毒试纸条制备技术研究

为了实现在马铃薯种薯生产田现场同时快速检测马铃薯X（PVX）和Y病毒（PVY）,利用胶体金标记和免疫层析技术研制了PVX-PVY双重检测试纸条。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,在波长526nm处有最大吸收值,金颗粒直径约25nm。同时标记PVX和PVY兔多克隆抗体,将抗体标记物喷射于玻璃纤维纸上,作为金标垫。将PVX和PVY抗体分别划线于硝酸纤维素膜上作为检测线,将羊抗兔抗体划线于硝酸纤维素膜上作为质控线,制备胶体金试纸条。结果表明,研制的双重试纸条能够在2min之内同时检出PVX和PVY。PVX病汁液检测稀释限度可达10⁶倍（W/V）,PVY可达10⁵倍（W/V）,其中对PVX检测更灵敏。用其他4种常见病毒（PVS、PLRV、PVA和PVM）检测,未出现交叉反应。在田间采集马铃薯叶片,分别利用试纸条与DAS-ELISA检测,结果一致性非常高。由此可知,该试纸条具有操作简便、反应快捷的特点,特别适用于田间及口岸一线对于马铃薯X和Y病毒的同时检测。     

一种快速提取小麦基因组DNA的改良CTAB方法

旨在寻求一种微量、快速提取小麦DNA的方法。以小麦幼叶为材料,用改良CTAB法、改良SDS法、沸水浴法提取小麦叶片总DNA,通过琼脂糖凝胶电泳法、紫外吸收法和PCR检测DNA完整性和纯度。改良CTAB法提取小麦基因组DNA质量和纯度高、无降解,每人每天可以轻松提取200个DNA样品,对转基因植株的PCR检测显示扩增目标条带清晰一致,无假阳性,试验结果理想。改良SDS法所提DNA纯度和浓度虽略不如改良CTAB法,但仍然符合实验要求。沸水浴法提取量少且杂质多,PCR无有效扩增,结果不理想。改良CTAB法提供了一种简便、快速微量小麦DNA提取方法,适用于PCR和其他分子生物学研究。     

免疫胶体金技术及其应用研究进展

免疫胶体金技术是以胶体金自身显色结合抗原抗体特异性反应而达到检测目的免疫标记技术。该技术操作简便,特异性强,近年来与拉曼光谱、荧光光谱等技术结合,得到了迅猛的发展。本文介绍了免疫胶体金技术的层析法、比浊法、斑点渗滤法,与新型技术结合等研究现状及其在药物残留等方面的应用及发展趋势。     

微波消解-流动注射化学发光法快速测定小麦中的稀土元素

为建立一种快速测定小麦中稀土元素的新方法,小麦全粉经微波消解后,利用稀土元素对Luminol-K2S2O8流动注射化学发光体系的线性抑制作用进行测定。结果表明：样品中的稀土元素含量为7.65μg/g~10.12μg/g,线性相关系数r=0.9991,RSD为4.0%~7.4%,检出限为3.82×10-9g/g,硬质紫麦加标回收率为96.30%~103.90%。该法快速简便、灵敏准确,用于小麦中微痕量稀土元素的测定,结果令人满意。     

Identification, characterisation, and chromosome locations of rye and wheat specific ISSR and SCAR markers useful for breeding purposes

Rye (Secale cereale L. and S. strictum) offers potential to increase the genetic variability and to introduce desirable characters for wheat improvements. Cytogenetic techniques have been used to screen wheat lines containing rye chromatin. These techniques are not adequate since they are highly technical and time consuming. They are not suitable for breeding programs that require rapid screening of large numbers of genotypes. The main objective of this study was to develop and characterize ISSR and SCAR markers that can distinguish wheat from rye genome. Total DNA from wheat, rye, and triticale accessions from different provenances were amplified with ISSR primers in PCR assays. Three wheat-diagnostic sequences were identified. In addition three rye-diagnostic ISSR markers of which, one marker specifically diagnostic for Secale strictum were characterized. Pairs of primers flanking these specific sequences were designed to produce SCAR markers. Two SCAR markers were rye genome-specific. One SCAR was present in all the seven rye chromosome, and another was specific to rye chromosomes two, three, four, and seven. These newly developed ISSR and SCAR markers should be useful to wheat breeders screening genotypes that may contain rye chromatins.     

ELISA对动物性食品中恩诺沙星残留的快速筛选

应用竞争酶联免疫法(ELISA)能够快速对动物性食品中的恩诺沙星残留进行检测筛选。与其他检测方法相比,ELISA具有适用范围宽、样品预处理简单、批处理量大、检测速度快、准确性高和重复性强的特点,特别适用于基层大规模筛选和现场监控。     

Gold Nanoparticles Preparation and Application in DNA Detection

Several conventional methods for preparing gold nanoparticles and their features are reviewed,Which are separated into physical metnods. The physical methods include vacuum evaporation,soft landing and laser ablation, and chemical methods the chemical ones have colloidal metheds,crystal species generating metheds,reverse micellar methods,phase transmission and model methods,etc..Gold nanoparticles with different size and shape can be produced by different methods. Peculiar physical and chemical properties of gold nanoparticles make them have wide applications in fields of chemistry, biology and medicine, especially in DNA detection. There are optical, electrochemical and piezoelectric methods for detection of DNA. The sensitivity and detection range of these methods can be significantly improved with the using of gold nanoparticles.     

IBV抗体的银加强金标免疫技术检测

【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的银加强金标免疫技术（SECGA）;【方法】将胶体金标记纯化的兔抗鸡IgG,然后将IBV纯化抗原包被于NCM上（0.4ug/片）,封闭后在膜片上滴加不同稀释度（10×2X）的血清,作用10分钟,洗涤后浸于1：4金标兔抗鸡IgG液中作用60分钟,再银染10分钟观察结果;【结果】SECGA能检出IB阳性血清的抗体＞10×27,而不与ND、EDS76、IBD阳性血清发生有意义的交叉反应（抗体滴度＜10×22）。对鸡IgG的最小检测量为0.88ng。用SECGA、气管环中和试验、ELISA试验检测IB抗体有明显的相关性;【结论】银加强金标免疫技术（SECGA）可用于IB抗体的检测,具有敏感、特异、简单、快速、适于现场诊断等优点,适宜于广大基层单位使用。     

免疫分析技术在农药残留快速检测中的应用及研究进展

为解决色谱法等常规方法在农药残留检测中耗时长、成本高等问题,提出了基于免疫分析的简便快捷、高选择性和高灵敏度的农药残留快检分析方法。综述了常用的农药残留快速检测技术,包括酶联免疫吸附测定、荧光免疫分析、免疫层析、免疫磁珠、仿生免疫分析及生物条形码技术等的作用原理、特点及研究进展。不同的方法有着各自的优缺点和适用范围,而分子印迹、纳米技术和基因检测技术的快速发展,为农药残留免疫分析提供了较高的灵敏度和准确度。建议基于免疫分析技术的自身优势,结合新技术并不断完善,进而在农药残留快检领域发挥重要作用。未来在农产品质量安全检测和控制上,开发简单便携的小型化和集成化检测手段,提高方法和仪器的稳定性和灵敏度成为农药残留快速检测的发展趋势。