油茶转录因子基因CoSOC1-like的克隆和表达分析

[目的]克隆油茶的SOC1同源基因(CoSOC1-like),分析其序列特征和表达模式及其蛋白进化.[方法]以3年生油茶嫩叶为材料提取RNA,利用RT-PCR和RACE方法克隆油茶的CoSOC1-like基因,用生物信息学工具分析其序列特征,用荧光定量PCR分析其表达模式,用基因瞬时表达法分析其蛋白的亚细胞定位.[结果...     

红脊长蝽感觉神经元膜蛋白基因克隆及组织表达谱分析

[目的 ]感觉神经元膜蛋白(SNMP)是至关重要的次要嗅觉蛋白,能够作为信息素识别的标记,而红脊长蝽(Tropidothorax elegans)作为一个重要的农林害虫,这方面的研究还很少。[方法 ]利用PCR方法对红脊长蝽SNMP基因进行克隆,并通过荧光定量PCR对该基因的表达情况进行分析。[结果 ]首次克隆和鉴定了红脊长蝽的2个SNMPs基因,并命名为TeleSNMP1和TeleSNMP2。序列分析表明,TeleSNMP1编码区开放阅读框长1 497 bp,编码498 aa;而TeleSNMP2编码区开放阅读框长1 686 bp,编码561 aa,这2个基因的等电点分别为8.26和7.05。同源性分析发现,同目昆虫同类SNMP序列一致性较高,不同目昆虫不同类SNMP序列一致性较低。TeleSNMP1和TeleSNMP2之间的序列一致性极低。进化树结果也表现同目昆虫同类SNMP基因进化关系最近。定量PCR结果显示,TeleSNMP1主要在雌雄触角中表达,而TeleSNMP2在非触角组织中也有表达。[结论 ]该结果为今后对红脊长蝽SNMPs基因功能的研究提供了有用的参考。     

桉树PAL基因克隆及焦枯病菌诱导下的表达分析

[目的]克隆桉树苯丙氨酸解氨酶基因(PAL),分析其序列特征及在焦枯病菌诱导下的表达特征,为探究桉树抗焦枯病机理提供理论支撑。[方法]通过SOE-PCR技术从尾细桉M1中克隆PAL基因,利用real-time PCR分析其在焦枯病菌诱导下的表达特性。[结果]克隆得到尾细桉M1 PAL基因,其ORF序列长2 142 bp,编码713个氨基酸,与其他已发表的桉树PAL相似性均在99%以上。序列分析发现,其编码蛋白是一类稳定的亲水性蛋白,含有丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸3个磷酸化位点,二级结构以α-螺旋和β-折叠为主,具有典型的苯丙氨酸和组氨酸解氨酶保守结构域。进一步分析桉树不同品系PAL基因的表达趋势,结果发现,不同品系PAL基因在焦枯病菌诱导下均表现为明显的上调表达,且抗性越强,PAL基因越早上调,上调表达量越大。[结论]从尾细桉M1中克隆得到的PAL基因具有典型的PAL家族成员特征,推测该基因可能通过参与酚类防御性物质或者信号分子SA等物质的合成,进而在桉树抵抗焦枯病菌侵染的过程中发挥重要作用。     

麻疯树BRI1基因的鉴定及其在不同发育时期花蕾中的表达分析

[目的]研究油菜素内酯受体BRI1的同源基因(JcBRI1)在麻疯树花发育过程中的作用。[方法]利用RT-PCR技术克隆JcBRI1基因的CDS,以pET-30a(+)质粒为框架构建原核表达载体转化至大肠杆菌进行诱导表达,随后利用LC-MS/MS对表达产物进行质谱鉴定,并以氨基酸序列为基础分析JcBRI1蛋白质结构。利用荧光定量PCR分析麻疯树JcBRI1基因在雌雄花发育的关键时期的表达水平,初步确定其在麻疯树花发育过程中的表达模式。[结果]克隆获得了JcBRI1基因的CDS,长度为3 591 bp。SDS-PAGE检测结果表明:JcBRI1基因在大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中均能表达,但在低温环境的表达量更高。原核表达产物的LC-MS/MS鉴定结果表明:JcBRI1氨基酸序列与预期的一致,JcBRI1基因的表达产物为麻疯树BRI1蛋白。对JcBRI1在麻疯树花器官不同发育时期的表达水平进行检测分析,结果表明:JcBRI1基因的表达量在雌花发育的第一个时期即大孢子母细胞时期就达到了最高值,在随后几个时期持续下调;然而,其在雄花各个时期的表达量并无明显差异,表明其很有可能参与了麻疯树雌花大孢子母细胞发育过程。[结论]麻疯树JcBRI1基因为LRR-RLKs家族成员BRI1的同源基因,很有可能参与麻疯树雌花大孢子母细胞的发育过程,至于JcBRI1在麻疯树大孢子母细胞发育过程中的具体作用机制还需进一步研究。     

核桃JrWOX4b基因的克隆和功能分析

[目的]为探索WOX4b基因在核桃不定根发生过程中的调控作用提供理论支撑.[方法]以核桃品种'林早香'(Juglans?regia?'Linzaoxiang')的cDNA为模板克隆该基因CDS全长序列;利用生物信息学技术对其进行多重序列比对和系统进化分析;构建该基因与黄色荧光蛋白(Yellow?Fluorescent?...     

地涌金莲MlCYP734A6基因的克隆与表达分析

[目的]为揭示CYP734A6基因在地涌金莲生长发育过程中的调控作用提供分子数据.[方法]从地涌金莲转录组数据库中筛选到1个注释为CYP734A6的差异基因片段,通过3'和5'RACE技术克隆得到该基因的全长序列,命名为MlCYP734A6(登录号为MW013148).利用生物信息学技术对MlCYP734A6进行序列比...     

巴西橡胶树CBF2基因的克隆和表达分析

分析植物CBF同源保守区序列设计简并引物,利用RT-PCR技术从橡胶树中克隆了CBF基因家族的保守区,并以SAFA-PCR法克隆了HbCBF2基因的5′端序列以及启动子序列。通过BLAST工具搜索Genbank数据库。结果表明,该序列同其他植物中的CFB家族基因高度同源,认为该序列就是橡胶树中的CBF基因。以此序列设计Northern Blot探针,从低温和干旱两个方面处理,探索该基因在巴西橡胶树中的表达情况。     

日本落叶松纤维素合酶基因片段的克隆及单核苷酸多态性分析

[目的]纤维素合酶(cellulose synthase,CesA)在植物纤维素合成途径中发挥主要调节作用,是控制木材纤维品质和产量的重要基因.从日本落叶松中分离克隆与纤维素合成相关的LkCesA基因,并对其进行核苷酸多样性以及连锁不平衡分析,为在日本落叶松中开展基于LkCesA基因的连锁不平衡作图及其辅助日本落叶松木材纤维性状的分子育种提供理论依据.[方法]依据日本落叶松转录组数据库检测到的纤维素合酶(CesA)基因ESTs序列设计引物,从日本落叶松中分离获得LkCesA基因片段.在此基础上,利用DnaSP5.0软件对日本落叶松40株基因型个体的LkCesA序列进行核苷酸多样性和连锁不平衡分析.[结果]从日本落叶松中成功克隆了CesA基因片段:该片段长1 209 bp,包含部分开放阅读框,长度为1 053 bp,可编码350个氨基酸,所推导的蛋白质氨基酸序列与火炬松Pt-CesA2的蛋白质氨基酸序列同源性为95.4％.在日本落叶松40株基因型个体的LkCesA序列中共检测到83个SNP位点,SNP发生频率为1/21 bp,多样性指数πT为0.006 05.在这些SNPs中,69个属于转换,14个属于颠换,其中19个为常见SNPs,64个为罕见SNPs.在外显子区域,共检测到54个SNP位点,其中34个为错义突变,20个为同义突变.进一步的连锁不平衡分析显示,随着核苷酸序列长度的增加,SNP连锁不平衡程度逐渐减弱.[结论]克隆到的LkCesA为植物CesA基因家族中的一员.LkCesA基因的连锁不平衡在基因内部就已衰退,说明选择该基因作为候选基因,在日本落叶松中开展连锁不平衡作图用于指导日本落叶松的定向培育及木材品质改良是可行的.此外,在LkCesA基因中检测到多个常见SNP位点,为进一步开展该基因的连锁不平衡作图提供了材料.     

中间锦鸡儿CiDR1的克隆及干旱胁迫下的表达分析

[目的]研究并了解中间锦鸡儿CiDR1基因功能及其对干旱胁迫的响应,为抗性育种提供候选基因。[方法]通过RACE技术从中间锦鸡儿中克隆CiDR1基因的c DNA全长,利用生物信息学分析软件对其基因结构及功能进行分析和预测。再通过qRT-PCR技术对干旱胁迫后的幼苗中的CiDR1表达模式进行研究。[结果]从中间锦鸡儿中克隆到CiDR1基因的c DNA全长共计4 297 bp,Gen Bank登录号为KP277100。生物信息学分析表明,预测的CiDR1蛋白序列中含有1 243个氨基酸残基,具有抗病基因特征结构域TIR、NB-ARC、LRR等,其等电点为6.35,不稳定指数为42.91,不具备信号肽,为非分泌蛋白,定位于细胞质中。定量PCR检测发现,CiDR1基因在幼年期的茎中表达量较低,在成年期的叶片中表达量较高;在干旱胁迫处理后的幼苗中,CiDR1表达水平有明显下降,表明该基因的表达受干旱抑制,可能与中间锦鸡儿适应干旱相关。[结论]中间锦鸡儿在干旱胁迫后其根、茎和叶中CiDR1的表达均明显下降,表明CiDR1的表达受干旱抑制,可能与中间锦鸡儿适应干旱相关,进一步研究发现CiDR1在根、茎、叶中的表达水平可能受发育阶段调控。     

天女木兰种子天冬氨酸蛋白酶基因的克隆与分析

天冬氨酸蛋白酶在天女木兰种子萌发过程中发挥着重要作用。以天女木兰种子为试验材料,利用同源克隆法RACE技术,从天女木兰种子中克隆得到天冬氨酸蛋白酶基因,全长1 545 bp,可以编码514个氨基酸残基。同源性分析显示,目的序列推导的氨基酸序列与其它植物中已知的天冬氨酸蛋白酶基因的氨基酸序列的同源性都在85%以上;采用生物信息学的方法进行分析,初步预测该基因编码的蛋白属于跨膜的分泌蛋白,大部分区域属于疏水结构;结构域的预测分析显示,此类蛋白包含约100个植物组织蛋白酶所特有的区域,该区域可能在植物液泡中发挥着重要作用。本研究为下一步系统、全面地研究天女木兰种子休眠的分子机理奠定了基础。     

普洱茶翻堆机挖掘装置仿真研究

普洱茶翻堆机挖掘装置是实现茶叶翻堆的关键设备,其动力是否满足要求、是否会产生共振以及应力应变的大小等都是必须考虑的问题。采用ADAMS和ANSYS软件进行动力学和有限元分析,动力学分析的结果文件即为有限元分析的栽荷文件,可通过格式转换建立有限元分析模型,然后进行静力学及模态分析。分析结果表明：挖掘装置工作所需挖掘力小于动力,最危险截面在连接点处,工作频率远离固有频率。     

多元分析方法在毛竹林土壤研究中的应用

我们通过在浙江安吉县的土壤调查,用因子分析、聚类分析和回归分析方法对竹林土壤和竹子生长之间的关系作了研究。结果表明,竹林土壤可划分为高生产力与低生产力两种类型,两者以毛竹眉围30厘米为界限。有机质、土壤质地、通气性、盐基代换量及土层厚度是影响竹子生长的主要因子,其中,影响毛竹生长的最主要因子是氮。因此,在竹子生长期增施有机肥和氮素化肥是改造低产竹林的有效措施。     

浅谈建设项目经济评价方法不确定性分析

本文简要分析不确定性因素对经济评价指标的影响,和不确定性分析的几种方法,确定项目在经济上的可靠性。     

用化学发光法测定生物中的痕量Co（Ⅱ）

本文在对苯基荧光酮类试剂中的新试剂ＤＭＰＦ的发光性质进行系统研究的基础上，建立了测定痕量Ｃｏ（Ⅱ）的化学发光新体系．其检测限达２．０×１０－１２ｇ／ｍＬＣｏ（Ⅱ），线性范围为４．０×１０－１１～１．０×１０－８ｇ／ｍＬＣｏ（Ⅱ），分析速度高达２４０样／ｈ．应用其进行人发作品及水样的Ｃｏ（Ⅱ）含量分析，所得结果令人满意．     

基于关联性分析的城市交通评价指标体系研究

针对城市交通评价指标中存在较大相关性的问题,具体提出进行评价的定性指标和定量指标的数据采集方法、无量纲化处理方法和指标数据的信度及效度分析方法以及利用关联性分析进行指标筛选的方法,从而保证筛选后的各项指标之间具有较高的独立性,通过实例验证此方法可信度和有效性。     

Farmer costs and benefits from agroforestry and farm forestry projects in Central America and the Caribbean: implications for policy

This paper presents results of an evaluation of the benefits provided by agroforestry and farm forestry projects in Central America and the Caribbean, and the policy implications. Tree planting provided financial benefits to farmers, as well as social, economic and environmental benefits. These justify policy interventions to explicitly recognize the potential of on-farm tree-planting efforts and provide a policy environment favorable to such efforts. New or revised policies are needed, particularly in a period of declining public budgets, to limit external incentives to in-kind inputs, rather than financial subsidies; promote market development for tree products; adopt low-cost, community-based extension strategies; focus research support; and reduce regulatory disincentives.     

营造巨尾桉经济评价研究

采用静态分析、动态分析和不确定性分析方法,通过计算营造巨尾桉的经济评价指标,同地评价其经济效果,为发展巨尾桉基地建设提供科学决策方法。     

福建沿海地区木片生产的经济决策研究

采用静态分析、动态分析和不确定性分析方法 ,通过计算木片生产经营的经济评价指标 ,为发展木片生产提供科学的决策方法 ,适合福建沿海地区小型木片生产企业借鉴     

基于多元统计分析的马尾松人工林健康评价研究——以广西热带林业实验中心为例

为构建一套科学实用的马尾松人工林健康评价体系,为马尾松健康经营提供理论依据。以广西热带林业实验中心的84块马尾松人工林样地为例,选取13个评价指标进行因子分析,计算森林健康指数(FHI)并对FHI值进行Ward聚类,以划分健康等级。此外,研究分析评价了马尾松样地的健康状况,并用判别分析建立Fisher判别函数对健康评价结果进行检验。结果表明:在调查的马尾松人工林中,健康林占32.1%,亚健康林占35.8%,不健康林占32.1%,且不同龄组马尾松人工林健康水平排序为:近熟林>中龄林>成熟林>幼龄林。判别分析与聚类结果具有较好的一致性,其中自身验证法正判率为97.8%,交互验证法正判率为94.3%。因此,构建的指标体系能够科学客观地反映广西热带林业实验中心马尾松人工林的健康状况。     

Regional differences in harvesting levels and wood-based employment in Norway

In this paper, a statistical framework based upon shift-share analysis is employed to analyse regional differences in Norway regarding changes in harvesting levels and number of full-time equivalent employees in wood processing. Changes in harvesting levels and employment differ between regions. A tendency found is that there has been a moderate centralisation in the period 1990–2000 with respect to harvesting levels. The analysis indicates that remote municipalities harvest relatively more in periods with a high harvesting intensity, while the harvesting level is more evenly distributed among the regions in other periods. There is, however, no clear picture whether there has been a centralisation or decentralisation regarding woodbased employment. Differences between regions may therefore be explained by structural factors, for example the degree to which firms in a particular region concentrate on production of bulky commodities or more customeroriented niche production.